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Identification of two Isaria isolates and bioassay of their pathogenicity against tea tortrix Homona coffearia and smaller tea tortrix Adoxophyes honmai

两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的致病力



全 文 :第 源员 卷摇 第 缘 期
圆园员源 年 员园 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 缘
韵糟贼援 摇 圆园员源

基金项目院 国家茶叶产业技术体系渊悦粤砸杂鄄圆猿冤袁农业部闽台作物有害生物综合治理重点实验室开放研究基金袁福建省农业科学院茶叶
研究所重点项目渊圆园员源鄄糟赠泽鄄园圆冤
作者简介院 王定锋袁男袁员怨愿员年生袁助理研究员袁研究方向为害虫生物防治和杀虫微生物分子生物学袁 耘鄄皂葬蚤造院 憎葬灶早凿枣圆园员猿岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院早赠憎怎责贼岳 员远猿援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员源 原 园员 原 圆园
两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和
茶小卷叶蛾的致病力
王定锋员袁圆 摇 杨摇 广圆 摇 王庆森员 摇 曾明森员 摇 吴光远员鄢
渊员援福建省农业科学院茶叶研究所袁 福安 猿缘缘园员缘曰 圆援福建农林大学袁 农业部闽台作物有害生物
综合治理重点实验室袁 福州 猿缘园园园圆冤
摘要院 为明确分离自茶卷叶蛾和中华大刀螳僵虫的 圆 株虫生真菌的归属及生防潜力袁采用形态学
特征和 则阅晕粤鄄陨栽杂序列分析其分类地位袁测定了其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫的致病力袁并初步
筛选了其最适培养条件遥 结果表明院圆 株真菌均为环链棒束孢 陨泽葬则蚤葬 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬袁分别命名为
陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员遥 在 员郾 园 伊 员园愿 孢子 辕 皂蕴浓度下袁陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 对茶卷叶蛾幼虫的累计校
正死亡率均达 员园园豫 袁蕴栽缘园分别为 猿郾 员猿 凿 和 猿郾 员缘 凿曰对茶小卷叶蛾幼虫的累计校正死亡率分别为员园园豫和 怨缘豫 袁蕴栽缘园分别为 猿郾 圆缘 凿 和 猿郾 猿员 凿遥 接菌后 愿 凿袁圆 菌株对茶卷叶蛾幼虫的 蕴悦缘园分别为
园郾 源苑 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴和 员郾 园员 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴曰对茶小卷叶蛾幼虫的 蕴悦缘园分别为 圆郾 圆园 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴
和 员郾 猿源 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴遥 圆 菌株 圆猿 益下最适生长培养基均为综合马铃薯培养基袁最适产孢培养基
均为蛋白胨马铃薯葡萄糖琼脂培养基曰在萨氏培养基上袁菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 分别在 圆源 耀
猿园 益及 圆源 益时生长速度最快袁在 圆苑 益和 圆员 益时产孢量最大遥 表明 圆 株环链棒束孢对茶卷叶蛾和
茶小卷叶蛾幼虫均具有较好的生防潜力袁可作为生防菌进行开发和应用遥
关键词院 环链棒束孢曰 茶卷叶蛾曰 茶小卷叶蛾曰 致病力曰 培养特性
陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼憎燥 陨泽葬则蚤葬 蚤泽燥造葬贼藻泽 葬灶凿 遭蚤燥葬泽泽葬赠 燥枣 贼澡藻蚤则 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼
贼藻葬 贼燥则贼则蚤曾 匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 葬灶凿 泽皂葬造造藻则 贼藻葬 贼燥则贼则蚤曾 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤
宰葬灶早 阅蚤灶早枣藻灶早员袁圆 摇 再葬灶早 郧怎葬灶早圆 摇 宰葬灶早 匝蚤灶早泽藻灶员 摇 在藻灶早 酝蚤灶早泽藻灶员 摇 宰怎 郧怎葬灶早赠怎葬灶员鄢
渊员援 栽藻葬 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁 云怎躁蚤葬灶 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 云怎爷 葬灶 猿缘缘园员缘袁 云怎躁蚤葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰
圆援 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 陨灶贼藻早则葬贼藻凿 孕藻泽贼 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 枣燥则 云怎躁蚤葬灶鄄栽葬蚤憎葬灶 悦则燥责泽袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻曰
云怎躁蚤葬灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 云怎扎澡燥怎 猿缘园园园圆袁 云怎躁蚤葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 糟燥灶枣蚤则皂 贼澡藻 贼葬曾燥灶燥皂蚤糟 泽贼葬贼怎泽 葬灶凿 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 责燥贼藻灶贼蚤葬造 燥枣 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 燥枣
