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Studies on Scavenging Activity Against DPPH Free Radical in Fresh Leaves from Some Common Subtropical Plants of Garden and Afforestion in China

中国亚热带常见园林植物清除DPPH自由基活性研究



全 文 :园  艺  学  报  2003 , 30 (5) : 563~567
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2003 - 04 - 11 ; 修回日期 : 2003 - 06 - 11
中国亚热带常见园林植物清除 DPPH自由基活性
研究
何云核1  胡丰林1  陆瑞利1  彭代启2  刘 卿2
(1 安徽农业大学森林利用学院 , 合肥 230036 ; 2 岳西县枯井园自然保护区 , 岳西 246600)
摘  要 : 采用二苯基苦基苯肼 (DPPH) 自由基酶标仪法 , 对中国亚热带常见的 83 科 164 种园林绿化植
物鲜叶的自由基清除活性进行了分析比较 , 结果表明 , 清除活性强 (清除 50 % DPPH 自由基时的样品浓度
IC50 < 01500 mg·mL - 1) 的有 25 种 , 清除活性中等 ( IC50 01501~11000 mg·mL - 1) 的 31 种 , 清除活性弱 ( IC50
> 11001 mg·mL - 1) 的 108 种。其中石榴、金缕梅、枫香、三角枫、 木、算盘子、山杜英、青冈栎、棣
棠、南天竹等 10 种植物鲜叶 DPPH自由基清除活性 IC50 < 01400 mg·mL - 1 , 其它种 IC50值介于 01401~141300
mg·mL - 1之间。讨论了其作为天然自由基清除剂或天然抗氧化剂产品新资源开发利用的前景。
关键词 : 亚热带园林绿化植物 ; 二苯基苦基苯肼 (DPPH) 自由基 ; 自由基清除活性
中图分类号 : S 79414   文献标识码 : A   文章编号 : 05132353X (2003) 0520563205
自由基清除剂具有广泛的生理活性 , 受到世界各国的重视。但植物中的自由基清除剂的研究还刚
刚起步 , 大部分植物中的自由基清除剂的作用尚不清楚〔1〕。二苯基苦基苯肼 (1 , 12diphenyl222picryhy2
drazyl , DPPH) 是一种稳定的自由基 , 在 517 nm 下有最大吸收峰 , 当样品中存在自由基清除物质时 ,
DPPH的吸收波长蓝移 , 在 517 nm 下吸收值减小 , 通过吸收值的变化可计算出样品清除自由基的活
性〔2〕。
作者从栽培或大量生长的园林绿化植物中精心挑选出 164 种具有一定代表性、园林应用价值较高
的常见植物 , 通过测定及分析 , 筛选出清除自由基活性强的植物 , 作为园林绿化植物选择时的参考 ,
为园林植物综合利用、产品开发提供资料。
1  材料与方法
6 月中下旬从合肥市及安徽舒城、岳西等县的野外采回成熟叶 , 立即称取剪碎的鲜叶 011 g 左右 ,
按 10μL·mg - 1加入 80 %甲醇震荡浸提 48 h , 取上清液稀释至 215、110、015、0125 mg·mL - 1备用。
自由基清除率的测定 : 采用新西兰 Ascent 酶标仪 , Sigma 公司生产 DPPH 试剂。于 96 孔酶标板中
加不同浓度的样品溶液 100μL 和 014 mg·mL - 1 DPPH 试液 100μL , 3 个重复。样品加入后震荡 30 s ,
37 ℃保温 20 min 后在 517 nm 波长下测定其吸光值 (Ap) , 同时测定不加 DPPH 的样品空白吸光值
(Ac) 和加 DPPH 但不加样品 (以 100μL 80 %甲醇代替样品) 的吸光值 (Amax) , 以 011、0105 mg·
mL - 1的抗坏血酸为阳性对照。自由基清除率 = {1 - 〔Ap - Ac〕/ Amax} ×100 % ; 然后根据样品浓度
和清除率关系计算 IC50的值 (清除 50 % DPPH自由基时的样品浓度)〔2 ,3〕。
2  结果与分析
211  植物系统学水平与 DPPH自由基清除活性分析
表 1 所列 83 科中 , 裸子植物、双子叶植物的自由基清除活性普遍高于单子叶植物。同科不同植
物之间无明显规律性 , 有的清除自由基活性普遍较强 (如金缕梅科、槭树科等) , 有的普遍较弱 (如
龙舌兰科、禾本科等) , 有的则强弱悬殊 (如无患子科等) 。
表 1  园林绿化植物自由基清除活性
Table 1  Free radical scavenging activity of the landscape garden and afforestion plants
植物 Species IC50(mg·mL - 1)
Ⅰ裸子植物 Gymnospermae
苏铁科 Cycadaceae 1 苏铁 Cycas revoluta 01956 ±01065
银杏科 Ginkgoaceae 2 银杏 Ginkgo biloba 11312 ±01101
