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A study on fungicidal activity of allicin against Colletotrichum capsici and Phytophthora capsici in the laboratory and its efficacy in the field

大蒜素对辣椒炭疽病和辣椒疫病病菌的室内抑制活性测定及田间防效研究



全 文 :书大蒜素对辣椒炭疽病和辣椒疫病病菌的
室内抑制活性测定及田间防效研究
周清,李保同,汤丽梅
(江西农业大学农学院,江西 南昌330045)
摘要:大蒜素是从大蒜中提取的植物源抗生素。为探明大蒜素对辣椒炭疽病和辣椒疫病病菌的抑制活性及田间防
治效果,采用生长速率法和孢子萌发法分别测定了大蒜素对辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌菌丝生长、孢子产生和孢
子萌发的抑制作用,采用叶面喷雾法研究了大蒜素对2种病害的田间防治效果。结果表明,大蒜素可抑制辣椒炭
疽病菌和辣椒疫病菌菌丝生长、孢子产生和孢子萌发,其活性随着浓度的提高而增强,对辣椒炭疽病菌EC50值分别
为130.15,142.60和127.21μg/mL,对辣椒疫病菌EC50值分别为128.11,123.64和139.68μg/mL。田间试验结
果表明,6%大蒜素水乳剂600~1200μg/mL处理第3次喷施后3d对辣椒炭疽病和辣椒疫病的防效分别为
83.54%~88.25%和82.85%~85.88%,第3次喷施后14d分别为74.59%~79.16%和74.59%~78.01%,与对
照药剂50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理无显著差异;66.7~200.0μg/mL处理第3次喷施后3~14d对
辣椒炭疽病和辣椒疫病的防效均低于76%,显著低于对照药剂50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理。6%大
蒜素水乳剂防治辣椒炭疽病和辣椒疫病的推荐使用剂量为600~1200μg/mL,在辣椒苗期和挂果期每隔10d喷施
1次,连续喷施3次。
关键词:大蒜素;辣椒炭疽病菌;辣椒疫病菌;抑制作用;防治效果
中图分类号:S436.418  文献标识码:A  文章编号:10045759(2014)03026207
犇犗犐:10.11686/cyxb20140331  
  辣椒炭疽病(犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犮犪狆狊犻犮犻)和辣椒疫病(犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻)是辣椒(犆犪狆狊犻犮狌犿犪狀狀狌狌犿)生长过
程中发生普遍且危害严重的世界性病害。辣椒炭疽病病原菌可通过种子、土壤和病株残体侵染,引起辣椒落叶、
烂果和幼苗死亡,对辣椒的产量、品质和贮藏产生很大的影响[1]。辣椒疫病是一种毁灭性土传卵菌病害,其病原
菌可侵染辣椒、茄子(犛狅犾犪狀狌犿犿犲犾狅狀犵犲狀犪)、番茄(犔狔犮狅狆犲狉狊犻犮狅狀犲狊犮狌犾犲狀狋狌犿)、黄瓜(犆狌犮狌犿犻狊狊犪狋犻狏狌狊)等作物,危
害辣椒的根、茎、叶和果实等部位,在气候条件适宜的情况下,短期内就可爆发蔓延,给辣椒生产造成严重经济损
失[1]。目前,化学防治仍是辣椒炭疽病和辣椒疫病的主要防治措施,这不仅易造成蔬菜和环境污染,还易诱发病
原菌的抗药性[25]。为寻求安全有效的防治措施,利用生物农药防治辣椒病害,减少农药残留,提高农产品质量
安全,越来越引起人们的关注。植物是生物活性化合物的天然宝库,各类植物中含有数以万计的次生代谢产物,
其中生物碱类、萜烯类、黄酮类、柠檬素和番荔枝内酯等化合物都具有较强的抑菌活性[67]。已有文献报道,金银
花(犔狅狀犻犮犲狉犪犼犪狆狅狀犻犮犪)、板蓝根(犐狊犪狋犻狊狋犻狀犮狋狅狉犻犪)、黄芩(犛犮狌狋犲犾犾犪狉犻犪犫犪犻犮犪犾犲狀狊犻狊)、苦参(犛狅狆犺狅狉犪犳犾犪狏犲狊犮犲狀狊)、丁香
(犛狔狕狔犵犻狌犿犪狉狅犿犪狋犻犮狌犿)、乌梅(犘狉狌狀狌狊犿狌犿犲)、百部(犛狋犲犿狅狀犪狊犲狊狊犻犾犻犳狅犾犻犪)、桂枝(犆犻狀狀犪犿狅犿狌犿犮犪狊狊犻犪)等植
物提取物以及枯茗酸、茶皂素、小蘖碱、芳樟醇、香茅醛等植物次生代谢产物对辣椒炭疽病和疫病菌具有良好的抑
制活性和田间防治效果[813]。
大蒜素(alicin)又名大蒜新素,化学名称为二烯丙基三硫化物(CH2=CH-CH2-S-S-S-CH2-CH=
