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Selection for Cd-hyperaccumulator Plant from 25 Lianas Species

藤本植物中具镉超积累特征植物的筛选



全 文 :林业科学研究 2016,29(4):515 520
ForestResearch
  文章编号:10011498(2016)04051506
藤本植物中具镉超积累特征植物的筛选
周杰良1,2,葛大兵1,李树战3,邓沛怡2,高 霞1,何丽波1,4
(1.湖南农业大学,湖南 长沙 410127;2.湖南生物机电职业技术学院,湖南 长沙 410127;
3.中南林业科技大学,湖南 长沙 410004;4.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江 杭州 311400)
收稿日期:20151222
基金项目:湖南省教育厅科学研究项目(10C0214);湖南省科技计划重点项目(2012FJ4565);湖南省科技计划项目(2012SK3177)
作者简介:周杰良(1972—),男,湖南隆回人,副教授,博士研究生,主要从事植物生态研究.
 通讯作者:何丽波(1982—),女,博士后,从事园林植物研究.Email:libohe1982@gmail.com
摘要:[目的]筛选出对重金属镉(Cd)具有强富集作用的植物,以修复被镉污染的土壤。[方法]以湖南常见的25种
藤本植物为参试样本,采用室内水培和室外盆栽相结合的方法,设置不同浓度的重金属镉溶液处理参试植株当年生
扦插苗,定量测定供试植物根部、茎部和叶片三部分的镉含量及生物量,分析参试植物对重金属镉的耐性和富集特
性。[结果]水培筛选试验表明:蔓长春花对Cd污染的耐性较强,转移系数和富集系数均大于1,具备了镉超富集植
物的基本特征。盆栽浓度梯度试验结果表明:当土壤中Cd投加浓度为25、50mgkg-1时,蔓长春花地上部分生物量
没有明显下降,且地上部分Cd含量均大于其根部,叶片中 Cd含量均大于 Cd超积累植物应达到的临界含量标准
(100mg· kg-1)。[结论]从25种参试植物中筛选出的蔓长春花具有重金属镉超富集植物的基本特征,是一种新
的镉超积累植物,建议在重金属镉污染土壤中进一步测试。
关键词:蔓长春花;重金属富集;镉;土壤污染
中图分类号:S7146 文献标识码:A
SelectionforCdhyperaccumulatorPlantfrom25LianasSpecies
ZHOUJieliang1,2,GEDabing1,LIShuzhan3,DENGPeiyi2,GAOXia1,HELibo1,4
(1.HunanAgriculturalUniversity,Changsha 410127,Hunan,China;2.HunanBiologicalandElectromagneticPolytechnic,
Changsha 410127,Hunan,China;3.CentralSouthUniversityofForestryandTechnology,Changsha 410004,Hunan,China;
4.ResearchInstituteofSubtropicalForestry,ChineseAcademyofForestry,Hangzhou 311400,Zhejiang,China)
Abstract:[Objective]Toselectthecadmium(Cd)hyperaccumulatorplantforremediatingthesoilpolutedby
Cd.[Method]25lianasspeciesweresampledinHunanProvince,China.Themethodofindoorhydroponicsand
outdoorpotexperimentweredesigned.TheCdcontentfromroot,stemandleafwereanalyzedbyquantitativeanaly
zing.[Result]TheresultsshowedthatVincamajorhadstrongertolerancetoCd,andboththeenrichmentcoefi
cientandtransfercoeficientwerehigherthan1andprovidedwiththebasiccharacteristicsofCdhyperaccumulator
plantinwatercultivation.Inpotexperiment,theabovegroundbiomasswasnotsignificantreducedandtheCdcon
tentwashigherthanundergroundwhentheconcentrationofCdinsoilwas25,50mg·kg-1,respectively,mean
while,thecumulantabilityreachedtothestandardof100mgkg-1inleaf.[Conclusion]V.majorisaspeciesfor
Cdhyperaccumulator,deeplyfurthertestshouldbecariedout.
