全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2622 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–09–07
逆境转录因子DREB2基因对百合的遗转转化研
究
尚爱芹，高永鹤
（河北农业大学，河北保定 071000）
以东方百合‘西伯利亚’百合为试验材料，建立以无菌小鳞茎为外植体的高效再生体系同时建
立了稳定的遗传转化体系，并通过农杆菌介导法将逆境转录因子 DREB2 基因成功地转入其基因组
中。
试验结果表明：‘西伯利亚’百合小鳞茎为最佳再生材料，其适宜不定芽再生的培养基为MS +
0.4 mg · L-1 6-BA + 1.0 mg · L-1 2,4-D，不定芽未经愈伤组织阶段而直接发生；最佳增殖培养基为
MS + 0.6 mg · L-1 6-BA + 0.2 mg · L-1 NAA；最佳生根培养基为 1/2MS + 0.1 mg · L-1 NAA。小鳞茎增
重培养基为MS + 0.2 mg · L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 NAA且附加蔗糖 6%。
优化了遗传转化的技术参数，以百合增重小鳞茎为转化受体，预培养时间为 3 d，侵染时最佳
菌液浓度为 OD600 = 0.8，侵染时间为 20 min，25 ℃下共培养 3 d。抗生素筛选卡那霉素浓度为 120
mg · L-1，头孢霉素在除菌过程中使用浓度为 400 mg · L-1，直至得到抗性芽。在共培养时加入乙酰丁
香酮没有明显变化，共培养基中去除 NH4NO3可提高转化率。抗性植株率可达 5%。对 59个卡那霉
素阳性单株进行 PCR 检测，证明有 28 个单株的 DNA 经扩增后产生了与阳性对照相同的特异扩增
带，与 DREB2基因相符。对转基因阳性植株进行 Southern、Northern杂交鉴定，结果表明外源基因
已经整合到转化植株的基因组中。

关键词：百合；遗传转化
中图分类号：S 682.2 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2622-01