CH2),是从蒜(犃犾犾犻狌犿狊犪狋犻狏狌犿)的球形鳞茎中提取的挥发性油状物,被誉为天然广谱抗生素,已广泛用于抑制金
黄色葡萄球菌(犛狋犪狆犺狔犾狅犮狅犮犮狌狊犪狌狉犲狌狊)、白色葡萄球菌(犛狋犪狆犺狔犾狅犮狅犮犮狌狊犪犾犫狌狊)、福氏痢疾杆菌(犛犺犻犵犲犾犾犪犳犾犲狓狀犲
262-268
2014年6月
   草 业 学 报   
   ACTAPRATACULTURAESINICA   
第23卷 第3期
Vol.23,No.3
收稿日期:20130608;改回日期:20130809
基金项目:江西省南昌市科技支撑项目(洪财2010095)资助。
作者简介:周清(1987),男,江西进贤人,硕士。Email:beijinzhaojia112@163.com
通讯作者。Email:libt66@163.com
狉犻)、宋氏痢疾杆菌(犛犺犻犵犲犾犾犪狊狅狀狀犲犻)、伤寒杆菌(犛犪犾犿狅狀犲犾犾犪犲狀狋犲狉犻犮犪)、大肠杆菌(犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻)等病菌和心血
管等疾病的防治[1416]。关于大蒜素在作物上的应用研究,孙惠敏等[17]报道大蒜素对柑橘溃疡病病原细菌(犡犪狀
狋犺狅犿狅狀犪狊犮犪犿狆犲狊狋狉犻狊)的抑制活性,有研究[1820]报道大蒜素对棉花致病菌立枯丝核菌(犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪狊狅犾犪狀犻)、棉花
串珠镰孢菌(犉狌狊犪狉犻狌犿犿狅狀犻犾犻犳狅狉犿犲)、棉花尖镰孢萎蔫专化型真菌(犉狌狊犪狉犻狌犿狅狓狔狊狆狅狉狌犿)、稻瘟病菌(犘狔狉犻犮狌
犾犪狉犻犪狅狉狔狕犪犲)、小麦纹枯病菌(犚犺犻狕狅犮狋狅狀犻犪犮犲狉犲犪犾犻狊)、油菜菌核病菌(犛犮犾犲狉狅狋犻狀犻犪狊犮犾犲狉狅狋犻狅狉狌犿)、番茄灰霉病菌
(犅狅狋狉狔狋犻狊犮犻狀犲狉犲犪)、番茄叶霉病菌(犉狌犾狏犻犪犳狌犾狏犪)和番茄早疫病菌(犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪狊狅犾犪狀犻)等病原真菌抑制效果,由此
证实大蒜素具有抑制植物病原细菌和真菌广谱的特性。而有关大蒜素对辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌的抑制作用
报道较少。本文研究了大蒜素对辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌菌丝生长、孢子产生和孢子萌发的抑制作用及其田
间防治效果,以期为大蒜素在蔬菜上的开发应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
药剂:98%大蒜素精油,由陕西慈缘生物技术有限公司生产,溶于甲醇配制成12mg/mL的母液;加复合氨
基酸、月桂酸甲酯、乳化剂Termul5030、乙二醇和去离子水等助剂,配制成6%大蒜素水乳剂;98%多菌灵(car
bendazim)原药由山东华阳科技股份有限公司生产,溶于甲醇配制成10mg/mL的母液;50%多菌灵可湿性粉剂
由江阴市福达农化有限公司生产。
仪器:电子天平(感量0.1mg)、光照培养箱、移液枪、卡尺、锥形瓶、玻璃棒、培养皿(Ф=90mm)、打孔器
(Ф=6mm)、接种器、血球计数板、凹玻片、载玻片等。
菌株:辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌由江西农业大学农学院植物病理实验室提供,经转接、纯化培养后供试。
培养基:马铃薯培养基(PDA),称取200g马铃薯置于1000mL蒸馏水中,煮沸30min,过滤,加入20g葡萄
糖和20g琼脂,融化后用蒸馏水补足至1000mL,分装灭菌(126℃,25min),备用。玉米粉培养基(CMA):称取
玉米粉300g置于1000mL蒸馏水中,60℃水浴加热1h,过滤,加入16g琼脂,用蒸馏水补足至1000mL,分装
灭菌(126℃,25min),备用。
1.2 方法
1.2.1 药剂对病原菌菌丝生长的影响 在预备试验的基础上,选择各药剂对病原菌菌丝生长抑制率在10%~
90%范围内的5个浓度,用甲醇将药剂配成一定浓度的母液,按照体积比1∶100的比例分别加入到已融化并冷
却至50℃左右的PDA培养基中,充分混匀后分别倒入4个灭菌的培养皿内,制成系列浓度的含药培养基(即大
蒜素50.0,66.7,100.0,200.0,600.0μg/mL,多菌灵1000μg/mL),以加入等体积甲醇的 PDA 平板为对
照[2122]。用打孔器截取在PDA培养基上培养的待用病原菌菌饼,菌丝面朝上接种于已凝固的含药PDA培养基
中央,置于25℃下黑暗培养,待对照菌落直径长至大于平皿直径2/3时,用卡尺测量菌落直径(mm)。每个菌落
