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Proteins Extraction from Larva of Dendrolimus punctatus and Its Nutrition and Safety Evaluation

马尾松毛虫幼虫蛋白质的提取及产品营养和安全评价*


采用缓冲液法对马尾松毛虫幼虫中的蛋白质进行提取研究。结果表明:原料粗细度、提取温度、提取时间和沉淀pH对幼虫蛋白质的提取率有显著影响(P<0.05),而料液比、蛋白质的沉淀温度和沉淀时间对提取率无显著影响。试验确定的最佳条件为:缓冲液为Na2HPO4NaOH(pH为9.5); 料液比为1∶15(m/v); 原料粗细度为40目虫粉; 抽提时间为5 h,抽提温度为40 ℃; 沉淀pH为5.0,沉淀温度为5 ℃,沉淀时间为1 h。 在此条件下,所得蛋白产品的粗蛋白含量为(71.12±0.16)%,总氮提取率为(60.36±1.25)%。蛋白产品中氨基酸总量69.58%, 必须氨基酸占氨酸总量的45.16%。安全评价结果表明:该蛋白产品的LD 50在12 050mg·kg-1 以上,属实际无毒范围。

Proteins extraction from the larva of Dendrolimus punctatus with a buffer solution method was studied. The results revealed that granularity of materials, extraction temperature, extraction time and precipitation pH showed significant effects on the extraction rate of the proteins(P<0.05), while relative amount of materials and extraction solvent, precipitation temperature, and precipitation time had no significant effects. The optimal conditions were as follows. The buffer solution was Na2HPO4 NaOH(pH 9.5), materials need to be fine powder (40 mesh), the ratio of materials to extraction solvent was 1∶15 (m/v), extraction time was 5 h, extraction temperature was 40 ℃, precipitation pH was 5.0, precipitation temperature was 5 ℃, precipitation time was 1 h. The protein content of the product obtained at the optimal condition was (7112±0.16)%, and the extraction rate was (60.36±1.25)% total mitrogen. The total amino acids content was 69.58% in the extract, of which the essential amino acids content was 45.16%. LD 50 of the protein product is was more than 12 050 mg·kg-1, suggesting the product was actually no poisonous.


全 文 :第 ww卷 第 |期
u s s {年 | 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1ww o‘²1|
≥ ³¨qou s s {
马尾松毛虫幼虫蛋白质的提取
及产品营养和安全评价 3
刘高强 魏美才
sk中南林业科技大学生命科学与技术学院 长沙 wtssswl
摘 要 } 采用缓冲液法对马尾松毛虫幼虫中的蛋白质进行提取研究 ∀结果表明 }原料粗细度 !提取温度 !提取时
间和沉淀 ³‹对幼虫蛋白质的提取率有显著影响k Π s1sxl o而料液比 !蛋白质的沉淀温度和沉淀时间对提取率无
显著影响 ∀试验确定的最佳条件为 }缓冲液为 ‘¤u ‹°’w2‘¤’‹k³‹为 |1xl ~料液比为 tΒtxk µΠϖl ~原料粗细度为 ws