藻灶贼燥皂燥责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 枣怎灶早蚤袁 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 灶葬贼怎则葬造 糟葬凿葬增藻则泽 燥枣 匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 葬灶凿 栽藻灶燥凿藻则葬
泽蚤灶藻灶泽蚤泽袁 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 葬灶凿 皂燥造藻糟怎造葬则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 陨栽杂鄄则阅晕粤 憎藻则藻 糟葬则则蚤藻凿 燥怎贼 贼燥 蚤凿藻灶贼蚤枣赠 贼澡藻蚤则
贼葬曾燥灶燥皂蚤糟 责燥泽蚤贼蚤燥灶袁 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 造葬则增葬藻 燥枣 贼藻葬 贼燥则贼则蚤曾 匀援 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 葬灶凿
泽皂葬造造藻则 贼藻葬 贼燥则贼则蚤曾 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤 憎藻则藻 皂藻葬泽怎则藻凿 遭赠 蚤灶凿燥燥则 遭蚤燥葬泽泽葬赠袁 葬灶凿 贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 糟怎造贼怎则藻
糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽 枣燥则 贼澡藻 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 憎藻则藻 责则藻造蚤皂蚤灶葬则蚤造赠 泽糟则藻藻灶藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 憎藻则藻
遭燥贼澡 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 陨泽葬则蚤葬 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬 葬灶凿 灶葬皂藻凿 葬泽 陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 宰澡藻灶
匀援 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 憎藻则藻 凿藻葬造贼 憎蚤贼澡 陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员 泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶 渊员郾 园 伊 员园愿 泽责燥则藻 辕 皂蕴冤袁 贼澡藻 糟燥则则藻糟贼藻凿
葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻 皂燥则贼葬造蚤贼蚤藻泽 憎藻则藻 遭燥贼澡 员园园豫 曰 蕴栽缘园 增葬造怎藻泽 憎藻则藻 猿郾 员猿 凿 葬灶凿 猿郾 员缘 凿袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 宰澡藻灶 粤援
澡燥灶皂葬蚤 憎藻则藻 贼则藻葬贼藻凿 怎灶凿藻则 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽袁 贼澡藻 糟燥则则藻糟贼藻凿 葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻 皂燥则贼葬造蚤贼蚤藻泽 憎藻则藻 员园园豫 葬灶凿
怨缘豫 袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠曰 蕴栽缘园 增葬造怎藻泽 憎藻则藻 猿郾 圆缘 凿 葬灶凿 猿郾 猿员 凿袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 宰澡藻灶 匀援 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 憎藻则藻 凿藻葬造贼 憎蚤贼澡
陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员袁 贼澡藻 蕴悦缘园 增葬造怎藻泽 渊 燥灶 贼澡藻 愿贼澡 凿葬赠冤 憎藻则藻 园郾 源苑 伊 员园缘 泽责燥则藻泽 辕 皂蕴 葬灶凿 员郾 园员 伊 员园缘泽责燥则藻泽 辕 皂蕴袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 宰澡藻灶 粤援 澡燥灶皂葬蚤 憎藻则藻 贼则藻葬贼藻凿 怎灶凿藻则 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽袁 贼澡藻 蕴悦缘园 增葬造怎藻泽 憎藻则藻
圆郾 圆园 伊 员园缘 泽责燥则藻泽 辕 皂蕴 葬灶凿 员郾 猿源 伊 员园缘 泽责燥则藻泽 辕 皂蕴袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 燥责贼蚤皂葬造 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤葬 渊圆猿 益冤 枣燥则
皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 憎葬泽 悦孕阅粤袁 葬灶凿 枣燥则 泽责燥则怎造葬贼蚤燥灶 孕孕阅粤援 宰澡藻灶 陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员
憎藻则藻 糟怎造贼怎则藻凿 燥灶 杂阅粤再 皂藻凿蚤怎皂袁 贼澡藻 燥责贼蚤皂葬造 糟怎造贼怎则藻 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻泽 枣燥则 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 憎藻则藻 圆源 原 猿园 益
葬灶凿 圆源 益袁 葬灶凿 枣燥则 泽责燥则怎造葬贼蚤燥灶 圆苑 益 葬灶凿 圆员 益袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 陨灶 糟燥灶糟造怎泽蚤燥灶袁 贼澡藻 贼憎燥 陨援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬
蚤泽燥造葬贼藻泽 澡葬增藻 早则藻葬贼 责燥贼藻灶贼蚤葬造 枣燥则 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 燥枣 贼澡藻 造葬则增葬藻 燥枣 匀援 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 葬灶凿 粤援 澡燥灶皂葬蚤援
运藻赠 憎燥则凿泽院 陨泽葬则蚤葬 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬曰 匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬曰 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤曰 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠曰 糟怎造贼怎则藻
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽
摇 摇 茶卷叶蛾 匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 晕蚤藻贼灶藻则 和茶小卷叶
蛾 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤 再葬泽怎凿葬是茶树 悦葬皂藻造造蚤葬 泽蚤灶藻灶泽蚤泽
上 圆 种重要的卷叶蛾科害虫袁主要分布于我国长江
流域以南各茶区袁国外分布于日本尧印度和斯里兰卡
等主要产茶国遥 在茶园中这 圆 种害虫经常混杂发生
为害袁严重影响茶树的生长和茶叶产量曰一般年份发
生 源 耀 怨 代不等袁主要以幼虫卷缀嫩叶匿居咀食叶
肉袁留下表皮形成透明枯斑袁且食量随虫龄增大而增
大袁并不断蚕食成叶尧老叶袁卷叶数常多达 猿 耀 源 叶袁
乃至整个芽梢袁严重时状如火烧遥 除茶树外袁还为害
油茶 悦葬皂藻造造蚤葬 燥造藻蚤枣藻则葬尧柑橘 悦蚤贼则怎泽 则藻贼蚤糟怎造葬贼葬 和苹果
酝葬造怎泽 责怎皂蚤造葬等多种经济作物咱员 原 猿暂 遥 茶卷叶蛾曾导
致斯里兰卡茶叶年产量减产超过 缘园豫 咱源暂 曰丁建华和
郭剑雄咱缘暂报道袁该虫导致福州红旗茶场茶树幼苗株
受害率达 猿远豫 遥 目前防治茶卷叶蛾科害虫主要采
用化学农药结合农业尧物理和生物防治咱圆 原 猿暂 袁而化学
农药的大量使用容易导致农药残留尧害虫抗药性和
次要害虫再猖獗等农业野猿砸冶问题的产生袁不仅危害
人类健康袁而且容易使茶叶出口遭受国际贸易中绿
色技术壁垒的冲击而受阻咱远暂 遥 为此袁寻求高效尧安
全的防治手段是维护茶产业健康可持续发展的关
键遥 虫生真菌作为农林害虫生物防治的一个重要组
成部分袁具有易于培养尧能持续控制害虫和环境友好
等优点袁今后将在无公害茶园和有机茶园的害虫防
治上发挥越来越重要的作用遥
环链棒束孢 陨泽葬则蚤葬 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬 原名环链拟青
霉 孕葬藻糟蚤造燥皂赠糟藻泽 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼怎泽袁是一种具有很强生
防潜力的虫生真菌咱苑暂 遥 早在上世纪 愿园 年代初袁梁宗
琦咱愿暂就从茶卷叶蛾蛹茧和一种鞘翅目昆虫上分离
到该菌袁并证实其可感染菜青虫 孕蚤藻则蚤泽 则葬责葬藻尧茶毛虫
耘怎责则燥糟贼蚤泽 责泽藻怎凿燥糟燥灶泽责藻则泽葬和褐飞虱 晕蚤造葬责葬则增葬贼葬 造怎早藻灶泽遥
之后国内外研究表明袁环链棒束孢对蚜虫 酝赠扎怎泽
责藻则泽蚤糟葬藻咱怨暂 尧线虫 孕葬灶葬早则藻造造怎泽 则藻凿蚤增蚤增怎泽咱怨 原 员园暂 尧小菜蛾
孕造怎贼藻造造葬 曾赠造燥泽贼藻造造葬咱员员 原 员圆暂 尧菜青虫咱员猿 原 员源暂 尧柳杉雷瘿蚊
砸藻泽泽藻造蚤藻造造葬 燥凿葬蚤咱员缘暂 和日本柳杉叶小卷蛾 耘责蚤灶燥贼蚤葬
早则葬灶蚤贼葬造蚤泽咱员远暂等多种农林害虫均具有较好的杀虫活
性曰姚丽娟咱员苑暂还证实环链拟青霉的代谢产物对小菜
蛾和菜青虫的杀虫效果分别为 怨猿郾 员豫和 猿愿郾 猿豫 曰陈
名君等咱员愿暂则发现该菌是天然阔叶次生林和马尾松
人工纯林生态系统中虫生真菌的优势种之一曰王品
等咱员怨暂发现环链棒束孢是广东茶园土壤中一种常见
的虫生真菌袁一年四季均能检测到遥 尽管已对环链
棒束孢进行了大量的研究袁但到目前还未见利用其
来防治茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的报道遥
为此袁本研究在鉴定出分离自茶卷叶蛾幼虫僵
虫和中华大刀螳 栽藻灶燥凿藻则葬 泽蚤灶藻灶泽蚤泽 僵虫的 圆 株虫生
真菌为环链棒束孢的基础上袁测定了其对茶卷叶蛾
和茶小卷叶蛾幼虫的致病力袁并初步筛选了其最适
培养条件袁旨在为利用环链棒束孢防治茶园 圆 种卷
叶蛾科害虫提供依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试菌株院菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 分别分离
自自然羅病死亡的茶卷叶蛾幼虫僵虫和中华大刀螳
僵虫袁并用萨氏培养基试管斜面保存于 源 益冰箱中遥
供试虫源院从茶园中采回茶卷叶蛾和茶小卷叶
蛾高龄幼虫袁置于扦插在养虫笼内的茶枝中饲养直
到化蛹尧羽化尧产卵遥 收集卵块置于养虫罩内袁卵孵
化后袁用茶稍喂养袁挑选健康的尧大小基本一致的 猿
圆猿缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
龄幼虫用于室内毒力测定遥
培养基院马铃薯葡萄糖琼脂 渊 责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻
葬早葬则袁 孕阅粤冤培养基院马铃薯 圆园园 早 煮沸过滤液尧葡萄
糖 圆园 早尧琼脂 圆园 早袁加热溶解后补水至 员 园园园 皂蕴遥 蛋
白胨马铃薯葡萄糖琼脂 渊 责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则 责造怎泽
员豫 责藻责贼燥灶藻袁 孕孕阅粤冤培养基院在 孕阅粤 培养基中添加
员豫蛋白胨遥 萨氏培养基 渊 杂葬遭燥怎则葬怎凿 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则
责造怎泽 员豫 赠藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼袁 杂阅粤再冤院蛋白胨 员园 早尧葡萄糖
源园 早尧酵母 员园 早尧琼脂 圆园 早袁补充蒸馏水至 员 园园园 皂蕴遥
察氏培养基渊悦扎葬责藻噪爷泽 皂藻凿蚤怎皂袁 悦扎葬责藻噪冤院晕葬晕韵猿 猿 早尧
