作 者 :巩振辉 何玉科
期 刊 :西北植物学报 1996年 3期
关键词:拟南芥;根癌农杆菌;CaMV基因VI;基因转移;真空渗入法;
Keywords:arabidopsis, Agrobacterium tumefaciens, gene VI of CaMV, gene transformation, vacuum infiltration method,
摘 要 :以拟南芥(Arabidopsisthaliana)生态型Landsbengerecta为试材,在含有所构建的CaMVBari-1株系基因VI的质粒(pJO530Bari-1GVI)的根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌种GV3101的介导下,研究了基因转移的新方法一真空渗入法。这种方法简便、快速、可靠且无需经过组织培养阶段即可获得大量转化植株。适宜的转化条件是将生长健壮,除去主苔后4-8d的成株连同营养钵倒置浸入被渗入培养基稀释的农杆菌孢子悬浮液,其光密度为0.8,在吸力为1.7m2/h的真空泵下断续处理2min/30s,置于24h连续光照下的气候室培养,待种子收获后在含有潮霉素的选择培养基选择转化植株.PCR分析及ELISA检测,该方法的转化效果高达0.71%。