全 文 ：第 wu卷 第 {期
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林 业 科 学
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湿地松成熟合子胚直接器官发生及植株再生 3
朱丽华 吴小芹
k南京林业大学森林资源与环境学院 南京 utssvzl
摘 要 } 以湿地松成熟胚为外植体诱导不定芽发生 o初步建立植株再生体系 ∀先用含不同浓度 yp…„的液体培养
基处理湿地松成熟胚 tu ∗ vy «o吸干后转移到无激素的培养基上培养 ∀y周后 o经 ys °ª#pt yp…„液体培养基预处
理 tu «的胚不定芽诱导率最高达 y| h o预处理 uw «平均每个外植体产芽数达到最高k| ∗ tu个l o但芽体较小 o在继
代培养基中伸长较慢 ~经 vs °ª#pt yp…„ 液体培养基预处理的胚不定芽诱导频率较低 o仅 ux h ∗ v{ h o但芽体健
壮 o在继代培养基中伸长较快 ~yp…„浓度大于 {s °ª#pt时不利于不定芽分化 ∀不定根诱导的研究结果表明 o‘„„
对不定芽生根具有促进作用 o在改良 tΠuŠ⁄n ‘„„s qsx °ª#pt培养基中培养 w周后 o生根率达 xs h o移栽成活率为
ys h左右 ∀
关键词 } 湿地松 ~成熟胚 ~不定芽 ~植株再生
中图分类号 }≥zuu1vn z ~±|wv1t 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kussyls{ p ssux p sx
收稿日期 }ussw p sw p tx ∀
3 吴小芹为通讯作者 ∀
Πλαντλετ Ρεγενερατιον ϖια Οργανογενεσισφροµ Ματυρε Εµ βρψοσ οφ Πινυσελλιοττιι
«∏¬«∏¤ • ∏÷¬¤²´¬±
k Χολλεγε οφ Φορεστ Ρεσουρχεσ ανδ Ενϖιρονµεντo Νανϕινγ Φορεστρψ Υνιϖερσιτψ Νανϕινγ utssvzl
Αβστραχτ} „ ³¯¤±·¯¨·µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²± ³µ²·²¦²¯ º¤¶§¨√¨ ²¯³¨ §©²µ Πινυσ ελλιοττιι q „§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§©²µ°¤·¬²± º¤¶²¥·¤¬±¨ §©µ²°
°¤·∏µ¨ °¨¥µ¼²¶²© Πq ελλιοττιι ¥¼ ¤ ¶²¤®¬±ªp·µ¨¤·°¨ ±·º¬·« ¬¯´∏¬§ °¨ §¬∏° ¦²±·¤¬±¬±ª yp¥¨±½¼¯¤§¨±¬±¨ kyp…„l ¤·§¬©©¨µ¨±·
¦²±¦¨±·µ¤·¬²±©²µtu ouw ¤±§vy «µ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ o©²¯ ²¯º¨ §¥¼ ¦∏¯·∏µ¨ ²± tΠu °²§¬©¬¨§Šµ¨¶¶«²©©¤±§⁄²¼ °¨ §¬∏° kŠ⁄l º¬·«²∏·
«²µ°²±¨ q׫¨ «¬ª«¨¶·§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±©µ¨ ∏´¨±¦¼¤±§·«¨ ¤¯µª¨¶·±∏°¥¨µ²©¤§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§¶º¨ µ¨ ²¥·¤¬±¨ §¬±·«¨ ³µ¨·µ¨¤·°¨ ±·º¬·«
ys °ª#pt yp…„ ©²µtu «ouw «µ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ q • ¨¯¤·¬√¨ ¼¯ «¬ª«©µ¨ ∏´¨±¦¬¨¶²© ¤¯µª¨ ¥∏§¶º¨ µ¨ ²¥·¤¬±¨ §¤©·¨µ¤³µ¨·µ¨¤·°¨ ±·º¬·«
vs °ª#pt yp…„ ©²µuw «q ’± ¶∏¥¦∏¯·∏µ¨ °¨ §¬∏°o¤§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§¶§¨µ¬√¨ §©µ²° ¤ ³µ¨·µ¨¤·°¨ ±·º¬·«ys °ª#pt yp…„
