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A PRELIMINARY STUDY ON MAKING PLANT CHROMOSOMAL SPECIMENS USING PEPPERMINT OIL COMPOUND AS PRETREATMENT AGENT

用复方薄荷油预处理制作植物染色体标本的初步研究



全 文 :武汉植物学研究   , ! ∀# ∃ % & ∋ ( & &
) ∗ + ,− . / ∗0 1 妇2. − 3 ∗ 4. − 56 . / 78 9‘. ,6 2
用复方薄荷油预处理制作植物
染色体标本的初步研究 ‘
张长顺
∀云南教育学院生物系 昆明 ! : ∋ & # #∃
提 要 报道了用复方薄荷油预处理制作植物染色体标本的方法 。共试验了 # 种植物 , 效果
良好 , 方法简便 , 有一定应用价值 。
关键词 复方薄荷油 , 染色体处理 , 染色体
植物染色体压片法和去壁低渗火焰干燥法 , 是 目前制作植物染色体标本的主要方
法〔‘〕。前几年庄南生等〔& , #〕用风油精预处理水稻 、绿豆根尖制作染色体标本获得成功 。我们
受此法的启示试验了一种新的方法 , 即用复方薄荷油预处理制作植物染色体标本 , 现将结
果报告如下 。
 材料和方法
 ;  材料
大部分材料用种子根或田间植株根尖 。 少部分材料用茎尖 、幼芽和幼叶。
; & 药品配制
∀/∃ 复方薄荷油 ∀即医用复方薄荷油滴鼻液 ∃ % 取薄荷脑和樟脑精各   磨碎 , 溶于
 ∋ ∋ < = 液体石蜡中 。
∀&∃ 处理液 % 将 # ( ! ; : 拌= 复方薄荷油与  < = 蒸馏水∀# ( ! ; : 拌= > < = ∃混合摇匀即
可 。 此液应在使用前配制 , 不宜保存 。
; # 制片操作程序
∀∃ 材料的预处理 % 剪取根尖置于 &# ( &! ℃的处理液中 , 处理 ∋ (  &∋ < 5− 。 在处理
过程中摇动材料多次 。 处理液的量与根尖数 目的比例大体是 #∋ 一 :∋ 个根尖用 ( : < =
处理液 。 处理液的浓度 , 处理时间详见表  。
收稿 日 %   ? 一∋≅ 一 : , 修回 日 %  ? 一 于 &? 。 作者 % 男 , : 岁 , 副教授 , 现从事遗传学教学及植物细胞遗传学
研究工作 。
; 云南教育学院科研经费资助课题 。
第 # 期 张长顺 % 用复方薄荷油预处理制作植物染色体标本的初步研究 & 
表  用复方薄荷油处理不同植物所需要的浓度和时间 ,
Α . Β/8  Α 28 8 ∗ − 8 8 − 4, . 45∗ − . −Χ 4 5< 8 Δ∗ , 4, 8 . 45− Ε Χ 5ΔΔ8 , 8 − 4 Φ /. − 49 Β Γ + 9 5鳍 Φ 8 Φ Φ 8 , < 5− 4 ∋  8 ∗ < Φ ∗ + − Χ
植物名称
Η/. − 4 − . < 8 染色体致 药品浓度伽= > < = ∃Ι 2, ∗ < ∗ 9 ∗ − /8 − + < Β 8 , Ι ∗ − 8 8 − 4 , . 45∗ − 处理时间∀< 5
− ∃
Α , 8 . 4 < 8 − 4 4 5,− 8 染色时间∀< 5
− ∃
ϑ 4 . 5−5 − Ε 45< 8
葱 Κ //5+ < 方94+ /Χ9 + −4
韭菜 Κ/5 + < 4翻兄,∗ 9+ <
荞麦 Λ. Ε 州净,Μ < 二以胡扭<
大豆 Ν尔 5, 。 < 。二
花生 Κ , ‘肪 丙护 。Ε 口8.
绿豆 尸几‘韶以。 . “,8 。
豌豆; 尸行“ < 9. “+ <
蚕豆 Ο 56 5. Δ. 加
水稻 Π卿加 9. 45 二
普通小麦 Α滚58 + < . 89 4( <
玉米 Θ心口 功口夕,
向日葵 月以泛口 , 4 2+9 . , , + +9
翠菊 Ι. 价血户2。 。从− ∗ 95
大丽菊 肠2/ 5. Η5 − . 4.