目虫粉 ~抽提时间为 x «o抽提温度为 ws ε ~沉淀 ³‹为 x1s o沉淀温度为 x ε o沉淀时间为 t «∀在此条件下 o所得蛋
白产品的粗蛋白含量为kzt1tu ? s1tyl h o总氮提取率为kys1vy ? t1uxl h ∀蛋白产品中氨基酸总量为 y|1x{ h o必
须氨基酸占氨酸总量的 wx1ty h ∀安全评价结果表明 }该蛋白产品的 ⁄xs在 tu sxs °ª#®ªpt以上 o属实际无毒范围 ∀
关键词 } 昆虫资源 ~害虫 ~马尾松毛虫 ~幼虫 ~蛋白质 ~缓冲液
中图分类号 }≥zyv 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kuss{ls| p stst p sx
收稿日期 }ussz p sx p u{ ∀
基金项目 }国家自然科学基金资助项目kvsszsyuzl ∀
3 感谢江南大学王树英老师在产品氨基酸分析方面的帮助以及武剑同学在其他试验工作中的帮助 ∀
Προτεινσ Εξτραχτιον φροµ Λαρϖα οφ ∆ενδρολιµυσ πυνχτατυσ ανδ Ιτσ Νυτριτιον ανδ Σαφετψ Εϖαλυατιον
¬∏Š¤²´¬¤±ª • ¬¨ ¬¨¦¤¬
k Χολλεγε οφ Λιφε Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψo ΧεντραλΣουτη Υνιϖερσιτψοφ Φορεστρψ & Τεχηνολογψ Χηανγσηα wtssswl
Αβστραχτ } °µ²·¨¬±¶ ¬¨·µ¤¦·¬²±©µ²°·«¨ ¤¯µ√¤²© ∆ενδρολιµυσ πυνχτατυσ º¬·«¤¥∏©©¨µ¶²¯∏·¬²± °¨ ·«²§º¤¶¶·∏§¬¨§q׫¨ µ¨¶∏¯·¶
µ¨√¨ ¤¯ §¨·«¤·ªµ¤±∏¯¤µ¬·¼ ²© °¤·¨µ¬¤¯¶o ¬¨·µ¤¦·¬²±·¨°³¨µ¤·∏µ¨ o ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬°¨ ¤±§³µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ³‹ ¶«²º¨ §¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨©©¨¦·¶²±
·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± µ¤·¨ ²©·«¨ ³µ²·¨¬±¶k Π  s1sxl o º«¬¯¨ µ¨ ¤¯·¬√¨ ¤°²∏±·²© °¤·¨µ¬¤¯¶ ¤±§ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¶²¯√¨ ±·o ³µ¨¦¬³¬·¤·¬²±
·¨°³¨µ¤·∏µ¨ o¤±§³µ¨¦¬³¬·¤·¬²±·¬°¨ «¤§±²¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨©©¨¦·¶q׫¨ ²³·¬°¤¯ ¦²±§¬·¬²±¶º¨ µ¨ ¤¶©²¯ ²¯º¶q׫¨ ¥∏©©¨µ¶²¯∏·¬²± º¤¶
‘¤u ‹°’w2‘¤’‹k³‹ |1xl o°¤·¨µ¬¤¯¶±¨ §¨·² ¥¨ ©¬±¨ ³²º§¨µkws °¨ ¶«l o·«¨ µ¤·¬²²© °¤·¨µ¬¤¯¶·² ¬¨·µ¤¦·¬²± ¶²¯√¨ ±·º¤¶tΒtx
k µΠϖl o ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬°¨ º¤¶x «o ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º¤¶ws ε o³µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ³‹ º¤¶x1s o³µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º¤¶
x ε o³µ¨¦¬³¬·¤·¬²±·¬°¨ º¤¶t «q׫¨ ³µ²·¨¬± ¦²±·¨±·²©·«¨ ³µ²§∏¦·²¥·¤¬±¨ §¤··«¨ ²³·¬°¤¯ ¦²±§¬·¬²± º¤¶kzt1tu ? s1tyl h o
¤±§·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± µ¤·¨ º¤¶kys1vy ? t1uxl h ·²·¤¯ °¬·µ²ª¨±q׫¨ ·²·¤¯ ¤°¬±² ¤¦¬§¶¦²±·¨±·º¤¶y|1x{ h ¬±·«¨ ¬¨·µ¤¦·o²©