运圆匀孕韵源员 早尧运悦造 园郾 缘 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园郾 缘 早尧云藻杂韵源窑
苑匀圆韵 园郾 园员 早尧蔗糖猿园 早尧琼脂员缘 早尧蒸馏水员园园园皂蕴遥 综
合马铃薯培养基渊糟燥皂责则藻澡藻灶泽蚤增藻 责燥贼葬贼燥 皂藻凿蚤怎皂袁 悦孕阅粤冤院
圆园豫马铃薯煮汁 员 园园园 皂蕴尧运匀圆孕韵源 猿 早尧酝早杂韵源 窑
苑匀圆韵 员郾 缘 早尧葡萄糖 圆园 早尧灾蚤贼葬皂蚤灶 月员 愿 皂早尧琼脂 圆园 早袁
加热溶解后补水至 员 园园园 皂蕴遥 以上培养基的 责匀 值
均控制在 苑援 园袁高压灭菌锅 员圆员 益灭菌 员缘 皂蚤灶遥
试剂院葡萄糖尧蔗糖尧蛋白胨尧酵母浸出汁尧琼脂
粉尧晕葬晕韵猿尧 运圆匀孕韵源尧 运悦造尧酝早杂韵源 窑苑匀圆韵尧 云藻杂韵源 窑
苑匀圆韵尧灾蚤贼葬皂蚤灶 月员尧吐温鄄愿园 均为国产分析纯曰员园 伊
孕悦砸 月怎枣枣藻则 渊 酝早圆 垣 孕造怎泽冤尧 凿晕栽孕尧 栽葬择 酶和 阅蕴圆园园园
阅晕粤 皂葬则噪藻则袁宝生物工程渊大连冤有限公司遥
仪器院耘责责藻灶凿燥则枣 缘猿猿员 孕悦砸 仪袁德国 耘责责藻灶凿燥则枣
公司曰粤曾蚤燥 杂糟燥责藻 粤员 生物显微镜袁德国卡尔蔡司公
司曰允阅鄄愿园员 凝胶成像仪袁江苏省捷达科技发展有限
公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 菌株的形态学观察及鉴定
将供试菌株接种到 悦扎葬责藻噪 平板上袁圆缘 益培养
员源 凿袁观察菌株培养性状尧产孢结构尧孢子形态大小
和分生孢子梗等分类特征遥 参照 杂澡蚤皂葬扎怎咱员缘暂的形态
描述和梁宗琦咱圆园暂的检索表进行菌株的初步鉴定遥
员援 圆援 圆 菌株 则阅晕粤鄄陨栽杂序列的扩增与分析
总 阅晕粤的提取院将 圆 个菌株分别接入 杂阅粤再平
板中培养 员园 凿袁从培养皿中刮取菌体用于真菌基因
组 阅晕粤的提取袁具体参照方卫国等咱圆员暂方法遥
则阅晕粤鄄陨栽杂序列的 孕悦砸 扩增与测定院 陨栽杂 序列
孕悦砸扩增选用的通用引物为 陨栽杂员渊缘忆鄄栽悦悦郧栽粤郧郧栽鄄
郧粤粤悦悦栽郧悦郧郧鄄猿忆冤和 陨栽杂源渊缘忆鄄栽悦悦栽悦悦郧悦栽栽粤栽栽郧粤
栽粤栽郧悦鄄猿忆冤 咱圆圆暂 遥 孕悦砸反应体系 圆缘 滋蕴院员园 伊 孕悦砸 缓
冲液 月怎枣枣藻则渊酝早圆 垣 孕造怎泽冤 圆郾 缘 滋蕴尧圆郾 缘 皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕
圆 滋蕴尧猿园 灶早模板 阅晕粤 员 滋蕴尧员园 滋皂燥蕴 辕 蕴 引物 陨栽杂员 和
陨栽杂源 各 员 滋蕴尧缘 哉 辕 滋蕴 栽葬择 酶 园郾 猿 滋蕴袁用 凿凿匀圆韵 补足
至 圆缘 滋蕴遥 孕悦砸 反应参数设置院怨源 益预变性缘 皂蚤灶曰
怨源 益变性 源缘 泽袁缘缘益退火 源缘 泽袁苑圆益延伸 员 皂蚤灶袁猿缘 个
循环曰苑圆 益延伸 员园 皂蚤灶遥 孕悦砸 产物以 员援 缘豫琼脂糖
凝胶渊带有溴化乙锭冤进行检测遥 孕悦砸 产物经琼脂
糖凝胶回收试剂盒回收纯化后送生工生物工程渊上
海冤股份有限公司测序遥
则阅晕粤鄄陨栽杂 序列分析院将 则阅晕粤鄄陨栽杂 序列测序结
果在 郧藻灶月葬灶噪 数据库中进行 月蕴粤杂栽 比对并申请
郧藻灶月葬灶噪登录号遥 为明确菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员
与同属其它种的亲缘关系袁选择 郧藻灶月葬灶噪 中棒束孢
属已公布的具有代表性的几种菌株 阅晕粤序列袁并以
链格孢 粤造贼藻则灶葬则蚤葬造 葬造贼藻则灶葬贼藻 为外群袁用 酝藻早葬 源援 园 软
件 悦造怎泽贼葬造 载方法进行多序列比对袁以邻接法渊灶藻蚤早澡鄄
遭燥则 躁燥蚤灶蚤灶早 皂藻贼澡燥凿冤构建分子系统发育树袁在分枝上
标记 员 园园园 次重复获得的自展检验 月燥燥贼泽贼则葬责 值进行
检验咱圆猿暂 遥 月燥燥贼泽贼则葬责 值大于 苑园豫就相当于统计学概
率的 怨缘豫 袁一般 苑缘豫以上认为是可信的咱圆源暂 遥
员援 圆援 猿 菌株对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的毒力测定
从 杂阅粤再平板上培养员源 凿的 陨悦月杂怨员愿和 陨悦栽蕴怨员员
菌株中分别收集其分生孢子袁用含 园郾 园缘豫吐温鄄愿园
的无菌水溶液分别配置成 员郾 园 伊 员园愿尧圆郾 园 伊 员园苑尧
源郾 园 伊 员园远尧愿郾 园 伊 员园缘尧员郾 远 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴 的悬浮液遥
用浸虫法咱圆远暂将上述孢子悬浮液分别接种于茶卷叶
蛾和茶小卷叶蛾 猿 龄幼虫上袁以 园郾 园缘豫吐温鄄愿园 溶
液作为对照袁每处理 员园 头幼虫袁重复 源 次遥 接种后袁
具体的培养条件参照王定锋等咱圆缘暂方法遥 试虫用无
农药污染的新鲜茶梢饲养于干净烧杯内袁烧杯口用
保鲜膜封住袁并在膜上扎 圆 个通气孔袁置于 圆缘 益尧
砸匀逸怨园豫 尧员圆 蕴 颐 员圆 阅培养箱中培养袁每 猿 天换 员 次
新鲜茶梢遥 从第 圆 天开始每天记录幼虫的感染和死
亡情况袁并对死亡虫体进行保温保湿培养渊圆缘 益尧
砸匀逸怨园豫 冤袁观察其是否变为僵虫袁连续观察 员园 凿遥
计算累计死亡率尧校正死亡率和僵虫率遥 累计死亡
率 越死亡虫口数 辕处理总虫数 伊 员园园豫 曰累计校正死
亡率 越 渊处理组累计死亡率 原对照组累计死亡率冤 辕
渊员 原对照组累计死亡率冤 伊 员园园豫 曰僵虫率 越死亡后
形成僵虫的虫数 辕处理总虫数 伊 员园园豫 遥
员援 圆援 源 最适培养基和最适培养温度的筛选
培养基对菌株生长速度和产孢量的影响院用直
径为 远 皂皂 的打孔器袁将在 杂阅粤再 平板上暗培养 苑 凿
的 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 菌株的菌落中心到边缘之间
打出菌块袁分别接种于 孕阅粤尧孕孕阅粤尧悦孕阅粤尧杂阅粤再 和
猿猿缘缘 期 王定锋等院 两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的致病力
悦扎葬责藻噪 平板中央袁每个菌株及培养基处理重复 源
次袁于圆猿 益尧员源 蕴 颐 员园 阅 下培养 员缘 凿 后袁采用直尺十
字交叉法测量菌落直径曰并用直径 远皂皂的打孔器从
菌落中心至边缘距离的 员 辕 圆 处打取菌块袁置于
园郾 园缘豫吐温鄄愿园 溶液中充分震荡袁血球计数板计数袁
统计产孢量袁确定菌株的最适培养基遥
温度对菌株生长速度和产孢量的影响院用直
径 远 皂皂的打孔器打取菌块袁接种到 杂阅粤再 平板中
央袁分别置于 员缘尧员愿尧圆员尧圆源尧圆苑尧猿园 和 猿猿 益条件下袁
