全 文 :园 艺 学 报 2008, 35 (12) : 1795 - 1802
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2008 - 06 - 04; 修回日期 : 2008 - 08 - 12
基金项目 : 国家 ‘863’计划项目 (2006AA100109)3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: gfliu@mail1hzau1edu1cn)
麝香百合胚性愈伤组织状态的调整与植株再生
王 杰 1, 2 , 刘国锋 13 , 包满珠 1 , 黄 莉 1
(1 华中农业大学园艺林学学院 , 园艺植物生物学教育部重点实验室 , 武汉 430070; 2 中国科学院武汉植物园 , 武汉
430074)
摘 要 : 采用麝香百合假鳞茎诱导出的胚性愈伤组织 , 从氯化钴、ABA、蔗糖浓度以及光照条件等 4
个方面对胚性愈伤组织的状态进行调整 , 并进行了植株再生研究。结果表明 : 0105μmol·L - 1的氯化钴有
利于提高体细胞胚的比例和愈伤组织的颗粒性 , 0101和 0102μmol·L - 1的氯化钴有利于愈伤组织体积增大
和增殖系数提高 ; 随着 ABA浓度提高 , 对胚性愈伤组织的长势、干湿程度、增殖体积和增殖系数的抑制效
果逐渐明显 , 但对胚性愈伤组织比例和颗粒性的抑制效果不显著 ; 光培养条件下 , 90和 60 g·L - 1蔗糖对
麝香百合胚性愈伤组织的比例和颗粒性都有较好的影响 , 但在暗培养条件下 , 仅 60 g·L - 1蔗糖的效果较
好 ; 光培养和暗培养对胚性愈伤组织的干湿程度和颗粒性都没有显著的影响 ; 1 g·L - 1活性炭和基本培养
基对愈伤组织的再生具有显著影响。综合以上结果 , 麝香百合胚性愈伤组织的最佳增殖方式为采用光培养 ,
培养基为 MS + NAA 514μmol·L - 1 + TDZ 014μmol·L - 1 + CoCl2 0105μmol·L - 1 + 蔗糖 60 g·L - 1 , 胚
性愈伤组织再生植株的适宜培养基为 MS +活性炭 1 g·L - 1 +蔗糖 30 g·L - 1。
关键词 : 百合 ; 胚性愈伤组织 ; 体细胞胚 ; 再生
中图分类号 : S 68212 文献标识码 : A 文章编号 : 05132353X (2008) 1221795208
Adjustm en t of the Sta tus of Em bryogen ic Ca llus and Plan t Regenera tion of
L ilium longif lorum
WANG J ie1, 2 , L IU Guo2feng13 , BAO Man2zhu1 , and HUANG L i1
(1 College of Horticulture and Forestry Sciences, Key Laboratory of Horticultural P lan t B iology, M inistry of Education, Huazhong
Agricultural U niversity, W uhan 430070, China; 2W uhan B otanical Garden, Chinese A cadem y of Sciences, W uhan 430074, China)
Abstract: In this paper, the effects of different concentrations of CoCl2 , ABA , sucrose and the condition
of illum ination on the status of embryogenic callus that induced from p seudo2bulblet of L ilium long if lorum were
studied, the embryogenesis and p lant regeneration of embryogenic callus were also investigated. The results
showed that the p roportion of somatic embryos and granularity of the callus could be increased by using CoCl2
with the concentration of 0105μmol·L - 1 , while 0101 and 0102μmol·L - 1 CoCl2 are beneficial to the in2
creasement of callus volume and p roliferation coefficient; Some negative effects on growth potential, water con2
tent, volume and p roliferation coefficient of embryogenic callus were observed when the concentration of ABA
was gradually increased, while p roportion and granularity of embryogenic callus were not affected by different
ABA concentrations; Culturing in light, the positive effects of 60 g·L - 1 or 90 g·L - 1 sucrose on p roportion
and granularity of embryogenic callus were observed, while only 60 g·L - 1 sucrose has positive effects when
cultured at dark; Furthermore, the water content and granularity of embryogenic callus were not affected by
light condition. Plant regeneration of embryogenic callus was affected by 1 g·L - 1 active carbon and the basic
medium used. Considering all factors in p resent study, the results demonstrated that the most app rop riate con2
dition for the p roliferation of embryogenic callus was using MS medium supp lemented with 514μmol·L - 1
园 艺 学 报 35卷
NAA , 014μmol·L - 1 TDZ, 0105μmol·L - 1 CoCl2 and 60 g·L - 1 sucrose and culture under light; and the
op timum medium for embryogenesis and p lant regeneration of embryogenic callus was MS basal medium sup2
p lemented with 1 g·L - 1 active carbon and 30 g·L - 1 source.