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{s °ª#pt º²∏¯§¬±«¬¥¬··«¨ ©²µ°¤·¬²± ²© ¤§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§¶q •²²·¶ º¨ µ¨ ©²µ°¨ § º«¨ ± ¬¨¦¬¶¨§¶«²²·¶ ³¯¤±·¨§ ²± tΠu Š⁄
¶∏³³¯ °¨¨ ±·¨§º¬·«±¤³«·«¤¯ ±¨¨ ¤¦¨·¬¦¤¦¬§k‘„„l s1sx °ª#pt ©²µw º¨ ®¨¶o¤±§·«¨ µ²²·¬±ªµ¤·¨ º¤¶xs h q׫¨ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨
º¤¶ys h º«¨ ±·«¨ µ²²·¬±ª¶«²²·¶º¨ µ¨ °²√¨ §·²·«¨ ªµ¨ ±¨«²∏¶¨ q
Κεψ ωορδσ} Πινυσελλιοττιι ~°¤·∏µ¨ °¨¥µ¼²~¤§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§~³¯¤±·¯¨·µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²±
湿地松k Πινυσ ελλιοττιιl抗松针褐斑病育种研究已 us余年 o所建立的抗病种子园已进入结实阶段 o但种子
产量有限 o在生产实践上迫切需要一条简便 !快捷的技术体系来加快现有抗病材料的大量繁殖 ∀植物组织培
养技术是快速繁殖木本植物 o尤其是繁殖优良树种的理想途径 o同时也是通过遗传操作获得转基因植物 o从
而改良树种的前提条件k王明庥 ousst ~黄健秋等 ot||xl ∀开展抗病湿地松组织培养技术的研究 o将有利于加
速抗病良种的推广进程 ∀
植物组织培养植株再生最常见的途径是直接器官发生和体细胞胚胎发生 ∀过去近 us年里 o松属树种体
细胞胚胎发生研究取得了很大进展k…¨ ¦º¤µετ αλqot||s ~黄健秋等 ot||x ~°¨ µ¦¼ ετ αλqousssl o但其应用却受
体胚成熟与转化等问题的限制k°∏¯¯ °¤± ετ αλqoussv ~≥·¤¶²¯ ¤¯ ετ αλqoussvl ∀器官发生是松属树种植株再生的
另一条途径 o通过采用各种不同的外植体 o有许多松属树种已可以器官发生途径进行繁殖kŠ²±½½¤¯ ½¨ ετ αλqo
t||{ ~°¤µ¤¶«¤µ¤°¬ετ αλqoussv ~פ±ª ετ αλqoussxl ∀随着松属树种组培生产技术的发展 o用组培再生植株进行
人工造林正逐步成为现实 o如美国 !新西兰 !加拿大等国已分别将火炬松k Πινυσταεδαl !辐射松k Πqραδιαταl和
海岸松k Πq πιναστερl的组培繁殖苗较大规模地应用于造林k沈惠娟 ot||u ~‘¤¬µ±ot||v ~马常耕 ot||w ~‹¤±§¯ ¼¨
ετ αλqot||x ~ ±¨½¬¨¶ ετ αλqousstl ∀自从 ≥²°°¨ µ等kt|zwl首次报道以湿地松子叶为外植体获得不定芽以来 o
国内外学者对其组织培养进行了较为深入的研究 ∀目前以成熟胚k…µ²º± ετ αλqot|zz ~°¨ µ¨½2…¨ µ°∏§¨½ ετ αλqo
t|{z ~阙国宁等 ot||zl !子叶k…µ²±¶²± ετ αλqot||tl !实生苗k…∏µ±¶ ετ αλqot||t ~朱丽华等 ousswl为外植体均已
获得完整再生植株 o未成熟胚体细胞胚胎发生也已成为现实k‘¨º·²±ot||x ~唐巍等 ot||zl ∀然而 o至今为止尚
没有可用于大规模林业生产的湿地松微繁体系的报道 ∀本研究采用含高浓度 yp…„的液体培养基对湿地松
胚外植体进行预处理 o然后转移至固体培养基上促进不定芽发生 o初步建立了湿地松组织培养植株再生
体系 ∀
t 材料和方法
111 供试湿地松种子及处理
试验用的湿地松成熟种子购于福建顺昌 ∀经 w ε 低温处理 v ∗ w周后取出 o用 s1t h高锰酸钾溶液浸泡
tu «o流水冲洗 t «o冲洗完毕 o在无菌条件下剥除种壳 o经 zs h乙醇表面消毒 vs ¶后置于 s1t h升汞浸泡
u ∗ v °¬±o用无菌水冲洗 w ∗ x次后 o将胚取出备用 ∀
112 不定芽的诱导
用含不同浓度 yp…„ ks !vs !ys !{s !tss !txs °ª#ptl的液体培养基浸泡处理湿地松离体胚k时间设 tu !uw !
