全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 23期 2015年 12月

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去甲斑蝥素脂质微球注射液 Beagle犬连续静脉给药 90 d毒动学研究
林 霞 1, 2，唐 星 3，徐宇虹 1，张 宇 3，何海冰 3，杨子毅 2*
1. 上海交通大学药学院，上海 200240
2. 江南大学药学院，江苏 无锡 214122
3. 沈阳药科大学药学院，辽宁 沈阳 110016
摘 要：目的 对比研究去甲斑蝥素脂质微球注射液（NCTD-LM）和去甲斑蝥酸钠注射液（NCTD-I）连续 90 d静脉滴注给予
Beagle 犬的毒动学特征，并研究毒性剂量下 2 种制剂在 Beagle 犬体内的蓄积情况。方法 应用超高效液相色谱-质谱联用
（UPLC-MS/MS）法测定各组 Beagle犬在首次给药、连续给药 44和 90 d的血药浓度，并计算毒动学参数。结果 分别静脉滴
注给予 Beagle犬 0.8、1.6和 3.2 mg/kg NCTD-LM后，首次给药后 AUC0-t分别为（2.22±0.53）、（4.77±1.13）和（13.4±3.6）
h·mg/L，t1/2分别为（1.37±0.18）、（1.64±0.42）和（1.98±0.25）h；90 d后其 AUC0-t分别为（3.58±0.95）、（11.4±2.0）
和（23.5±3.9）h·mg/L，t1/2分别为（3.87±1.90）、（5.75±3.29）和（5.84±2.45）h；2.4 mg/kg静脉滴注给予 Beagle犬 NCTD-I
后，首次给药和 90 d后其血浆AUC0-t分别为（9.07±2.09）和（14.1±3.0）h·mg/L，t1/2分别为（2.84±1.34）和（3.53±1.26）h。
但各组动物在停药 15和 30 d后，血药浓度均低于定量下限。结论 NCTD-LM在 Beagle犬体内 0.8～3.2 mg/kg剂量内呈现
非线性药动学特征。2种制剂连续静脉给予 Beagle犬 90 d，血药浓度、AUC0-t和 t1/2均随给药时间延长而显著增加，但无长
期蓄积作用。
关键词：去甲斑蝥素脂质微球注射液；去甲斑蝥酸钠注射液；Beagle犬；毒代动力学；非线性药动学；UPLC-MS/MS
中图分类号：R285.61 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)23 - 3526 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.23.014
Toxicokinetics of norcantharidin lipid microsphere for injection in Beagle’s dog
following 90 d repeated iv administration
LIN Xia1, 2, TANG Xing3, XU Yu-hong1, ZHANG Yu3, HE Hai-bing3, YANG Zi-yi2
1. School of Pharmacy, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China
2. School of Pharmacy, Jiangnan University, Wuxi 214122, China
3. School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China
Abstract: Objective To evaluate the toxicokinetics and in vivo accumulation of norcantharidin lipid microsphere for injection
(NCTD-LM) in Beagle’s dogs following 90 d repeated iv administration by comparing with sodium demethylcantharidate injection
(NCTD-I). Methods An ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrum method was employed to determine
the NCTD in plasma of Beagle’s dog after 1, 44, and 90 d repeated iv administration. The toxicokinetic parameters were calculated
from the plasma concentration. Results After the first iv administration of 0.8, 1.6, and 3.2 mg/kg NCTD-LM to Beagle’s dog, the
AUC0-t were (2.22 ± 0.53), (4.77 ± 1.13), and (13.43 ± 3.64) h·mg/L, respectively, while the t1/2 were (1.37 ± 0.18), (1.64 ± 0.42), and
(1.98 ± 0.25) h, respectively. After the 90 d repeated iv administration of 0.8, 1.6 and 3.2 mg/kg NCTD-LM to Beagle’s dog, the AUC0-t
were (3.58 ± 0.95), (11.4 ± 2.0), and (23.5 ± 3.9) h·mg/L, respectively, while the t1/2 were (3.87 ± 1.90), (5.75 ± 3.29), and (5.84 ±
2.45) h, respectively. For NCTD-I, the AUC0-t were (9.07 ± 2.09) and (14.1 ± 3.0) h·mg/L respectively after 1 and 90 d repeated iv
administration, while the t1/2 were (2.84 ± 1.34) and (3.53 ± 1.26) h. 15 and 30 d after the end of administration, the concentration of
NCTD in plasma of Beagle’s dog in each group were all dropped below the lowest limit of quantification (LLOQ). Conclusion
NCTD displays a nonlinear elimination at the dose range of 0.8—3.2 mg/kg after iv administration of NCTD-LM to Beagle’s dog.