南洋杉科 3 南洋杉 Araucaria cunninghamia 61907 ±01347
Araucariaceae
松科 Pinaceae 4 雪松 Cedrus deodara 11376 ±01115
5 白皮松 Pinus bungeana 11850 ±01320
6 日本五针松 P. parviflora 11124 ±01072
7 金钱松 Pseudolarix kaempferi 11719 ±01089
杉科 Taxodiaceae 8 日本金松 Sciadopitys verticillata 21415 ±01167
柏科 Cupressaceae 9 柏木 Cupressus funebris 01943 ±01022
10 刺柏 Juniperus formosana 01494 ±01021
11 圆柏 Sabina chinensis 21332 ±01203
12 龙柏 S . chinensis ‘Kaizuka’ 21379 ±01102
13 蜀桧 S . gaussenii 21578 ±01136
14 北美香柏 Thuja occidentalis 01663 ±01032
罗汉松科 15 罗汉松 01421 ±01014
Podocarpaceae  Podocarpus macrophyllus
三尖杉科 16 三尖杉 Cephalotaxus fortunei 21430 ±01057
Cephalotaxaceae
红豆杉科 Taxaceae 17 南方红豆杉 Taxus mairei 11106 ±01040
Ⅱ被子植物 Angiospermae
双子叶植物 Dicotyledoneae
胡桃科 18 青钱柳 Cyclocarya paliurus 21451 ±01100
Juglandaceae
杨柳科 Salicaceae 19 垂柳 Salix babylonica 21486 ±01095
榛科 Corylaceae 20 雷公鹅耳枥 01447 ±01012
 Carpinus viminea
壳斗科 Fagaceae 21 青冈栎 01389 ±01015
 Cyclobalanopsis glauca
榆科 Ulmaceae 22 榔榆 Ulmus parvifolia 71213 ±01390
桑科 Moraceae 23 榕树 Ficus microcarpa 31520 ±01160
紫茉莉科 24 叶子花 Bougainvillea spectabilis 41415 ±01250
Nyctaginaceae
木兰科 25 鹅掌楸 Liriodendron chinense 21522 ±01073
Magnoliaceae
26 白玉兰 Magnolia denudata 01769 ±01031
27 广玉兰 M. grandiflora 21690 ±01090
28 紫玉兰 M. liliflora 21382 ±01083
29 木莲 Manglietia fordiana 11304 ±01044
30 含笑 Michelia figo 01775 ±01021
五味子科 31 南五味子 11211 ±01037
Schisandraceae  Kadsura longipedunculata
八角科 Illiciaceae 32 莽草 Illicium lanceolatum 11326 ±01029
蜡梅科 33 夏蜡梅 Calycanthus chinensis 51035 ±01083
Calycanthaceae
樟科 Lauraceae 34 蜡梅 Chimonanthus praecox 21817 ±01073
35 樟树 Cinnamomum camphora 01928 ±01022
36 浙江桂 C. chejiangensis 31621 ±01120
37 豹皮樟 Litsea coreana var1sinensis 01498 ±01012
小檗科 38 紫叶小檗 21400 ±01095
Berberidaceae  Berberis thunbergii f . atropurpurea
植物 Species IC50(mg·mL - 1)
39 南天竹 Nandina domestica 01403 ±01013
大血藤科 40 大血藤 Sargentodoxa cuneata 01923 ±01024
Sargentodoxaceae
毛茛科 41 粗齿铁线莲 01897 ±01018
Ranunculaceae  Clematis argentilucida
山茶科 Theaceae 42 山茶 Camellia japonica 01409 ±01016
43 木荷 Schima superba 01667 ±01011
44 紫茎 Stewartia sinensis 21208 ±01053
金丝桃科 45 金丝桃 Hypericum monogynum 01920 ±01327
Hypericaceae
金缕梅科 46 蜡瓣花 Corylopsis sinensis 01934 ±01042
Hamamelidaceae 47 金缕梅 Hamamelis mollis 01292 ±01007
48 枫香 01312 ±01012