vy «v个水平l o然后用灭菌滤纸吸干其表面水分 o转入无激素 Š⁄!tΠuŠ⁄固体培养基上培养 ∀每个处理含
vs个胚 oy周后统计有不定芽分化的外植体数 o计算诱导率k有不定芽分化的外植体数Π接种数l ∀
113 不定芽的伸长与生根
将有不定芽分化的胚转入添加低浓度激素的伸长培养基中 o待不定芽长至 s1x ∗ t1s ¦° o将其切割成单
个芽 o接种在添加 ‘„„ks1sx °ª#ptl的 tΠuŠ⁄生根培养基上进行不定根的诱导 ∀
以上培养基中除生根培养基中蔗糖浓度为 us ª#pt外 o其余均添加蔗糖 vs ª#pt !水解酪蛋白k≤‹l
xss °ª#pt !谷氨酰胺kŠ¯ ±lwxs °ª#pt !琼脂 y ª#ptk液体培养基不加l o³‹ x1{ otut ε !s1tsx °¤高温高压
灭菌 t{ °¬±∀全部培养过程均在 ⁄ƒp˜×‘光照培养箱中完成 o温度 kuv ? tl ε o光照强度 u sss ¬¯o每日光照
ty «∀
u 结果与分析
211 6−ΒΑ浓度及基本培养基使用浓度对湿地松胚不定芽分化的影响
表 1 6−ΒΑ浓度及培养基使用浓度对湿地松不定芽分化的影响
Ταβ .1 Εφφεχτ οφ χονχεντρατιον οφ 6−ΒΑ ανδ βασαλ µεδιυµ ον
αδϖεντιτιουσ βυδ διφφερεντιατιον οφ Π1 ελλιοττιι
培养基浓度
≤²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© °¨ §¬∏°
yp…„Π
k°ª#ptl
外植体死亡率
²µ·¤¯¬·¼µ¤·¨ ²© ¬¨³¯¤±·r h
分化率
⁄¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±µ¤·¨r h
Š⁄ vs s vs1s
Š⁄ ys s v{1v
Š⁄ tss xv1{ z1z
tΠuŠ⁄ vs s vv1v
tΠuŠ⁄ ys s yu1t
tΠuŠ⁄ tss xv1t t{1{
用含不同浓度 yp…„ 的液体
培养基浸泡湿地松种胚 uw «o然
后转移到无激素改良 Š⁄或浓度
稀释 t倍的 tΠuŠ⁄固体培养基上
培 养 ∀ v ∗ w § 后 o经 vs !
ys °ª#pt yp…„ 处理的胚 tss h
转绿 o子叶微微张开 ous ∗ uy §后
部分胚外植体的子叶 !子叶基部 !