Keywords:Vincamajor;heavymetalhyperaccumulator;Cd;soilpolution
随着现代工农业生产的发展,农药化肥施用量、
工业“三废”、城市垃圾产生量不断增加,导致土壤
中镉(Cd)含量增高[1]。镉不易被土壤微生物分解,
易被植物吸收积累,其污染为不可逆的累积过程,还
林 业 科 学 研 究 第29卷
通过食物链富集,危害人体健康。土壤重金属污染
使农产品的安全性受到严重威胁,我国受重金属污
染的农田土壤约2500万 hm2,导致每年粮食减产
500多万t,受污染粮食多达150万 t[2]。我国区域
农田土壤 Cd的富集最为严重[3],而采用传统的物
理和化学方法难以实施修复,目前普遍认为植物修
复技术最有希望,重金属富集植物的筛选是植物修
复技术的基础和关键[4]。目前已被确认的超积累植
物约400多种,但以镍(Ni)的超积累植物为主,占
70%左右,同时植物生长有一定的区域性,引种生态
后果很难预测[5],故筛选本土的超积累植物意义
重大。
近几年镉超积累植物的筛选工作主要集中在蕨
类、园林植物和杂草方面[6-8]。藤本植物是适应性
很强的植物类群,抗旱能力强,繁殖迅速,根系发达,
生长速度很快,地面覆盖率较好,固土力强,观赏价
值高,生物量可不进入食物链。藤本植物是一类较
理想的植物修复资源。我国藤本植物种类丰富,共
计有85科409属3073种(含变种、亚种),占中国
种子植物区系的 11.3%,湖南、湖北两省有 784
种[9],目前对藤本植物研究主要集中在种质资源的
调查和园林垂直绿化方面,很少有藤本植物对重金
属修复方面的报道。本研究以我国华中地区25种
常见的藤本植物为试材,分析其对重金属镉的耐性
和富集特征,为藤本植物在土壤重金属修复中的应
用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验场地的环境条件与供试植物
试验地点设在湖南省湖南生物机电职业技术学
院藤本研究所苗圃内,地理位置为113°5′E,28°11′
N,海拔高度约44.5m。该地是重金属未污染区,属
亚热带季风性湿润气候,年平均气温17.2℃,年积
温为5457℃,年均降水量1361.6mm,全年无霜期
平均275d,日照时数达1677h。
参试的25种藤本植物为:木鳖子(Momordicaco
chinchinensis(Lour.)Spreng.)、茅莓(Rubusparvifolius
L.)、清香藤(JasminumlanceolariumRoxb.)、白英
(SolanumlyratumThunb.)、络石(Trachelospermum
jasminoides(Lindl.)Lem.)、蔓长春花(Vincamajor
L.)、羊乳(Codonopsislanceolata(Sieb.etZucc.)
Trautv.)、杠板归(PolygonumperfoliatumL.)、单叶
铁线莲(ClematishenryiOliv.)、毛花猕猴桃(Actin
idiaerianthaBenth.)、五叶地锦(Parthenocisusquin
quefoliaPlanch.)、蛇葡萄 (Ampelopsisheterophyla
(Thunb.)Sieb.)、金 银 花 (Lonicera japonica
Thunb.)、薜荔(FicuspumilaLinn.)、地瓜榕(Ficus
tikouaBur.)、龙须藤(BauhiniachampioniBenth.)、
扶芳藤(Euonymusfortunei(Turcz.)Hand.Mazz.)、
常春藤(Hederanepalensisvar.sinensisRehd.)、茑萝
(Quamoclitpennata(Lam.)Bojer.)、凌霄(Campsis
grandiflora(Thunb.)K.Schum.)、菝葜(Smilaxchina