用十字交叉法垂直测量直径各1次,取其平均值。每处理重复3次,与对照比较计算各药剂处理对菌落扩展的生
长抑制率,分析比较供试药剂对供试病原菌菌丝生长的影响。以药剂浓度的对数值为横坐标,菌丝生长抑制率的
几率值为纵坐标,采用回归分析法对试验数据进行分析,计算各处理的EC50值、EC90值及其95%置信限。
生长抑制率(%)={[(对照菌落直径-菌饼直径)-(处理菌落直径-
菌饼直径)]/(对照菌落直径-菌饼直径)}×100
1.2.2 药剂对病原菌孢子产生的影响 用打孔器截取在PDA培养基上培养的待用病原菌菌饼,菌丝面朝上接
种于已凝固的含药PDA(炭疽病菌培养)或CMA(疫病菌培养)培养基中央,以无药剂的培养基为对照。接种的
PDA培养基于30℃下连续光照培养7d后,加入40mL无菌水,用毛笔刷洗培养基表面的孢子,过滤。接种的
CMA培养基于26℃下黑暗培养3d后,继续光照培养6d,在培养基中加入40mL无菌水于16℃下再光照培养
0.5h后,用毛笔刷洗培养基表面的孢子,过滤。用血球计数板在10×10倍视野下镜检孢子的数量,每菌饼随机
检测4视野。每处理重复3次,与对照比较计算各药剂对孢子产生的抑制率,分析供试药剂对供试病原菌孢子产
生的影响。
362第23卷第3期 草业学报2014年
产孢抑制率(%)=[(对照产孢量-处理产孢量)/对照产孢量]×100
1.2.3 药剂对病原菌孢子萌发的影响 按1.2.2无药剂对照操作方法产生的孢子,用灭菌水稀释至1×105~
1×107个孢子/mL,并加入0.5%葡萄糖溶液,备用。在无菌条件下将6%大蒜素水乳剂用无菌水配成一定浓度
的母液,用移液枪从低浓度到高浓度依次吸取0.5mL母液分别加入小试管中,再吸取制备好的孢子悬浮液0.5
mL使药液与孢子悬浮液等量混合均匀,配置成试验所需浓度。用微量加样器吸取药剂孢子混合液滴至凹玻片
上,将凹玻片架放于带有浅层水的培养皿中,于25℃下光照静置2h。每处理重复3次,并设不含药剂的处理作
对照。当对照孢子萌发率达到90%以上时,在10×10倍视野下镜检孢子萌发的情况,孢子芽管长度大于孢子的
半径视为萌发。每处理随机观察4个视野,记录孢子总数和萌发孢子数。每处理重复3次,与对照比较计算各药
剂对孢子萌发的抑制率,分析供试药剂对供试病原菌孢子萌发的影响。
孢子萌发率(%)=(孢子萌发数/调查的孢子总数)×100
处理校正孢子萌发率(%)=(处理孢子萌发率/空白对照孢子萌发率)×100
孢子萌发抑制率(%)=[(空白对照孢子萌发率-处理校正孢子萌发率)/空白对照孢子萌发率]×100
1.2.4 药剂对辣椒炭疽病和疫病的田间防治效果 试验于2011年在江西农业大学科技园保护地辣椒上进行,
土壤有机质含量2.15%,pH值5.8,肥力中等。供试辣椒品种为湘研19号,2月12日定植,株行距40cm×60
cm。试验设6%大蒜素水乳剂66.7,100.0,200.0,600.0,1200.0μg/mL,50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL
和清水对照,共7个处理,3次重复,随机区组排列,小区面积20m2。于辣椒苗期,即3月7,17,27日连续喷药3
次防治疫病;于辣椒挂果期,即5月9,19,29日连续喷药3次防治炭疽病,药液用量450kg/hm2。第1次施药前
调查病情基数,最后1次药后3,7,14d分别调查1次病害的防治效果。病情调查、分级标准及药效计算参照《农
药田间药效试验准则》(一)有关方法进行[23],用Duncan氏方法对数据进行方差分析,比较各处理间的差异。
辣椒果实炭疽病病情分级标准:0级,无病斑;1级,病斑面积占果实面积的2%以下;3级,病斑面积占果实面
积的3%~8%;5级,病斑面积占果实面积的9%~15%;7级,病斑面积占果实面积的16%~25%;9级:病斑面
积占果实面积的25%以上。
辣椒植株疫病病情分级标准:0级,无症状;1级,地上部仅叶、果有病斑;3级,地上茎、枝有褐腐斑;5级,茎基
部有褐腐斑;7级,地上茎、枝与茎基部均有褐腐斑,且部分枝条枯死;9级,全株枯死。
病情指数=[∑(各级病果叶枝数×相对级数值)/(调查总果叶枝数×9)]×100
防治效果(%)=[(空白对照区病情指数-药剂处理区病情指数)/空白对照区病情指数]×100
2 结果与分析
2.1 药剂对病原菌的抑制作用
2.1.1 对病原菌菌丝生长的抑制作用 大蒜素在供试浓度内对辣椒炭疽病菌和疫病菌菌丝生长有显著的抑制
作用,其抑制活性与浓度呈正相关,200~600μg/mL处理对炭疽病菌菌丝生长的抑制效果为71.17%~
78.06%,与对照药剂多菌灵1000μg/mL处理无显著差异,对疫病菌丝生长的抑制效果为71.39%~78.23%,显