 Liquidambar formosana
49 木 Loropetalum chinense 01345 ±01017
山梅花科 50 白花重瓣溲疏 Deutzia crenata 21435 ±01081
Philadelphaceae  var. candidissima2plena
51 绢毛山梅花 01692 ±01034
 Philadelphus sericanthus
绣球花科 52 绣球花 Hydrangea macrophlla 71282 ±01219
Hydrangeaceae
蔷薇科 53 桃 Amygdalus persica 21407 ±01116
Rosaceae 54 榆叶梅 A . triloba 01709 ±01042
55 梅 Armeniaca mume 21296 ±01080
56 日本晚樱 Cerasus serrulata 11810 ±01106
 var. lannesiana
57 贴梗海棠 Chaenomeles speciosa 11574 ±01013
58 白绢梅 Exochorda racemosa 11183 ±01040
59 棣棠 Kerria japonica 01398 ±01014
60 垂丝海棠 Malus halliana 01786 ±01021
61 石楠 Photinia serrulata 21055 ±01039
62 紫叶李 Prunus cerasifera 01714 ±01031
 f . atropurpurea
63 火棘 Pyracantha fortuneana 11130 ±01027
64 木香花 Rosa banksiae 01443 ±01015
65 月季 R. chinensis 01457 ±01036
66 玫瑰 R. rugosa 01431 ±01027
67 光叶粉花绣线菊 Spiraea 21487 ±01051
 japonica var. fortunei
苏木科 68 云实 Caesalpinia decapetala 21335 ±01082
Caesalpincaceae
69 紫荆 Cercis chinensis 01421 ±01017
含羞草科 70 合欢 Albizia julibrissin 31123 ±01132
Mimosaceae
蝶形花科 Fabaceae 71 锦鸡儿 Caragana sinica 61318 ±01236
72 苏槐蓝 Indigofera carlesii 31414 ±01103
73 多花胡枝子 Lespedeza floribunda 31205 ±01130
74 红豆树 Ormosia hosiei 51252 ±01240
75 刺槐 Robinia pseudoacacia 21401 ±01055
76 槐树 Sophora japonica 81129 ±01292
77 紫藤 Wisteria sinensis 11618 ±01063
大戟科 78 重阳木 Bischofia polycarpa 01713 ±01032
Euphorbiaceae 79 变叶木 Codiaeum variegatum 71940 ±01242
80 一品红 Euphorbia pulcherrima 51193 ±01185
465                  园   艺   学   报                   30 卷
  续表 1
植物 Species IC50(mg·mL - 1)
81 算盘子 Glochidion puberum 01369 ±01001
芸香科 Rutaceae 82 香圆 Citrus wilsonii 21882 ±01098
苦木科 83 臭椿 Ailanthus altissima 21497 ±01046
Simaroubaceae
楝科 Meliaceae 84 楝树 Melia azedarach 31358 ±01127
漆树科 85 南酸枣 01461 ±01018
Anacardiaceae  Choerospondias axillaries
86 美国漆树 Rhus typhina 01694 ±01022
槭树科 Aceraceae 87 三角枫 Acer buergerianum 01326 ±01011
88 五角枫 A . mono 01580 ±01015
89 红枫 A . palmate 01929 ±01031
 ‘Atropurpureum’
无患子科 90 栾树 Koelreuteria paniculata 01483 ±01026
Sapindaceae
91 无患子 Sapindus mukorossi 13180 ±01336
七叶树科 92 七叶树 Aesculus chinensis 91775 ±01278
Hippocastanaceae
冬青科 93 冬青 Ilex purpurea 01682 ±01021
Aquifoliaceae
卫矛科 Celastraceae 94 卫矛 Euonymus alatus 11061 ±01037
95 冬青卫矛 E. japonicus 21923 ±01057
