全 文 ：第 2 3
V ol
.
卷 第 2 期
2 3 N
o
.
2
植 物 研 究
BU L L En NO F BO A TI NCA L R ES A R C E H
2 (X) 3年 4 月
AP ril
,
2X() 3
按树 LH Z: 、 U 6 无性系茎提取液对绿豆插条发根和种子萌发的影响 ’
詹福建 , 巫光宏 ` 黄卓烈` ” 谭绍满 2 区锵仪 ` 周光辉`
( 1
. 华南农业大学生命科学学院 ,广州 5 1以抖2
( 2
. 华南农业大学林学院 ,广州 51 0 64 2)
摘 要 研究表明 , 难生根的尾叶按 x 赤按 LH 2 2 无性系茎的粗提液对绿豆插条发根率 、 不定根
长度有极明显的抑制作用 , 而易生根的尾叶按 U 6无性 系茎的粗提液却没有抑制作用 。 时这些
茎粗提液进一步用有机溶剂萃取分 离 ,各萃取相进行 白菜种子萌发的生物测验 ,表明 LH 2 中的
水相 、 乙醚相含有抑制种子萌发的物质 , 经 D un c an ’ 9 新复极差法分析抑制作用显著 , 而易生根
的 U 6中却无影响 。 水相 、 乙醚相分别再经硅胶柱层析技术分离纯化得到多种不同的成分 ,进行
白菜种子萌发生物测验后 , 有数种成分有明显的抑制作用 。 因此说明 ,难生根的 LH 2 无性系茎
内含有成分不同的生根抑制物质 , 而易生根的 U 6无性系茎 内几乎没有或含有少量这些生根抑
制物质 。
关键词 尾叶按 x 赤按 L H 2 2无性系 ;尾叶按 U 6无性系 ;生根抑制物质
E F F E C T O F S T E M E X T R A C T S O F E U CA L YP TUS L H
2
A N D U 6 C L O N E S O N T H E R O O T NI G O F M U N G B E A N C U T T IN G S
A N D O N G E R为n N A T I O N O F S E E D S
z H AN F u 一 J i a n l Wu G u a n g 一 Ho n g l H u AN e z h u o 一 h e l ” 认N s hao 一 M an Z
O U Jian g
一 Y i l Z H O U uG an g
一 H u i l
( 1
.
COl
e罗 Of U fe cS i e cn e , S o u th Ch in a Agh e ult u旧 U in vesr i yt
,
G u an g山 o u 5 1以讲 2 )
( 2
.
C o l e罗 Of Foer s t叮 , Sou ht Ch i an Agh e ul t u r al U n iv e sr i ty , G u an g hz o u 5 106 42 )
A b s t r a e t hT
e er s u l t s o f ht i s ivn
e s it ga ti o n i n d i e a t e d ht at t h e e ur d e s et m ex t ar e t of E cu a加`璐 L H二
e l o n e ( E cu
a加七。 “ 代少hyl la 5 . T . B l a d e E cu a加名。 e a am 记 u le ns is D he hn a dr t ) , hw i e h w a s d iif e u lyt -
ot 一
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,
i n h ib i t e d e v id e n街 ht e 、 t i n g r a te an d ht e l e n hgt o f 、 t s of mu n g b e a n e u t t i n邵 . O ht e r -
w is e
,
t h e er w a s on
c a s e i n ht e U 。 c l o n e (召讹 a加 t o u fOP h了l l a s · T . B l a d e U 。 c lon e ) , w h i c h w a s e a s y
一 t o 一伽 t . hT e e ur d e e x atr e t io n s w e er P u成 e d b y o gr an i e s o lv e n t ex atr e t i o n m e ht od s , an d ht e n d l
k i n d s o f e x atr
e t io n s w e r e te s t e d b y s e e d g e mr i
n
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o n
.