员源 蕴 颐 员园 阅培养袁每处理 源 次重复遥 测量培养 员缘 凿的
菌落直径和产孢量袁方法同上袁以确定菌株的最适培
养温度遥
员援 猿 数据分析
采用 杂孕杂杂 员苑援 园 和 耘曾糟藻造 圆园园苑 软件进行数据分
析袁利用 阅怎灶糟葬灶 氏新复极差法进行差异显著性检
验袁孕则燥遭蚤贼方法计算半数致死浓度 蕴悦缘园值尧半数致死
时间 蕴栽缘园值及相应的回归方程遥
圆 结果与分析
圆援 员 菌株的形态学描述及分子生物学鉴定
圆援 员援 员 形态学鉴定
菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 在察氏培养基上培养
员源 凿袁菌落直径均约为 远园 皂皂袁菌落正面均为白色袁隆
起袁棉絮状袁延长培养产生浓密的孢梗束袁菌落背面
均为淡黄色遥 圆 菌株菌丝均分隔袁透明袁光滑袁宽
园郾 缘 耀 员郾 缘 滋皂曰分生孢子梗短袁长约 员猿 耀 圆源 滋皂曰其上
通常着生 圆 耀 源 个瓶梗袁瓶梗多数基部球形膨大袁于
全长 员 辕 圆 处向上突然变细袁渊源援 缘 耀 员园冤滋皂 伊 渊员援 缘 耀
猿冤滋皂曰分生孢子透明袁光滑袁大部分为椭圆形或近球
形袁渊圆 耀 源援 缘冤滋皂 伊 渊员援 缘 耀 圆冤滋皂袁常形成叠瓦状排
列的斜链或成环状渊图 员冤袁初步鉴定 圆 菌株均为环
链棒束孢 陨援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬遥
图 员 两个菌株的产孢结构和分生孢子的显微观察渊源园园 伊 冤
云蚤早援 员 悦燥灶蚤凿蚤燥早藻灶燥怎泽 泽贼则怎糟贼怎则藻 葬灶凿 糟燥灶蚤凿蚤葬 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 蚤泽燥造葬贼藻泽 怎灶凿藻则 贼澡藻 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻 渊源园园 伊 冤
圆援 员援 圆 菌株 则阅晕粤鄄陨栽杂序列分子鉴定
以 陨栽杂员 和 陨栽杂源 为引物袁从菌株 陨悦月杂怨员愿 和
陨悦栽蕴怨员员 基因组 阅晕粤 中分别扩增出 员 条约 远园园 遭责
的序列 渊图 圆 冤袁 孕悦砸 产物测序结果表明袁菌株
陨悦月杂怨员愿 序列长度为 缘愿缘 遭责袁 郧藻灶月葬灶噪 登录号为
运悦源员猿怨苑源曰菌株 陨悦栽蕴怨员员 序列长度为 缘怨园 遭责袁郧藻灶鄄
月葬灶噪登录号为 运悦源员猿怨苑缘遥 通过 月蕴粤杂栽与 郧藻灶月葬灶噪
中已有的核酸序列进行比对袁发现菌株 陨悦月杂怨员愿 和
陨悦栽蕴怨员员 的 则阅晕粤鄄陨栽杂序列和环链棒束孢 陨援 糟葬贼藻灶蚤葬灶鄄
灶怎造葬贼葬或环链拟青霉 孕援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼怎泽 相应序列的
同源性高达 怨愿豫以上遥
圆援 员援 猿 则阅晕粤鄄陨栽杂序列的系统发育分析
菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 与其它环链棒束孢 陨援
糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬或环链拟青霉 孕援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼怎泽 聚集
在一个进化支上袁月燥燥贼泽贼则葬责 值为 愿园豫 渊图 猿冤遥 其中
菌株 陨悦月杂怨员愿尧孕援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼怎泽 杂蕴圆苑 和 孕援 糟葬贼藻灶蚤葬灶鄄
灶怎造葬贼怎泽 扎赠援 苑 聚类在一个小的分支上袁月燥燥贼泽贼则葬责 值为
愿远豫 曰而菌株 陨悦栽蕴怨员员尧 陨援 糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬 远圆源圆 和 陨援
糟葬贼藻灶蚤葬灶灶怎造葬贼葬 远圆源园 聚类在另一个小分支上袁月燥燥贼鄄
泽贼则葬责值为 员园园豫 遥 综合菌株的培养和形态学特征以
及分子鉴定结果袁确定菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 均
为环链棒束孢遥
圆援 圆 菌株对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫的致病力
茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫在分别接种 员援 园 伊
员园愿 孢子 辕 皂蕴 菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 孢子悬浮液
圆 耀 猿 凿 后袁均出现行动变得迟缓袁体表颜色由淡绿
色逐渐变为红褐色袁部分节间处呈黑色的症状遥
再经过 员 耀 圆 凿袁死虫体表变软袁有部分虫体体表开始
源猿缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 圆 孕悦砸扩增菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 的琼脂糖凝胶电泳图
云蚤早援 圆 粤早葬则燥泽藻 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 孕悦砸 责则燥凿怎糟贼 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 枣则燥皂 陨栽杂 则藻早蚤燥灶
燥枣 陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员 蚤泽燥造葬贼藻泽
摇 摇 员 耀 圆院 菌株 陨悦月杂怨员愿的 陨栽杂片段曰 酝院 阅晕粤分子量标准曰 猿 耀 源院 菌株 陨悦栽蕴怨员员的 陨栽杂片段遥 员鄄圆院 陨栽杂 枣则葬早皂藻灶贼 燥枣 陨悦月杂怨员愿曰 酝院 阅晕粤
皂葬则噪藻则 渊阅蕴圆园园园 遭责冤曰 猿鄄源院 陨栽杂 枣则葬早皂藻灶贼 燥枣 陨悦栽蕴怨员员援
图 猿 基于 则阅晕粤鄄陨栽杂序列的菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 及相关类群的系统发育树
云蚤早援 猿 晕藻蚤早澡遭燥怎则鄄躁燥蚤灶蚤灶早 贼则藻藻 遭葬泽藻凿 燥灶 则阅晕粤鄄陨栽杂 泽藻择怎藻灶糟藻泽 枣则燥皂 陨悦月杂怨员愿 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员 蚤泽燥造葬贼藻泽 葬灶凿 燥贼澡藻则 枣怎灶早蚤
长出白色菌丝袁并逐渐形成僵虫遥 室内生测结果表
明袁圆 株菌对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫都具有较