著低于对照药剂多菌灵1000μg/mL处理(表1)。大蒜素对炭疽病菌和疫病菌菌丝生长的抑制中浓度(EC50)分
别为130.15和128.11μg/mL,EC90值分别为992.26和988.74μg/mL(表2)。
2.1.2 对病原菌产孢及孢子萌发的抑制作用 不同浓度的大蒜素(50~600μg/mL)均对辣椒炭疽病菌和疫病
菌产孢和孢子萌发均有显著的抑制作用,其抑制活性与浓度呈正相关,600μg/mL处理对炭疽病菌产孢的抑制
效果为81.16%,显著高于对照药剂多菌灵1000μg/mL处理,对炭疽病菌孢子萌发的抑制效果为83.72%,与对
照药剂无显著差异;600μg/mL处理对疫病菌产孢的抑制效果为88.23%,显著低于对照药剂多菌灵1000
μg/mL处理,对疫病菌孢子萌发的抑制效果为84.40%,显著高于对照药剂(表1)。大蒜素对炭疽病菌产孢和孢
子萌发EC50值分别为142.60和127.21μg/mL,EC90值分别为936.20和836.82μg/mL,对疫病菌产孢和孢子
萌发EC50值分别为123.64和139.68μg/mL,EC90值分别为450.01和729.05μg/mL(表2)。
462 ACTAPRATACULTURAESINICA(2014) Vol.23,No.3
表1 大蒜素对辣椒炭疽病菌和疫病病原菌的抑制效果
犜犪犫犾犲1 犐狀犺犻犫犻狋犻狏犲犲犳犳犲犮狋狊狅犳犪犾犻犮犻狀狅狀狆犪狋犺狅犵犲狀犻犮犳狌狀犵犻狅犳犆.犮犪狆狊犻犮犻犪狀犱犘.犮犪狆狊犻犮犻
病原菌
Pathogenic
fungus
处理
Treatment
(μg/mL)
菌丝生长
Mycelialgrowth
菌落直径
Diameterof
colonies(cm)
抑制率
Inhibitory
rate(%)
产孢量
Sporulationquantity
孢子量
Number
(×105/L)
抑制率
Inhibitory
rate(%)
孢子萌发
Sporegermination
萌发率
Germinationrate
(%)
抑制率
Inhibitory
rate(%)
辣椒炭疽病
犆.犮犪狆狊犻犮犻
大蒜素 Alicin600.0 2.03±0.12d 78.06a 4.37±0.37e 81.16a 15.64±0.54e 83.72a
大蒜素 Alicin200.0 2.48±0.04d 71.17a 7.93±0.84d 65.80b 32.06±1.16d 66.63b
大蒜素 Alicin100.0 3.83±0.25c 50.51b 13.47±0.96c 41.91c 52.13±2.08c 45.92c
大蒜素 Alicin66.7 5.33±0.46b 27.55b 17.13±0.84b 26.13d 67.67±3.45b 29.55d
大蒜素 Alicin50.0 5.56±0.35b 24.03b 17.66±0.76b 23.85d 71.08±3.87b 26.00d
多菌灵Carbendazim1000 2.32±0.08d 73.72a 8.41±0.50d 63.73b 20.43±0.96e 78.73a
CK 7.13±0.36a 23.19±1.12a 96.06±4.80a
辣椒疫病
犘.犮犪狆狊犻犮犻
大蒜素 Alicin600.0 2.03±0.06d 78.23b 0.86±0.05e 88.23b 14.78±0.92e 84.40a
大蒜素 Alicin200.0 2.48±0.22d 71.39c 1.08±0.04e 85.13b 30.56±1.18d 67.74b
大蒜素 Alicin100.0 3.83±0.16c 50.84d 3.37±0.82d 56.35c 52.38±2.60c 44.70c
大蒜素 Alicin66.7 5.33±0.35b 28.01e 5.63±0.26c 22.57d 72.39±3.06b 23.57d
大蒜素 Alicin50.0 5.56±0.42b 24.51e 6.49±0.38b 10.74e 75.69±4.12b 20.09d
多菌灵Carbendazim1000 0.6±0e 100.00a 0f 100.00a 32.54±1.06d 65.65b
CK 7.17±0.38a 7.27±0.62a 94.72±3.88a
 注:表中数据为3次重复平均值。同列不同小写字母表示在0.05水平差异显著,下同。
 Note:Dataisthemeanof3repeats.Differentsmallettersinthesamecolumnmeansignificantdifferenceat0.05level,thesamebelow.
