全 文 ：武汉植物学研究 2001, 19 (6) : 449～ 452
J ourna l of W uhan B otan ica l Resea rch
Cam ellia n itid iss im a 与C. p ete lotii 之间的关系研究
——来自 nrD NA ITS 的证据Ξ
唐绍清1　钟　扬2　施苏华3　张宏达3
(1. 广西师范大学生物系, 桂林　541004; 2. 复旦大学生物多样性研究所, 上海　200433;
3. 中山大学生命科学学院, 广州　510275)
摘　要: 通过对Cam ellia n itid issim a Ch i 和Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 的核糖体DNA
IT S 区序列进行分析, 结果表明两者的 IT S 区序列存在一定的差异, Cam ellia n itid issim a 与
Cam ellia tung h inensis, Cam ellia lim onia 和 Cam ellia p ing g uoensis 的亲缘关系比与 Cam ellia
petelo tii 的关系更近, 说明两者是相互独立的种。
关键词: Cam ellia n itid issim a; Cam ellia p etelotii; n rDNA IT S
中图分类号: Q 949. 758. 4　文献标识码: A 　文章编号: 10002470X (2001) 0620449204
Rela tion sh ip between Cam ellia n itid iss im a Ch i and C.
p etelotii (M err. ) Sea ly based on nrD NA ITS
TAN G Shao2Q ing1, ZHON G Yang2, SH I Su2H ua3, CHAN G H ung2T a3
(1. D ep artm an t of B iology , Guang x i N orm a l U n iversity , Gu ilin　541004, Ch ina;
2. M in istry of E d uca tion K ey L abora tory of B iod iversity S cience and E colog ica l E ng ineering
and Institu te of B iod iversity S cience, F ud an U niversity , Shanghai　200433, Ch ina;
3. S chool of L if e S ciences, Z hong shan U n iversity , Guangzhou　510275, Ch ina)
Abstract: T he sequences of n rDNA IT S from Cam ellia n itid issim a Ch i and
Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy w ere analyzed in th is study. T here are som e
difference betw een the sequences of these tw o species. Cam ellia n itid issim a Ch i
w as clo ser to Cam ellia tung h inensis, Cam ellia lim on ia and Cam ellia p ing g uoen2
sis than to Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy. It suggested Cam ellia n itid issim a
Ch i and Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy are dist inct species.
Key words: Cam ellia n itid issim a; Cam ellia p etelotii; n rDNA IT S
金花茶 (Cam ellia n itid issim a Ch i) 属山茶科 (T heaceae) 山茶属 (Cam ellia) , 分布于中
国广西南部和越南北部, 因其花冠黄色而在园艺上具有极其重要的价值, 被列为国家一级Ξ 收稿日期: 2001204215, 修回日期: 2001211226。基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (39860011)和广西自然科学基金匹配资助项目。
　作者简介: 唐绍清 (1965- ) , 男, 博士, 从事植物学教学和研究工作。
重点保护植物。胡先　[1 ]将其定名为 T heop sis ch ry san tha H u, 后被日本学者津山尚[2 ]订正
为Cam ellia ch ry san tha (H u) T uyam a。1992 年, 张宏达和叶创兴[3 ]经考证发现金花茶的
正确学名是戚经文[4 ]早已发表的Cam ellia n itid issim a Ch i。因此金花茶的学名被进一步订
正为Cam ellia n itid issim a Ch i。
Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy分布于越南北部, 1924年由M errill[5 ]发表为 T hea p e2
telotii M err. , 后经Sealy [6 ]改为Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy, 1993年闵天禄等[7 ]认为金
花茶的学名是Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy, 因为金花茶C. n itid issim a (C. ch ry san tha )
是金花茶组 (Sect. Ch ry san tha Chang) 的模式, 而Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy是古茶
组的模式, 因此把金花茶的学名订正为Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy成了取消金花茶
组的重要证据。但张宏达和叶创兴不同意闵天禄等的观点[8 11 ]。1998年出版的中国植物
志[12 ]采用的金花茶学名是Cam ellia n itid issim a Ch i, 但仍有不同的观点[13 ]。
核糖体DNA 中的内转录间隔区 ( IT S) 序列是在序列水平上探讨科内属间和属下种
间关系十分有效的方法[14 ] , 本研究测定了 Cam ellia n itid issim a Ch i 和 Cam ellia p etelotii
(M err. ) Sealy 的 IT S 序列, 并进行了分析, 目的在于探讨 Cam ellia n itid issim a Ch i 与
Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 之间的关系。
表 1　样品来源、凭证标本和序列号
T able 1　A ccessions of Cam ellia samp led
种类
N am e
凭证标本
V oucher
来源
O rigin
Genbank 收录号
Genbank
accession no.