强的毒力袁试虫死亡率随孢子浓度的增大和接种时
间的推移而增加渊表 员冤遥 员郾 园 伊 员园愿 孢子 辕 皂蕴孢子悬
浮液处理 愿 凿后袁菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 对茶卷叶
蛾幼虫的累计校正死亡率均达 员园园豫 袁僵虫率分别
为 愿缘豫和 愿园豫 袁蕴栽缘园分别为 猿郾 员猿 凿和 猿郾 员缘 凿曰对茶小
卷叶蛾幼虫的累计校正死亡率分别为 员园园豫 和
怨缘豫 袁僵虫率分别为 愿圆郾 缘豫 和 愿缘豫 袁 蕴栽缘园分别为猿郾 圆缘 凿和 猿郾 猿员 凿遥 菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 处理茶
卷叶蛾幼虫第 愿 天的 蕴悦缘园值分别为 园郾 源苑 伊 员园缘 孢
子 辕 皂蕴和 员郾 园员 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴曰处理茶小卷叶蛾幼
虫的 蕴悦缘园值分别为圆郾 圆园 伊 员园缘 孢子 辕 皂蕴 和 员郾 猿源 伊
员园缘 孢子 辕 皂蕴遥
圆援 猿 最适培养基和最适培养温度的筛选
圆援 猿援 员 培养基对菌株生长速度和产孢量的影响
菌株 陨悦月杂怨员愿 在 悦孕阅粤 培养基上生长速度最
快袁员缘 凿 菌落直径达 苑猿郾 缘 皂皂袁显著快于其它培养
基曰但其在 孕孕阅粤和 杂阅粤再培养基上产孢量最大袁培
养 员缘 凿 分别为 员郾 猿园 伊 员园远 孢子 辕 皂皂圆 和 员郾 圆员 伊 员园远
孢子 辕 皂皂圆袁二者之间差异不显著袁但均显著高于其
它培养基渊图 源鄄粤冤遥 菌株 陨悦栽蕴怨员员在 悦孕阅粤和 悦扎葬责藻噪
培养基上生长速度最快袁员缘 凿 菌落直径达 远猿郾 苑缘 皂皂
和 远圆郾 圆缘 皂皂袁二者之间差异不显著曰但该菌株在
孕孕阅粤培养基上产孢量最大袁培养 员缘 凿 达 员郾 员园 伊 员园远
孢子 辕 皂皂圆袁且显著高于其它培养基渊图 源鄄月冤遥 表明
菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员 最适生长培养基均为
悦孕阅粤曰最适产孢培养基均为 孕孕阅粤遥
缘猿缘缘 期 王定锋等院 两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的致病力
表 员 两株棒束孢菌不同孢子浓度处理对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾 猿龄幼虫的致病力渊愿 凿冤
栽葬遭造藻 员 灾蚤则怎造藻灶糟藻 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 泽责燥则藻泽 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 陨泽葬则蚤葬 泽责责援 蚤泽燥造葬贼藻泽 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 猿则凿 蚤灶泽贼葬则 造葬则增葬藻 燥枣
匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬 葬灶凿 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤 渊愿 凿冤
菌株
陨泽燥造葬贼藻
处理浓度
渊孢子 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
茶卷叶蛾幼虫
蕴葬则增葬 燥枣 匀燥皂燥灶葬 糟燥枣枣藻葬则蚤葬
校正累计死亡率 渊豫冤
悦燥则则藻糟贼藻凿 葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻
皂燥则贼葬造蚤贼赠
致病力回归方程
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠
则藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶
字圆 蕴栽缘园渊凿冤渊怨缘豫 悦蕴冤
累计僵虫率 渊豫冤
粤糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻 则蚤早蚤凿
糟葬凿葬增藻则 则葬贼藻
陨悦月杂怨员愿 员援 园 伊员园愿 员园园援 园园 依园援 园园 葬 赠 越缘援 缘园曾 原圆援 苑猿 缘援 猿员 猿援 员猿 渊圆援 愿员 耀猿援 源圆冤 愿缘援 园园 依圆援 愿怨 葬
圆援 园 伊员园苑 员园园援 园园 依园援 园园 葬 赠 越远援 圆员曾 原猿援 源猿 员援 源猿 猿援 缘苑 渊猿援 圆缘 耀猿援 愿缘冤 愿园援 园园 依源援 园愿 葬
源援 园 伊员园远 怨源援 苑圆 依猿援 园远 葬遭 赠 越缘援 苑圆曾 原猿援 缘圆 员援 员远 源援 员猿 渊猿援 苑愿 耀源援 源远冤 苑园援 园园 依源援 园愿 遭
愿援 园 伊员园缘 愿怨援 苑圆 依园援 圆愿 遭 赠 越远援 员圆曾 原源援 员苑 猿援 圆苑 源援 愿园 渊源援 源猿 耀缘援 员远冤 远圆援 缘园 依圆援 缘园 遭
员援 远 伊员园缘 远怨援 员苑 依源援 员苑 糟 赠 越缘援 圆苑曾 原源援 员愿 园援 缘源 远援 圆圆 渊缘援 苑源 耀远援 愿源冤 源苑援 缘园 依圆援 缘园 糟
陨悦栽蕴怨员员 员援 园 伊员园愿 员园园援 园园 依园援 园园 葬 赠 越远援 缘怨曾 原猿援 圆愿 远援 怨愿 猿援 员缘 渊圆援 愿远 耀猿援 源园冤 愿园援 园园 依源援 园愿 葬
圆援 园 伊员园苑 员园园援 园园 依园援 园园 葬 赠 越苑援 员员曾 原猿援 苑苑 圆援 圆愿 猿援 源园 渊猿援 员员 耀猿援 远缘冤 苑苑援 缘园 依圆援 缘园 葬
源援 园 伊员园远 怨圆援 圆圆 依圆援 远员 葬 赠 越缘援 猿缘曾 原猿援 猿苑 圆援 猿怨 源援 圆远 渊猿援 怨园 耀源援 远员冤 远缘援 园园 依圆援 愿怨 遭
愿援 园 伊员园缘 愿员援 怨源 依圆援 苑源 遭 赠 越缘援 员愿曾 原猿援 愿员 圆援 猿园 缘援 源猿 渊缘援 园员 耀缘援 怨园冤 缘圆援 缘园 依圆援 缘园 糟
员援 远 伊员园缘 缘愿援 愿怨 依源援 圆猿 糟 赠 越源援 远圆曾 原猿援 愿苑 圆援 猿苑 远援 怨园 渊远援 圆苑 耀苑援 愿苑冤 猿苑援 缘园 依源援 苑怨 凿
菌株
陨泽燥造葬贼藻
处理浓度
渊孢子 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
茶小卷叶蛾幼虫
蕴葬则增葬 燥枣 粤凿燥曾燥责澡赠藻泽 澡燥灶皂葬蚤
校正累计死亡率 渊豫冤