Key words: L ilium long if lorum ; embryogenic callus; somatic embryo; regeneration
关于麝香百合 (L ilium long if lorum ) 植株再生研究的报道已有很多 , 采用的外植体有鳞片 ( Gup ta
et al. , 1979; N ightingale, 1979; Stimart & A scher, 1981; Tanimoto & Matsubara, 1995)、叶片 ( Stem2
berg et al. , 1977; N iim i, 1986; Bacchetta et al. , 2003 )、花药 (Qu et al. , 1988 )、花丝 (A rzate2
Fernández et al. , 1997)、茎段 (Nhut, 1998)、花托 (Nhut, 2003) 以及起源于各个器官的薄片细胞
层 (Nhut et al. , 2001) 等。在体胚再生方面 , Haensch ( 1996) 利用不同百合杂交种的鳞片 , Tribu2
lato等 (1997) 利用麝香系列百合 ‘雪皇后 ’品种的柱头和花梗 , Nhut等 ( 2002) 利用麝香百合假
鳞茎的薄片 , 均获得了较好的体细胞胚。但在体胚状态的调整方面 , 目前只有 Nhut等 (2006) 利用
液体培养的方式对麝香百合的体胚进行过状态调整。体胚的状态对遗传转化以及相关研究具有重要意
义。作者通过调整体细胞胚的状态 , 来减少体胚的退化并提高再生率。
1 材料与方法
试验于 2006年 5月到 2007年 4月在华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室进行 , 试验
材料均采自华中农业大学实验基地。
111 麝香百合胚性愈伤组织的诱导与增殖
采用麝香百合 (L ilium long if lorum ) 无菌苗叶柄和叶片再生出小鳞茎 , 参照 Nhut等 (2002) 的方
法 , 将无菌苗假鳞茎切成 018~110 mm的小薄片 , 置于 MS + NAA 514μmol·L - 1 + TDZ 111μmol·
L - 1 + 蔗糖 30 g·L - 1的培养上 , 光照培养 [温度 (25 ±1) ℃, 光照 16 h·d - 1 , 光强度 2 000 lx ] 40
d后 , 诱导出带有部分体细胞胚的愈伤组织 , 将其接种到同样的培养基上进行增殖培养 , 每 40 d更换
1次培养基。
112 胚性愈伤组织状态的调整
以诱导的胚性愈伤组织为材料 , 以 MS +NAA 514μmol·L - 1 + TDZ 014μmol·L - 1 +蔗糖 30 g·
L - 1为基本培养基 , 采用双因素试验设计 (蔗糖浓度与光照 ; ABA与光照 ; 氯化钴与光照 ) , 每处理
培养 30个约 2 mm3的愈伤团 , 3次重复 , 培养 60 d。
对培养 60 d后愈伤团的状态进行观察和记录。 (1) 增殖体积 : 增殖后愈伤团的平均体积 /发生增
殖的愈伤团增殖前的平均体积。 (2) 增殖系数 : 增殖后的总体积 /接种时愈伤团的个数。 (3) 胚性愈
伤组织比例 : 每个愈伤团上胚性愈伤百分比的平均值。 (4) 颗粒性 : 4级 , 颗粒性最好 , 直径 > 015
mm , 紧密 ; 3级 , 颗粒性较好 , 细小 , 直径 < 015 mm , 紧密 ; 2级 , 颗粒性弱 , 细小 , 直径 < 015
mm , 紧密 ; 1级 , 颗粒性差 , 表面呈瘤状突起 , 每个突起直径都达 1 mm以上。 (5) 长势 : 4级 , 最
旺盛 ; 3级 , 旺盛 ; 2级 , 较旺盛 ; 1级 , 最弱。 (6) 干湿程度 : 4级 , 表面干燥 ; 3级 , 表面较干