º«¬¦«·«¨ ¶¨¶¨±·¬¤¯ ¤°¬±²¤¦¬§¶¦²±·¨±·º¤¶wx1ty h q⁄xs ²©·«¨ ³µ²·¨¬±³µ²§∏¦·¬¶º¤¶°²µ¨·«¤±tu sxs °ª#®ªpt o¶∏ªª¨¶·¬±ª
·«¨ ³µ²§∏¦·º¤¶¤¦·∏¤¯ ¼¯ ±²³²¬¶²±²∏¶q
Κεψ ωορδσ} ¬±¶¨¦·µ¨¶²∏µ¦¨¶~¬±¶¨¦·³¨¶·~ ∆ενδρολιµυσ πυνχτατυσ~ ¤¯µ√¤~³µ²·¨¬±~¥∏©©¨µ¶²¯∏·¬²±
随着世界人口的不断增加和耕地的不断减少 o人类蛋白质资源已面临短缺危机 ∀目前我国人均膳食中
动物性蛋白质的摄取量与世界水平相差甚远 o仅相当于经济发达国家的 tΠx ∗ tΠ{k周光召 ot||z ~魏美才等 o
usstl ∀因此 o在当前形势下开发新的动物蛋白质资源具有重要意义 ∀
昆虫是地球上生物中种类最多 !数量最大的生物类群 o是目前最大的未被充分利用的宝贵资源k文礼章 o
t||{ ~•¤°²¶2∞¯²µ§∏¼ ετ αλqoussu ~ ¤¬·¬ετ αλqousstl o其虫体本身蕴藏着高含量的优质动物蛋白 o而且其虫
体蛋白质中氨基酸组分分布的比例与联合国粮农组织kƒ„’l制定的蛋白质中必需氨基酸的比例模式非常接
近k文礼章 ot||{ ~魏美才等 ousstl ∀因此昆虫被认为是目前最大且最具开发潜力的动物蛋白质来源 ∀
松毛虫k ∆ενδρολιµυ󶳳ql是我国最严重的森林大害虫 o堪称不冒烟的森林火灾 k狄升 ot||xl ~但从资
源学的角度来看 o松毛虫又是一类巨大的生物资源 ∀前期研究结果表明 o松毛虫中含有 xs h ∗ yx h的优质
蛋白质k刘高强等 oussvl o我国云南的少数民族地区和国外部分国家如日本和朝鲜的一些人们常把松毛虫
蛹当作一种食物来食用k何剑中等 ot||{¤l ∀这些食虫事实和松毛虫巨大的资源特点为人们开发松毛虫新
资源蛋白系列食品给予了启示 ∀中国林业科学研究院资源昆虫研究所对云南松毛虫k ∆ qηουιl !思茅松毛虫
k ∆ qϖικυχηιιl !德昌松毛虫k ∆ qπυνχτατυσ τεηχηανγενσισl等进行了资源化利用研究k何剑中等 ot||{¥~t||{¦l ∀
笔者近年来研究了马尾松毛虫k ∆ qπυνχτατυσl毒素的性质后 o采用加热处理的方法解决了马尾松毛虫毒素对
其开发利用的制约问题k刘高强等 oussv ~ussxl o随后研究了马尾松毛虫蛹甲壳素的提取工艺k刘高强等 o
usszl o并对马尾松毛虫幼虫蛋白质的提取进行了初步研究k刘高强等 oussyl ∀本文则在前期研究的基础
上 o进一步采用缓冲液法提取了马尾松毛虫幼虫中的总蛋白质 o对所得产品蛋白质的营养价值和食用安全性
进行评价 ∀
t 材料与方法
111 试验材料和仪器
马尾松毛虫幼虫 o采自湖南东安县地区 ∀样品在真空干燥箱内于 ws ε 下烘干备用 ∀
日立 {vx2xs型氨基酸自动分析仪 o日本日立公司 ~ ⁄ƒ2t型真空干燥箱 o上海跃进医疗器械厂生产 ~
³‹≥2ux型精密 ³‹计 ∀
112 试验方法
t1u1t 提取工艺 参考相关文献k郭勇 ot||y ~鲁晓翔等 ot|||l和预试验确定 o马尾松毛虫幼虫蛋白质的基
本提取工艺如下 }虫体干燥 ψ制浆 ψ溶剂抽提 ψ离心分离 ψ调等电点 ψ离心分离 ψ粗蛋白质 ψ透析除杂 ψ
较纯蛋白质 ψ干燥成品 ∀每次准确称取 x1yx ª样品 o按照基本工艺流程进行蛋白质的提取 ∀
t1u1u 蛋白质含量的测定 采用微量凯氏定氮法k宁正祥 ot||zl测定 ∀
t1u1v 总氮提取率的计算 总氮提取率 }蛋白产品中含氮量Π原料中含氮量 €蛋白产品质量 ≅ 品粗蛋白含
量Π原料质量 ≅料粗蛋白含量 ∀
t1u1w 氨基酸组成的测定 样品经 y °²¯#pt ‹≤¯ 水解后 o采用日立 {vx2xs型高速氨基酸分析仪进行 tz种
蛋白质构成氨基酸的分析 ∀另取样用 x °²¯#pt ‘¤’‹水解后 o采用同机测定其色氨酸含量 ∀
t1u1x 氨基酸价的计算 氨基酸价k h l €样品蛋白质中氨基酸含量k°ª#ª
pt ³µ²·¨¬±l
比较基准同种氨基酸含量k°ª#ªpt ³µ²·¨¬±l ≅ tss h ∀
t1u1y 产品的安全性评价 采用急性毒性试验法k周宗灿 oussyl ∀预试验 }选取健康的小白鼠 ty只 o体重
均为kus ? ulªo雌雄各半 o随机分为 w组 o每组 w只 ∀通过灌胃经口给予受试物 ∀观察各组小鼠的反应 !表现