胚轴等部位产生不定芽k图 t¤l ∀
经 tss !txs °ª#pt yp…„ 处理的
胚只有部分转绿 ots §后 o经 txs °ª#ptyp…„处理的胚大部分已褐变死亡 o故未列入统计 ∀试验结果表明 o
基本培养基使用浓度对湿地松胚外植体不定芽的分化亦有一定影响 }经同一浓度 yp…„处理的外植体 o转入
tΠuŠ⁄培养基中其不定芽分化率均高于转入 Š⁄培养基中的外植体k表 tl ∀
212 6−ΒΑ浓度及浸泡处理时间对湿地松不定芽诱导的影响
将湿地松离体胚用含不同浓度 yp…„的液体培养基浸泡处理后 o转移到无激素的 tΠuŠ⁄培养基中培养 ∀
y周后统计结果k表 ul表明 o不定芽诱导不仅受 yp…„浓度的影响 o同时受处理时间的影响 ∀经无激素液体培
养基浸泡处理的湿地松种胚仅伸长长成无菌苗 o未能诱导出不定芽 ~当液体培养基中 yp…„浓度为 vs °ª#pt
时 o随着浸泡时间的延长 o不定芽诱导率有所上升 o但诱导率最高不超过 ws h ~浓度为 ys °ª#pt的 yp…„液
体培养基浸泡处理 tu «后 o湿地松成熟胚不定芽诱导率达到最高 o但随着浸泡时间的延长 o不定芽诱导率逐
yu 林 业 科 学 wu卷
渐下降 ~当液体培养基中 yp…„浓度为 {s ∗ tss °ª#pt时 o随着浸泡时间的延长 o不定芽诱导率急剧下降 o褐
变死亡率亦随浸泡时间的延长而上升 ~当液体培养基中 yp…„浓度达到 txs °ª#pt时 o对湿地松成熟胚造成
严重的毒害作用 o外植体全部褐变死亡 ∀
表 2 不同 6−ΒΑ浓度及浸泡处理时间对湿地松胚
不定芽诱导率的影响
Ταβ .2 Ινφλυενχε οφ 6−ΒΑ χονχεντρατιον ανδ σοακινγ τιµε
ον ινδυχτιον φρεθυενχψ οφ αδϖεντιτιουσ βυδσ
yp…„Π
k°ª#ptl
不定芽诱导率
Œ±§∏¦·¬²±©µ¨ ∏´¨ ±¦¼ ²©¤§√ ±¨·¬·¬²∏¶¥∏§¶Πh
tu « uw « vy «
s s s s
vs ux1s vv1v v{1t
ys y|1s yu1t vv1v
{s xt1w vu1| tw1v
tss ws1s t{1{ tu1s
txs s s s
研究发现 o胚外植体不定芽的数量 !大小及发
生部位与液体培养基中 yp…„浓度有很大关系 }经
vs °ª#ptyp…„浸泡处理的胚能诱导产生较健壮
的芽 o但该处理浓度下每个外植体平均分化芽的
数量较少 o发生部位为胚轴 !子叶 !子叶基部 o以子
叶基部腋芽萌发为主 ~在含 ys °ª#ptyp…„ 的液
体培养基中浸泡 uw «能得到数量最多的芽 o但芽
体比较小 ot ∗ u °°的芽所占比例达 {s h o大于 x
°°的芽仅占 x h左右 o在胚轴 !子叶 !子叶基部均
有芽发生 o以胚轴产生不定芽为主 o子叶基部腋芽
萌发占少数 ~经 {s ∗ tss °ª#pt的 yp…„浸泡处理
过的胚 o绝大部分在胚轴 !子叶产生大量绿色结节并且玻璃化 o极少分化产生有效芽k表 vl ∀因此 oyp…„浸泡
处理浓度以 vs ∗ ys °ª#pt为宜 o时间宜控制在 tu ∗ uw «∀
表 3 6−ΒΑ浸泡处理浓度及时间对湿地松不定芽大小的影响
Ταβ .3 Εφφεχτ οφ 6−ΒΑ χονχεντρατιον ανδ σοακινγ τιµε ον αδϖεντιτιουσ βυδ σιζε
