全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2626 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–08–01
基金项目：江西省科技厅科技支撑项目（2008BB22000）；2011 大学生创新性实验项目
* 通信作者（E-mail：327481955@qq.com；Tel：15970665575）
江西野生四季兰组培中的酚害控制和污染控制
种 楠 1，陈洁敏 1，赵九洲 2
（1 江西财经大学艺术学院园林系，南昌 330032；2 江西省生态环境实验教学示范中心，南昌 330032）
中国兰是中国十大传统名花之一，具有很高的观赏价值和经济价值。但是野生兰花的生境随着
工业和城市化进程的迅猛发展而遭到严重破坏。本研究旨在缩短和简化野生四季兰［Cymbidium
ensifolium（L.）Sw.］的育苗程序，解决组培中的酚害和污染的问题，以降低成本，为江西野生四季
兰花的迁地保护和规模化生产提供依据。
选取野生四季兰 3 ~ 8 cm 长的幼芽，将其从母体上采下，先用自来水流水冲洗 10 min，75%的
酒精浸泡 30 s，再置于 0.1%升汞溶液（加 1 ~ 2 滴 Tween-20）中消毒 8 min，然后用无菌水冲洗 5
次，用消毒滤纸吸干表面水分，剥去外围小叶，在无菌条件中于解剖镜下剥出约 10 mm 长的茎尖，
以生长点为中心分割 4 mm 茎段作为外植体。采用 L16(43)正交设计研究外植体组培中的酚害控制和
污染的控制效果。以改良的 MS 为基本培养基[其中 1/4 MS + 花宝 1 号 3 g · L-1 + 蛋白胨 2 g · L-1 +
6-BA 2.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1 + 香蕉泥（BJ）200 g · L-1 + 蔗糖 20 g · L-1 + 琼脂 8 g · L-1 ]，培
养基中添加不同浓度（0、2、4、6 g · L-1）的活性炭（activated carbon，AC）和不同浓度（0、35、
70、105 mg · L-1）的硫代硫酸钠（Hyposulphite，HY）研究酚害的控制效果；添加不同浓度（0、0.5、
1.0、1.5 mg · L-1）的氨苄（Penicillin，PN）研究污染的控制效果。试验中所有培养基 pH 值均为 5.5。
培养室温度（25 ± 1）℃，光照 10 ~ 12 h · d-1，光照度约 2000 lx，相对湿度 60% ~ 65%。
在茎尖的培养中，以 1/4MS + 蔗糖 20 g · L-1 + BJ200 g · L-1 + 琼脂 8 g · L-1 + 6-BA 2.5 mg · L-1 +
NAA 0.1 mg · L-1 + AC 4 g · L-1 的诱导率高达 96.7%，AC 的用量为 4 和 6 g · L-1 控制酚害的效果好。
野生四季兰的茎段培养中的污染较重，限制成苗率和出瓶率。将污染菌在无菌条件下接种于葡萄糖
蛋白胨液体培养基中增殖培养后，在马铃薯葡萄糖培养基平板上划线接种，置于 37 ℃恒温培养箱
48 h 后观察菌落的生长状态，确定污染菌的适宜生长培养基，其后继续在适宜培养基平板上划线分
离，得到不同的单菌落。分别挑取单个菌落接种于马铃薯斜面培养基培养上，每种菌源均反复划线、
镜检，得到纯菌种，经过镜检确定为革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性芽苞杆菌 2 种。为此在培养基中
添加 PN 和 HY，进行抑菌试验，7 d 和 14 d 统计污染率。PLB 继代培养中，1/4MS + 6-BA 2.5 mg · L-1
+ NAA 0.1 mg · L-1 + BJ 200 g · L-1 + 蔗糖 20 g · L-1 + 琼脂 8 g · L-1 + PN 70 g · L-1 + HY 1.5 g · L-1组
合可有效控制污染，浓度较大（80 mg · L-1PN）时容易导致 PLB 黄化，难以诱导苗分化。

关键词：四季兰；氨苄；硫代硫酸钠；酚害；污染；组培
中图分类号：S 682.31 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2626-01