悦燥则则藻糟贼藻凿 葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻
皂燥则贼葬造蚤贼赠
致病力回归方程
孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠
则藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶
字圆 蕴栽缘园渊凿冤渊怨缘豫 悦蕴冤
累计僵虫率 渊豫冤
粤糟糟怎皂怎造葬贼蚤增藻 则蚤早蚤凿
糟葬凿葬增藻则 则葬贼藻
陨悦月杂怨员愿 员援 园 伊员园愿 员园园援 园园 依园援 园园 葬 赠 越 缘援 猿远曾 原圆援 苑缘 员援 远源 猿援 圆缘渊圆援 怨圆 耀猿援 缘缘冤 愿圆援 缘园 依圆援 缘园 葬
圆援 园 伊员园苑 怨缘援 园园 依圆援 愿怨 葬 赠 越 源援 苑苑曾 原圆援 远园 园援 缘园 猿援 缘圆渊猿援 员缘 耀猿援 愿缘冤 苑缘援 园园 依缘援 园园 葬
源援 园 伊员园远 愿源援 苑圆 依圆援 苑源 遭 赠 越 源援 怨怨曾 原猿援 缘园 源援 猿怨 缘援 园员渊源援 远园 耀缘援 源源冤 远园援 园园 依源援 园愿 遭
愿援 园 伊员园缘 远怨援 员苑 依源援 员苑 糟 赠 越 源援 苑怨曾 原猿援 愿苑 员援 远园 远援 源猿渊缘援 愿怨 耀苑援 员怨冤 缘园援 园园 依源援 园愿 遭
员援 远 伊员园缘 源远援 员员 依圆援 源圆 凿 赠 越 源援 缘员曾 原源援 员远 圆援 员愿 摇 愿援 猿愿渊苑援 猿愿 耀员园援 远园冤 猿苑援 缘园 依圆援 缘园 糟
陨悦栽蕴怨员员 员援 园 伊员园愿 摇 怨缘援 园园 依圆援 愿怨 葬 赠 越 源援 缘愿曾 原圆援 猿愿 员援 员缘 猿援 猿员 渊圆援 怨远 耀猿援 远源冤 愿缘援 园园 依圆援 愿怨 葬
圆援 园 伊员园苑 怨圆援 缘园 依圆援 缘园 葬 赠 越 缘援 园猿曾 原圆援 怨愿 员援 员员 猿援 怨员 渊猿援 缘苑 耀源援 圆源冤 苑苑援 缘园 依圆援 缘园 葬
源援 园 伊员园远 愿苑援 缘园 依圆援 缘园 葬 赠 越 远援 圆怨曾 原源援 圆怨 源援 缘缘 源援 愿员 渊源援 源苑 耀缘援 员源冤 远圆援 缘园 依圆援 缘园 遭
愿援 园 伊员园缘 苑圆援 缘园 依圆援 缘园 遭 赠 越 缘援 源远曾 原源援 猿缘 员援 园员 远援 圆远 渊缘援 愿园 耀远援 愿源冤 缘园援 园园 依源援 园愿 糟
员援 远 伊员园缘 源苑援 缘园 依圆援 缘园 糟 赠 越 源援 愿园曾 原源援 猿圆 员援 苑猿 苑援 怨缘 渊苑援 员猿 耀怨援 源怨冤 源园援 园园 依源援 园愿 凿
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同列数据后不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 字圆 约 字圆渊缘袁 园援 园缘冤 越
员员援 园苑袁故致病力回归方程与实际相符遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼
孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援 字圆 约 字圆渊缘袁 园援 园缘冤 越 员员援 园苑袁 蚤灶凿蚤糟葬贼蚤灶早 贼澡葬贼 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 则藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 糟燥灶枣燥则皂泽 贼燥 贼澡藻
燥遭泽藻则增藻凿 凿葬贼葬援
圆援 猿援 圆 温度对菌株生长速度和产孢量的影响
菌株 陨悦月杂怨员愿 在 圆源尧圆苑尧猿园 益下生长速度最快袁
培养 员缘 凿菌落直径分别达 远苑郾 苑缘尧远愿郾 苑缘尧远愿郾 缘 皂皂袁
三者之间差异不显著袁但均显著快于其它温度曰该菌
株在 圆苑 益下产孢量最大袁培养 员缘 凿 达 圆郾 怨愿 伊 员园远 孢
子 辕 皂皂圆袁显著高于其它温度 渊图 缘鄄粤冤遥 菌株 陨悦鄄
栽蕴怨员员 在 圆源 益下生长速度最快袁培养 员缘 凿菌落直径
达 远员郾 圆缘 皂皂袁显著快于其它温度曰其在 圆员 益下产孢
量最大袁培养 员缘 凿 达 怨郾 怨缘 伊 员园缘 孢子 辕 皂皂圆袁显著高
于其它温度渊图 缘鄄月冤遥
猿 讨论
仅依据形态学分类特征鉴定病原真菌袁对于许
多种下差异较小的变种尧亚种袁往往难以得到令人满
远猿缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
图 源 培养基对菌株 陨悦月杂怨员愿渊粤冤和 陨悦栽蕴怨员员渊月冤菌落生长及产孢的影响
云蚤早援 源 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂藻凿蚤葬 燥灶 糟燥造燥灶赠 早则燥憎贼澡 葬灶凿 泽责燥则怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼藻泽 陨悦月杂怨员愿 渊粤冤 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员 渊月冤
摇 摇 图中数据为平均数 依标准差遥 柱上不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 孕阅粤尧孕孕阅粤尧悦孕鄄
阅粤尧杂阅粤再尧悦扎葬责藻噪分别为马铃薯葡萄糖琼脂尧蛋白胨马铃薯葡萄糖琼脂尧综合马铃薯尧萨氏尧察氏培养基遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援 孕阅粤院 孕燥贼葬贼燥
凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则曰 孕孕阅粤院 责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则 责造怎泽 员豫 责藻责贼燥灶藻曰 悦孕阅粤院 糟燥皂责则藻澡藻灶泽蚤增藻 责燥贼葬贼燥 皂藻凿蚤怎皂曰 杂阅粤再院 杂葬遭燥怎则葬怎凿 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则 责造怎泽 员豫
赠藻葬泽贼 藻曾贼则葬糟贼曰 悦扎葬责藻噪院 悦扎葬责藻噪爷泽 皂藻凿蚤怎皂援
意的结果遥 近年来袁飞速发展的分子生物学技术和
日益充实的 郧藻灶月葬灶噪数据库袁为病原真菌的分类鉴
定提供了强有力的分子依据遥 则阅晕粤鄄陨栽杂 序列中不
仅有进化缓慢尧相对保守的转录区袁也有进化速率较
快尧长度适中的间隔区 渊 陨栽杂冤袁且拥有用于扩增
则阅晕粤鄄陨栽杂 不同区域的通用引物咱圆圆暂 袁因此被广泛用