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e e x P e ir m e snt er
v e a l e d ht a t ht e er w e er s t or n
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罗 r ihn ihi t o yr i n gr e d i e n st e x i st e d i n w at er e x t r a c t an d het e r ex t ar e t 场 a n alr s i s of D u n c an ’ 9 S SR . B u t
ht e er w a s n o ihn ib i it
n g e fe
e t i n ht e e x t r a e t of U 6 e l o n e
.
hT
e i n h ib i t i n g fr a e it on
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u ir if e d fu rt h e r
b y s i l i e a g e l e o l u m n e h or m a ot gar
Ph y an d ht e r e s u l t s h ow
e d ht a t d i fe er
n t i n h ib i ot yr a e ti v i t ie s w e er e x i s
-
· 基金项目 :广东重点攻关课题 (9 M04 2 0 1G )雷州林业局资助的课题。
第一作者简介 :詹福建 ( 19 67 一 ) , 男 ,实验师 , 主要从事植物生物化学方面的研究工作 。
收稿日期 : 2X() 2 一 08 一 30
, * 通讯作者 。
2期 詹福建等 :按树 LH 2 、 U 6无性系茎提取液对绿豆插条发根和种子萌发的影响
te d am o n g ht e s e v e arl p
u ri fi e d afr
e it o n s
.
5 0
,
I t
’ 5 e o n e l u d e d t h a t t h e er w e r e s e v e ar l d i fe
r e n t in笋 d i -
e n t s of i n h ib it o r s i n ht e s t e m o f L H
2 2 e lo n e a n d le s s i n h ib i to sr i n th e s et m o f U 6 e l o n e
.
旋y wo r ds E . u or hyl l a x E . e a m a dl u le o is LH 二 e lo n e ; E . u甲勺l l a U 6 e l o n e : or t in g i n h ib i to sr
按树 ( E cu a如如 )作为重要的经济树种 ,用途
广泛 ,生长快速 。 目前按树种苗繁殖主要采用无
性扦插繁殖 , 因为在无性扦插繁殖具有成本低 、见
效快 、 简便易行 、完全保持母株的优良性状 、易于
推广等优点 。 但是生根抑制物的存在与否及含量
的高低是影响扦插成活 的重 要 因素 。 一些研
究 [ ’ 一 ’ ]表明 ,有些按树的枝条的茎 、叶中含有内源
生根抑制物质巨按酚和 “ 抑制物 G ” 。 在一些容
易发根的按树如 (剥按 )枝条中就没有这些抑制
物 。 此外 , 在对 一些 木 本植 物 如杉 树 [’] 、 按
树 .s[ ` 〕 、核桃揪仁’ 〕等枝条内含有不同的生根抑制
物质 ,使枝条的扦插繁殖难以生根 。 目前 ,按树内
源生根抑制物质在国内尚未有人分离提取出来 。
本试验以易生根的尾叶按无性系 U 6作对照 ,对难
生根的杂交按树 (尾叶按 x 赤按 ) L H 22无性系茎
的内源生根抑制物质进行初步的分离纯化研究 。
材料与方法
1
.
1 材料
本实验的供试按树为尾叶按 U 6无性系 ( E u -
ca 帅 t o u or hyl l a 5 . T . Bl a d e U 6 e l o n e , 以下简称
U 6 )和杂按树 L H 2 无性系 ( E uc a l , t su u orP勺 al .s
T
.
B l a d e x E cu a帅 r o e a am dl u le sn is D e h n h a dr t ,
L H 2 c fo en
, 以下简称 L H 2 2 ) ,为国家林业局雷州林
业科学研究所提供 。 常规栽培管理 ,树龄为 4 年 ,
植株高达 2 一 2 . s m 。 生物试验选用 的材料 : 白菜
( B~ ic
a hc ien sn is L
.
) 种子 (上海虹桥矮青菜 ) ;
市售绿豆 ( hP o e o lus a u er us R o x b )种子 。
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 绿豆苗培育
将绿豆种子在水中浸泡 h6 ,然后播种于塑料
盆中 ,用多次冲洗干净的沙培育幼苗 。 培养温度
为室温 , 自然光照 。 培养时施用营养液 。 营养液
的大量元素配方及微量元素配方见文献 [川 ,绿豆
幼苗培养至 s d ,从基部剪取下胚轴以上部分 (长
c7 m )作为生物测定的插条 。
1
.
2
.