和死亡情况以估计正式试验的剂量 ∀正式试验 }根据预试结果设计剂量 o分 x ∗ y个剂量组 o每组小鼠 ts只 ∀
通过各组小鼠的死亡数目来计算受试物的半数致死量k⁄xsl o从而判断受试物毒性的大小 ∀
表 1 单因素试验的各因素及水平
Ταβ .1 Φαχτορσ ανδ τηειρ λεϖελσιν σινγλε φαχτορ τεστ
因 素 ƒ¤¦·²µ¶ 水 平 ¨√¨ ¶¯
料液比 ¤·¨µ¬¤¯¶Β¶²¯√ ±¨·k µ }ϖl tΒtx tΒus tΒux
原料粗细度 ¤·¨µ¬¤¯¶©¬±¨ §¨ªµ¨¨ ws目虫粉 ws ° ¶¨«³²º§¨µ 原干虫体 ⁄µ¼ ²µ¬±ª¬±¤¯ ¬±¶¨¦· )
提取温度 ∞¬·µ¤¦·¬²±·¨°³¨µ¤·∏µ¨Πε tx ux ws
提取时间 ∞¬·µ¤¦·¬²±·¬° Π¨« u v x
沉淀 ³‹ °µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ³‹ w1s x1s x1x
沉淀温度 °µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ·¨°³¨µ¤·∏µ¨Πε x tx us
沉淀时间 °µ¨¦¬³¬·¤·¬²±·¬° Π¨« t u v
113 试验设计
本试验采取单因
素试验法 ∀测定某一
因素时 o表 t中其他
条件为非测定因素 ∀
经预试验后 o选择的
缓冲液为 ‘¤u ‹°’w2
‘¤’‹ k³‹ 为 |1xl ∀
单因素试验的基本条件 }料液比为 tΒusk µ }ϖl o原料粗细度 }原干虫体 ~提取时间为 v «o提取温度为 ux ε ~
沉淀 ³‹为 x1s o沉淀温度为 x ε o沉淀时间为 u «∀
114 统计分析
每组试验重复 v次 o结果为平均值 ? 标准偏差 ∀数据处理采用 ≥„≥ {1t软件 ∀
u 结果与分析
211 单因素试验结果
单因素提取马尾松毛虫幼虫蛋白质的结果见表 u ∀显著性分析结果表明 o原料粗细度 !提取温度 !提取
时间对提取结果差异显著 o沉淀 ³‹差异极显著 o而料液比 !沉淀温度和沉淀时间对提取结果无显著差异 ∀
ust 林 业 科 学 ww卷
表 2 单因素试验结果及显著性分析 ≠
Ταβ .2 Ρεσυλτσ οφ τηε εξτραχτιον οφ προτειν φροµ ∆ . πυνχτατυσ βψσινγλε φαχτορ τεστ µετηοδ
因 素
ƒ¤¦·²µ¶
水 平
¨√¨ ¶¯
蛋白产品的产量
≠¬¨ §¯²©³µ²·¨¬± ³µ²§∏¦·Πª
料液比 ¤·¨µ¬¤¯¶Β¶²¯√¨ ±·
tΒtx
tΒus
tΒux
t1tw ? s1st
t1tx ? s1st
t1ty ? s1sw
原料粗细度 ¤·¨µ¬¤¯¶©¬±¨ §¨ªµ¨¨ 原干虫体 ⁄µ¼ ²µ¬ª¬±¤¯ ¬±¶¨¦·ws目虫粉 ws ° ¶¨«³²º§¨µ
t1tw ? s1st
u1uy ? s1sw 3
提取温度 ∞¬·µ¤¦·¬²±·¨°³¨µ¤·∏µ¨Πε
tx
ux
ws
s1{y ? s1sw
t1sw ? s1st
t1uz ? s1sw 3
提取时间 ∞¬·µ¤¦·¬²±·¬° Π¨«
u
v
x
s1|t ? s1sv
t1sw ? s1st
t1uy ? s1st 3
沉淀 ³‹ °µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ³‹
w1s
w1x
x1s
t1vz ? s1st 3
t1tt ? s1st
t1ys ? s1st 3 3
沉淀温度 °µ¨¦¬³¬·¤·¬²± ·¨°³¨µ¤·∏µ¨Πε
x
tx
us
t1t| ? s1su
t1tw ? s1st
t1tv ? s1sw
沉淀时间 °µ¨¦¬³¬·¤·¬²±·¬° Π¨«
t
u
v
t1tw ? s1su
t1tw ? s1st
t1tt ? s1sw
≠ 3 Α€ s1sx ~33 α € s1st q
从表 u可看出 o原料粗细
度以 ws目虫粉进行匀浆为宜 ~
提取温度 !提取时间以及沉淀
³‹都与蛋白产品的产量正相
关 o故提取温度取 ws ε !提取
时间取 x «~沉淀 ³‹中 ox1s的
产量最高 o故沉淀 ³‹ 应以 x1s
为宜 ∀
料液比 !沉淀温度和沉淀
时间对提取结果差异不显著 o
但综合考虑生产实际与产量的
关系 o料液比以 tΒtx为宜 ~沉
淀温度和沉淀时间分别以 x ε
和 t «为宜 ∀
212 单因素试验的验证
在单因素试验确定的最佳
条件下进行 v次重复提取 o所
得蛋白产品干质量为ku1wt ?