省沽油科 96 野鸦椿 Euscaphis japonica 01509 ±01015
Staphyleaceae 97 银鹊树 Tapiscia sinensis 01776 ±01023
黄杨科 Buxaceae 98 黄杨 Buxus sinica 31447 ±01081
鼠李科 Rhamnaceae 99 猫乳 Rhamnella franguloides 21665 ±01098
100 雀梅藤 Sageretia thea 01761 ±01024
葡萄科 Vitaceae 101 爬山虎 41168 ±01177
  Parthenocissus tricuspidata
杜英科 102 山杜英 Elaeocarpus 01379 ±01005
Elaeocarpaceae   sylvestris
椴树科 Tiliaceae 103 南京椴 Tilia miqueliana 21753 ±01075
木棉科 104 发财树 Pachira macrocarpa 21304 ±01040
Bombacaceae
锦葵科 Malvaceae 105 木芙蓉 Hibiscus mutabilis 41980 ±01229
106 木槿 H. syriacus 81946 ±01340
梧桐科 107 梧桐 Firmiana simplex 61347 ±01268
Sterculiaceae
瑞香科 108 结香 Edgeworthia chrysantha 21430 ±01144
Thymelaeaceae
胡颓子科 109 胡颓子 Elaeagnus pungens 31252 ±01070
Elaeagnaceae
大风子科 110 毛山桐子 Idesia polycarpa 81920 ±01374
Flacourtiaceae   var. vestita
柽柳科 111 柽柳 Tamarix chinensis 41315 ±01158
Tamaricaceae
千屈菜科 112 紫薇 Lagerstroemia indica 01412 ±01010
Lythraceae
石榴科 Punicaceae 113 石榴 Punica granatum 01283 ±01005
八角枫科 114 八角枫 Alangium chinense 01713 ±01023
Alangiaceae
紫树科 Nyssaceae 115 蓝果树 Nyssa sinensis 01598 ±01029
山茱萸科 116 洒金桃叶珊瑚 Aucuba 71655 ±01297
Cornaceae   japonica var. variegata
117 光皮树 Cornus wilsoniana 01476 ±01016
118 四照花 Dendrobenthamia 01494 ±01014
  japonica var. chinensis
五加科 Araliaceae 119 八角金盘 Fatsia japonica 61737 ±01213
120 常春藤 Hedera nepalensis 41119 ±01171
  var. sinensis
杜鹃花科 Ericaceae 121 杜鹃 Rhododendron simsii 01890 ±01035
植物 Species IC50(mg·mL - 1)
紫金牛科 122 紫金牛 Ardisia japonica 01422 ±01016
Myrsinaceae
柿树科 Ebenaceae 123 柿树 Diospyrus kaki 01711 ±01025
野茉莉科 124 野茉莉 Styrax japonicus 01716 ±01017
Styracaceae
山矾科 125 白檀 Symplocos paniculata 01904 ±01037
Symplocaceae
木犀科 Oleaceae 126 雪柳 Fontanesia fortunei 21440 ±01108
127 金钟花 Forsythia viridissima 21138 ±01116
128 迎春 Jasminum nudiflorum 11671 ±01051
129 茉莉花 J . sambac 41397 ±01177
130 女贞 Ligustrum lucidum 11543 ±01061
131 桂花 Osmanthus fragrans 31209 ±01129
132 紫丁香 Syringa oblata 21488 ±01088
茜草科 Rubiaceae 133 栀子花 Gardenia jasminoides 21255 ±01075
忍冬科 134 糯米条 Abelia chinensis 11174 ±01047
Caprifoliaceae 135 忍冬 Lonicera japonica 21482 ±01097
136 金银忍冬L. maackii 31265 ±01155
137 下江忍冬L. modesta 01916 ±01030
138 木绣球 Viburnum 41058 ±01196
  macrocephalum
139 法国冬青 01943 ±01020
  V . odoratissimum var. awabuki
夹竹桃科 140 夹竹桃 Nerium indicum 21750 ±01093