yp…„Π
k°ª#ptl
浸泡处理时间
≥²¤®¬±ª·¬°¨ Π«
 t °°的芽
 t °° ¥∏§¶Πh
t ∗ u °°的芽
t ∗ u °° ¥∏§¶Πh
 x °°的芽
 x °° ¥∏§¶Πh
平均芽数
„√¨ µ1 ±∏°¥¨µ²©¥∏§¶
tu tx xx vs v ∗ x
vs uw tx xs vx w ∗ y
vy ts ys vs w ∗ y
tu ts |s s { ∗ ts
ys uw tx {s x | ∗ tu
vy zs vs s u ∗ v
tu zx ux s t ∗ u
{s uw |s ts s s
vy tss s s s
tu {s us s t ∗ u
tss uw |s ts s s
vy tss s s s
213 湿地松不定芽的
伸长与增殖
经处理的离体胚在
无激素 tΠu改良 Š⁄培
养基上培养 t个月后 o
分化出大量不定芽 ∀已
分化的芽继续继代在
tΠuŠ⁄上 o其生长正常但
伸长比较缓慢 ~继代在
添加 Š„v 的 tΠuŠ⁄培
养基中 o则外植体逐渐
变黄 o培养一段时间后 o
一半以上的外植体死
亡 ~tΠuŠ⁄培养基中加入微量‘„„ks1sx °ª#ptl或同时加入 ‘„„ ks1sx °ª#ptl与细胞分裂素kŽ× 或 yp…„
s1t °ª#ptl o比较有利于不定芽的伸长 ∀经伸长培养后 o已分化的不定芽可以分为 v类 }„类不定芽针叶正
常 o颜色嫩绿 o表面具有蜡质层 o具有明显可辨的茎段 o长势旺盛k图 t¥l ~…类不定芽针叶湿润 o粘成一束 o表
面无蜡质层 o茎段不明显 o长势较弱 ~≤类不定芽比较小 o甚至只是些类似芽的结构 o在继代培养中无法长成
可切割的有效芽 ∀其中 „类不定芽数量最多 o少数为 ≤ 类 o…类不定芽数量极少 ∀经过 u次继代后 o每个胚
平均可获得 „类不定芽 { ∗ ts个 ∀
待芽长到 t1s ∗ t1x ¦°高时 o将其单个切下 o继代到含 yp…„的新鲜培养基上进行增殖 ∀t个月后部分不
定芽基部或叶腋有 u ∗ v个新芽产生 ∀总的来说 o不定芽的增殖较困难 ∀这是下一步工作亟待解决的问题 ∀
214 再生植株的形成
将高 t1s ∗ t1x ¦°的不定芽切割成单个 o转入附加 ‘„„s1sx °ª#pt的 tΠuŠ⁄的生根培养基中诱导不定
根发生 ot个月后生根率为 xs h kwsΠ{sl ∀所形成的不定根大多为单根 o比较粗壮 o较少有侧根发生 o颜色为
黄白色 o根茎连接处基本无愈伤组织k图 t¦l ∀试验结果表明 o不定根的形成还与芽的生理状态有关 o生长健
壮的芽较利于根的发生 o且根伸长较快 ~细弱的不定芽生根能力较差 o根形成后生长亦较慢 ∀
不定根形成后将其转移至无生长素的培养基上进行伸长生长 ot个月后选择健壮的再生植株进行移栽 ∀
移栽前逐渐打开瓶盖炼苗 x ∗ z §o然后将小苗取出后 o用水洗去根部残留的琼脂培养基 o移栽于装有蛭石与
泥碳土等比例混合的基质的容器内 ∀u个月后移栽成活率为 ys h左右k图 t§l ∀
zu 第 {期 朱丽华等 }湿地松成熟合子胚直接器官发生及植株再生
图 t 湿地松植株再生过程
ƒ¬ªqt ∂¤µ¬²∏¶¶·¤ª¨¶²©³¯¤±·¯¨·µ¨ª¨ ±¨ µ¤·¬²±¬± Πq ελλιοττιι