表2 大蒜素对辣椒炭疽病和辣椒疫病病菌的室内毒力测定结果
犜犪犫犾犲2 犜狅狓犻犮犻狋狔犲犳犳犻犮犻犲狀犮狔狅犳犪犾犻犮犻狀狅狀狆犪狋犺狅犵犲狀犻犮犳狌狀犵犻狅犳犆.犮犪狆狊犻犮犻犪狀犱犘.犮犪狆狊犻犮犻犻狀狋犺犲犵狉犲犲狀犺狅狌狊犲
病原菌
Pathogenic
fungus
项目
Index
毒性回归方程
Regressionequation
oftoxicity
相关系数
Correlated
coefficient
抑制50%浓度
(95%置信区域)
EC50(95%FL,μg/mL)
抑制90%浓度
(95%置信区域)
EC90(95%FL,μg/mL)
辣椒炭疽病
犆.犮犪狆狊犻犮犻
菌丝生长 Mycelialgrowth 狔=1.9284+1.4527狓 0.9442 130.15(91.62~184.88) 992.26(754.15~1240.64)
产孢Sporulation 狔=1.6219+1.5682狓 0.9849 142.60(119.44~170.24) 936.20(695.26~1215.94)
孢子萌发Sporegermination 狔=1.7033+1.5665狓 0.9911 127.21(106.67~151.69) 836.82(737.46~960.47)
辣椒疫病
犘.犮犪狆狊犻犮犻
菌丝生长 Mycelialgrowth 狔=1.9564+1.4441狓 0.9445 128.11(61.86~265.81) 988.74(936.32~1235.60)
产孢Sporulation 狔=-0.2211+2.2842狓 0.9210 123.64(76.21~200.59) 450.01(402.65~528.40)
孢子萌发Sporegermination 狔=1.1690+1.7859狓 0.9823 139.68(119.13~163.78) 729.05(691.06~773.22)
2.2 大田防治试验
2.2.1 大蒜素对辣椒炭疽病防效 大蒜素对辣椒炭疽病具有良好的防治效果,600~1200μg/mL处理第3次
药后3,7,14d对辣椒炭疽病的防效为83.54%~88.25%,82.01%~86.17%和74.59%~79.16%,与对照药剂
50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理无显著差异;66.7~200.0μg/mL处理第3次药后3~14d对辣椒炭
疽病的防效均低于76%,极显著低于对照药剂50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理(表3)。
2.2.2 大蒜素对辣椒疫病防效 大蒜素对辣椒疫病具有良好的防治效果,600~1200μg/mL处理第3次药后
3,7,14d对辣椒疫病的防效分别为82.85%~85.88%,79.91%~83.37%和74.59%~78.01%,与对照药剂
562第23卷第3期 草业学报2014年
50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理无显著差异;66.7~200.0μg/mL处理药后3~14d对辣椒疫病的防
效均低于76%,极显著低于对照药剂50%多菌灵可湿性粉剂1000μg/mL处理(表4)。
表3 大蒜素对辣椒炭疽病的田间防治效果
犜犪犫犾犲3 犉犻犲犾犱犲犳犳犻犮犪犮狔狅犳犪犾犻犮犻狀狅狀犆.犮犪狆狊犻犮犻
处理
Treatment
浓度
Concentration
(μg/mL)
药前病指
Diseaseindex
beforesprayed
药后3d3daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
药后7d7daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
药后14d14daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
6%大蒜素水乳剂
Alicin6%EW
66.7 0.91 9.48 54.15dD 12.63 49.82dD 15.29 45.76dD
100.0 0.83 6.20 67.12cC 8.28 63.93cC 11.15 56.64cC
200.0 0.76 4.23 75.50bB 5.66 73.08bB 8.27 64.88bB
600.0 0.87 3.25 83.54aA 4.33 82.01aA 6.85 74.59aA
1200.0 0.92 2.46 88.25aA 3.52 86.17aA 5.94 79.16aA
50%多菌灵可湿性粉剂
Carbendazim50% WP
1000.0 0.85 2.54 86.84aA 3.58 84.77aA 6.08 76.91aA
CK 0.82 18.63 22.68 25.40
 注:表中数据为3次重复平均值。同列数据后不同小、大写字母分别表示在5%和1%水平差异显著(Duncan氏新复极差),下同。
 Note:Dataisthemeanof3repeats.Differentsmalorcapitallettersafterdatainthesamecolumnmeanthesignificanceat0.05or0.01level,the
samebelow.