2 绿豆插条发根的生物测验
分别取各待测溶液 l m L 置于试管中 ,各插人
留有 I c m 长的下胚轴的绿豆苗插条 12 株 , 培育
期间保持液面高度 , 保持原有浓度 。 另以蒸馏水
作同样处理为对照 。 于培养箱中 30 士 1 “ C 培育
s d
。 分别记录根萌发率和最长根的长度 。 进行三
次重复实验 。
1
.
2
.
3 白菜种子萌发与胚根伸长的生物测验
分别取各待测溶液 1m L 置于试管中 ,每支试
管各加白菜种子 50 粒 ,浸泡 24 h 后 ,均匀分置于
铺有湿滤纸的培养皿中 ,于培养箱中倾斜 30 “ 、 恒
温 25 土 l “ C 培养 4 d ,培育期间保持一定水分 。 用
蒸馏水作同样处理为对照 。 7 d 后分别记录萌发
率和胚根长 。 进行三次重复实验 。
1
·
.2 4 茎粗提取液的制备 .s[ 川
砍取直径约 2 c m 的 L H Z: 、 U 6的主茎 , 连皮剪
碎 。 称取 20 9 材料 , 用 甲醇浸泡 7 2 h 。 进行抽
滤 ,得甲醇相滤液 。 取 90 m L 置于真空 干燥箱
( 4 0 士 1℃ )中蒸干去除有机溶剂 ,然后加相同体
积的水溶解 ,此为按树 L H 2 、 U 6茎的甲醇粗提液 。
然后用这些甲醇粗提液分别做绿豆插条发根的生
物测验 。
1
.
2
.
5 茎粗提液有机相萃取及各相生物测验
将剩余 甲醇相滤液置于真空干燥箱 ( 40 士
1℃ )浓缩使甲醇去除 , 然后离心 10 0 0 r/ m in 20
m in
,得上清液 。 用石油醚萃取上清液 4 次 , 得石
油醚相 ;然后在剩余部分再加等体积蒸馏水 , 用乙
醚萃取 3 次 , 得乙醚相 ,余下部分为水相 。 各相分
别置于真空干燥箱 (恒温 40 ℃ )中蒸干 ,用一定量
的蒸馏水溶解 , 按上述方法做绿豆插条发根的生
物测验 。
1
.
2
.
6 茎萃取水相的硅胶过柱分离纯化及生物
测验
将层析用 60 一 120 目硅胶进行活化后 , 用环
己烷浸泡 3 h ,装于层析柱 ( 2 e m x 6 0 e m ) 。 将萃
取得到的 LH Z: 、 U 6水相分别蒸干 , 用适量环己烷
溶解后 ,真空浓缩至 10 m L , 上柱 ,用环己烷洗脱 ,
流速为每管 10 m L / 14 m i n , L H Z: 收集 3 2 支试管 ,
U 6收集 2 支试管 ,分别在波长 30 n m 进行紫外
吸光度的测定 。 分别收集每一洗脱峰对应的试管
中溶液 ,蒸干后先用 0 . 5 m L 95 % 乙醇溶解 ,再用
2
.
5 m L 蒸馏水混合 ,待乙醇挥发干后用白菜种子
做生物测验 。
1
.
2
.
7 L H 2 2的茎萃取乙醚相硅胶过柱分离纯化
23 卷
及生物测验
层析用硅胶 ( 型号同上 )装柱方法同上 。 将
L H 2 乙醚相真空蒸干 , 用 10 二 L 环己烷溶解 , 上
柱 ,环己烷洗脱 ,流速为每管 7 m in , 每管收 5 m L ,
共收集 31 管 。 用 7 52 紫外光栅分光光度计测各
支管在波长 2 2 0 n m 的紫外吸光度 。 将每一紫外
吸收峰对应的各试管的溶液处理白菜种子做生物
测验 。
1
.
2
.
8 数据处理
上述的每次生物测验均做三次重复 ,得到实
验数据后 ,数据若是发芽率首先采用反正弦转换 ,
然后做 F测验 ,计算 F 值 ,进行 0F . 05 和 or . 。 , 比较 ,
最后采用 unD
c
an
’ s 新复极差法分析 s1L 。
2 结果与分析
2
.
