全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 15 期 2014 年 8 月
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• 化学成分 •
青江藤中黄烷类化学成分的研究
胡贤卿 1, 2,刘庆鑫 2,李慧梁 2,韩 伟 1*
1. 华东理工大学药学院,上海 200237
2. 第二军医大学药学院,上海 200433
摘 要:目的 研究产自云南的青江藤 Celastrus hindsii 茎枝的化学成分。方法 采用正、反相硅胶,Sephadex LH-20,薄
层制备色谱等色谱法进行分离纯化,应用波谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果 从青江藤茎枝 80%乙醇提取物中
分离得到 4 个黄烷类化合物,分别鉴定为 (2S)-7, 3′-二甲氧基-6, 4′-二羟基黄烷(1)、6, 7, 3′-三甲氧基-4′-羟基黄烷(2)、6, 7-
二甲氧基-3′, 4′-二羟基黄烷(3)、(2S)-7, 3′-二甲氧基-4′-羟基黄烷(4)。结论 化合物 1~3 为未见文献报道的新化合物,并
首次获得 X-ray 数据,分别命名为青江藤烷 A、青江藤烷 B、青江藤烷 C;其中化合物 2 和 3 分别为 1 对对映异构体,化合
物 4 为首次从该植物中分离得到。
关键词:青江藤;(2S)-7, 3′-二甲氧基-6, 4′-二羟基黄烷;6, 7, 3′-三甲氧基-4′-羟基黄烷;6, 7-二甲氧基-3′, 4′-二羟基黄烷;(2S)-7,
3′-二甲氧基-4′-羟基黄烷;青江藤烷 A;青江藤烷 B;青江藤烷 C;对映异构体
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)15 - 2132 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.15.002
Flavane constituents from branch of Celastrus hindsii
HU Xian-qing1, 2, LIU Qing-xin2, LI Hui-liang2, HAN Wei1
1. School of Pharmacy, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China
2. School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract: Objective To investigate the chemical constituents in the branch of Cleastrus hindsii from Yunnan province. Methods
The compounds were separated and purified by column chromatography with silica gel, RP C18, Sephadex LH-20 columns, and
preparative TLC. Their structures were elucidated by the basis of spectroscopic methods and chemical evidences. Results Four
flavanes were isolated from 80% ethanol extract from the branch of C. hindsii and identified as (2S)-7, 3′-dimethoxy-6, 4′-
dihydroxyflavan (1), 6, 7, 3′-trimethoxy-4′-hydroxyflavan (2), 6, 7-dimethoxy-3′, 4′-dihydroxyflavan (3), and (2S)-7, 3′-
dimethoxy-4′-hydroxyflavan (4), respectively. Conclusion Compounds 1—3 are new flavanes with X-ray data, named hindsiflavane
A—C, and compounds 2 and 3 are a couple of enantiomers, respectively. Compound 4 is isolated from this plant for the first time.