表4 大蒜素对辣椒疫病的田间防治效果
犜犪犫犾犲4 犉犻犲犾犱犲犳犳犻犮犪犮狔狅犳犪犾犻犮犻狀狅狀犘.犮犪狆狊犻犮犻
处理
Treatment
浓度
Concentration
(μg/mL)
药前病指
Diseaseindex
beforesprayed
药后3d3daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
药后7d7daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
药后14d14daftersprayed
病情指数
Disease
index
防效
Efficacy
(%)
6%大蒜素水乳剂
Alicin6%EW
66.7 0.93 9.93 56.93dD 14.36 51.00dD 21.22 44.79cC
100.0 0.85 6.32 70.01cC 8.74 67.38cC 13.29 62.17bB
200.0 0.74 4.58 75.03bB 6.43 72.42bB 10.50 65.67bB
600.0 0.88 3.77 82.85aA 5.57 79.91aA 9.24 74.59aA
1200.0 0.92 3.22 85.88aA 4.82 83.37aA 8.36 78.01aA
50%多菌灵可湿性粉剂
Carbendazim50% WP
1000.0 0.85 3.62 82.82aA 5.57 79.21aA 8.05 77.09aA
CK 0.84 20.82 26.47 34.72
3 结论与讨论
通过室内抑菌活性测定表明,大蒜素可有效抑制辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌菌丝生长、孢子产生和孢子萌
发,其EC50值均在142.60μg/mL以下,EC90值均在1159.66μg/mL以下;通过田间试验表明,6%大蒜素水乳剂
对辣椒炭疽病和辣椒疫病具有较好的防治效果,600~1200μg/mL处理第3次药后3d防效均在82.85%以上,
第3次药后14d防效均在74.59%以上。因此,6%大蒜素水乳剂具有在辣椒炭疽病和辣椒疫病防治上推广应用
的价值。用6%大蒜素水乳剂防治辣椒炭疽病和辣椒疫病的推荐使用剂量为600~1200μg/mL,建议在辣椒苗
期和挂果期连续喷施3次,每隔10d喷施1次。
662 ACTAPRATACULTURAESINICA(2014) Vol.23,No.3
辣椒炭疽病菌和辣椒疫病菌侵入植物体内的一般过程是分生孢子(疫病为卵孢子)通过风雨等传播落在辣椒
植株表面,在潮湿条件下萌发形成芽管和附着孢子侵入寄主组织,然后扩展形成菌丝发病[24]。本试验通过室内
研究发现,大蒜素对辣椒炭疽病菌和疫病菌菌丝生长、孢子产生和孢子萌发有抑制作用;田间试验结果表明,大蒜
素对辣椒炭疽病和疫病有较好的防治效果,并具有一定的持效期。这表明大蒜素对辣椒炭疽病菌和疫病菌的侵
入和扩展均可能产生不同程度的影响。杀菌剂对病原菌的作用机制有多种,如抑制真菌细胞壁形成和质膜生物
合成,抑制呼吸作用,抑制甾醇生物合成(SBI)及其合成过程中的脱甲基(DMI),增加线粒体膜和内质网膜上的脂
质过氧化反应等[25]。大蒜素的生物活性主要来源于它与含巯基化合物的相互作用和抗氧化能力,其抗菌的机理
可能是对乙酰辅酶A的抑制作用[2627]。有关大蒜素的抑菌抗病机制有待进一步研究。
大蒜素对植物病原菌的抑制活性存在差异。宋兴舜等[19]报道大蒜素原药33~100μg/mL对番茄早疫病菌
菌丝生长抑制率为28.70%~76.00%,72~143μg/mL对番茄叶霉病菌和番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制率分别
为34.12%~74.07%和51.77%~83.32%;蒋家珍等[18]报道5%大蒜素乳油对棉花立枯丝核菌、棉花串珠镰孢
菌和棉花尖镰孢萎蔫专化型真菌菌丝生长EC50值分别为19.40,7.10和20.60μg/mL。本实验发现大蒜素对辣
椒炭疽病菌和辣椒疫病菌EC50值分别为130.15和128.11μg/mL,EC90值分别为992.26和1159.66μg/mL,这
与前人报道的结果存在较大差异,其原因可能与供试的药剂来源和靶标种类不同有关。在新鲜大蒜中没有游离
的大蒜素,其前体为蒜氨酸和蒜酶,自然状况下独立稳定地存在于鳞茎中。当大蒜经加工或受到物理机械破碎