Apocynaceae 141 络石 Trachelospermum 12132 ±01411
  jasminoises
厚壳树科 142 福建茶 Ehretia microphylla 31009 ±01089
Ehretiaceae
马鞭草科 143 白棠子树 Callicarpa dichotoma 11547 ±01076
Verbenaceae
茄科 Solanaceae 144 枸杞 Lycium chinense 61433 ±01233
醉鱼草科 145 醉鱼草 Buddleja lindleyana 11712 ±01061
Buddlejaceae
玄参科 146 毛泡桐 Paulownia tomentosa 31209 ±01116
Scrophulariaceae
紫葳科 147 楸树 Catalpa bungei 21874 ±01094
Bignoniaceae
爵床科 Acanthaceae 148 黄脉爵床 Sanchezia nobilis 31966 ±01136
单子叶植物 Monocotyledoneae
百合科Liliaceae 149 新疆天门冬 Asparagus 31851 ±01137
  neglectus
竹芋科 Marantaceae 150 竹芋 Maranta arundinacea 14130 ±01470
龙舌兰科 151 朱蕉 Cordyline fruticosa 11155 ±01385
Agavaceae 152 龙血树 Dracaena draco 81968 ±01298
153 巴西铁 D. fragrans 91745 ±01366
154 富贵竹 D. sanderiana var. 12164 ±01400
  virescens
155 凤尾兰 Yucca gloriosa 13119 ±01422
禾本科 Gramineae 156 孝顺竹 Bambusa multiplex 41995 ±01189
157 罗汉竹 Phyllostachys aurea 41352 ±01192
158 斑竹 P. bambusoides f . 71656 ±01272
  lacrima2dae
159 紫竹 P. nigra 31910 ±01144
棕榈科 Palmae 160 鱼尾葵 Caryota ochlandra 51138 ±01218
161 散尾葵 Chrysalidocarpus 61379 ±01272
  lutescens
162 蒲葵 Livistona chinensis 21391 ±01096
163 棕竹 Rhapis humilis 11634 ±01047
164 棕榈 Trachycarpus fortunei 21492 ±01081
5655 期          何云核等 : 中国亚热带常见园林植物清除 DPPH自由基活性研究           
212  自由基清除活性植物筛选
根据清除自由基活性强弱可将表 1 中 164 种植物分为强 ( IC50 < 01500 mg·mL - 1) 、中 ( IC50 01501
~11000 mg·mL - 1) 、弱 ( IC50 > 11001 mg·mL - 1) 3 个等级 , 活性强的有石榴、金缕梅等 25 种 , 活性
中等的有苏铁、白玉兰等 31 种 , 活性弱的有竹芋、络石等 108 种。清除 DPPH自由基活性强 (即 IC50
数值较低) 的前 10 种植物依次为石榴 (113) 、金缕梅 (47) 、枫香 (48) 、三角枫 (87) 、 木 (49) 、
算盘子 (81) 、山杜英 (102) 、青冈栎 (21) 、棣棠 (59) 、南天竹 ( 39) 等 , 其相应的 IC50 均 <
0140 mg·mL - 1 , 这些植物具有开发出高效 DPPH自由基清除剂 , 即相应天然抗氧化剂或有关保健产品
的利用前景。
3  讨论
石榴、金缕梅等 10 种常见的园林绿化植物的叶片有较强的 DPPH 自由基清除能力 , 其开发利用
潜力涉及到清除自由基 (DPPH或其它) 的主要组分。有关这些植物中具有的可清除 DPPH 等自由基
的一些次生化合物 , 如黄酮类、生物碱、多酚类等的研究结果讨论于下。
311  石榴
叶含天竺葵甙 (pelargonin) 、山楂酸 (maslinic acid) 、木麻黄宁 (casuarinin) 、积雪草酸 (asiatic
acid) 、谷甾醇、乌素酸及生物碱丙烯基哌立定 (propenylpiperidine) 等化合物〔4 ,6〕, 其中木麻黄宁和天
竺葵甙是多酚类化合物。由于鞣质等多酚类多具较强的清除自由基活性〔7〕, 因此木麻黄宁和天竺葵甙
可能属于石榴叶中具清除自由基活性的组分。
312  南天竹
根、茎含多种生物碱 , 嫩叶含氢氰酸〔4〕。
313  山杜英
同科的卵形山杜英叶中含具抗肿瘤和爱滋病病毒活性的鞣质类物质杜英素 (elaeocarpusin)〔6〕, 该
组分是具较强的清除自由基活性的没食子酸类鞣质。山杜英叶富含鞣质〔4〕。
314  金缕梅、 木、枫香等金缕梅科植物
虽然同属植物有含多种黄酮类化合物的报道〔5〕, 但有关金缕梅叶的化学组分未见报道。 木花含