燥 ; 2级 , 表面湿润 ; 1级 , 水渍状 , 发粘。
113 胚性愈伤组织的细胞学观察
对胚性愈伤组织进行石蜡切片 (王灶安 , 1992) , 在体视显微镜下观察 , 以期找到百合胚性愈伤
组织发育的各个阶段。
114 胚性愈伤组织的植株再生
以增殖后状态较好的胚性愈伤组织为材料 , 分别以 MS + 1 g·L - 1活性炭、1 /2 MS + 1 g·L - 1活
性炭和 MS为培养基进行体胚诱导及植株再生试验。每处理设 5次重复 , 每重复接种 10个约 015 cm3
6971
12期 王 杰等 : 麝香百合胚性愈伤组织状态的调整与植株再生
的愈伤团。
培养 60 d后 , 对愈伤组织的再生情况进行观察和记录。 (1) 再生率 : 长出再生苗的愈伤团个数 /
接种愈伤团的总个数 ; (2) 再生芽的数量 : 每个重复 (10个愈伤团 ) 再生出的芽总数 ; (3) 再生芽
的质量 : 4级 , 生长旺盛 , 健壮 , 颜色翠绿 ; 3级 , 生长一般 , 颜色翠绿 ; 2级 , 生长较慢 , 颜色浅
绿 ; 1级 , 长势很弱 , 发黄。
2 结果与分析
根据试验设计作了 3个双因素分析 , 其中氯化钴与光照、ABA与光照两组因素 , 没有交互作用 ;
而蔗糖浓度与光照条件在胚性愈伤的颗粒性、胚性愈伤比例上存在着交互作用。
211 氯化钴对胚性愈伤组织状态的影响
从表 1可以看出 , 不同浓度的氯化钴除了对麝香百合胚性愈伤组织的长势无影响外 , 对其它性状
均有影响 , 其中较高浓度的氯化钴 (0105μmol·L - 1 ) 对胚性愈伤组织的比例和颗粒性具有明显的
促进作用 , 胚性愈伤组织的比例可达 85%以上 , 颗粒性很明显 (图 1) ; 但对胚性愈伤组织的体积增
长、增殖系数以及干湿程度的促进作用不如较低浓度的氯化钴 (0102或 0101μmol·L - 1 ) 明显。在
较低浓度氯化钴 (0101μmol·L - 1 ) 的培养基上 , 胚性愈伤组织表面干燥 , 增殖体积和增殖系数都
在 10以上 , 而在较高浓度氯化钴 (0105μmol·L - 1 ) 的培养基上 , 愈伤颗粒的表面比较湿润 , 并附
带少量水渍状的愈伤团 , 增殖系数和增殖体积也仅有前者的 1 /2左右。
表 1 氯化钴对麝香百合胚性愈伤组织性状的影响
Table 1 The effects of CoC l2 on em bryogen ic ca llus sta tus of L ilium longiflorum
CoCl2 /
(μmol·L - 1 )
长势
Growing status
胚性愈伤组织比例
Proportion of
embryogenic callus
干湿程度
Hum idity
颗粒性
Granularity
增殖体积
Proliferation
volume
增殖系数
Proliferation
coefficient
0101 2183 ±0198a 0155 ±0126b 3100 ±0141a 1167 ±0152b 10183 ±5185a 10167 ±5189a
0102 2183 ±0175a 0127 ±0124c 2133 ±0141b 2133 ±0152a 10183 ±4192a 10183 ±4192a
0105 2133 ±0152a 0188 ±0104a 3117 ±0155b 2150 ±0155a 6167 ±2159b 6167 ±2158b
注 : 同一栏中不同小写字母代表不同处理间存在 P = 0105水平的显著性差异。下同。
Note: Means followed by different letters within the same column are significantly different at P = 0105. The same below.