后,大蒜中被激活的蒜酶催化分解蒜氨酸,生成具有挥发性的大蒜素[28]。现代研究认为,大蒜素是具有生物活性
的亚砜和砜类化合物成分的总称,其主要成分为二烯丙基三硫醚、二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫酸、二烯丙基硫
代亚磺酸酯和甲基烯丙基三硫醚[28]。曾东方等[20]报道大蒜乙醇萃取物20000μg/mL对稻瘟病菌、小麦纹枯病
菌、油菜菌核病菌菌丝生长的抑制效果分别达到70.60%,83.60%和94.30%,张万萍和赵丽[29]报道大蒜水和乙
酸乙酯提取物对辣椒疫病菌菌丝生长的最低抑菌浓度为5000μg/mL,与本试验结果比较活性明显偏低,其原因
可能是大蒜提取物中活性成分含量偏低所致。
参考文献:
[1] 董金皋.植物病理学(北方本)[M].北京:中国农业出版社,2001:226231.
[2] 李红霞,刘照云,王建新.辣椒炭疽病菌对嘧菌酯的敏感性测定[J].植物病理学报,2005,35(1):7377.
[3] DaveyJF,GregoryNF,MulrooneyRP,犲狋犪犾.Firstreportofmefenoxamresistantisolatesof犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻fromli
mabeanpodsintheMidAtlanticRegion[J].PlantDisease,2008,92(4):656.
[4] KeinathAP.Sensitivityofpopulationsof犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻fromSouthCarolinatomefenoxam,dimethomorphoxamide
andcymoxanil[J].PlantDisease,2007,91(6):743748.
[5] 戚仁德,丁建成,高智谋.安徽省辣椒疫霉对甲霜灵的抗药性监测[J].植物保护学报,2008,35(3):245250.
[6] 吴传万,杜小凤,徐建明,等.植物源抑菌活性成分研究新进展[J].西北农业学报,2004,13(3):8188.
[7] 刘敏艳,胡冠芳,余海涛,等.绣球小冠花等35种植物提取物对粘虫的杀卵作用研究[J].草业学报,2012,21(4):198
205.
[8] 林述平,凌晓曦,邓召利,等.丁子香酚对辣椒疫霉菌的毒力测定[J].江西农业科学,2011,23(2):102103.
[9] 吴新安,花日茂,岳永德,等.几种中草药提取物对植物病原菌的抗菌活性研究[J].安徽农业大学学报,2002,29(4):330
332.
[10] 张新强,桑维钧,倪云跃,等.中草药提取物对辣椒炭疽病菌和番茄灰霉病原菌的抑制效果[J].贵州农业科学,2012,
40(4):100101.
[11] 林琳,高智谋,高同春,等.浓度95%小蘖碱对2种辣椒炭疽病的防治效果[J].安徽农业科学,2011,39(20):12190
12191.
[12] 冯俊涛,韩立荣,范瑞娟,等.枯茗酸对辣椒疫病菌生长发育的影响[J].中国农业科学,2012,45(13):26282635.
[13] 苗建强,王猛,李秀环.五种挥发性化合物对土传病原真菌及线虫的生物活性[J].植物保护学报,2012,39(6):561566.
[14] 高甜,柴惠,沃兴德.大蒜素的药理作用及其开发应用[J].医学研究杂志,2011,40(5):1215.
762第23卷第3期 草业学报2014年
[15] 高芸,冯彬,雷世鑫,等.大蒜提取物抑菌的体外实验及临床应用研究[J].长春中医药大学学报,2010,26(1):118120.
[16] ClovesAC,MelissaC,DavidM,犲狋犪犾.Antimalarialactivityofalicin,abiologicalyactivecompoundfromgarlic[J].Anti
micmbAgentsChemother,2006,50(5):1731.
[17] 孙惠敏,李保同,郭明程,等.几种杀菌剂对柑桔溃疡病的生物活性[J].江西农业大学学报,2011,33(1):3842.
[18] 蒋家珍,吴学民,陈宁,等.5%蒜精油水乳剂对三种棉花致病菌的毒力作用[J].河南农业科学,2004,(10):3739,66.