L.)、常春油麻藤(MucunasempervirensHemsl.)、风
龙(SinomeniumacutumRehd.)、三叶木通(Akebiatri
foliata(Thunb.)Koidz.)、毛鸡矢藤(Paederiascan
densvartomentosa(BL.)Hand.Mazz.)。
1.2 水培初步筛选试验
25个供试品种均采用当年生扦插苗,扦插基质
为珍珠岩,生根后,取生长基本一致的扦插苗,移至
2L玻璃瓶中,每瓶5株,外包裹黑色聚乙烯薄膜防
止营养液见光,营养液为霍格兰营养液。幼苗先在
营养液中培养2周,每隔2d更换1次营养液,营养
液pH值6.5,24h连续通气。环境控制:温度为光
照/黑暗25℃/20℃,相对湿度60% 70%,光照/黑
暗时间为14h/10h。幼苗在营养液生长2周后进
行加镉处理,镉源为 CdNO3,加镉水平为 10mg·
kg-1(T1),不加镉的营养液为对照(CK),每处理重
复3次,加镉培养14d后测定。
1.3 盆栽浓度梯度试验
水培初步筛选试验结果表明,蔓长春花是具有
Cd超积累特征的植物,由于水培环境跟土壤环境不
一致,镉胁迫的浓度较低(10mg·kg-1),水培筛选
的时间短(14d),需通过更高的镉浓度土培试验和
更长的镉胁迫生长期来检验蔓长春花对 Cd的积累
潜力,以进一步确认是否为Cd超积累植物。
试验地点湖南生物机电职业技术学院藤本研究
所苗圃内。盆栽所用土壤取自苗圃表土,盆栽土壤
基本理化性质为 pH值 6.65,有机质 16.75g·
kg-1,全N0.74g·kg-1,全P0.69g·kg-1,有效P
10.32mg·kg-1,速效 K89.06mg·kg-1,重金属元
素背景值分别为总Cd0.15mg·kg-1。共设了4个
处理,外源Cd投加浓度分别为:0mg·kg-1(CK)、
25mg·kg-1(T1)、50mg·kg-1(T2)、100mg·kg-1
(T3),投加的重金属形态为分析纯CdCl2·2.5H2O,
以固态加入盆土,充分混匀,平衡两周后待用。每一
塑料盆(¢=20cm,H=15cm)装入1.5kg处理土,
615
第4期 周杰良,等:藤本植物中具镉超积累特征植物的筛选
盆下有托盘,接下漏的水。
本试验于2014年5月15日开始,盆栽植物为
蔓长春花扦插苗,幼苗高度为12±2cm,来自该校藤
本研究所苗圃内,每盆5棵,3次重复,各重复间栽
入的苗数一致。遮雨栽培。根据盆缺水情况,不定
期浇自来水(水中未检出Cd),保持土壤含水量在田
间持水量的80%左右。蔓长春花于8月15日测定。
1.4 样品分析及数据统计
收获的植物分为根部、茎部、叶片三部分,用自
来水充分冲洗粘附于植物样品上的泥土和污物,然
后再用去离子水冲洗,沥去水分,在105℃下杀青30
min,70℃下于烘箱中烘至恒质量粉碎备用。土壤样
品风干后过100目筛备用,植物及土壤样品均采用
HNO3-HClO4法消化(体积比为3:1),原子吸收分
光光度计(日立 180-80)法测定其中的重金属含
量,重复3次。
采用 SPSS17软件进行方差(ANOVA)分析、多
重比较和聚类分析。
2 结果与分析
2.1 水培筛选试验中植物对镉的耐性与富集特征
2.1.1 对生物量的影响 从表1可以看出,对 Cd
污染耐性分为3大类:
一类为蔓长春花,地上部分生物量未下降,而有
增加,且差异显著,表现出对 Cd污染具有较强的耐
性。在这一浓度水平表现出对蔓长春花生长有某种
刺激作用,这与已报道的植物对重金属污染的响应
有相似之处[10-11]。
另一类为白英、羊乳、金银花、木鳖子、杠板归、
薜荔、凌霄、五叶地锦、风龙9种植物,地上部分生物
量与对照相比生物量下降,但差异不显著,表现较强
的耐性。
其它15种又为一类,对Cd污染耐性差,镉胁迫
显著降低植物的生物量,其中龙须藤生物量下降了
58%,耐性表现最弱。
表1 水培条件下不同藤本植物的生物量(干质量)