Cam ellia f lav id a T ang S. Q. 129 Cultivated in GBG3 A F315480
C. g rand is T ang S. Q. 107 Cultivated in GBG A F315488
C. lim on ia T ang S. Q. 102 Cultivated in GBG A F315479
C. n itid issim a T ang S. Q. 101 Cultivated in GBG A F315470
C. p etelotii T ran N inh 951037 T am D as, V ietnam A F327514
C. p ing g uoensis T ang S. Q. 116 Cultivated in GBG A F315475
C. p ing g uoensis
　var. term ina lis T ang S. Q. 112 Cultivated in GBG A F315476
C. tung h inensis T ang S. Q. 115 Cultivated in GBG A F315474
C. sinensis T ang S. Q. 132 Cultivated in GBG A F315492
　　3 GBG: 桂林植物园, 广西。　GBG: Guilin Bo tan ic Garden, Guilin, Guangx i.1　材料与方法1. 1　材料本研究所用植物来源见表 1, 除Cam ellia n i2tid issim a Ch i和Cam elliap etelotii (M err. ) Sealy外, 我们还测定了 6 个金花茶的近缘种或变种用于比较研究, 属于另外一个组的茶Cam ellia sinen2
sis 用作外类群。Cam ellia
p etelotii (M err. ) Sealy 的凭证标本藏于中山大学植物标本室 (SYS) , 其余各种的凭证标
本藏于广西师范大学生物系植物标本室 (GXNU )。
1. 2　方法
采用CTAB 法[15 ]提取植物总DNA , 总DNA 用玻璃珠法进行纯化。n rDNA IT S 区用
引物 IT S4 (5’- TCCTCCGCT TA T T GA TA TA GC- 3’) 和 IT S5 (5’- GGAA GTAAAA 2
GTCGTAA CAA GG- 3’) , 按程序: 94℃ 预变性3 m in; 接着94℃ 1 m in, 50℃ 2 m in, 72℃
2 m in, 25个循环; 最后72℃保温10 m in进行扩增。PCR 反应产物经Q IA qu in纯化试剂纯
化, 用自动测序仪进行测序, 引物是N 18L 18 (5’- AA GTCGTAA CAA GGT T TC- 3’)。
采用C lu sta l X 程序进行对位排列[16 ] , 用 PAU P 4. 0 软件包进行统计分析和分支分
析[17 ]。采用最大简约法[18 ]获得最大简约树, 邻接法[19 ]用于构建邻接树, 都以 Cam ellia
sinensis 作为外类群。
054 武 汉 植 物 学 研 究　　　　　　　　　　　　　　　　　第 19 卷　
2　结果与讨论
Cam ellia n itid issim a Ch i 和Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 的核糖体DNA IT S 区
序列见图 1, 两者的序列有 29 个碱基的差异, 其中有 20 个碱基差异是由于碱基的插入或
图 1　Cam ellia n itid iss im a Chi和Cam ellia p etelotii (M err. ) Sea ly 的 nrD NA ITS 序列
F ig. 1　nrDNA IT S sequences of Cam ellia n itid issim a Ch i and Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy
A. 2 棵最简约树的严格一致树 (步长 65, C I=
01892, R I= 01740, RC = 01661) ; B. 邻接树. 带3
号的为外类群
A sterisk (3 ) indicates the ou tgroup used to roo t
the trees. N um bers above branches rep resen t the
boo tstrap values (% ) fo r the clades based on 1000
rep licates. (A ) T he Strict Consensus tree of the
two mo st parsimonious trees. ( 65 step s, C I =
01892, R I= 01740 and RC= 01661). (B)N eighbo r2
jo in ing tree
图 2　应用 2 种方法产生的系统树
F ig. 2　Phylogenetic trees generated w ith nrDNA
IT S sequences and two tree2m ak ing m ethods
154　第 6 期　 　唐绍清等: Cam ellia n itid issim a 与C. p etelotii 之间的关系研究——来自 nrDNA IT S 的证据
缺失造成的, 这说明它们明显是不同的种。最大简约分析得到了 2 棵最大简约树, 它们的
严格一致树及用邻接法构建的邻接树见图 2:A ,B。分析结果表明, Cam ellia n itid issim a 与
Cam ellia tung h inensis, Cam ellia lim on ia 和 Cam ellia p ing g uoensis 的亲缘关系比与
Cam ellia p etelotii 更近, 分析结果进一步说明了Cam ellia n itid issim a Ch i 与Cam ellia p e2
telotii (M err. ) Sealy 是相互独立的种。
本研究的关键材料 Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 由越南国家大学的 T ran N inh
教授提供, 采自 Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 模式标本的原产地越南的 T am D as,
T ran N inh 与N ao to sh i H akoda [20 ]对Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 作了详细的描述。
我们对 T ran N inh 951037 号标本上的花进行了解剖, 花的特征记述如下: 苞片与花萼分
化不明显, 边缘及内面有白毛, 花瓣 14 片, 外部花瓣的花瓣背面有白毛, 雄蕊多数, 形成花
丝管, 子房无毛, 花柱 3 条。这与 Sealy [6 ]描述的Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 的特征
相符, 说明标本的鉴定是正确的。
致谢: 越南国家大学的 T ran N inh 教授提供Cam ellia p etelotii (M err. ) Sealy 材料; 缪汝槐教授和叶
创兴教授帮助解剖Cam ellia p etelotii 的花和鉴定标本, 特此致谢。
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