212 ABA对胚性愈伤组织状态的影响
由表 2可见 , 对于胚性愈伤组织的长势、干湿程度、增殖体积和增殖系数 , 随着 ABA浓度的增
加 , 抑制效果越明显。在较高浓度 ABA (10μmol·L - 1 ) 培养基上 , 胚性愈伤组织长势比较弱 , 增
殖体积和增殖系数为 7150和 6106, 愈伤颗粒表面比较湿润 , 附有少量的水渍状愈伤团 , 而在较低浓
度 (011μmol·L - 1 ) 下 , 情况与之相反 ; ABA浓度的变化对胚性愈伤组织比例和颗粒性没有显著性
影响。
表 2 ABA对麝香百合体胚性愈伤组织性状的影响
Table 2 The effects of ABA on em bryogen ic ca llus sta tus of L ilium longiflorum
ABA /
(μmol·L - 1 )
长势
Growing
status
胚性愈伤组织比例
Proportion of
somatic embryos
干湿程度
Hum idity
颗粒性
Granularity
增殖体积
Proliferation
volume
增殖系数
Proliferation
coefficient
1010 2125 ±0171b 0173 ±0130a 2175 ±0187b 3125 ±1104a 7150 ±2167c 6106 ±2146b
110 2175 ±0146a 0149 ±0142a 3150 ±0153a 3113 ±0135a 8175 ±2131b 8175 ±2131a
011 3100 ±0100a 0152 ±0136a 3100 ±0100ab 2163 ±0164a 10100 ±0100a 10100 ±0100a
213 蔗糖浓度与光照条件对愈伤组织状态的影响
蔗糖浓度和光照条件对百合愈伤组织状态的影响存在交互作用。从表 3可以看出 , 光培养条件
7971
园 艺 学 报 35卷
下 , 高浓度的蔗糖对麝香百合胚性愈伤组织的比例和颗粒性都有较好的促进作用 ; 而在暗培养条件
下 , 较低浓度蔗糖的效果要优于较高浓度。综合蔗糖与光照两个因素 , 光照与蔗糖浓度在 60 g·L - 1
的条件下培养效果最好。
表 3 蔗糖浓度与光照条件对麝香百合胚性愈伤组织性状的影响
Table 3 The effects of sucrose concen tra tion and illum ina tion on em bryogen ic ca llus sta tus of L ilium longiflorum
光照条件
Illum ination
蔗糖浓度 / ( g·L - 1 )
Sucrose concentration
颗粒性
Granularity
胚性愈伤组织比例
Proportion of somatic embryos
光培养 30 2150 ±0171bc 0140 ±0114b
Cultured in light 60 4100 ±0100a 0192 ±0103a
90 4100 ±0100a 0190 ±0100a
暗培养 30 3133 ±0158bac 0177 ±0125a
Cultured in dark 60 3167 ±0158ba 0187 ±0106a
90 2133 ±1154c 0127 ±0125b
214 光照条件对愈伤组织状态的影响
从表 4可以看出 : 对比光培养与暗培养 , 麝香百合胚性愈伤组织的长势、胚性愈伤组织比例、体
积增长、增殖系数等指标均有显著差异。
光培养条件下胚性愈伤组织的长势为 311级 , 明显优于暗培养条件下的 212级 ; 光培养条件下愈
伤组织的体积增长和增殖系数都可保持在 1210以上 , 暗培养条件下都只有 610左右 ; 而两种培养方
式对胚性愈伤组织的干湿程度和颗粒性的影响无显著性差异。
表 4 光照条件对百合胚性愈伤组织性状的影响
Table 4 The effects of illum ina tion on em bryogen ic ca llus sta tus of L ilium longif lorum
光照
Illum ination
长势
Growing status
胚性愈伤组织比例
Proportion of
somatic embryos
干湿程度
Hum idity
颗粒性
Granularity
增殖体积
Proliferation
volume
增殖系数
Proliferation
coefficient
光培养 3111 ±0178a 0169 ±0136b 2178 ±0150a 2100 ±0144a 12178 ±4141a 12167 ±4150a
Cultured in light
暗培养 2122 ±0144b 0198 ±0125a 2189 ±0150a 2133 ±0153a 6111 ±2120b 6111 ±2120b
Cultured in dark
215 胚性愈伤组织的植株再生
从表 5可以看出 , 3种培养基在胚性愈伤组织的再生率和再生芽数量上均表现出显著性差异 , 其