编号 参试材料
生物量/(g·盆 -1)
CK T1 p值
相对生物量
(T1/CK)
1 木鳖子 1.65±0.98 1.53+0.56 0.559 0.93
2 清香藤 4.52±1.12 3.58+1.08 0.039 0.79
3 白英 6.24±1.94 6.27±1.10 0.835 1.00
4 络石 7.64±1.19 5.47±1.07 0.000 0.72
5 蔓长春花 3.02±1.10 3.73±0.61 0.000 1.09
6 羊乳 2.71±0.04 2.83+0.21 0.594 1.04
7 杠板归 1.38±0.23 1.06+0.39 0.073 0.77
8 单叶铁线莲 5.19±1.03 4.27±1.02 0.000 0.82
9 毛花猕猴桃 8.46±1.73 5.39±1.81 0.000 0.64
10 五叶地锦 8.22±2.18 7.60±1.87 0.033 0.92
11 蛇葡萄 9.68±2.03 9.05±1.08 0.000 0.93
12 金银花 9.48±1.11 7.34±1.03 0.298 0.77
13 薜荔 6.09±1.12 5.67±1.10 0.054 0.93
14 地瓜榕 8.79±1.06 6.35±1.05 0.004 0.72
15 龙须藤 7.66±1.05 3.22±1.10 0.016 0.42
16 扶芳藤 15.22+4.05 10.80±3.96 0.000 0.71
17 常春藤 10.10+2.06 8.73±1.80 0.003 0.86
18 茑萝 17.84+2.12 14.60±3.09 0.000 0.82
19 凌霄 6.16+1.12 6.02±1.04 0.035 0.98
20 菝葜 13.2+3.05 7.96±1.93 0.000 0.60
21 常春油麻藤 13.32±2.04 10.18±1.44 0.000 0.76
22 风龙 17.62±3.14 16.35±3.27 0.012 0.93
23 三叶木通 18.69±2.15 10.68+2.08 0.000 0.57
24 毛鸡矢藤 33.67+9.06 30.34+7.93 0.000 0.90
25 茅莓 25.61±7.21 20.60±6.36 0.000 0.80
  注:表示差异极显著(P<0.01),表示差异显著(P<0.05)。
2.1.2 积累特性 从表2来看,不同种类植物对
Cd的积累反应差异大,地上部分及根部的镉含量范
围分别为 3.83 131.74mg·kg-1和 12.78
9138mg·kg-1。蔓长春花对Cd的积累能力最强,
715
林 业 科 学 研 究 第29卷
其地上部分和根部 Cd含量分别为131.74和62.49
mg·kg-1,显著高于营养液中 Cd的浓度(10mg·
kg-1),已达到100mg·kg-1临界浓度,且地上部分
Cd含量大于根部Cd含量,转移系数达2.11,表现出
较强的从根部向地上部分运输Cd的能力,具备了重
金属超积累植物应具有的基本特征。
风龙、常春油麻藤、茅莓对Cd的积累能力最弱,
其地上部分 Cd含量分别为6.89、6.29、3.83mg·
kg-1,都显著低于营养液中 Cd的浓度,且地上部分
Cd含量小于根部 Cd含量,转移系数分别为0.18、
0.44、0.30,表现出弱的从根部向地上部分运输 Cd
的能力,因而并不具有重金属超积累植物的基本特
征。其它21种植物地上部分对Cd有一定的积累能
力,但地上部分 Cd含量低于根部 Cd含量,转移系
数低于1,表现出从根部向地上部分转移 Cd的能力
较弱,故对Cd的提取能力有限。
表2 水培条件下不同藤本植物的镉含量
编号 参试材料
Cd含量/(mg·kg-1)
地上部分T1 根部T1
转移系数
1 木鳖子 59.08±9.81 71.84±10.17 0.82
