全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2593 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–07–25
基金项目：广东省蔬菜新技术研究重点实验室项目
* 通信作者（E-mail：huhexu@21cn.com；Tel：13602797313）
与南瓜短蔓基因连锁的分子标记
王 瑞 1，黄河勋 1,*，林毓娥 1，梁肇均 1，陈清华 2
（1广东省农业科学院蔬菜研究所，广州 510640；2华南农业大学园艺学院，广州 510640）
矮生材料一直是作物育种中重要的种质资源。研究者在南瓜育种过程中发现了一个新的
短蔓印度南瓜（Cucurbita maxima D.）材料，为一对隐性核基因控制其矮生性状。
本试验中用 AFLP 技术拟寻找与该短蔓基因连锁的分子标记，希望为该矮生资源的分子
辅助育种提供理论依据。
供试材料为短蔓南瓜近等基因系，及母本多代自交系，F2代分离群体。在三叶期调查植株的长
蔓、短蔓性状，取长蔓植株和短蔓植株各 10株叶片，分别提取 DNA等量混合酶切连接，另外，F2
代分离群体全部植株分别采样，做好标记，提取 DNA。
采用 JoinMap V3.0软件分析所得 AFLP标记和短蔓基因之间的连锁关系。根据 F2代单株的长
蔓、短蔓田间调查记录，并按照 JoinMap V3.0 软件的规定进行命名：所得标记在 F2各单株电泳谱
带上的有无分别记作 d和 b。最终计算所得的 AFLP标记与矮生基因的遗传距离。
试验结果显示，用 64对 AFLP引物对两个相对基因池进行 PCR扩增，其中MCAG/ETT引物组
合在长蔓、短蔓池可以扩增出一条特异性条带。在杂合长蔓和纯合长蔓之间验证发现该条带在杂合
植株中稳定出现。进一步用MCAG/ETT在 F2代（69株）分离群体验证，其中有 4株短蔓植株没有
出现该特异条带。用 JoinMap V3.0分析软件进行分子标记连锁分析，计算MCAG/ETT与南瓜短蔓
基因之间的遗传距离，结果表明二者之间存在连锁关系，连锁距离为 11.3 cM。对引物MCAG/ETT
组合扩增得到的特异性片段进行回收、克隆、测序。测序结果显示，该片段去掉接头引物长 149 bp。
在 EBI数据库进行 BLAST分析，发现其与杨树的 CBL-interacting proteion kinase有 96%的同源
性。

关键词：南瓜；短蔓；分子标记
中图分类号：S 642.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2593-01