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小叶栒子的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月338
小叶栒子的组织培养
刘泽勇1 孙朝晖1,* 曾春凤2
1 河北省林业科学研究院,石家庄 050061;2 河北省任丘市农业局,河北任丘 062550
Tissue Culture of Cotoneaster microphyllus
LIU Ze-Yong1, SUN Zhao-Hui1,*, ZENG Chun-Feng2
1Hebei Academy of Forestry Science, Shijiazhuang 050061, China; 2Hebei Renqiu Agricultural Bureau, Renqiu, Hebei 062550,
China
收稿 2004-06-28 修定  2005-03-07
*通讯作者(E-mail: sunzhaohuihb03@sohu.com, Tel:
0311-87684980)。
1 植物名称 小叶栒子(Cotoneaster microphyllus)。
2 材料类别 茎尖及带腋芽的茎段。
3 培养条件 芽诱导培养基:(1)MS+6-BA 1.0 mg·L-1
(单位下同)+IBA 0.1;增殖培养基:(2)MS+6-BA
0.8+IBA 0.3,(3)MS+6-BA 0.3+IBA 0.3,(4)MS+6-
BA 0.1+IBA 0.5,(5)MS+6-BA 0.3+IBA 0.5,(6)
MS+6-BA 0.5+IBA 0.5,(7)MS+6-BA 0.1+IBA
0.5+TDZ 0.005;生根培养基:(8)1/2MS+IBA 0.1,
(9)1/2MS+IBA 0.2,(10)1/2MS+IBA 0.3,(11)
1/2MS+IBA 0.4,(12)1/2MS+IBA 0.5,(13)
1/2MS+IBA 0.6。培养基均加入0.5%琼脂,诱导、
增殖培养基加 3% 蔗糖,生根培养基加 2% 蔗糖,
pH 6.0。光照度1 500~2 000 lx,光照时间10 h·d-1。
培养温度 15~25℃。空气湿度 40%~70%。
4 生长与分化情况
4.1 无菌苗的获得 材料取自河北省林业科学研究
院资源圃三年生扦插苗的当年生嫩枝。采集时间
为2003年 5月 7日。将采回的嫩枝剪去叶片,用
软毛刷蘸中性肥皂水顺芽向轻轻刷洗后,流水冲
洗30 min。置于超净工作台上,剪成 5 cm 左右
茎段,用70% 乙醇处理5 s,再用0.1% 升汞浸泡
60 s,无菌水冲洗6~8 次。切割成带 1~2 个腋芽
的茎段,接入培养基(1)中。7 d左右腋芽萌出,继
续培养 20 d 左右形成丛生芽。
4.2 增殖培养 培养基(1)中的丛生芽长到30 d后,
剪取单芽接种到培养基(2)~(7)中,10 d左右有不
定芽发生。培养30 d,增殖系数由高到低为(2)>
(3)>(5)>(6)>(4)>(7)。(2)的增殖系数为6,但丛生
芽细弱,生长矮小,高于 3 cm 的芽数仅占 9%;
(3)和(5)的增殖系数分别为5.8和4.6,高于3 cm
的芽数占 18% 和 22%,宜作增殖培养基;(4)增
殖系数为 2,高于 3 cm 芽数占 40%,可作为壮
苗培养基;(7)和(4)比较,附加 TDZ 对增殖无明
显效果,株高略有下降;(6)在第 1代继代时有增
殖,至第 3 代全部枯死。
4.3 生根 取增殖培养形成的长势较壮、高度约3
cm的芽尖,接于培养基(8)~(13)中,进行瓶内生
根试验。10 d 后有粉红色根尖生成,15 d 后形
成辐射状根,30 d 后(8)~(13)生根率均为100%。
(10)的平均根数最多,达4.5条,其余为3.3~3.7
条。(8)的平均根长最长,达 1.5 cm,(9)为 1.2
cm,(10)~(13)为 0.8~0.9 cm。进行瓶外生根试验
时,剪取长势较壮、高3~5 cm 带顶芽试管苗,分
别以IBA 200、500和1 000 mg·L-1做速蘸处理,扦
插于0.2%高锰酸钾消毒的蛭石基质中,以无激素
为对照。以塑料薄膜搭建小拱棚,温度15~20℃,
空气湿度 70%~80%。3 个处理生根率均为100%,
显著高于对照的41.5%。IBA 1 000 mg·L-1的处理平
均根数最多,达16.6条,平均根长最短(0.9 cm),
为一排排梳子似的小根,无须根;IBA 200和 500
mg·L-1 的处理平均根数分别为8.1和 8.6条,根较
长且有须根。
4.4 炼苗与移栽 瓶内生根的试管苗,移出培养室,
打开瓶口炼苗 1~2 d,小心取出,洗净基部培养
基,栽植于消过毒的蛭石基质中, 搭建塑料拱棚
保湿,10 d 后逐渐去棚,30 d 后移入装有营养
土的营养钵,成活率达 100%。瓶外生根苗可于
30 d 后直接上钵,可提前 30 d 出苗。
5 意义与进展 小叶栒子属蔷薇科栒子属,是点缀
园林假山的优良树种,也是极好的绿篱材料。在
常规繁殖中,由于种子有隔年发芽特性,需沙藏
数月后才能播种,扦插繁殖又需大量种条,从而
限制了其大量快速繁殖。本文组培快繁的成功为
此提供了可能。栒子属植物组织培养尚未见报道。