南瓜 Ι以“瓜4. < 仍6 2. 匆
丝瓜 工“力临撰 /5 ∗ Χ ,5 6.
大麻 Ι. ∗ − .赫 9∗ 45刃.
芝麻 ϑ89 . 二+二( 扭 /.云南松 Φ 5, +9 Γ+− , . 二8− 9 59薄荷 几‘”忿五。 彻户亡火. /Γ Ρ
紫茉莉 材‘, 口械: 0. /.Η口
侧柏 尸才口勺沁考口Χ 公 ( 4. /59芋 Ι时配口95. 89 ∗ /8 二4.
牵牛花 Η 2 . , Β介5 , , % 
白菜 3 ,. 9 56 . 弓 Η8泛5, % 8 , % : :
菠菜ϑΗ 5”.6 5. ∗ /8 Σ + 6 8.
野迎春 ) . 9 < 5, % + < < 8 9似5
辣椒 肠户956 + < . , % , % + +<
夜香树 。“,+ < −昭+ 。, +二
篮按 Τ+6. /Γ Η4 + 9 Ε/ ∗ Β + /+ 9
垂柳 ϑ. /5 二 Β. 妙俪 56 .
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大丽菊 、夜香树用茎尖 ς野迎春 、垂柳用幼芽 ς蓝按用幼叶 ς 其他材料用根尖 。
ϑ 48 < . Η8 Ρ 8 . − Β8 + 9 8Χ Δ∗ , Φ , 8Φ . , 5− Ε 82,∗ < ∗ 9 ∗ < 8 9 ∗ Δ /玉Θ2/5. Η5 , 忿− . 4. . − Χ Ι触9 4侧< 凡∗64 +门+ < ς 9Φ , ∗ + 4 Δ∗ , ). 9 Ω
< 5 , + < < 8 9 ”, . − Χ ϑ . /行 Β .勿∋ ”56 . ς Γ ∗ + − Ε /8 . Δ Δ∗ , Τ + 6. /ΓΗ 4 + 9  砧 ; /+ 9 , . − Χ , ∗ ∗ 4 4 5Φ Δ∗ , ∗ 4 28 , 9 ;
∀& ∃ 固定 % 根尖用蒸馏水冲洗 # ( ≅ 次后 , 用 甲醇 % 冰醋酸 ∀# % /∃ 固定液于 ≅ ℃或室温
下固定 : (  : 2 。
∀#∃ 涂片 % 取 ( # 个根尖置于干净载玻片上 , 加一滴固定液 , 先用解剖针撕碎根尖 ,
然后用镊子细心捣碎弓除去大块组织残渣 , 再加上一滴固定液 , 于酒精灯上火焰干燥 。
∀≅ ∃ 染色 % 气干片用 : Ξ的 Ν 58 < 9. 染色液 ∀Φ Ψ ? ; ∋∃ 染色至合适 , 染色时间详见表  。
以茎尖 、幼芽和幼叶作材料的制片操作程序同上 。
∀:∃ 封片 % 制片经镜检后用树胶封片。
武 汉 植 物 学 研 究 第 ! 卷
& 结果
∀∃ 我们共试验了 # 种植物 ∀详见表  ∃ , 分属于 & 个科 #∋ 个属 , 有草本植物 , 也有
木本植物 ς除用根尖作材料外 ,还用茎尖 、幼芽和幼叶 , 结果均获成功 。得到的图象清晰 , 染
色体分散好 ,形态正常∀图版 Ζ % 一  #∃ 。
∀&∃ 复方薄荷油是治疗鼻炎的常用药 , 用作预处理液 , 使用方便 , 配制简单 , 到医院 、
诊所均可找到 , 并且价格便宜 , 因此 , 一般实验室都可以开展此项工作 。
∀# ∃ 经初步试验 , 复方薄荷油有聚集分裂细胞中期分裂相的作用 。 我们以葱 、蚕豆和
豌豆的根尖作材料 , 用浓度为 : ; ! 拼= > < = 的处理液非离体处理材料 &∋ < 5− , 得到的根尖
细胞中期分裂相的比率都高于对照 , 葱分别是 #! ; “Ξ和 & ; #& 写 ς蚕豆的是 # ; ? Ξ与
 ; ! Ξ ς豌豆的是 ≅& ; ∋ Ξ与 &≅ ; : Ξ 。 用 4 测定法测定 # 种材料 , 二者差异均非常显
著 〔‘, 。
综上所述 , 用复方薄荷油预处理制作植物染色体标本有一定适用性 , 可作为制作植物
染色体标本的一种方法 。当然此法还存在一些间题 , 如得到的染色体标本溢痕结构还不够
清楚 , 用于大染色体植物效果不太好 , 有待对方法进一步改进 。
参 考 文 献
李愚学 , 张教方 ; 植物染色体研究技术 ; 哈尔滨 % 东北林业大学出版社 ,   ; # 一:#
庄南生 , 黎京度 ; 水稻染色体标本制备的风油精法 ; 植物学报 ,   & , # ≅ ∀≅∃ % #的( # 。
庄南生 , 黎京度 ; 用风油精预处理制备植物染色体标本的新方法 ; 生物学杂志 ,  # , & % &! ( &?