s1swl ªo其粗蛋白含量为
kzt1tu ? s1tyl h o总氮提取率
为kys1vy ? t1uxl h k表 vl ∀与以前稀碱法提取方法相比 o所得蛋白产品的粗蛋白含量较低≈稀碱法所得产品
的粗蛋白含量为k{t1sv ? s1twl h   o但总氮提取率大大提高≈稀碱法的总氮提取率为kwt1uz ? u1ssl h  k刘高
强等 oussyl ∀因此 o总体来看 o采用缓冲液法对马尾松毛虫幼虫中的蛋白质进行提取 o方法更好 o也更具有
实用价值 ∀
表 3 最佳试验条件下蛋白质的提取结果
Ταβ .3 Ρεσυλτσ οφ εξτραχτιον οφ προτειν φροµ ∆ . πυνχτατυσ υνδερ τηε οπτιµαλ χονδιτιον
样品干质量
⁄µ¼ °¤¶¶Πª
样品粗蛋白质含量
°µ²·¨¬± ¦²±·¨±·²© °¤·¨µ¬¤¯¶Πh
蛋白产品干质量
°µ²·¨¬± °¤¶¶Πª
产品粗蛋白质含量
°µ²·¨¬± ¦²±·¨±·²©³µ²§∏¦·Πh
提取率
∞¬·µ¤¦·µ¤·¬²Πh
x1yx xs1st ? s1wt u1wt ? s1sw zt1tu ? s1ty ys1vy ? t1ux
213 蛋白质产品的氨基酸组成分析
对最优条件下提取的蛋白质产品进行氨基酸组成分析 o结果见表 w ∀由表中可见 o所得蛋白产品中 ot{
种氨基酸齐全 ∀其中氨基酸总量为 y|1x{ h ~必须氨基酸总量为 vt1wu h k含婴儿必需氨基酸组氨酸lk刘志
皋 ousswl o占氨基酸总量的 wx1ty h ∀
表 4 蛋白质产品及蛋白质的氨基酸组成及含量 ≠
Ταβ .4 Αµινο αχιδσ προφιλε οφ τηε προτειν προδυχτ
氨基酸
„°¬±²¤¦¬§¶
ª#ktss ª产品
³µ²§∏¦·lpt
°ª#kt ª蛋白质
³µ²·¨¬±lp t
氨基酸
„°¬±²¤¦¬§¶
ª#ktss ª产品
³µ²§∏¦·lpt
°ª#kt ª蛋白质
³µ²·¨¬±lp t
甘氨酸 Š¯ ¼ v1|s xw1{ 天门冬氨酸 „¶³ z1vv tsv
丙氨酸 „¯ ¤ w1zt yy1u 谷氨酸 Š¯ ∏ |1tu tu{
缬氨酸 ∂¤¯ 3 w1|u y|1t 酪氨酸 ×¼µ v1|x xx1x
亮氨酸 ¨∏3 y1vu {{1{ 苯丙氨酸 °«¨ 3 v1{z xw1w
异亮氨酸 Œ¯ 3¨ w1tt xz1z 脯氨酸 °µ² u1ts u|1x
丝氨酸 ≥ µ¨ u1wt vv1{ 精氨酸 „µª w1tu xz1|
苏氨酸 ׫µ3 u1{{ ws1x 赖氨酸 ¼¶3 w1ys yw1y
蛋氨酸  ·¨3 t1{| uy1y 组氨酸 ‹¬¶3 u1sz u|1t
胱氨酸 ≤¼¶ s1xu z1v 色氨酸 ×µ³3 s1zy ts1z
氨基酸总量
ײ·¤¯ ¤°¬±²¤¦¬§¶ y|1x{
必须氨基酸总量
ײ·¤¯ ¶¨¶¨±·¬¤¯ ¤°¬±²¤¦¬§¶ vt1wu
≠ 3 必需氨基酸k含组氨酸l∞¶¶¨±·¬¤¯ ¤°¬±²¤¦¬§¶k¬±¦¯∏§¬±ª ‹¬¶l q
vst 第 |期 刘高强等 }马尾松毛虫幼虫蛋白质的提取及产品营养和安全评价