¤q不定芽的形成 ~¥q不定芽的伸长 ~¦q不定根的形成 ~§q移栽至温室里的再生植株 ∀
¤q„§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§¶©²µ°¨ §©µ²° °¤·∏µ¨ ½¼ª²·¬¦ °¨¥µ¼²¶~¥q„§√¨ ±·¬·¬²∏¶¥∏§¶ ±¨¯²±ª¤·¨§²±
tΠuŠ⁄ ° §¨¬∏° ¦²±·¤¬±¬±ªs1sx °ª#pt‘„„ ~¦q •²²·º¤¶©²µ°¨ §²±·«¨ ¶·¨° ¥¤¶¨ t °²±·«
¤©·¨µ·µ¤±¶©¨µ·²tΠuŠ⁄ ° §¨¬∏° º¬·«s1sx °ª#pt‘„„ ~§q • ª¨¨ ±¨ µ¤·¨§³¯¤±·¯¨·¶¬± ªµ¨ ±¨«²∏¶¨ q
v 结论与讨论
本试验之所以采用含激素的
液体培养基对外植体进行预处
理 o是考虑到在液体培养基中外
植体与激素的接触更广泛 o因而
吸收可能会更充分 ∀李正理等
k t|yu l 研 究 红 松 k Πινυσ
κοραιενσισl后胚离体培养的结果
表明 o胚在萌发初期对营养的吸
收是由子叶进行的 o而在固体培
养基上只有少数子叶接触到培养
基 ∀杜勒等kt||yl的研究表明 o
液体培养基或者液体 !固体混合
培养基更有利于外植体吸收培养
基中的营养物质及激素 ∀
试验结果表明 o采用含高浓
度 yp…„的液体培养基对湿地松
成熟合子胚进行预处理 o然后转
入无激素的培养基上培养 o的确
比较容易诱导产生不定芽 ∀不定
芽诱导受 yp…„浓度 !处理时间的
影响较大 }经不含 yp…„液体培养基处理的胚没有不定芽产生 ~在一定范围内 o随着液体培养基中 yp…„浓度
的增高 o不定芽诱导率 !平均芽数均增高 ∀较低浓度kvs °ª#ptl的 yp…„处理诱导产生出较茁壮的芽 ~中等
浓度kys °ª#ptl的 yp…„处理能诱导产生最大数量的芽 o但芽体较小 ~yp…„浓度过高k  {s °ª#ptl不仅影
响不定芽的诱导 o甚至对供试的胚产生严重的毒害作用 ∀ …µ²±¶²±等kt||tl在湿地松离体子叶不定芽植株再
生研究中也发现不定芽的大小以及数量与 yp…„处理时间有关 ∀而 ∂²± „µ±²¯§等kt|{tl的研究认为 o产生不
定芽的胚的比例与细胞分裂素浓度无关 o但在一个外植体上形成芽的数量随着细胞分裂素浓度的提高而增
加 o其间的差异可能与所研究的松属树种不同有关 ∀此外 oyp…„浓度的高低还影响不定芽发生的部位 ∀经
vs °ª#pt yp…„处理的胚 o以子叶基部腋芽萌发为主 o在子叶 !胚轴处仅有少量不定芽发生 ~yp…„浓度达到
ys °ª#pt时在整个胚的任何部位均可产生不定芽 ∀何子灿等kt||xl的研究也表明 o金钱松k Πσευδολαριξ
αµαβιλισl胚外植体表面不定芽发生的部位与 yp…„浓度有关 o∂²± „µ±²¯§等kt|{tl在小干松k Πινυσ χοντορταl胚
不定芽研究中也有类似报道 ∀
大量研究表明 o基本培养基的成分及使用浓度对松属树种的器官分化有较大的影响 ∀ …µ²±¶²±等kt||tl
对湿地松离体子叶不定芽发生的研究表明 o…和改良 Š⁄t培养基均能诱导产生大量不定芽 o而 • • 培养基
则不利于子叶分化不定芽 ∀ ∂²± „µ±²¯§等kt|{tl在研究中发现 o将 °培养基浓度扩大 u倍或以上时 o胚存活