Key words: Cleastrus hindsii Benth.; (2S)-7, 3′-dimethoxy-6, 4′-dihydroxyflavan; 6, 7, 3′-trimethoxy-4′-hydroxyflavan; 6, 7-dimethoxy-
3′, 4′-dihydroxyflavan; (2S)-7, 3′- dimethoxy-4′-hydroxyflavan; hindsiflavane A; hindsiflavane B; hindsiflavane C; enantiomers
青江藤 Celastrus hindsii Benth. 是卫矛科
(Celastracea)南蛇藤属 Celastrus L. 植物,又名夜
茶藤、黄果藤。青江藤的根可作为通经药和利尿药
使用[1]。前期研究中,国内外的研究者已从该植物
中分离得到了三萜[2-3]、倍半萜[4-5]、生物碱[6]等成分,
因 β-二氢沉香呋喃型倍半萜类成分具有杀虫活性,
相关研究主要集中于此。为寻找更多的活性成分,
丰富化合物的类型,本实验对产自云南的青江藤茎
枝的 80%乙醇提取物进行系统化学成分研究,从中
分离得到 4 个黄烷类化合物,分别鉴定为(2S)-7, 3′-
二甲氧基-6, 4′-二羟基黄烷[(2S)-7, 3′-dimethoxy-6,
4′-dihydroxyflavan,1]、6, 7, 3′-三甲氧基-4′-羟基黄
烷(6, 7, 3′-trimethoxy-4′- hydroxyflavan,2)、6, 7-
二甲氧基-3′, 4′-二羟基黄烷(6, 7-dimethoxy-3′, 4′-
收稿日期:2014-05-19
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81102335)
作者简介:胡贤卿(1987—),女,博士在读,研究方向为中药化学成分的分离和鉴定。Tel: 13816608846 E-mail: huxianqing888@163.com
*通信作者 韩 伟,博士,教授,博士生导师,主要从事中药有效成分提取、纯化等的工艺研究。Tel: (021)64253705 E-mail: whan@ecust.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 15 期 2014 年 8 月
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dihydroxyflavan,3)、(2S)-7, 3′-二甲氧基-4′-羟基黄
烷 [(2S)-7, 3′-dimethoxy-4′-hydroxyflavan,4],化合
物 1~3 为新的黄烷类化合物,并首次获得 X-ray 数
据,分别命名为青江藤烷 A、青江藤烷 B、青江藤
烷 C。其中化合物 2 和 3 分别为一对对映异构体,
对映异构体在天然产物中十分少见,这也是首次从
该植物中分离得到黄烷类的对映异构体,化合物 4
为首次从该种植物中分离得到。结构见图 1。
OH3CO
H3CO
R
OH
1 R = OH
4 R = H
2 R = OCH3
3 R = OH
OH3CO
R
OCH3
OH
2
3
45
6
7
9
10
8 1
2
3 4
5
6
图 1 化合物 1~4 的结构
Fig. 1 Structures of compounds 1—4
1 仪器与材料
柱色谱硅胶(200~300 目)和薄层色谱硅胶
GF254(烟台江友硅胶开发有限公司);Sephadex
LH-20(40~70 μm)填料(美国 GE 公司),ODS
填料(日本 YMC 公司);薄层色谱制备板(烟台江
友硅胶开发有限公司);AVANCE—400、500 MHz
核磁共振波谱仪(瑞士 Bruker 公司);Agilent
LC/MSD 和 Agilent Q-TOF 高分辨质谱仪(美国
Agilent 公司);Bruker FTIR Vector 22 红外光谱仪
(瑞士 Bruker 公司);Shimadzu UV—2550 分光光度
计(日本 Shimadzu 公司);Perkin-Elmer 341 数字旋
光仪(美国 Perkin-Elmer 公司);Buchi Sepacore C—
615 中压制备色谱系统(瑞士 Buchi 公司)。
实验用青江藤药材于2010年12月采自云南昆
明,由第二军医大学张汉明教授鉴定为南蛇藤属植
物青江藤Celastrus hindsii Benth. 的茎枝,标本
(2010120822)保存于第二军医大学药学院天然药
化教研室。