2 清香藤 49.00±11.23 59.87±12.15 0.82
3 白英 8.92+2.03 13.22±4.09 0.67
4 络石 13.59±9.10 22.02±9+0.34 0.62
5 蔓长春花 131.74+20.66 62.49±9.68 2.11
6 羊乳 75.03±19.24 91.38±14.33 0.82
7 杠板归 37.30±5.04 43.28±3.02 0.86
8 单叶铁线莲 21.78±2.02 33.24±3.03 0.66
9 毛花猕猴桃 27.07±3.78 51.88±5.30 0.52
10 五叶地锦 18.84±2.20 28.28±2.29 0.67
11 蛇葡萄 44.20±8.12 83.10±7.55 0.53
12 金银花 42.86±3.43 48.11±4.02 0.89
13 薜荔 27.43±2.19 38.28±3.61 0.72
14 地瓜榕 19.10±1.52 21.65±1.06 0.88
15 龙须藤 48.84±11.52 56.66±9.17 0.86
16 扶芳藤 36.84±3.89 38.79±5.63 0.95
17 常春藤 28.08±7.88 32.24±8.92 0.87
18 茑萝 43.46±6.71 45.86±7.94 0.95
19 凌霄 27.39±3.54 48.79±2.94 0.56
20 菝葜 39.44±3.03 61.38±4.40 0.64
21 常春油麻藤 6.29±2.16 14.29±2.26 0.44
22 风龙 6.89±1.45 38.53±5.33 0.18
23 三叶木通 34.01±2.54 41.88±3.46 0.81
24 毛鸡矢藤 13.32±1.92 35.80±3.15 0.37
25 茅莓 3.83±2.23 12.78±3.05 0.30
2.1.3 对重金属耐性及积累能力聚类分析 通常
当土壤中重金属浓度超过临界浓度,植物的生长会
受到抑制,最终表现为生物量的显著降低[12]。用相
对生物量(T1/CK)作为耐性标准,相对生物量大的
是耐性较强植物。富集系数越大,其积累能力越强。
由于一般的植物地上部分生物量相对地下部分大,
而且收获容易,故植物地上部分富集系数越大,转移
系数越大,植物提取修复潜力越大,应用推广越
方便。
用实际生物量、相对生物量、地上部分富集系
数、转移系数 4个变量进行系统聚类分析,分为
4类:
第一类为超积累植物:蔓长春花相对生物量、地
上部分富集系数、转移系数均满足超积累植物的选
择标准,
第二类为具有修复潜力植物类:木鳖子、羊乳、
蛇葡萄,镉含量高,生物量下降小、转移系数接近1,
达0.8以上。
第三类为耐性较强,地上部分积累性差植物类:
毛鸡矢藤、茅莓、风龙。
第四类为耐性一般,积累性一般植物类:清香
藤、白英、络石、杠板归、单叶铁线莲、毛花猕猴桃、五
叶地锦、金银花、薜荔、地瓜榕、龙须藤、扶芳藤、常春
藤、茑萝、凌霄、菝葜、常春油麻藤、三叶木通。
815
第4期 周杰良,等:藤本植物中具镉超积累特征植物的筛选
图1 水培条件下基于重金属耐性及积累能力的聚类分析
2.2 浓度梯度试验对镉的耐性与富集特征
2.2.1 对Cd的耐性 由表3可知,随着镉胁迫的
增加,生物量逐渐降低,蔓长春花在 Cd投加浓度为
25、50mg·kg-1的处理中,与CK相比地上部分生物
量差异不显著,但当土壤中Cd浓度为100mg·kg-1
时,植物的生长会受到明显抑制,生物量下降
了6%。
蔓长春花根系生物量的变化类似地上部分。随
着镉胁迫的加剧,生物量也逐渐降低,生长受到影
响。与地上部分不同的是,根部生物量变化相对更
敏感,尽管蔓长春花在 Cd投加浓度为25mg·kg-1
的处理中,与对照相比根系生物量未下降,但在 Cd
投加浓度大于50mg·kg-1时,根部生物量均明显下
降,Cd投加浓度 100mg·kg-1时生物量下降了