于病原真菌相似种的鉴定咱圆远 原 圆愿暂 遥 本试验在形态学
鉴定的基础上袁通过测定菌株 陨悦月杂怨员愿 和 陨悦栽蕴怨员员
的 则阅晕粤鄄陨栽杂序列袁并与棒束孢菌其它种的代表菌株
的对应序列进行比对分析袁从分子水平上进一步确
定 圆 个菌株均为环链棒束孢遥
本试验室内毒力测定的结果表明菌株 陨悦月杂怨员愿
和 陨悦栽蕴怨员员 对 圆 种卷叶蛾科害虫具有很强的杀虫活
性遥 员郾 园 伊 员园愿 孢子 辕 皂蕴孢子悬浮液处理后袁对茶卷
叶蛾幼虫的 蕴栽缘园值分别为 猿郾 员猿 凿 和 猿郾 员缘 凿袁对茶小
卷叶蛾幼虫的 蕴栽缘园值分别为 猿郾 圆缘 凿 和 猿郾 猿员 凿曰且 圆
个菌株延长培养都会产生浓密的孢梗束遥 这与 匀葬灶
等咱圆怨暂表明环链棒束孢孢梗束的形成可作为高致病
性菌株选择的一个重要指标袁孢梗束浓密的菌株对
小菜蛾致病性强的结果相似遥 虽然室内毒力测定表
明 圆 个菌株具有很高的毒力袁但如何开发出适用于
田间施用的剂型以及配套使用方法来适应复杂尧多
变的茶园环境袁还有待进一步的研究遥
培养基组分和培养温度直接影响环链棒束孢的
生长速率和产孢量袁最适培养基和最适培养温度的
初步筛选将为菌株今后规模化生产提供一定的试验
依据遥 朱新燕等咱猿园暂研究表明 悦孕阅粤 培养基不仅有
利于环链拟青霉菌落生长袁而且有利于其产孢遥 但
本研究结果表明袁虽然 悦孕阅粤培养基为菌株 陨悦月杂怨员愿
和 陨悦栽蕴怨员员的最适生长培养基袁但圆菌株的最适产
苑猿缘缘 期 王定锋等院 两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的致病力
图 缘 温度对菌株 陨悦月杂怨员愿渊粤冤和 陨悦栽蕴怨员员渊月冤菌落生长及产孢的影响
云蚤早援 缘 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 燥灶 糟燥造燥灶赠 早则燥憎贼澡 葬灶凿 泽责燥则怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼藻泽 陨悦月杂怨员愿 渊粤冤 葬灶凿 陨悦栽蕴怨员员 渊月冤
摇 摇 图中数据为平均数 依标准差遥 柱上不同小写字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻
葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
孢培养基却为 孕孕阅粤 培养基曰菌落生长速率较快的
培养基袁其单位面积产孢量反而较小遥 菌株 陨悦栽蕴怨员员
在 圆员 耀 圆源 益生长速率逐渐加快直到达到最大值
渊圆源 益冤袁该结果与朱新燕等咱猿园暂报道的 猿 株环链拟
青霉 孕糟源缘尧孕糟圆愿苑 和 孕糟猿园缘 在圆猿 益菌落生长速率最
快的研究结果较一致遥 本研究中菌株 陨悦月杂怨员愿 在
圆源 耀 猿园 益范围生长速率最快曰而 杂澡蚤皂葬扎怎咱员缘暂对 猿园 株
环链拟青霉菌株的观察发现袁在麦芽琼脂培养基
渊皂葬造贼 藻曾贼则葬糟贼 葬早葬则袁 酝耘粤冤和 杂阅粤再 培养基上其最适
生长温度是 圆缘 益袁最不适合生长的温度是 猿园 益遥
以上几个菌株的最适生长温度都高于林华峰等咱猿员暂
报道的环链拟青霉菌丝适宜生长温度为 圆园 益袁说明
环链棒束孢不同菌株之间最适生长温度存在较大差
异遥 温度对环链棒束孢产孢量的影响也同样显著袁
本研究中菌株 陨悦月杂怨员愿 在 圆苑 益下产孢量最大袁这与
朱新燕等咱猿园暂报道的菌株 孕糟猿园缘 在圆苑 益下产孢最多
的结果一致袁但该温度高于菌株 孕糟源缘 和 孕糟圆愿苑 最大
产孢量温度圆猿 益袁远高于本研究中菌株 陨悦栽蕴怨员员 的
最大产孢量温度 圆员 益遥 菌株 陨悦月杂怨员愿 的产孢能力
远大于陨悦栽蕴怨员员袁且其生长的最适温度范围与茶卷叶
蛾和茶小卷叶蛾发生较严重的夏秋季节气温较接
近袁具有开发成生防菌剂的巨大潜力遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 谭济才援 茶树病虫防治学援 北京院 中国农业出版社袁 圆园园圆院
怨怨 原 员园圆
咱圆暂 张汉鹄袁 谭济才援 中国茶树害虫及其无公害治理援 合肥院 安
徽科学技术出版社袁 圆园园源院 员愿怨 原 员怨远
咱猿暂 陈宗懋援 中国茶叶大辞典援 北京院 中国轻工业出版社袁
圆园园园院 员苑远 原 员苑苑
咱源暂 悦则葬灶澡葬皂 允 耘援 栽藻葬 责藻泽贼泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 糟燥灶贼则燥造援 粤灶灶怎葬造 砸藻增蚤藻憎 燥枣
耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁 员怨远远袁 员员院 源怨员 原 缘员源
咱缘暂 丁建华袁 郭剑雄援 茶卷叶蛾的初步观察援 茶叶科学简报袁
员怨愿怨渊员冤院 圆园 原 圆缘
咱远暂 陈宗懋援 茶叶质量安全和标准建设应与时俱进援 中国茶叶
加工袁 圆园员圆渊员冤院 员
咱苑暂 蕴怎葬灶早泽葬鄄粤则凿 允 允袁 匀赠憎藻造鄄允燥灶藻泽 晕 蕴袁 酝葬灶燥糟澡 蕴袁 藻贼 葬造援 韵灶 贼澡藻
则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 燥枣 孕葬藻糟蚤造燥皂赠糟藻泽 泽藻糟贼援 陨泽葬则蚤燥蚤凿藻葬 泽责藻糟蚤藻泽援 酝赠糟燥造燥早蚤鄄
糟葬造 砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园缘袁 员园怨渊缘冤院 缘愿员 原 缘愿怨
愿猿缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
咱愿暂 梁宗琦援 拟青霉属的两个新种援 微生物学报袁 员怨愿员袁 圆员渊员冤院
猿员 原 猿源
咱怨暂 蕴蚤葬灶早 在 匝袁 匀葬灶 再 云袁 悦澡怎 匀 蕴袁 藻贼 葬造援 杂贼怎凿蚤藻泽 燥灶 贼澡藻 早藻灶怎泽
孕葬藻糟蚤造燥皂赠糟藻泽 蚤灶 悦澡蚤灶葬援 陨援 云怎灶早葬造 阅蚤增藻则泽蚤贼赠袁 圆园园缘袁 圆园院 愿猿 原 员园员
咱员园暂 姚婷袁 梁宗琦袁 莫明和袁 等援 拟青霉云南菌株的杀线虫作
用援 中国生物防治袁 圆园园远袁 圆圆渊猿冤院 圆圆远 原 圆圆怨
咱员员暂 韩燕峰袁 张延威袁 梁建东袁 等援 一些拟青霉菌株对小菜蛾
致病性的初步研究援 植物保护袁 圆园园愿袁 猿源渊圆冤院 源远 原 源怨
咱员圆暂 何劲袁 康冀川袁 雷帮星袁 等援 四株虫生真菌的鉴定及其对
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渊责任编辑院李美娟冤
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