2 提取与分离
青江藤药材茎枝 5.0 kg 经 80%乙醇热回流提取
4 次,每次 3 h,滤过,合并提取液,减压浓缩,得
浸膏 300 g,以适量水混悬后分别用三氯甲烷和醋酸
乙酯萃取,减压回收溶剂,得三氯甲烷萃取物 80 g。
将三氯甲烷萃取物经常压硅胶柱色谱分离,石油醚-
醋酸乙酯(50∶1、30∶1、10∶1、5∶1、1∶1)梯
度洗脱,得到 8 个部分 Fr. 1~8。将 Fr. 4(8.8 g)
再次经过硅胶柱色谱,石油醚-醋酸乙酯(10∶1)
洗脱,得到 4 个部分 Fr. 4-1~4-4。其中 Fr. 4-2(200
mg)依次经过 Sephadex LH-20(甲醇)及薄层色谱
制备板(石油醚-醋酸乙酯 10∶1)分离,得到化合
物 1(20 mg)、4(6 mg);Fr. 6(7.8 g)经过反相
中压制备色谱,40%~100%甲醇水溶液梯度洗脱,
得到 3 个部分 Fr. 6-1~6-3。将 Fr. 6-2(30 mg)经
过 Sephadex LH-20(甲醇)分离纯化,得到化合物
2(6 mg);将 Fr. 6-3(100 mg)依次经过 Sephadex
LH-20(甲醇)及薄层色谱制备板(石油醚-醋酸乙
酯 8∶1)分离纯化,得到化合物 3(30 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:无色晶体(甲醇)。[α]25D −1.83°(c 0.30,
甲醇); MeOHmaxUV λ (nm): 286 (3.49); KBrmaxIR ν (cm−1):
3 396, 2 916, 1 633, 1 512, 1 452, 1 269, 1 122, 1 034,
827。HR-ESI-MS 给出分子离子峰 m/z: 325.107 6
[M+Na]+(计算值 C17H18NaO5 325.104 6),确定相
对分子质量为 302,分子式为 C17H18O5,不饱和度
为 9。红外光谱中 3 396 cm−1 处有强吸收,表明其
结构中存在羟基。根据 1H-NMR、13C-NMR(表 1)
和 DEPT 谱,可以判断该化合物结构中含有 2 个甲
氧基、2 个亚甲基、6 个次甲基和 7 个季碳,结合分
子式推测结构中还有 2 个羟基取代。综合分析并结
合 1H-1H COSY 和 HSQC 谱,可确定该化合物含有
2 个苯环,从 1H-NMR 谱可以判断,其中 1 个是四
取代的,有 2 个处于对位的苯环质子 δH 6.39 (1H, s)
和 6.48 (1H, s);另 1 个是三取代的,形成 ABX 耦
合系统 [δH 6.96 (1H, d, J = 1.7 Hz), 6.75 (1H, d, J =
8.2 Hz), 6.81 (1H, dd, J = 8.2, 1.7 Hz)],综合以上信
息且 1H-NMR 谱中 δH 4.81 (1H, dd, J = 10.0, 2.2
Hz),推测该化合物是 1 个黄烷结构。在 1H-1H COSY
谱中(图 2),有 H-2/H2-3/H2-4,H-5′/H-6′的相关信
号,得到 2 个片段。在 HMBC 谱中(图 2),可以
看到 H-5 (δH 6.48) 分别与 C-7 (δC 146.6) 和 C-9 (δC
147.4) 相关,H-8 (δH 6.66) 分别与C-6 (δC 140.0) 和
C-10 (δC 112.6) 相关,甲氧基质子 (δH 3.68) 与 C-7
(δC 146.6) 相关,至此,A 环的结构已确定;同样
地,根据图 2 中标出的 2′,3′及 6′位质子的 HMBC
相关信号确定 B 环的结构,甲氧基质子 (δH 3.77)
与 C-3′ (δC 147.5) 相关,表明该甲氧基取代于 3′位,
至此确定了 B 环的结构;另外,HMBC 谱中 H2-4 (δH
2.80) 分别与 C-5 (δC 115.4), C-9 (δC 147.4) 和 C-2
(δC 76.9) 相关;H-2 (δH 4.81) 分别与 C-2′ (δC 110.5)
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表 1 化合物 1~3 的 1H-NMR 和 13C-NMR 谱数据
Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of compounds 1—3
1 a 2 b 3 c 碳位
δH δC δH δC δH δC
2 4.81 (1H, dd, J = 10.0, 2.2 Hz) 76.9 4.89 (1H, dd, J = 10.2, 2.4 Hz) 77.8 4.80 (1H, dd, J = 10.1, 2.3 Hz) 79.1