中 MS +活性炭 1 g·L - 1培养基上再生率和再生芽数分别为 0154和 8180, 均明显优于 MS和 1 /2 MS +
活性炭 1 g·L - 1培养基 ; 但 3种培养基在再生芽质量上没有表现出明显的差异性。
表 5 不同培养基对百合胚性愈伤组织再生植株的影响
Table 5 The effects of d ifferen t m ed ia on plan t regenera tion of em bryogen ic ca llus of L ilium longiflorum
培养基
Media
活性炭 / ( g·L - 1 )
Active carbon
再生率
The rate of p lant
regeneration
再生芽数量
The number of
regenerating shoots
再生芽质量
The quality of
regenerating shoots
MS 1 0154 ±0111a 8180 ±4108a 3100 ±0171a
1 /2 MS 1 0136 ±0112b 5120 ±1110b 3120 ±0184a
MS 0 0132 ±0108b 5100 ±1158b 2140 ±1114a
观察结果 (图 1和图 2) 表明 , 百合体胚的发育起源于各个原胚阶段 (图 2, B ) , 经历了球形
胚、心形胚、子叶形胚等胚的发育阶段 (图 1, A~C) ; 体胚在发育过程中可直接再生成小芽 (图 1,
8971
12期 王 杰等 : 麝香百合胚性愈伤组织状态的调整与植株再生
D) 或小鳞茎 (图 1, E、 F)。体胚再生的幼苗 (图 1, G) 经生根 (培养基为 MS +活性炭 1 g·
L - 1 )、炼苗后 , 移栽到土壤中生长良好 (图 1, H)。
9971
园 艺 学 报 35卷
综合以上试验结果 , 可以确定百合胚性愈伤组织最佳增殖培养基为 MS + NAA 514μmol·L - 1 +
TDZ 014μmol·L - 1 + CoCl2 0105μmol·L - 1 +蔗糖 60 g·L - 1 ; 最佳再生培养基为 MS +活性炭 1 g·
L - 1 +蔗糖 30 g·L - 1。
3 讨论
本研究中参照 Nhut等 (2002) 的方法 , 利用百合假鳞茎的横切薄片初步诱导出胚性愈伤组织并
对其状态进行了调整 ; 利用麝香百合的叶片和叶柄直接再生出小鳞茎 , 并且再生率达到 85%以上。
Nhut等 (2002) 利用百合种球的顶芽快繁出无菌苗 , 再对无菌苗进行茎段培养 , 使之在茎段的叶腋
处长出假鳞茎 , 假鳞茎的繁殖系数和生产周期有一定的局限性。通过假鳞茎的薄片培养 , 平均每个薄
片可以获得 217个体细胞胚 , 但本研究中体细胞胚在增殖和继代过程中退化严重 , 因此笔者进行了胚
性愈伤组织的状态调整 , 调整后胚性愈伤组织的数量和质量均有所提高 , 并且能在较长时期内保持生
长状态 (表 1, 表 3)。
关于百合胚性愈伤组织的调整 , Nhut等 (2006) 认为无论是液体培养还是固体培养 , 在装有 20
mL培养基的 250 mL锥形瓶中接种 015 g的胚性愈伤组织进行培养 , 效果较好 , 胚性愈伤组织的颗粒
性和比例都有一定程度的提高。
本研究从氯化钴、ABA、蔗糖浓度以及光照条件 4个方面进行研究 , 证明了其对胚性愈伤组织调
整的有效性。
在氯化钴浓度为 0105μmol·L - 1的条件下 , 麝香百合胚性愈伤组织的比例和颗粒性都得到了有
效提高 (表 1) , 这与 Roustan等 (1989) 在胡萝卜上的研究一致。这可能是 Co2 +作为一种直接的乙
烯抑制剂 , 抑制了 ACC循环中乙烯的产生 (Merritt et al. , 2001) ; 而 Philosoph2Hadas等 ( 1996) 则
认为由于 Co2 +的存在 , 乙烯不能干扰多胺的合成 , Co2 +可以通过促进多胺的合成而提高体细胞胚的
发生频率。另一方面 , 较高浓度的氯化钴对胚性愈伤组织的干湿程度、体积增长和增殖系数有一定的
抑制作用 , 可能是较高浓度的钴元素和氯离子对植物细胞产生了毒害作用。
ABA能引起植物器官和细胞过早衰老 , 刺激乙烯合成 , 引起脱落 ( Stange & O sborne, 1988)。本
试验中 , ABA浓度越高 , 对百合胚性愈伤组织长势、干湿程度、增殖体积和增殖系数的抑制作用就
越明显 , 符合对 ABA作用的传统认识。另外 , 内源 ABA作为正的调节因子在种子胚发育期间起着重
要作用 , 可使胚正常发育成熟并抑制过早萌发 (Quatrano & Raikhel, 1986)。虽然 ABA对本试验中麝
香百合胚性愈伤组织比例和颗粒性的影响无显著差异 , 但在胡萝卜体细胞胚的发育过程中有一定的积
极作用 , ABA能促进体细胞胚的成熟 ( Kiyosue et al. , 1992; J iménez & Bangerth, 2001; Thi & Plesch2
ka, 2005) , 改变体细胞胚的状态 (Bhaskaran & Sm ith, 1990)。ABA的这种作用在单子叶植物上表现
