全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 5期,2008年 10月 955
加州蓝铃花的组织培养与快速繁殖
吴月亮 *
沈阳农业大学林学院, 沈阳 110161
Tissue Culture and Rapid Propagation of Phacelia campanularia A. Gray
WU Yue-Liang*
College of Forestry, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, China
收稿 2008-07-02 修定 2008-07-16
资助 沈阳农业大学青年教师科研基金(20 0 6B2 4)。
* E-mail: wuyueliang72@163.com; Tel: 024-88487150
1 植物名称 加州蓝铃花(Phacelia campanularia A.
Gray)。
2 材料类别 茎段和茎尖。
3 培养条件 (1)诱导芽萌发培养基: 1/2MS (MS大
量元素用量减半); (2)增殖培养基: 1/2MS+6-BA 0.5
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2; (3)生根培养基: 1/2MS+
IBA 0.2+NAA 0.2。以上培养基中均加入 6 g·L-1琼
脂和 30 g·L-1蔗糖, pH 5.9~6.0。培养室中温度为
(24±1) ℃, 光照时间为 16 h·d-1, 光照强度约为 60
µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得及芽的诱导 春季, 剪取加州蓝
铃花幼嫩植株的茎尖和带腋芽的茎段, 去掉叶片, 用
流水冲洗 1 h, 再用蒸馏水冲洗 2~3次后转至无菌
室。在超净工作台上, 将剪好的茎尖和茎段用70%
乙醇浸泡30 s, 无菌水冲洗3~5次, 再用0.1% HgCl2
浸泡 3 min, 然后用无菌水冲洗 3~5次, 将茎段切成
2.0~3.0 cm长的单芽小茎段, 接种于培养基(1)中,
放置于培养室内进行培养。外植体接种 5~10 d后,
腋芽开始生长, 茎尖开始变绿、伸长, 20 d后形成
至少 4个叶片的无根幼苗(图 1), 40 d后茎段可长
出 5~7 个腋芽。
4.2 芽的增殖 切取组培幼苗为单芽小茎段, 转入培
养基(2)中进行增殖培养, 培养 5~10 d, 茎段基部叶
腋处开始萌动, 2周后萌动部分直接长出丛生芽, 40
d后形成 5~6个新的无根幼苗, 每株 4~5个腋芽(图
2 )。以后平均 4 0 d 继代一次, 增殖系数可达
20~30。
4.3 生根培养 将长至3~5 cm高的组培苗接种于培
养基(3)中。10 d左右, 苗基部根原基突起; 20 d左
右, 从根原基上长出白色新根, 每株生根 8~10条,
根长 3.0~5.0 cm (图 3), 35 d后根变黑变粗, 生根率
达 100%。
图 1 加州蓝铃花无根幼苗
图 2 加州蓝铃花的增殖培养
4.4 炼苗及移栽 当植株长出8~10条主根并变粗变
黑后进行炼苗。开瓶后在室内放置 1~2 d, 这样有
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利于提高瓶苗的适应能力。然后用清水清洗干净,
水温 20~25 ℃。将分好的苗用 0.1%代森铵浸根
3~5 min后移栽。培养基质为草炭土和珍珠岩按
3:1比例配制的混合土, 每天早晚喷水各一次, 温度
保持在20~25 ℃, 空气湿度为70%~80%, 光照强度
为 85~100 µmol·m-2·s-1, 1个月后移栽成活率可达到
95%以上(图 4)。
5 意义与进展 加州蓝铃花为田基麻科钟穗花属植
物, 原产于美国南加州, 一年生, 钟型花呈蓝色, 直
图 3 加州蓝铃花的生根培养 图 4 加州蓝铃花的移栽苗
径可达 2.5 cm, 松散的头状花序, 晚春到初夏开花,
叶呈卵型, 有齿裂, 暗绿色, 株高 15~30 cm, 花期
4~9月, 适于做花境, 其观赏性好, 花期长, 耐旱耐
瘠薄土壤, 是优良的草本花卉。加州蓝铃花是我院
近年来引进的国外优良草本花卉之一, 对丰富沈阳
地区的园林花卉种类, 提高园林绿化水平有一定的
意义。由于引进数量有限, 本文结果可能有助于解
决其大量繁殖问题。加州蓝铃花的组织培养和快
速繁殖尚未见报道。