3 2.00 (2H, m) 29.5 2.11 (2H, m) 30.1 1.96~2.07 (2H, m) 31.3
4 2.58~2.80 (2H, m) 24.2 2.73~2.94 (2H, m) 24.9 2.64~2.84 (2H, m) 25.7
5 6.48 (1H, s) 115.4 6.59 (1H, s) 112.1 6.63 (1H, s) 114.7
6 140.0 143.0 144.5
7 146.6 148.2 149.9
8 6.39 (1H, s) 101.1 6.50 (1H, s) 101.0 6.42 (1H, s) 102.5
9 147.4 148.9 150.8
10 112.6 112.1 114.4
1′ 132.8 133.6 135.1
2′ 6.96 (1H, d, J = 1.7 Hz) 110.5 6.96 (1H, d, J = 1.0 Hz) 108.6 6.85 (1H, d, J = 2.0 Hz) 114.5
3′ 147.5 146.5 146.4
4′ 146.1 145.3 146.1
5′ 6.75 (1H, d, J = 8.2 Hz) 115.1 6.90 (1H, d, J = 8.0 Hz) 114.2 6.76 (1H, d, J = 8.0 Hz) 116.3
6′ 6.81 (1H, dd, J = 8.2, 1.7 Hz) 118.8 6.92 (1H, dd, J = 8.0, 1.0 Hz) 119.2 6.72 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz) 118.9
6-OCH3 3.83 (3H, s) 56.4 3.74 (3H, s) 57.4
7-OCH3 3.68 (3H, s) 55.6 3.81 (3H, s) 55.8 3.75 (3H, s) 56.5
3′-OCH3 3.77 (3H, s) 55.6 3.90 (3H, s) 55.8
a1H-NMR 谱 400 MHz,13C-NMR 谱 100 MHz,溶剂 DMSO-d6;b1H-NMR 谱 500 MHz,13C-NMR 谱 125 MHz,溶剂 CDCl3;c1H-NMR 谱 500 MHz,
13C-NMR 谱 125 MHz,溶剂 CD3OD
a 400 and 100 MHz for 1H- and 13C-NMR in DMSO-d6; b 500 and 125 MHz for 1H- and 13C-NMR in CDCl3; c 500 and 125 MHz for 1H- and 13C-NMR in CD3OD
图 2 化合物 1~3 关键的 1H-1H COSY ( ) 和 HMBC ( ) 相关信号
Fig. 2 Key 1H-1H COSY ( ) and HMBC ( ) correlations of compounds 1—3
和 C-6′ (δC 118.8) 相关;H2-3 (δH 4.81) 与 C-1′ (δC
132.8) 相关;由此确定了该黄烷的平面结构。化合
物的立体构型通过 X-ray 单晶衍射(图 3)确定,
即化合物 1 鉴定为 (2S)-7, 3′-二甲氧基-6, 4′-二羟基
黄烷,是一新化合物,命名为青江藤烷 A。单晶数
据已提交至 CCDC 数据库,CCDC 号为 933083。
化合物 2:无色晶体(甲醇)。 MeOHmaxUV λ (nm): 240
(3.75); KBrmaxIR ν (cm−1): 3 437, 2 962, 1 614, 1 512, 1 463,
1 271, 1 120, 1 014, 854。HR-ESI-MS 给出分子离子
峰 m/z: 317.138 9 [M+H]+(计算值 C18H21O5
317.138 4),确定相对分子质量为 316,分子式为
C18H20O5,不饱和度为 9。IR 中 3 437 cm−1 处也有
羟基特征强吸收。根据 1H-NMR、13C-NMR(表 1)
和 DEPT 谱中的信息,可以判断该化合物结构中含
有 3 个甲氧基、2 个亚甲基、6 个次甲基和 7 个季碳。
与化合物 1 的核磁数据相比较,两者非常相似,综
合分析 1H-1H COSY 和 HMBC 谱,根据部分关键的
相关信息(图 2),确定该化合物基本骨架与化合物
1 相同。在 HMBC 谱中,可以看到 3 个甲氧基质子
(δH 3.83, 3.81, 3.90) 分别与 C-6 (δC 143.0), C-7 (δC