得比较明显 , 如 L i和 Qu (2002) 对狗牙根的研究 , Guiderdoni等 (1995) 对甘蔗的研究等 , 证明了
这一点。
一般认为 , 较高浓度的蔗糖能有效提高植物细胞的渗透压 , 改善体细胞胚的颗粒性和干湿程度 ,
防止水渍化的发生。Charrière等 (1999) 的研究表明 , 蔗糖含量由 30 g·L - 1调整到 120 g·L - 1之后 ,
24 h内可以观察到半支莲愈伤状态分化的转变。本试验采用 60 g·L - 1的蔗糖浓度结合光照培养取得
了较好的效果 (表 3) , 并观察到体细胞胚的发育全过程 (图 1, 图 2)。
光照条件 (光强、光质和光周期等 ) 对外植体分化生长有很大的影响 , 前人的研究表明 , 有的
材料适合暗培养 , 有的则适合光培养 , 而暗光更有利于愈伤组织的诱导形成 (曹孜义和刘国民 ,
1999)。本试验中 , 光培养对麝香百合胚性愈伤组织长势、体积增长、增殖系数有显著的促进作用 ,
但对胚性愈伤组织的颗粒性和干湿程度无显著影响 , 这与高永超等 ( 2007) 对地钱的研究结果和文
涛等 (2007) 对虎杖的研究结果一致。
0081
12期 王 杰等 : 麝香百合胚性愈伤组织状态的调整与植株再生
总之 , 本试验通过对麝香百合胚性愈伤组织状态的调整 , 获得了状态良好的体细胞胚 , 有利于麝
香百合的再生与快繁 , 并减少畸形苗的发生 , 同时为研究百合遗传转化等提供了良好的材料。
References
A rzate2Fernández A M, Nakazaki T, Okumoto Y, Tanisaka T. 1997. Efficient callus induction and p lant regeneration from filamentswith anther in
lily (L ilium longiflorum Thunb. ) . Plant Cell Rep, 16: 836 - 840.
Bacchetta L, Remotti P C, Bernardini C, Saccardo F. 2003. Adventitious shoot regeneration from leaf exp lants and stem nodes of L ilium. Plant
Cell Tiss O rg Cult, 74: 37 - 44.
Bhaskaran S, Sm ith R H. 1990. Regeneration in cereal tissue culture: A review. Crop Sci, 30: 1328 - 1337.
Cao Zi2yi, L iu Guo2m in. 1999. Practical p lant tissue culture technological tutorial. Lanzhou: Gansu Science Technology Press: 238. ( in Chinese)
曹孜义 , 刘国民. 1999. 实用植物组织培养技术教程. 兰州 : 甘肃科学技术出版社 : 238.
Charrière F, Sotta B , M iginiac E, Hahne G. 1999. Induction of adventitious shoots or somatic embryos on in vitro cultured zygotic embryos of Heli2
anthus annuus: Variation of endogenous hormone levels. Plant Physiol B iochem, 37: 751 - 757.
Gao Yong2chao, W ang J ia2ning, Q iu W ei2zhong, Chi J ian2guo, Sha W ei, Zhang Han. 2007. Effects of different light and p lant growth substances
on the induction and decomposition of callus of M archantia polym orpha. Shandong Science, 20 (4) : 37 - 43. ( in Chinese)
高永超 , 王加宁 , 邱维忠 , 迟建国 , 沙 伟 , 张 晗. 2007. 不同光照和植物生长物质对地钱愈伤组织诱导及分化的影响. 山东
科学 , 20 (4) : 37 - 43.
Guiderdoni E, Mérot B, Eksom tramage T, Paulet F, Feldmann P, Glaszmann J C. 1995. Somatic embryogenesis in sugarcane ( Saccharum spe2
cies) / /Bajaj Y P S ed. Somatic embryogenesis and synthetic seed I. B iotechnology in agriculture and forestry. Vol. 31. Berlin: Sp ringer:
92 - 113.