率极低 ~将培养基浓度稀释 tΠu ∗ tΠw则有利于不定芽的分化 ∀ ƒ∏®∏§¤等kt|{|l在黑松k Πινυστηυνβεργιιl种胚
外植体不定芽分化研究中发现 o随着培养基浓度从 tΠwŠ⁄!tΠuŠ⁄到 uΠvŠ⁄o不定芽分化率增加 o在 uΠvŠ⁄培
养基中分化率最高 o达 |x h ~在 Š⁄培养基中诱导率只有 yt h ∀本试验中 o改良 Š⁄浓度稀释 t倍k即改良
tΠuŠ⁄l更有利于湿地松胚不定芽分化 ∀
本试验仅仅在湿地松胚不定芽诱导及植株再生方面做了一些探索 o所建立的再生体系与大规模工厂化
生产还有很长一段距离 ∀今后的工作中一方面需要加强对不定芽扩大增殖的研究 o另一方面应继续优化不
定芽生根的培养基 o从而提高生根率及根系的质量 o增强再生植株的适应性 o提高移栽成活率等 ∀这些问题
的突破无疑将使工厂化生产抗病湿地松成为可能 ∀
{u 林 业 科 学 wu卷
参 考 文 献
杜 勒 o竺莉红 o梁海曼 qt||y1 无外源激素条件下液体和固体培养基对黄瓜子叶培养器官分化不同影响 q生物技术 oyktl }tz p t|
何子灿 o柯善强 qt||x1 外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用 q武汉植物学研究 otvktl }{t p {y
黄健秋 o卫志明 o许智宏 qt||x q马尾松成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生 q科学通报 owsktl }zv p zx
李正理 o张新英 qt|yu q红松后胚离体培养的研究 ´ }不同培养方式下幼苗生长的比较观察 q植物学报 otskul }tsv p ttu
马常耕 qt||w q世界松类无性系林业发展策略和现状 q世界林业研究 okul }tt p t{
阙国宁 o房建军 o葛万川 o等 qt||z q火炬松 !湿地松 !晚松组培繁殖的研究 q林业科学研究 otskvl }uuz p uvu
沈惠娟 qt||u q木本植物组织培养技术 q北京 }中国农业科技出版社 ou{ p xz
唐 巍 o欧阳藩 o郭仲琛 qt||z q湿地松体细胞胚胎发生和植株再生 q植物资源与环境 oykul }{ p tt
王明庥 qusst q林木遗传育种学 q北京 }中国林业出版社 ouz{ p u{y
朱丽华 o张 艺 o吴小芹 qussw q湿地松的组织培养及植株再生 q南京林业大学学报 }自然科学版 ou{kyl }wz p xt
…¨ ¦º¤µ • o‘¤ª°¤±¬• o• ¤±± ≥ • qt||s qŒ±¬·¬¤·¬²± ²© °¨¥µ¼²ª¨ ±¬¦¦∏¯·∏µ¨¶¤±§¶²°¤·¬¦ °¨¥µ¼² §¨ √¨ ²¯³°¨ ±·¬± ²¯¥¯²¯ ¼¯ ³¬±¨ q≤¤±ƒ²µ• ¶¨ous }{ts p {tz
…µ²º± ≤ o≥²°° µ¨‹ ∞qt|zz q…∏§¤±§µ²²·§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±¬± ¦²±¬©¨µ¦∏¯·∏µ¨¶qפ³³¬oyskyl }zu p zv
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k责任编辑 徐 红l
|u 第 {期 朱丽华等 }湿地松成熟合子胚直接器官发生及植株再生