148.2) 和 C-3′ (δC 146.5) 相关,确定 3 个甲氧基分
别取代于 6 位、7 位和 3′位。至此,化合物 2 的平
面结构已确定,与 1 的区别在 6 位上的取代基不同。
该化合物的立体构型通过 X-ray 单晶衍射分析(图
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图 3 化合物 1~3 的 X-ray 单晶衍射图
Fig. 3 Single X-ray diffraction of compounds 1—3
3)可知,其本身是 1 对对映异构体,2 位上存在 2
种构型,经检索,其平面结构为新化合物,确定为
6, 7, 3′-三甲氧基-4′-羟基黄烷,命名为青江藤烷 B。
单晶数据已提交至 CCDC 数据库,CCDC 号为
933307。
化合物 3:无色晶体(甲醇)。 MeOHmaxUV λ (nm):
278 (3.58); KBrmaxIR ν (cm−1): 3 418, 2 948, 1 629, 1 514,
1 458, 1 273, 1 124, 1 028, 838。HR-ESI-MS 给出分
子离子峰 m/z: 325.103 8 [M+ Na]+ (计算值
C17H18NaO5 325.104 6),确定相对分子质量为 302,
分子式为 C17H18O5,计算出不饱和度为 9。根据
1H-NMR、13C-NMR(表 1)和 DEPT 谱,判断该化
合物结构中含有 2 个甲氧基、2 个亚甲基、6 个次
甲基和 7 个季碳。与化合物 1 的核磁数据相比较可
以确定两者结构的骨架相同,综合分析 1H-1H
COSY 和 HMBC 谱中的相关信号(图 2),确定该
化合物也是 1 个黄烷类的结构。在 HMBC 谱中,2
个甲氧基质子 (δH 3.74, 3.75) 分别与 C-6 (δC
144.5) 和 C-7 (δC 149.9) 相关,确定 2 个甲氧基分
别取代于 6 位和 7 位。至此,化合物 3 的平面结构
已确定。化合物 3 的立体构型经 X-单晶衍射分析
(图 3),发现其也是 1 对对映异构体,情况与化合
物 2 类似,2 位上存在 2 种构型,经检索,其平面
结构为新化合物,将其确定为 6, 7-二甲氧基-3′, 4′-
二羟基黄烷,命名为青江藤烷 C。单晶数据已提交
至 CCDC 数据库,CCDC 号为 978634。
化合物 4:无色晶体(甲醇)。ESI-MS m/z: 309
[M+Na]+,推测相对分子质量为 286。1H-NMR (400
MHz, CDCl3) δ: 7.01 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5), 6.98
(1H, d, J = 1.7 Hz, H-2′), 6.95 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′),
6.93 (1H, dd, J = 8.0, 1.7 Hz, H-6′), 6.52 (1H, dd, J =
8.2, 1.8 Hz, H-6), 6.50 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-8), 4.97
(1H, dd, J = 10.4, 2.2 Hz, H-2), 3.92 (3H, s, 7-OCH3),
3.78 (3H, s, 3′-OCH3), 2.77~2.94 (2H, m, H-4), 2.13
(2H, m, H-3);13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ: 78.0
(C-2), 30.1 (C-3), 24.6 (C-4), 129.9 (C-5), 107.4 (C-6),
159.0 (C-7), 101.5 (C-8), 155.8 (C-9), 113.8 (C-10),
133.5 (C-1′), 108.6 (C-2′), 146.6 (C-3′), 145.3 (C-4′),
114.2 (C-5′), 119.2 (C-6′), 55.2 (7-OCH3), 55.8
(3′-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[7],故鉴定
化合物 4 为 (2S)-7, 3′-二甲氧基-4′-羟基黄烷。
参考文献
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