1 出二 、 U 6茎粗提液和各有机萃取相的生物
测验结果与分析
从表 1 的数据可知 , U 6无性系茎粗提液各萃
取相对绿豆插条生根的最长胚根长和平均发根数
均无明显作用 ,新复极差分析结果 ,与对照 比较无
显著差异 。 虽然水相表现出一些抑制现象 , 但与
对照 比 , 没有达到显著差异 。 而 LH 2 茎粗提液对
绿豆插条的发根数表现为强烈的抑制作用 , 发根
数为 0 。 而石油醚相对绿豆插条发根表现为促进
作用 ,其中发根数比对照增加 60 , 63 % ,最长根长
度比对照增加 43 . 85 % ,新复极差分析结果 ,与对
照相比较 ,石油醚相对发根数达到极显著水平 ,对
最长根长度也达到显著水平 。 乙醚相对绿豆发根
数表现为轻微的抑制 ,但对最长根长度有较强抑
制作用 ,最长根长度比对照下降 6 . 92 % 。 新复
极差分析结果差异显著 ,说明对不定根的伸长有
较强的抑制作用 。 水相对两项指标均表现为抑制
作用 ,发根数比对照减少 53 . 13 % ,最长根长度比
对照减少 90 . 0 % , 新复极差分析差异极显著 。
从实验结果中可知 , 经过萃取后在 LH 2 水相和 乙
醚相存在对根的发生和伸长的抑制物质 ,而在 U 6
中却不存在 。
表 1 LH 2 与 U 6粗提液及各萃取相处理对绿豆插条发根及不定根伸长的影响
aT ble 1 Efe ot of ex atr cst of Euc 诚翔`us LH 二 a n d U 6 d o en s on ht e , int g of m un g be an cu it n罗
L H2 U 6
最长根长度 平均发根数 最长不定根长度 平均发根数
肠 n脚 t耐 l e幻 gt h Av e班 ge , st 肠 n ge st ort le n多h Av e爪 ge 树。
相对百分率 书拐寸百分率 相对百分率 书拐丁百分率
_
.
I S R _
. 巧 R _ , 巧 R _ , . 1另R
R 曲` 把 拌~ 恤 , 石下井长下 ; 肠山` 枕 详爪” 业叫笋 石浦笋资不 ; Rd` 说 伴州刘哪乒 万篇笋长篇 R己` v e 户均 eC n俩罗 荞篇于份不一— ’ 一 r一一~ 0 .仿 .0 01 一— ” 一 t’ 一一 ~~ .0 仿 .0 01 ’— ’ - 一一~ 0.必 0 . 01 一— ’ 一 r 一一 ’ ~ .0 苗 .0 01( e k% ) ( ck % ) ( ck % ) ( c k% )
甲醇相
M e th叨 0 1脚 er
B 0
.
X() d D 9 8
.
3 1 a A l l 8
.
89
石油醚相
P e t闹 eu m 汕 er lay er 14 3
.
85 A 160
.
6 3 A 9 5
.
7 8 A 94
.
3 5
乙醚相
Eht er l
a y e r
3 3
.
0 8 B 9 8
.
7 7 B 106
.
7 5 A 89
.
6 3
水相
10
.
0 B 4 6
.
87 C 8 1
、
4 3 a A 7 1
.
3 6
W at er lay er
对照 (无提取物 )
C K ( N
o e x n . c t )
10
,
o b 人 10 . 0 b B l o
.
o 人 l o . o a
注 : 1 . 每种处理用绿豆插条 12 株 , 3 次重复 ,表中数据为 3次重复平均值。 2 . 多重比较采用 uD n can ’ 。 新复极差法 ,下同。 纵向比较
字母相同差异不显著 , 字母不同的差异显著。
N ot e s : l 月、概 花p e t i6 on s wer d
o n e an d 1 2 e u t i飞 s w哪 u s ed in eac h er 伴 t i t i o n . 2 . hT e let e招 i n th e 切b le 机份 th e 卿u l t s of D u nc an ’ s
et s t
.
hT
e
sanz
e let esr i
n lon g iut d in al ind i
e a t司 ht at the d诩er 花nce was not 5 19诚 e ant . B u t t he d i玉er n t le t t e拍 i n d icat ed th at th e d汪er 比 n e e was 5 1兮
in 6 e a n t
.