槲皮素 (quercetin) 、异槲皮甙 (isoquercitrin) 等〔4〕; 叶的化学组分尚无报道。枫香果实含路路通酸
(liquidambaric acid) 、三叶豆甙 (trifolin) 等化合物〔6〕; 叶含桂皮酸酯、桂皮酸、桂皮醇、龙脑等〔4〕。
315  三角枫等槭树科植物
本科植物富含鞣质〔4〕; 红枫叶含牡荆素 (vitexin)〔4〕; 毛果槭叶中富含杜英素等物质〔6〕。
316  青冈栎等壳斗科植物
含多种单宁类物质 , 如 : 狭叶栎鞣质 ( stenophynin) 、木麻黄宁 (casuarinin) 、蒙栎鞣宁 (quercus
mongolica) 和柯黎勒鞣花酸 (chebulagic acid) 等〔6〕, 其较高的清除自由基活性显然与所含的单宁有
关。
317  棣棠等蔷薇科植物
叶含堆心菊素 (helenien) 、环氧叶黄素 (eloxanthin) 、柳穿鱼甙 (pectolinaroside) 、维生素 C等〔4〕。
318  算盘子等植物
树叶均含鞣质〔4〕, 为清除自由基的主要组分。上述植物清除自由基活性组分主要为维生素类、胡
萝卜素、多酚类、鞣质、黄酮及类黄酮、甙类、生物碱及含氮杂环类、萜类等化合物 , 黄酮类主要用
于治疗心血管疾病 , 鞣质具有收敛、活血等作用 , 维生素类用途广泛。其它 154 种植物清除自由基活
性组分有待进一步研究。
665                  园   艺   学   报                   30 卷
参考文献 :
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from Some Common Subtropical Plants of Garden and Afforestion in China
He Yunhe1 , Hu Fenglin1 , Lu Ruili1 , Peng Daiqi2 , and Liu Qing2
(1 Faculty of Forest Utilization , Anhui Agricultural University , Hefei 230036 , China ; 2 Kujingyuan Natural Reservoir of Yuexi County ,
Yuexi 246600 , China)
Abstract : A DPPH2Microplate assay was made to determine the free radical scavenging activity in leaves of
subtropical plants of garden and afforestion belonging to 83 Families 164 Species. The results showed it can be di2
vided into three types of high (sample concentration of scavenging 50 percent of DPPH free radical IC50 < 01500 mg
·mL - 1) , medium ( IC5001501 - 11000 mg·mL - 1) and low ( IC50 > 11001 mg·mL - 1) free radical scavenging
activity. There are 25 with high activity , 31 with medium , 108 with low. Among them , Pomegranate , Chinese
Witchhazel , Beautiful Sweetgum , Buerger Maple , Chinese Loropetalum , Puberulous Glochidion , Sylvestral E2
laeocarpus , Blue Japanese Oak , Japanese Kerria and Common Nandina have the highest activity. Their IC50 are
01283、01292、01312、01326、01345、01369、01379、01389、01398、01403 mg ·mL- 1 , respectively.
Others IC50 is between 01401~141300 mg·mL - 1 . It is suggested that these species can be used a new resource of
free radical scavenger and antioxidant products.
Key words : Subtropical plants of garden and afforestion ; 1 , 12diphenyl222picryhydrazyl (DPPH) ; Free
radical scavenging activity
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7655 期          何云核等 : 中国亚热带常见园林植物清除 DPPH自由基活性研究