童一中 ; 作物育种常用的统计分析法 ; 上海 % 上海科学技术出版社 ,   ?  ; : (  ∋
Κ Η 7 Τ = Ζ[ Ζ∴ Κ 7 ] ϑΑ Μ ⊥ ] _ ∴ [Κ ⎯ Ζ∴ Ν Η= Κ ∴ Α
Ι Ψ 7 _ [ _ ϑ_ [Κ = ϑΗΤ Ι Ζ[ Τ ∴ ϑ Μ ϑΖ∴ Ν ΗΤ ΗΗΤ 7 [ Ζ∴ Α
_ Ζ= Ι_ [Η_ Μ ∴ ⊥ Κ ϑ Η7 Τ Α 7 Τ Κ Α [ Τ ∴ Α Κ Ν Τ ∴ Α
Θ 2. − Ε Ι2. − Ε 92 + −
∀肠户. ,4 < 8 , % 4 ∗Δ 3 5∗/ ∗盯 , ]+ , − . 二 ΤΧ ‘. 45∗ − Ι ∗ //8 Ε 8 ⎯ + − < 5− Ε ! :∋ & &# ∃
Κ Β 94, . 8 4 Α 28 < 8 42∗ Χ ∗ Δ + 9 5− Ε 428 Φ 8 Φ Φ 8 , < 5− 4 ∋  8 ∗ < Φ ∗ + − Χ . 9 Φ , 8 4 , 8 . 4< 8 − 4 . Ε 8 − 4 4 ∗
< . Σ 8 Η/. − 4 8 2, ∗ < ∗ 9 ∗ < . / 9Η8 8 5< 8 − 9 1 . 9 9 4 + Χ 58 Χ ; Α 28 #  9Η 8 8 58 9 1 8 , 8 48 9 48 Χ Β Γ 42 59
< 8 42∗ Χ ; Α 28 , 8 9 + /4 92 ∗ 1 8Χ 42. 4 428 Φ/. − 4 8 2, ∗ < ∗ 9 ∗ < 8 9 Χ 59 Φ 8 , 9 8 Χ 1 8 // . − Χ 42 8 5< . Ε 8 9 ∗ Δ
428 8 2, ∗ < ∗ 9 ∗ < 8 1 8 , 8 8 /8 . , . − Χ Χ 59 45− 8 4 ; Κ − Χ 42 59 < 8 42 ∗ Χ 2 . 9 42 8 Δ∗ //∗ 1 5− Ε 82. , . 8 4 8 , 59 Ω
4 58 9 % Ζ4 : 8 . 9Γ 4∗ ∗ Φ 8 , . 4 8 . − Χ 428 Φ , 58 8 ∗ Δ 428 82 8< 58 ./ , 8 . Ε 8 − 4 9 : 8 28 . Φ 8 , ; : ∋ 42 8 < 8 42∗ Χ
: Η , . 8 4 58 . /;
⎯ 8 Γ 1 ∗ , Χ 9 Η8 ΗΗ 8 , < 5− 4 ∋  8 ∗ < Η∗ + − Χ , Α ,8 . 4 < 8 − 4 ∗ Δ 82 , ∗ < ∗ 9 ∗ < 8 , Ι 2, ∗ < ∗ 9 ∗ < 8