表 5 蛋白质产品中必需氨基酸含量与 ΦΑΟΠΩΗΟ标准模式比较 ≠
Ταβ .5 Χοµ παρισον οφ εσσεντιαλ αµινο αχιδσ προφιλεσ βετωεεν τηε προτειν προδυχτ
ανδ τηε στανδαρδ εσσεντιαλ αµινο αχιδσ προφιλεσφροµ ΦΑΟΠΩΗΟ °ª#ªpt
氨基酸
„°¬±²¤¦¬§¶
ƒ„’Π• ‹’建议标准
ƒ„’Π• ‹’ ¶·¤±§¤µ§
松毛虫蛋白产品
°µ²·¨¬± ³µ²§∏¦·
产品氨基酸价
„°¬±²¤¦¬§√¤¯∏¨
苏氨酸 ׫µ ws ws1x tst
缬氨酸 ∂¤¯ xs y|1t tv{
蛋氨酸 n胱氨酸  ·¨n ≤¼¶ vx vv1| |z
异亮氨酸 Œ¯¨ ws xz1z tww
亮氨酸 ¨∏ zs {{1{ tuy
苯丙氨酸 n酪氨酸 °«¨ n ×¼µ ys ts|1| t{v
赖氨酸 ¼¶ xx yw1y ttz
色氨酸 ×µ³ ts ts1z tsz
合计 ײ·¤¯ vys wzx1u
≠标准模式为常规水平模式kƒ„’Π• ‹’ ot|zvl k刘志皋 ousswl≥·¤±§¤µ§°²§¨¯¬¶¦²°°²±¯¨ √¨ ¯ °²§¨¯
kƒ„’Π• ‹’ ot|zvlk¬∏«¬ª¤²ousswl q
表 x 为蛋白产品中必
需氨酸组成和 ƒ„’Π• ‹’必
需氨酸标准模式的比较 ∀
从表中可知 o第一限制氨基
酸为含硫氨基酸 o其氨基酸
价为 |z ∀但含硫氨基酸中
的胱氨酸在盐酸水解条件
下 o易受破坏 o故其实际值
应比测定值高 ∀其他必需
氨酸的氨基酸价都在 tss以
上 o所以 o本试验所得蛋白
质产品的营养价值较高 o是
一种优质动物蛋白源 ∀
214 蛋白质产品的急性毒
性试验
蛋白质产品的急性毒性试验结果见表 y ∀本预试验采用 t §内多次经口给予小鼠药物的方式 o最大剂量
已达 ts sss °ª#®ªpt以上ktu sxs °ª#®ªptl o结果无小鼠死亡和其他异常症状 o连续观察 u周后也无小鼠死
亡 ∀这表明该蛋白产品的 ⁄xs在 ts sss °ª#®ªpt以上 o属实际无毒范围 o根据相关规定k周宗灿 oussyl o无需
进一步进行正式试验 ∀
表 6 蛋白质产品的小鼠急性毒性试验预试结果
Ταβ .6 Πρελιµιναρψτεστ ρεσυλτ ον τηε αχυτε τοξιχιτψ (υσινγ ρατ) οφ τηε προτειν προδυχτ
药物体积
∂²¯∏°¨ Π≈°#kts ªl p t 
药物含量
≤²±·¨±·Πkª#°ptl
日给予次数
⁄¨ ¬¯√ µ¨¼·¬°¨ ¶§¤¬¯¼
实际剂量
×µ∏¨ §²¶¨Πk°ª#®ªptl
动物数
„±¬°¤¯ ±∏°¥¨µ
死亡数
⁄¨ ¤§±∏°¥¨µ
s1ux s1tus x w tu sxs w s
s1ux s1tus x v | svz w s
s1ux s1tus x u y sux w s
s1ux s1s{s t u w ssx w s
v 结论与讨论
蛋白质的提取方法较多 o如稀碱法 !酶法 !稀盐法以及缓冲液法等k郭勇 ot||y ~陈来同等 ot||zl ∀但缓