Over the 90 d repeated iv administration period, the plasma concentration levels, AUC0-t, and t1/2 for both NCTD-LM and NCTD-I

收稿日期：2015-04-07
基金项目：国家科技重大专项重大新药创制：辽宁省国家重大新药创制综合平台（2013ZX09301305）
作者简介：林 霞（1986—），女，博士后在读，从事药物新剂型研究与开发。Tel: 13609896755 E-mail: 13840485982@163.com
*通信作者 杨子毅，男，副教授，从事药物新剂型研究与开发。Tel: (0510)85197769 E-mail: ziggyyang@163.com
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are increased with time increasing. However, no accumulation of NCTD is observed for the both formulations.
Key words: NCTD-LM; NCTD-I; Beagle’s dog; toxicokinetics; nonlinear pharmacokinetics; UPLC-MS/MS

去甲斑蝥素（norcantharidin，NCTD）是将传
统抗肿瘤中药斑蝥素去除 1、2位甲基得到，与斑蝥
素相比，其泌尿系统刺激作用大大降低，同时更为
显著升高白细胞水平[1]。NCTD 多途径、多靶点的
作用于肿瘤细胞，如抑制肿瘤细胞增殖[2-3]、诱导凋
亡[4-5]、抗侵袭转移[6]、抑制血管生成[7]等，临床用
于包括肝癌、食道癌、肠癌、胰腺癌等多种消化系
统癌症，以及难治性或复发多发性骨髓瘤，尤其适
用于原发性肝癌的治疗。NCTD本身难溶于水，以
其钠盐形式——去甲斑蝥素酸钠注射液（NCTD-I）
应用于临床。NCTD-I pH值在 8.0～10.0内，与人体
血液 pH 值（7.35～7.45）相差较大，在临床使用过
程中，存在较为严重的血管刺激性，易引发静脉炎
症；同时药物本身具有较强刺激性，亦可引起血管
痉挛，加重静脉炎，患者顺应性极差。其次，该药物
具有一定的心脏毒性和肾毒性，治疗窗较窄，临床推
荐剂量为 10～30 mg/d，而部分患者静脉给药超过 20
mg/d，即出现恶心、呕吐、头晕等不良反应。以上缺
点在一定程度上限制了该药物的临床应用。
研究发现，将脂质微球作为 NCTD的给药载体，
制备成去甲斑蝥素脂质微球注射液（NCTD-LM），
可有效将 80%以上的药物包载于脂质核心中，从而
消除血管刺激性[8-9]。NCTD-LM 与 NCTD-I 相比，
同等剂量下抑制肿瘤生长作用相当，药物毒性降低，
如小鼠 iv给药半数致死量（LD50）可达 NCTD-I的
1.5～2.0倍；降低大鼠连续 28 d iv给药的心脏毒性
和肾毒性[10]。文献报道，NCTD-LM与NCTD-I单次
iv给予大鼠后，在 1.35～4.05 mg/kg剂量内呈现非线
性药动学，4.05 mg/kg剂量组（相当于 1.5倍临床拟
用量 30 mg/d）药物代谢速度显著降低，出现大鼠死
亡[10]，提示应密切关注NCTD高剂量给药时的药动学
特征。目前尚无NCTD类制剂长期连续给药后动物体
内的药动学特征报道，亟需研究。
本研究采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-
MS/MS）法，旨在对比研究 NCTD-LM高、中、低
剂量（3.2、1.6、0.8 mg/kg）和 NCTD-I（2.4 mg/kg）
连续 90 d静脉滴注给予 Beagle 犬的毒动学特征，
考察NCTD不同剂型在Beagle犬体内的全身暴露量
与各毒性剂量及时间的关系，考察毒性剂量下的药
物蓄积情况，为后续临床试验提供参考。
1 材料
1.1 仪器
Waters 超高效液相-串联质谱仪，配有 Waters
ACQUITYTM 超高效液相（自动进样器，二元溶剂
管理器）、Waters 三重四级杆检测器（TQD）、