30%,但与50mg·kg-1处理比较,根部生物量下降
无显著差异,可能蔓长春花根部将Cd转移到地上部
分的原因。
2.2.2 Cd的积累特性 由表4可知,随着镉胁迫
的增加,转移效率逐渐下降,但在各处理中蔓长春花
地上部分Cd含量均大于其根部Cd含量,转移系数
表3 不同处理水平下蔓长春花的生物量 g·盆 -1
处理 地上部分 根部
CK 3.3692aA 0.6498aA
T1 3.4042aA 0.6588aA
T2 3.3456aA 0.4689bB
T3 3.1797bB 0.4525bB
  注:表中不同小写字母代表不同Cd浓度处理下的显著性差异(p
<0.05);不同大写字母代表不同 Cd浓度处理下的极显著性差异(p
<0.01),表4同。
均大于1。在土壤中Cd投加浓度为50mg·kg-1和
100mg·kg-1时,其地上部分和根部Cd含量均大于
100mg·kg-1,地上部分Cd富集系数也均大于1,均
满足Cd超积累植物应具有的临界含量特征和富集
系数特征。同一处理水平,蔓长春花地上部分富集
系数均大于根部富集系数,随着 Cd投加浓度加大,
地上部分富集系数和根部富集系数逐渐减小,但富
集系数在Cd投加浓度为100mg·kg-1时仍均大于
1,说明此时蔓长春花对 Cd的积累可能还未趋近其
所能积累的最大临界含量。
3 讨论
近年来,我国发现了几种重金属超富集植物,如
915
林 业 科 学 研 究 第29卷
表4 不同镉浓度处理下蔓常春各器官中的镉含量
处理
Cd含量/(mg·kg-1)
根部 叶片 茎部
转移系数
地上部分
富集系数
根部富集
系数
CK 0.6178D 2.3692D 1.3109D 3.0 12.3 4.1
T1 92.9370C 144.6232C 104.6232C 1.3 5.0 3.7
T2 133.4440B 190.8200B 146.8200B 1.1 3.4 2.7
T3 164.8460A 225.9808A 187.9808A 1.0 2.1 1.6
As超富集植物蜈蚣草(PtertsvitataL.)[13];Zn超富
集植物东南景天(SedumalfrediH.)[14]、Cd超富集
植物 宝 山 堇 菜 (ViolabaoshanensisShu,Liuet
Lan)[15]、Mn超富集植物商陆(Phyrtolaccaacinosa
Roxb.)等[16],并开展了相关研究。但总的来看,植
物修复技术还不十分成熟,主要原因是超积累植物
生物量小,生长地域受到限制,导致修复效率不高,
进一步筛选超富集植物仍然是十分必要的。根据超
积累植物衡量标准,蔓长春花在土壤 Cd投入浓度
50mg·kg-1条件下,其地上部分镉含量达到190.82
mg·kg-1,超过100mg·kg-1临界含量标准。在生
物量积累方面,蔓长春花表现出对 Cd有较强的耐
性,富集系数最大为3.4,且地上部分镉吸收量高于
根部。总体上蔓长春花与已报道的镉超富集植物东
南景天、宝山堇菜、龙葵(SolanumnigrumL.)[17]、芦
蒿(ArtemisiaselengensisTurc.)[18]、苎麻(Boehmeria
nivea(L.)Gaudich.)[19]相比,在生物量上没有优
势,但蔓长春花作为藤本观赏植物,聚合观赏价值
高、根系发达、抗逆强、易繁殖和适应性强的优势,尤
其适于土壤破碎化的环境如废弃的矿山、重度石漠
化区域进行生态修复,是其它植物无法比拟的。蔓
长春花对重金属镉污染土壤的修复潜力大,建议进
行耐性机理机制和污染区修复试验的深入研究。
4 结论
水培筛选试验和盆栽浓度梯度试验结果表明,
参试的25种我国华中地区常见藤本植物中,蔓长春
花具备了超富集植物应具有的临界含量特征、转移
特征、耐性特征和富集系数特征,是一种新的镉超富
集植物。
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