2 期 詹福建等 :按树 L H 2 2 、 U 6无性系茎提取液对绿豆插条发根和种子萌发的影响
0 6
0
,
5
今30`0-众氏县0仍G .
1 3 5 7 9 1 1 13 1 5 1 7 1 9 2 1 2 3 2 5 2 7 29 3 1
图 1 L H 2 2 水相的环己烷溶解物经硅胶 ( 60 一 120 目 )过柱洗脱曲线 ( 30 n m )
F ig
.
1 E l
u t ion
e u vr e of w a t e r l ay
e r of L H 2 2 by n 一 h e x a n e s ol u t ion i n s ili e a ge l e h r o m a t o gr a P妙
表 2 山 2 水相的环己烷溶解物经硅胶过柱所得产物对白菜种子萌发及胚根伸长的影响
T ab l
e
Z E玉 e t Of id fe re n t fr a e it on s 场 e h ro m at o gr a p h y on s i lie a g e l Of w at e r l即e r Of n 一 h e xa n e s o l u t i o n of 山二 e lo n e
o n th e s e e d ge rm i
n at i on an d th
e r a d ic 己ar el on gat io n of B r此占ica ch i ne 川 is
种子萌发 eS ed g e m l ina it on 平均胚根长 A v e 住gL e 耐 i e u lar e lon 护 t i o n管号
T u be
n u n l be r
相对百分率 ( ck % )
R e la t iv e pe re e n t a g e 0 0 5 0
.
0 1
相对百分率( ck % )
R el a it v e P毗 en t a g e 0 . 05 0 . 0 1
第 3 号管 Nu mb 3 2 3 8 . 8 8 a A B 2 4 3 . 14 a 人B
第 8 一 1 1 号管 N u m b s 一 1 1 2 6 1 . 13 a A 26 . 6 7 a A
第 13 号管 N u m b 13 2 3 6 . 13 a A B 184 . 3 l ab , A B C
第 1 6 号管 N u mb 16 13 8 . 8 8 bC B C 127 . 4 5 b e B C
第 19 号管 N u m b 19 17 5 . X() b B 1 39 . 2 2 b e B C
第 23 号管 N u m b 2 3 6 6 7 e C 80 . 3 9 。 d C D
第 2 6 号管 N u m b 26 0 . X() d D 0 . X() d D
第 2 9 一 32 号管 N u m b 2 9 一 3 2 0 . 0() d D 0 . X() d D
对照 C K IX() . 0() e C IX() . 加 e C D
注 : 1 . 3 次重复实验 ,每次重复用白菜种子 50 粒 。 2 . 发芽率采用反正弦值转换 , 多重比较采用 D un c an ’ s 新复极差法 。
N ot es : l
.
hT re 花pet i t i o n s we re d o n e an d 5 0 se d s w er u s de i n ace h 祀pe t i t i o n
.
2
.
hT
e l e t t e rs in th e tab]
e w e re ht e res
u l t s Of D u n e an
’ s t es t
.
Se e d
郎rm i n a t i o n p e二 e n t哪5 w e re 腼日肠 m l de by s i n 一 ’ tarn s of rm at i o n l〕e fl 〕re t e s t . hT e s am e le t ters i n lo n巨tu d i n al in di e at de th at th e d ife re n e e w as n ot
5 1 , i if e an t
.
B u t th e d ife er
n t let tesr idn ica tde th
a t th e d ife 花 n e e w a s 5 1, i if e a n t·
0 _ 1 2
0
.
1
86弓0 2…0`0巨ON.0
1 3 5 7 9 1 1 1 3 15 1 7 1 9 2 1
图 2 U 6 水相经硅胶 ( 60 一 12 0 目 )过柱洗脱曲线 ( 2 20n m )
Fig
.
2 lE ut i
o n e u
er fO
w at e r l叮 e r of n 一 hxe a ne s o l u t i o n o f U 6 by e h or m a t昭 var h y o n s i li e a g e l
2
.