[19] 宋兴舜,宋凤杰,于广建.大蒜素对番茄三种真菌病害的影响[J].东北农业大学学报,2004,35(4):395398.
[20] 曾东方,陈玢,曾麟,等.大蒜素对三种农作物病原真菌的抑制作用[J].湖北农业科学,2011,50(11):22472249.
[21] 文克俭,罗天琼,张莉,等.6种杀菌剂对3种禾草病害的防治研究[J].草业学报,2013,22(3):124131.
[22] 毕江涛,马萍,杨志伟,等.药用植物柽柳内生真菌分离及其抑菌活性初步研究[J].草业学报,2013,22(3):132138.
[23] 农业部农药检定所生测室.农药田间药效试验准则(一)[S].北京:中国标准出版社,2000:132139.
[24] 徐雍皋,徐敬友.农业植物病理学[M].北京:江苏科学技术出版社,1996:266268.
[25] 刁春玲,刘芳,宋宝安,等.农用杀菌剂作用机理的研究进展[J].农药,2006,45(6):374377.
[26] TaliaM,AharonR.Themodeofactionofalicin:itsreadypermeabilitythroughphospho1ipidmembranesmaycontributeto
itsbiologicalactivity[J].BiochimicaetBiophysicaActa,2000,1463:2030.
[27] ManfredF,AndreaF,HartnutK.Alicin,anaturalyoccurringantibioticfromgarlic,specificalyinhibitsacetylCoAsyn
thetase[J].FEBSLetters,1990,261(1):106108.
[28] 王继强,龙强,李爱琴,等.大蒜素的作用机理和应用研究进展[J].中国饲料添加剂,2007,10(8):3336.
[29] 张万萍,赵丽.大蒜提取物和根系分泌物对3种土传性病原菌的抑菌效果[J].中国蔬菜,2012,31(2):6671.
犃狊狋狌犱狔狅狀犳狌狀犵犻犮犻犱犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔狅犳犪犾犻犮犻狀犪犵犪犻狀狊狋犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犮犪狆狊犻犮犻犪狀犱
犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻犻狀狋犺犲犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔犪狀犱犻狋狊犲犳犳犻犮犪犮狔犻狀狋犺犲犳犻犲犾犱
ZHOUQing,LIBaotong,TANGLimei
(ColegeofAgronomy,JiangxiAgriculturalUniversity,Nanchang330045,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Alicinisabotanicalantibioticextractedfromgarlic.Toexplorefungicidalactivityofalicinagainst
犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犮犪狆狊犻犮犻and犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻inthelaboratoryitsinhibitoryeffectsagainstmycelialgrowth
andconidialproductionwereassayedbymeasuringmycelialgrowthrateandconidialgermination.Itsefficacy
inthefieldwastestedbyfoliarspraying.Alicinshowedinhibitoryeffectsagainstmyceliagrowth,conidial
productionandgerminationofbothfungianditsactivityincreasedwithincreasedconcentrations.TheEC50was
130.15,142.60and127.21μg/mLagainstmycelialgrowth,conidialproductionandconidialgerminationre
spectivelyof犆.犮犪狆狊犻犮犻,and128.11,123.64and139.68μg/mLrespectivelyagainst犘.犮犪狆狊犻犮犻.Fieldtests
showedthattheefficaciesofalicin6%EW (emulsioninwater)at600andat1200μg/mLagainst犆.犮犪狆狊犻犮犻
were83.54%-88.25%respectivelyand82.85%-85.88%against犘.犮犪狆狊犻犮犻.Onthethirddayafterthethird
spraytheywere74.59%-79.16%and74.59%-78.01%respectivelybutatthefourteenthdayafterthethird
spray,theywerenotsignificantlydifferentfromthatofthecontrol[carbendazim50% WP(wettalbepowders)
at1000μg/mL].Theefficaciesofalicin6%EWat200-600μg/mLagainst犆.犮犪狆狊犻犮犻and犘.犮犪狆狊犻犮犻were
lessthan76%onthethirdtofourteenthdayafterthethirdspray,andweresignificantlylowerthanthatofthe
control.Therecommendeddosageofalicin6%EWagainst犆.犮犪狆狊犻犮犻and犘.犮犪狆狊犻犮犻is600-1200μg/mLon
pepperseedlingsandduringthefruitingperiod,sprayingwasdone3timesat10dintervals.
犓犲狔狑狅狉犱狊:alicin;犆狅犾犾犲狋狅狋狉犻犮犺狌犿犮犪狆狊犻犮犻;犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪犮犪狆狊犻犮犻;inhibition;efficacy
862 ACTAPRATACULTURAESINICA(2014) Vol.23,No.3