全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 12期，2009年 12月 1211
收稿 2009-11-09 修定 　2009-11-30
资助 黑龙江省自然科学基金面上项目(41 3 08 6 0 2)。
* 通讯作者(E-mail: wujianhui20002002@yahoo.com.cn;
Tel: 0451-82191495)。
蒙古柳的组织培养与快速繁殖
郭瑶, 吴建慧 *
东北林业大学园林学院，哈尔滨 150040
Tissue Culture and Rapid Propagation of Salix linearistipularis Hao
GUO Yao, WU Jian-Hui*
College of Landscape Architecture, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China
1 植物名称 蒙古柳(Salix linearistipularis Hao), 又
名筐柳。
2 材料类别 无菌苗叶片。
3 培养条件 诱导愈伤组织培养基: (1) MS+TDZ 0.1
mg·L-1 (单位下同)+2,4-D 0.01。不定芽诱导培养
基: (2) WPM+6-BA 0.1+NAA 0.05。不定芽增殖培
养基: (3) MS+6-BA 1.0+NAA 0.05。生根培养基:
(4) 1/2MS。上述培养基均添加 2%蔗糖和 0.7%琼
脂, pH 5.8~6.0。培养温度为(25±2) ℃; 光照时间
为 12 h⋅d-1, 光照强度约为 34 μmol⋅m-2⋅s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 蒙古柳带芽茎段先用75%乙
醇消毒 30 s后, 无菌水冲洗 3~4遍, 再用 6%的
NaClO消毒 5 min, 无菌水冲洗 6~7遍, 然后将处理
好的蒙古柳茎段接种在MS培养基上。待茎段萌
发生长出2~3对幼叶后, 将其幼嫩叶片切下接种于
培养基(1)中。
4.2 愈伤组织的诱导及不定芽的分化和增殖 将蒙
古柳的叶片切成约1 cm长的段(两侧有剪口), 放到
培养基(1)中, 约 20 d后, 切口处长出黄白色愈伤组
织(图 1)。黄白色愈伤组织继代到培养基(2)中, 4
周后分化出不定芽(图 2)。不定芽在培养基(3)中
继代培养, 形成不定芽丛并长大(图 3)。
4.3 壮苗及生根培养 将长大的丛生芽单个切开, 转
接入生根培养基(4)中, 20 d后开始生根, 根长而粗
壮, 根数为 5~8条, 生根率达 95%以上, 且苗生长
健壮(图 4)。
4.4 炼苗及移栽 于温室中开盖炼苗, 1周后小心取
出试管苗, 洗去根上残留的培养基, 移入已消毒的
壤土和蛭石(2:1)的混合基质中, 背阴处定植, 控制
温度为23~26 ℃, 空气相对湿度为70%~90%, 随后
逐渐降低湿度至与外界自然湿度接近。 2个月后统
计移栽成活率达 75%。
图 1 蒙古柳愈伤组织诱导
图 2 蒙古柳愈伤组织分化不定芽
图 3 蒙古柳不定芽增殖长大
5 意义与进展 蒙古柳为杨柳科柳属落叶小乔木或
灌木。其抗性强, 喜温、耐寒、耐风沙、耐盐碱,
植物生理学通讯 第 45卷 第 12期，2009年 12月1212
可以忍耐 pH 10以上的生境, 是我国一些沙荒地和
图 4 蒙古柳的壮苗及生根培养
图 5 蒙古柳的移栽
黄土丘陵地造林的好树种, 同时也是良好的园林绿
化材料, 但易遭受病虫危害。本文结果对蒙古柳转
抗病抗虫基因的研究可能有一定的参考价值。与
蒙古柳同属植物的组织培养已有报道(余如刚等
2005; Liesebach和Nauioks 2004; 朱美秋等2006; 杜
喜梅等 2006; Lyyra等 2006; 张天宇等 2007), 但蒙
古柳组织培养的报道尚未见。
参考文献
杜喜梅, 燕丽萍, 王太明, 夏阳, 张俊莲, 詹伟(2006). 沙柳组织培
养快繁技术研究. 山东林业科技, (6): 7~8
余如刚, 杜雪玲, 夏阳, 梁慧敏, 李阳春(2005). 旱柳Q106组织培
养及快繁体系的建立. 草原与草坪, (5): 57~59
张天宇, 燕丽萍, 夏阳, 张俊莲, 刘翠兰, 李双云, 李丽(2007). 柳
树愈伤组织的诱导研究. 山东林业科技, (2): 17~19
朱美秋, 李燕玲, 杜克久(2006). 垂柳组织培养初步研究. 河北林
果研究, 21 (3): 269~271
Liesebach M, Nauioks G (2004). Approaches on vegetative propa-
gation of difficult-to-root Salix caprea. Plant Cell Tiss Org
Cul, 79: 239~247
Lyyra S, Lima A, Merkle SA (2006). In vitro regeneration of Salix
nigra from adventitious shoots. Tree Physiol, 26 (7): 969~975