Gup ta P, Sharma A K, Charturvedi H C. 1979. Multip lication of L ilium longiflorum Thunb. by asep tic culture of bulb2scales and their segments.
Indian J Exp B iol, 16: 940 - 942.
Haensch K T. 1996. Plant regeneration through somatic embryogenesis in different genotypes of L ilium hybrids. Gartenbauwissenschaft, 61: 214 -
218.
J iménez V M, Bangerth F. 2001. Endogenous hormone levels in exp lants and in embryogenic and non2embryogenic cultures of carrot. Physiol
Plant, 111: 389 - 395.
Kiyosue T, Nakajima M, Yamaguchi I, Satoh S, Kamada H, Harada H. 1992. Endogenous levels of abscisic acid in embryogenic cells, non2em2
bryogenic cells and somatic embryos of carrot (D aucus carota L. ) . B iochem Physiol Pflanzen, 188: 343 - 347.
L i L, Qu R. 2002. In vitro somatic embryogenesis in turf2type bermudagrass: Roles of abscisic acid and gibberellic acid, and occurrence of sec2
ondary somatic embryogenesis. Plant B reed, 121: 155 - 158.
Merritt F, Kemper A, Tallman G. 2001. Inhibitors of ethylene synthesis inhibit auxin2induced stomatal opening in ep iderm is detached from leaves
of V icia faba L. Plant Cell Physiol, 42: 223 - 230.
Nhut D T. 1998. M icrop ropagation of lily (L ilium longiflorum ) via in vitro stem node and p seudo2bulblet culture. Plant Cell Rep, 17: 913 - 916.
Nhut D T. 2003. The control of in vitro direct main stem formation of L ilium longif lorum derived from recep tacle culture, and rap id p ropagation by
using in vitro stem nodes. Plant Growth Regulation, 40: 179 - 184.
Nhut D T, Hanh N TM, Tuan P Q, Nguyet L TM, Tram N T H, Chinh N C, Nguyen N H, V inh D N. 2006. L iquid culture as a positive condi2
tion to induce and enhance quality and quantity of somatic embryogenesis of L ilium longif lorum. Sci Hort, 110: 93 - 97.
Nhut D T, Le B V, de Silva J T, A swath C R. 2001. Thin cell layer culture system in L ilium : Regeneration and transformation perspectives. In
V itro Cell Dev B iol Plant, 37: 516 - 523.
Nhut D T, Le B V, M inh N T, de Silva J T, Fukai S, TanakaM, van K T T. 2002. Somatic embryogenesis through p seudo2bulblet transverse thin
cell layer of L ilium longif lorum. Plant Growth Regulation, 37: 193 - 198.
N ightingale A E. 1979. Bulblet formation on L ilium longiflorum Thunb. NellieWhitepiby foliar sp ray app lications of PBA. HortScience, 14: 67 - 68.
N iim i Y. 1986. App lication of leaf segment culture to in vitro bulblets p roduction of six L ilium species. Acta Bot, 35: 189 - 194.
Philosoph2Hadas S, Meir S, Rosenberger I, Halevy A H. 1996. Regulation of the gravitrop ic response and ethylene biosynthesis in gravistimulated
snapdragon sp ikes by calcium chelators and ethylene inhibitors. Plant Physiol, 110: 301 - 310.
Qu Y, Mok M C, Mok D W S, Stang J R. 1988. Phenotyp ic and cytological variation among p lants derived from anther cultures of L ilium longiflo2
rum. In V itro Cell Dev B iol, 24: 471 - 476.
1081
园 艺 学 报 35卷
Quatrano R S, Raikhel N V. 1986. Localization of wheat2germ agglutinin in develop ing wheat embryos and those cultured in abscisic acid. Planta,
168: 433 - 444.
Roustan J P, Latche A, Fallot J. 1989. Stimulation of D aucus carota somatic embryogenesis by inhibitors of ethylene synthesis: Cobalt and nickel.
Plant Cell Rep, 8 (3) : 182 - 185.
Stange L, O sborne D J. 1988. Cell specificity in auxin2 and ethylene2induced‘supergrowth’in R iella helicophylla. Planta, 175: 341 - 347.
