作 者 :赵东利 逯越 黄胜英 李雅杰
期 刊 :西北植物学报 2005年 11期
关键词:多基因家族;紫杉醇酰化酶;引物设计;基因克隆;红豆杉;
Keywords:superfamily, taxol acyltansferase, primer design, gene cloning, Taxus,
摘 要 :紫杉醇酰化酶多基因家族是催化红豆杉紫杉醇合成过程中的各酰化酶基因的总和。该基因家族的不同成员之间具有很高的保守性,本实验以该基因家族中的紫杉烷2α-O-苯甲酰转运酶(TBT)基因克隆为例,从引物设计与PCR参数优化角度,总结了针对类似高保守性多基因家族的基因克隆的经验,表明分别在保守性极高部位设计第一次扩增引物及在保守性极低部位设计巢式引物,并采用touchdown PCR程序及高效能的Zaq DNA聚合酶是成功的关键。