全 文 ：园
艺
学
报
2002, 29 ( 5) : 486~ 487
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期: 2001- 11- 26; 修回日期: 2002- 04- 23
* 通讯作者
莴苣 红帆 品种下胚轴愈伤组织诱导与植株再生
高
辉
苟晓松
邓运涛
李旭锋*
(四川大学生命科学学院, 成都 610064)
摘
要: 莴苣下胚轴愈伤组织诱导时, MS+ 6
BA 0. 5 mg/ L+ 2, 4
D 1 mg/ L+ NAA 0. 1 mg/ L 效果最好,
出愈率达94% ; 愈伤组织分化为芽时, MS+ 6
BA 1. 0 mg / L+ NAA 0. 05 mg/ L 分化频率最高, 达 100% ; 再
生苗在 1/ 2MS+ NAA 0. 5 mg/ L 中诱导生根成为完整植株。
关键词: 莴苣; 下胚轴; 愈伤组织; 植株再生
中图分类号: S 642. 2

文献标识码: A

文章编号: 0513
353X ( 2002) 05
0486
02
1 目的、材料与方法
关于叶用莴苣, 已有以子叶、叶片为外植体进行离体培养得到再生植株的报道!1∀, 但未见用下胚
轴作外植体的报道。
本试验以莴苣品种 红帆 ( Lactuca sativa ) !2∀为材料, 将种子用 75% 酒精处理 30 s, 用0. 1%
HgCl2溶液浸泡10 min, 无菌水冲洗 3~ 4 次, 置于MS 固体培养基上在培养室内培养 10 d, 取下胚轴
长3~ 5 mm为外植体。
愈伤组织诱导培养基为MS+ 3%蔗糖+ 0. 8%琼脂, 附加各种不同浓度的激素配比 (表 1) ; 分化
培养基为 MS+ 3%蔗糖+ 0. 8 %琼脂, 附加各种激素配比 (表 2) ; 生根培养基为 1/ 2 MS+ 3%蔗糖+
0. 8 %琼脂+ 0. 5 mg/ L NAA。培养基经1. 45 kg/ cm2压力、121 # 湿热灭菌 15 min。
培养室温度为 ( 25 ∃ 1) # 。愈伤组织诱导为黑暗培养, 分化和生根培养为每日光照 14 h, 光照强
度为 2000 lx。
2
结果分析与讨论
2. 1
愈伤组织的诱导
莴苣下胚轴脱分化能力较强, 培养 15 d后均
有愈伤组织出现 (表 1) , 25 d后愈伤组织大量增
殖成团 (见插页 1图版, 1)。试验表明, 在 MS+
6
BA 0. 5mg/ L+ 2, 4
D 1 mg/L+ NAA 0. 1 mg/ L的
培养基中愈伤组织的产量最高, 出愈率达 94% ,
其余组合的效果均不及。
2. 2
器官分化
将莴苣下胚轴所有脱分化形成的愈伤组织切
成5 mm 见方的小块转入 MS 附加 6
BA、NAA的
分化培养基中, 培养 5d 后愈伤组织有一定的增
殖; 15 d后愈伤组织上出现很多绿点, 其中有部
分绿点发育成芽; 23 d后芽发育成叶片。表 2数
据为 20 d的统计结果, 其中以MS+ 6
BA 1. 0 mg/
表 1
植物激素对莴苣下胚轴愈伤组织诱导的影响
Table 1
Effect of auxin on inducing callus from
hypocotyl of lettuce
2, 4
D
( mg/L)
6
BA
( mg/L)
NAA
(mg/ L)
接种下胚
轴数
No. of
hypocotyls
cultured
出愈数
No. of callus
formed
诱导率
Induct ion
frequency( %)
0 0 0 50 3 6
0 0 0. 1 50 2 4
0 0 0. 2 50 2 4
0 0. 5 0 50 44 88
0 1. 0 0 50 32 64
0 0. 5 0. 1 50 45 90
1. 0 0. 5 0. 1 50 47 94
1. 0 1. 0 0. 2 50 30 60
2. 0 0. 5 0. 1 50 27 54
2. 0 1. 0 0. 2 50 26 52
L+ NAA 0. 05mg/ L 的培养基中的分化频率最高,
达100% (表 2, 插页 1 图版, 2、3) , 其余的配
比组合也都有不同程度的分化, 有再生苗出现。
可见该莴苣品种的分化能力很强。
2. 3
生根培养
将分化的再生莴苣植株转入到生根培养基中,
在1/ 2MS+ NAA 0. 5 mg/ L 中 7 d后有健壮的根长
出, 成为完整的再生植株。
在试验中我们观察到, NAA在对莴苣下胚轴
的愈伤诱导中作用不大, 6
BA低浓度较高浓度对
莴苣下胚轴的分化起到了更重要的作用, 但高浓
度的2, 4
D ( 2. 0mg/ L) 却抑制 6
BA对莴苣下胚
表 2
植物激素对莴苣愈伤组织分化出芽的影响
Table 2
Effect of auxin on differentiation of adventitious
buds from callus derived from hypocotyl of lettuce
6
BA
( mg/L)
NAA
( mg/L)
接种愈伤数
No. of callus
cultured
出芽数
No. of bud
分化率
Different ia