冲液法提取蛋白质简单易行 o且无食品安全隐患 o因此本文采用缓冲液法对马尾松毛虫幼虫进行了蛋白质的
提取研究 ∀结果表明 o采用此法进行松毛虫幼虫蛋白质的提取是可行的 o与以前试验的稀碱法相比k刘高强
等 oussyl o本法提取效果更好 o总氮提取率更高 ∀同时产品氨基酸分析结果表明 o所得蛋白产品中 ot{种氨
基酸齐全 ∀其中氨基酸总量为 y|1x{ h ~必须氨基酸总量为 vt1wu h k含婴儿必需氨基酸组氨酸lk刘志皋 o
usswl o占氨基酸总量的 wx1ty h ∀表明该蛋白产品有较高的营养学价值 ∀急性毒性试验结果表明 o该蛋白产
品的 ⁄xs在 ts sss °ª#®ªpt以上 o属实际无毒范围 o这为产品的进一步开发提供了安全方面的依据 ∀
向洋等kt|||l对家蛆幼虫中的蛋白质进行了提取 o所用方法为稀碱法 o与本文不同 ∀本文结果表明 o提
取松毛虫蛋白质时 o缓冲液法提取效果优于稀碱法 o蛋白质提取率为 ys1vy h ~而该文献中报道的蛋白质得
率仅为 v|1sz h o可能与所采用方法不同有关 ∀冀宪领等kusssl研究了黄粉虫k Τενεβριο µολιτορl中蛋白质的提
取工艺 o采用稀碱法和盐法 u种方法提取 o结果表明盐提法的提取效果更好 o提取率为 y|1v{ h o比本文缓冲
液法提取马尾松毛虫幼虫中蛋白质的提取率kys1vy h l较高 o这种差异可能与原材料和提取方法都有关 ∀
总体来看 o目前昆虫蛋白质的开发利用研究尚少 o大多研究集中在昆虫营养成分的测定方面 ∀而且已
有昆虫蛋白质的开发研究 o尚未用缓冲液法进行蛋白质的提取 o本文的提取结果可为今后马尾松毛虫蛋白系
列产品的研发提供技术参考 ∀今后仍需要采用正交设计或响应面设计法对提取工艺进行优化 o以进一步降
低成本和提高提取率 ∀
wst 林 业 科 学 ww卷
参 考 文 献
陈来同 o徐德昌 qt||z1 生化工艺学 q北京 }北京大学出版社 outy p ut{1
狄 升 qt||x1 松毛虫综合防治效益分析 q林业经济 okwl }w{ p xw1
郭 勇 qt||y1 现代生化技术 q广州 }华南理工大学出版社 ot p xs1
何剑中 o张 荣 o童 清 o等 qt||{¤q云南民族地区食用松毛虫的调查 q林业科学研究 ottkwl }v|y p wst1
何剑中 o卢 南 qt||{¥q云南松毛虫蛹和成虫化学成分及其比较研究 q林业科学研究 ottkul }tvs p tvw1
何剑中 o崔永忠 o黄 茵 o等 qt||{¦q云南松毛虫蛹和蛾蛋白饲料价值的研究 q饲料工业 ot|kvl }v{ p ws1
冀宪领 o盖英萍 qusss1 黄粉虫蛋白质的提取工艺研究 q食品科技 okxl }uw p ux1
刘高强 o刘卫星 o魏美才 o等 qussz1 从害虫松毛虫中提取甲壳素的初步研究 q西北林学院学报 ouukul }v{ p wt1
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k责任编辑 朱乾坤l
xst 第 |期 刘高强等 }马尾松毛虫幼虫蛋白质的提取及产品营养和安全评价