2 LH 2水相经硅胶过柱产物的生物测验结果 所示 ,在图 1 中出现多个较明显的峰值 ,表明有不
与分析 同的物质成分 。 各个峰值所得的产物处理后进行
LH 2 2水相用环己烷溶解后 , 经硅胶过柱所得 白菜种子的生物测验 , 实验结果见表 2 。 结果表
的各管分部液 , 分别用 752 紫外光栅分光光度计 明 ,第 26 、 29 一 32 号管分部液对白菜的发芽率有
在 2 10 n m 至 340 n m 测其紫外吸收值 ( O . D 值 ) 。 强烈的抑制作用 。 用新复极差分析 ,与对照相比 ,
其中各管分部液在波长 30 n m 的洗脱曲线如图 1 种子萌发率达极显著差异 ,平均胚根长达显著差
植 物 研 究 2 3 卷
异 。 第 23 号管分部液有较弱的抑制作用 ,在萌发 范围为 Z 10 mn 至 3 40n m 。 其中在波长为 2 20n m
率和平均胚根长方面分别比对照抑制 3 . 3 % 和 的洗脱曲线如图 2 所示 。 各个峰值所得的产物处
2
.
39 %
。 新复极差分析 ,两项指标均没有达到显 理后进行白菜种子的生物测验 , 实验结果见表 3 。
著差异 。 第 3 、 8 一 1 1 、 13 、 19 号管对白菜的发芽率 经新复极差分析 ,在白菜种子的萌发率方面 , 可看
和胚根伸长均表现为不同程度的促进作用 。 出各洗脱峰与对照相比几乎没有抑制作用 ,在对
2
.
3 U 6水相经硅胶过柱产物的生物测验结果与 白菜种子平均胚根长的影响中 ,所有的管洗脱峰
分析 与对照相比均表现为较轻促进作用 , 说明 U 6水相
将 U 6水相萃取物经环己烷溶解后 ,经层析硅 中所萃取出的物质经过硅胶过柱洗脱 ,抑制生根
胶 60 一 120 目过柱后收集到的 2 支管 , 分别用 物质含量很低或几乎没有 。
75 2 紫外光栅分光光度计测其紫外吸收值 , 波长
表 3 U 6水相经硅胶过柱所得产物对白菜种子萌发及胚根伸长的影响
T ab le 3 E巧ec t of 山fe er in fr a c t ion s of w aet r la y e r of U 6场 hc ~ a t o 目旧p场 on s il ca 罗1 of n 一 h e x即 e s ol iut o n
on ht
e se e d g e ” 旧 I n iat on an d het adr ic d ar el
o n g a t io n of Br as
3
ica hc ien sn is
种子萌发 eS ed ge n n l n iat on 平均胚根长 vA e 井唱 e ar id cu lar el on 脚ion
管号
T u b e n u m be r
相对百分率 ( ck % )
R e liat ve ep rC
e n t a g e
玲R
0
.
05 0
.
0 1
相对百分率 ( ck % )
R e liat ve eP 代 e n t a罗
LS R
0
.
05 0
.
0 1
第 3 一 5 号管 N u mb 3 一 5
第 6 一 7 号管 N u mb 6 一 7
第 8 一 1 2 号管 N u mb s 一 12
第 1 3号管 N u mb 13
对照 C K
1 14
.
3 8
10 3
.
7 5
1 17
.
5 0
1 02
.
5 0
10
.
0
A
A B
A
A B C
A B C
A683126仪仪97心
0
.
0 18
0
.
0 1 5
0
.
0 1 2
0
.
0 0 9
0 0 0 6
0
.
0 0 3
0
息8日.0
1 1 1 3 1 5 17 19 2 1 2 3 2 5 2 7 2 9 3 1
图 3 lL 二 乙醚相经硅胶 ( 60 一 120 目 )过柱洗脱曲线 ( 3 0 n m )
iF g
.