Stemberg N G, Chen C H, Ross J G. 1977. Regeneration of p lantlets from leaf cultures of L ilium longiflorum Thunb. Proc SD Acad Sci, 56:
152 - 158.
Stimart D P, A scher P D. 1981. Foliar emergence from bulblets of L ilium longiflorum as related to in vitro generation temperatures. J Am Soc
Hortic Sci, 106: 446 - 450.
Tanimoto S, Matsubara Y. 1995. Stimulating effect of sperm ine on bulblet formation in bulb2scale segments of L ilium longiflorum. Plant Cell Rep,
15: 297 - 300.
Thi L T, Pleschka E. 2005. Somatic embryogenesis of some D aucus species influenced by ABA. J App l Bot Food Qual, 79: 1 - 4.
Tribulato A, Remotti P C, Loffle H J M, van Tuyl J M. 1997. Somatic embryogenesis and p lant regeneration in L ilium longiflorum Thunb. Plant
Cell Rep, 17: 113 - 118.
W ang Zao2an. 1992. BotanicalM icrotechnique. Beijing: China Agriculture Press: 47. ( in Chinese)
王灶安. 1992. 植物显微技术. 北京 : 中国农业出版社 : 47.
W en Tao, L iang L i, Zeng Yang, Yu Xiao. 2007. Effect of different illum ination on callus of Polygonum cuspidatum. China Journal of Chinese
Materia Medica, 32 (13) : 1227 - 1280. ( in Chinese)
文 涛 , 梁 莉 , 曾 杨 , 喻 晓. 2007. 不同光照强度对虎杖愈伤组织的影响. 中国中药杂志 , 32 (13) : 1227 - 1280.
News
“第三届全国柿生产和科研进展研讨暨
中国园艺学会柿分会成立大会”在广西恭城召开
2008年 10月 17—20日 , 由 “中国园艺学会柿分会筹备委员会 ”主办 , 广西壮族自治区恭城瑶族自治县人民政
府承办 , 北京汇源集团桂林生态果业有限公司、恭城汇坤农品有限公司、桂林联发食品有限公司协办的 " 第三届全国
柿生产和科研进展研讨暨中国园艺学会柿分会成立大会 " 在桂林市恭城瑶族自治县隆重召开。来自京、闽、粤、桂、
冀、豫、鄂、湘、苏、赣、鲁、晋、陕、川、辽、津、云、浙等 18个省 (市、自治区 ) 柿生产、教学、科研、企业
和政府等部门的正式代表 200余人参加了本次会议。
本次会议主题为 “有机生产、多元化产品开发和严重病虫害防治 ”, 24个大会专题报告围绕国内外柿业发展现状
和趋势、安全生产技术体系创新、多元化产品开发、顶腐病和炭疽病的综合防治、冰冻灾后恢复等 5个专题进行了重
点研讨。自由讨论阶段研讨了目前我国柿产业发展新经验、特色柿资源调查及利用、柿相关病虫害防治、新型安全柿
果保鲜剂应用、柿果加工工艺及其重要功能成分开发等新理念。与会代表还重点就柿炭疽病发病机理及柿棉蚧有效防
治技术展开热烈讨论。与会代表发言踊跃、气氛热烈、会议取得了预期效果。
根据中国园艺学会第十届第 6次常务理事扩大会议的批复 , 本届会议还成立了 “中国园艺学会柿分会 ” (简称
“柿分会 ”)。与会代表讨论通过了 “柿分会 ”章程 , 选举出理事长、荣誉理事长各 1人、副理事长 6人、常务理事 21
人和理事 59人。华中农业大学园艺林学学院罗正荣教授当选为 “柿分会 ”首届理事长 , 西北农林科技大学王仁梓研
究员当选为 “柿分会 ”荣誉理事长。杨勇 (西北农林科技大学 )、龚榜初 (中国林业科学院亚热带林业研究所 )、冷
平 (中国农业大学 )、章镇教授 (南京农业大学 )、丁向阳 (河南省林业科学院 )、王文江 (河北农业大学 ) 当选为
副理事长。“柿分会 ”挂靠华中农业大学 , 秘书处设在该校园艺林学学院 , 张青林博士任秘书长。
中国园艺学会柿分会秘书处
2008年 10月 30日
2081