tion rate( % )
1. 0 0. 05 50 50 100
1. 0 0. 1 50 47 94
1. 0 0. 2 50 34 68
1. 5 0. 05 50 20 40
1. 5 0. 1 50 39 78
1. 5 0. 2 50 28 56
2. 0 0. 05 50 32 64
2. 0 0. 1 50 38 76
2. 0 0. 2 50 31 62
轴的愈伤诱导 (表 1)。然而, 低浓度的NAA 对莴苣的芽分化起到了重要作用。随着 NAA浓度的上
升, 下胚轴的分化呈下降趋势, 而 6
BA浓度的上升使下胚轴的再分化率下降 (表 2)。而且我们观察
到, 从每块愈伤组织上最多可分化出 5个芽。据刘凡等!1∀报道, 用MS+ 6
BA 0. 5 mg/L+ NAA 0. 1mg/
L 培养莴苣子叶和真叶的切片, 真叶不定芽发生频率为 87% , 但子叶的愈伤组织数量较真叶多。与下
胚轴相比, 莴苣子叶和真叶诱导产生的愈伤组织和再生苗频率要低一些。
参考文献:
1
刘
凡, 李
岩, 曹鸣庆. 高频率生菜植株再生及转化体系的建立. 华北农学报, 1996, 11 ( 1) : 109~ 113
2
中国科学院植物研究所主编. 中国高等植物图鉴. 北京: 科学出版社, 1980. 689
In Vitro Plant Regeneration from Callus Induced from Hypocotyl of Lettuce
( Lactuca sativa)
Gao Hui, Gou Xiaosong, Deng Yuntao, and Li Xufeng
( College of Life Science, Sichuan University , Chengdu 610064, China)
Abstract: Taking MS、1/ 2MS as basic media, adopting 6
BA、NAA、and 2, 4
D of different concentration
composition to conduct t issue culture and plant regeneration from hypocotyl of lettuce, the result showed that medi

um of MS+ 6
BA 0. 5 mg/L+ 2, 4
D 1mg/L+ NAA 0. 1mg/ L , was the best to induce callus from hypocotyl, the
rate of callus is 94%; and the differentiat ion medium, MS+ 6
BA 1. 0mg/ L + NAA 0. 05mg/ L, was the best to
induce buds from callus and had a 100% plant regenerat ion rate; and it was for rooting media, 1/ 2MS+ NAA 0. 5
mg/ L, to induce root ing from seedlings.
Key words: Lettuce ( Lactuca sativa) ; Hypocotyl; Callus tissue; Plant regeneration
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4875 期









高
辉等: 莴苣 红帆 品种下胚轴愈伤组织诱导与植株再生