3 E lut ion
e
vur
e Of e t ha
r
lay
e r of LH
二 场 ehID m at o 『a p h y on s i il e a g e lw i th n 一 h ex t an e
表 4 比 2 乙醚相经硅胶过柱所得产物对白菜种子萌发及胚根伸长的影响
T ab l
e 4 E fe
e t Of d漩 er n t fr 朗 it on s of e tha r l盯 e r Of l 二 by c h r om aot gr a P场 on s iil e a gel 袱 t h
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e h i en 助肠
种子萌发 Sed g e n ” in at ion管号
N u m b e r of tU b e
相对百分率
elR at i
v e p e rC e n t叹笋 ( e k% )
CBC
第 3 号管 N u mb 3
第 6 一 8 号管 N u m b 6 一 8
第 1 2 一 13 号管 Nu ybn 12 一 1 3
第 16 号管 Nu btn 16
第 20 号管 N u brn 20
第 24 号管 N u m b 24
第 2 9 号管 N u m b 29
对照 C K
1 1
.
1 1
0
.
0
2
.
5 6
17
.
0
0
.
0
10
.
0
2期 詹福建等 :按树 LH Z: 、 U 6无性系茎提取液对绿豆插条发根和种子萌发的影响
2
.
4 LH
Z : 乙醚相硅胶过柱产物的生物测验结果
与分析
L H
Z : 乙醚相用环己烷溶解后 , 经硅胶柱层析
分离后 ,分别测各管在波长范围为 2 10 n m 至 340
nI 的紫外光吸收值 ,其中在波长为 30 n m 的洗
脱曲线如图 3 所示 。 各个峰值所得的产物处理后
进行白菜种子的生物测验 , 实验结果见表 4 。 结
果表明 ,对白菜种子发芽率的影响中 ,所有的处理
均有明显抑制作用 ,尤其第 6 一 8 管 、第 24 管的抑
制效果达 10 % ,新复极差分析 , 与对照相比 ,各
处理抑制种子发芽率都达到 1% 的极显著差异水
平 。 说明 L H2 乙醚相物质经硅胶柱层析分离纯
化后 ,得多种成分 ,都有抑制生根的作用 。
(波长 30 n m )多种物质 ,进行生物测定后 , 有部
分表现明显的抑制作用 (见图 1 , 3 和表 2 , 4 ) 。 因
而说明 ,按树体内所含有的生根抑制物质成分复
杂 ,有待进一步论证 。 同时实验中以易生根的尾
叶按 U 6无性系作对照 ,其茎中的分离物对绿豆插
条发根和白菜种子的萌发无明显的抑制作用 , 说
明易生根的尾叶按 U 6无性系茎内的生根抑制物
几乎没有或含量很低 。
参 考 文 献
3 讨论
有些植物的离体枝条扦插后很容易产生不定
根而成活 ,而另一些植物离体枝条扦插后很难发
根而成活 。 有关学者对一些植物的发根机理进行
研究表明 :容易生根的植物体内含有促进生根 的
化学物质 ,难生根的植物体内含有生根抑制物质 ,
且在不 同植 物 中其 成 分 和含 量 也 不 相 同。
e or w [9 ]等和 B o il e [ , ]等人分别从巨按 ( E . 脚 n ids )
的成熟叶子和 良叶山按 ( E . p lu ~ le nt a iS m s ) 的茎叶中分离得到一种生根抑制物质 , 证实为 “ 巨
按酚 ” ,介y lo r [ ’ 0 ]等就发现美洲山核桃 ( c a卿 1111-
ozI e sn is )茎插条的抽提液中含有抑制生根的物质 ,
这些物质是胡桃醒 ( ju glo en ) 的类似物 , 国内有关
学者黄卓烈 〔川 、刘卫东 〔’ 〕对难生根的按树进行研
究 ,发现酚类物质对扦插生根有一定的抑制作用 。
在本实验中 ,从难生根的尾叶按无性系 LH 2 的茎
中分离的提取物 , 主要集中在甲醇相 (粗提液 ) 、
乙醚相和水相中 ,生物测验结果明显抑制绿豆插
条发根 、 白菜种子的萌发和胚根的生长 ,尤其以水
相中物质的抑制作用最为强烈 (见表 1 ) 。 实验表
明这些提取物是按树茎中的内源性生根抑制物 ,
与黄卓烈 [川 、 刘卫东 [ ’ ] 、 徐程扬 [ ’ 〕 、 程有广 [` ]等
的实验结果相一致 。 L H 2 萃取的水相与乙醚相中
物质经硅胶过柱分离提纯后 , 得到不同光密度值
1
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