全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第1期，2006年2月76
绒柏的组织培养和植株再生
王建华1 齐力旺1 韩素英1,2,*
中国林业科学院1 林业研究所细胞生物学实验室，2 森林生态环境与保护研究所，北京 100091
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Chamaecyparis pisifera cv.
‘Squarrosa’
WANG Jian-Hua1, QI Li-Wang1, HAN Su-Ying1,2,*
1Laboratory of Cell Biology, Research Institute of Forestry, 2Research Institute of Forestry Ecology, Environment and Protection,
Chinese Academy of Forestry, Beijing 100091, China
收稿 2005-05-30 修定 2005-08-09
资助 国家转基因与产业化专项(J2002-B-005、JY03-B-28-
02)和国家林业局“948”项目(98-4-04-02)。
*通讯作者(E-mail: syhanqi@yahoo.com.cn, Tel: 010-
62888882, Fax: 010-62872015)。
1 植物名称 绒柏(Chamaecyparis pisifera cv.
‘Squarrosa’。
2 材料类别 四年生盆栽的一年生茎段。
3 培养条件 所用培养基及激素为：(1) MS+6-BA
0.2 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5+2,4-D 0.75+尿素
60; (2) MS+ 6-BA 3.5+NAA 0.3+2,4-D 0.8; (3) MS+6-
BA 3.5+IBA 0.5+NAA 0.5+尿素 80; (4) MS+6-BA
2+NAA 0.05+IBA 0.05+LH 50+VC 5; (5) MS+6-BA
3+NAA 0.2+LH 80+VC 40 +AC 1.5 g·L-1; (6) MS+6-
BA 0.2+NAA 0.2+IBA 0.1; (7) MS+6-BA 0.5+NAA
1+IBA 0.1; (8) MS+KT 0.3+IBA 0.2+2,4-D 1.8。培
养基中蔗糖(1)为 3.5%，(2)、(8)为 4%，(5)为
2.5%，其余均为 3%；琼脂 0.7%；pH 5.7。培
养温度为(24±4)℃；光照时间14 h·d-1，光强在起
始和继代培养时为20~32 mmol·m-2·s-1，生根培养
时为40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 诱导培养 3月中旬，采取绒柏树冠中上部茎
段，用水洗净，切成 3~5 cm 长的茎段，用 70%
酒精浸泡 15 s，0.05% 的氯化汞消毒 7 min，无
菌水冲洗 4 次。切去少许外植体切口，然后切成
0.6~1.0 cm长，接种于培养基(1)~(5)上，每瓶接
种 4~6 个外植体。7~10 d 后，外植体萌动生长；
经20 d，培养基(1)上的外植体基部产生少许愈伤
组织，每个外植体有 3~5 个丛生芽分化，培养基
(2)、(3)上的正常生长，不产生愈伤组织；培养基
(4)、(5)上的则有针叶变态现象，基部产生棕褐色
愈伤组织。
4.2 增殖与壮苗培养 培养基(1)上的丛生芽和培养
基(2)、(3)上不定芽转接于培养基(6)上，正常伸
长生长，基部很少产生愈伤组织，约 30 d 后，
直接生根培养。培养基(4)、(5)上的虽有针叶变态
现象，但分化频率高、效果好，可作为增殖培
养。其中培养基(5)的效果最好，颜色嫩绿，45
d 后，平均高为 4.3 cm。
4.3 ·Ö»¯ÅàÑø 绒柏分化培养特征是有针叶变态现
象，先为苞片状，后膨大为菜花状，至此试管
苗不再伸长。培养基(4)、(7)上有此现象可重新转
接于培养基(5)上，25 d后，转接于培养基(6)上
进行恢复培养，再转接于生根培养。
4.4 生根培养 将不定芽剪成1.5~2.0 cm 的茎段，
转接于培养基(8)上。12 d后，明显伸长，基部有
不定根突出；20 d 后有根长出；约40 d，明显
形成白色粗壮根，根长2~4 cm，生根率为85% 左
右。
4.5 移栽 绒柏嫩茎生根后，开瓶炼苗，洗净根部
琼脂，用 100 mg ·L-1 的多菌灵溶液浸蘸一下根
部，然后移栽于灭菌后的蛭石、砂土(1∶2)的基
质中，适当遮荫，约 20 d 后再移植于砂土中，
成活率可达 9 0 % 以上。
5 意义与进展 绒柏是重要的园林绿化树种，其盆
栽更具有观赏和经济价值。近 10 年来，裸子植
物的离体培养取得了巨大的进展。但我国关于园
林裸子植物组织培养技术报道甚少。本文结果可
供绒柏组织培养和快速繁殖参考，绒柏的组织培
养和快速繁殖未见报道。