Masslynx色谱工作站，美国Waters公司；Barnstead
EASY pure®ⅡRF/UV超纯水机，美国 Lowa公司；
IKA Vortex Genius 3旋涡混合器，德国 IKA公司；
LG10-2.4A 高速离心机，北京医用离心机厂；
GL-20B 高速冷冻离心机，上海菲恰尔分析仪器有
限公司；系列精密移液器，德国 Eppendorf 公司；
CentriVap浓缩仪，美国 Labconco公司。
1.2 药品与试剂
NCTD-LM（批号 20110119，规格 10 mg、5 mL，
质量分数 105.4%，包封率 83.9%）、NCTD-I（批号
1102181，规格 10 mg、5 mL，质量分数 99.5%），
沈阳药科大学药剂研究室自制；NCTD对照品（批
号 20080607，质量分数 99.7%），沈阳药科大学药
剂研究室自制；苯海拉明（内标，IS，批号 101129），
沈阳药科大学药物分析研究室赠送。甲醇、乙腈，
色谱纯，美国 Fisher 公司；甲酸，色谱纯，美国
DIKMA 公司；醋酸乙酯，分析纯，天津博迪化工
有限公司。
1.3 实验动物
Beagle 犬，32 只，雌雄各半，6～8 月龄，体质
量 9.20～12.61 kg，购于广东省高要市康达实验动物
科技有限公司，动物生产许可证号：SCXK（粤）
2009-0009。单笼饲养，环境温度 17.9～27.9 ℃、相
对湿度 50.2%～82.6%，换气次数 8～10 次/h，12 h
照明/12 h黑暗交替，工作照度 150～300 lx，动物照
度 100～200 lx，自由进食进水。
2 方法
2.1 溶液制备
2.1.1 受试药物溶液的制备 NCTD-LM：准确吸取
相应容积的药物，用注射器吸取所需容积的 5%葡
萄糖注射液，定容至一定体积，配制成质量浓度为
0.32、0.16、0.08 mg/mL的药液；NCTD-I：用 5%
葡萄糖注射液稀释配制成质量浓度为 0.24 mg/mL
的药液。现用现配。
2.1.2 NCTD 对照品溶液的制备 精密称取 NCTD
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对照品 25 mg置 50 mL量瓶中，加甲醇适量溶解并
稀释摇匀，制得 500 µg/mL 的储备液。精密量取适
量上述储备液，加甲醇稀释制成 NCTD 质量浓度分
别为 0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、100、200、
500 µg/mL的系列对照品溶液，−20 ℃保存备用。
2.1.3 IS溶液的制备 精密称取苯海拉明 2.5 mg置
100 mL量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇
匀，制得 25 µg/mL的 IS储备溶液。精密量取 1 mL
置 50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密
量取 1 mL置 10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇
匀得 0.05 μg/mL 的 IS溶液，−20 ℃保存备用。
2.2 动物分组及给药方法
检疫结束后，将 Beagle犬按体质量和性别随机
分为 4组，NCTD-I组（2.4 mg/kg，经过预试验判
断为 Beagle 犬的最大耐受剂量；以临床拟用量 30
mg/d计，相当于临床用量的 3倍），NCTD-LM低、
中、高剂量（0.8、1.6、3.2 mg/kg，分别相当于 NCTD-I
剂量的 0.33、0.67和 1.33倍；相当于临床拟用量的
1、2和 4倍）组，每组 8只，雌雄各半。各组 Beagle
犬后肢匀速静脉滴注方式给药，给药体积 10
mL/kg，滴速 2.0～2.5 mL/min；每天给药 1次，第
1周连续给药 7 d，从第 2周开始，每周给药 6 d，
连续给药 13周（90 d）。
2.3 生物样品采集
于给药的第 1、44、90天的给药前（0时），给
药开始后 5、15、30 min及给药结束时间点（1 h），
给药结束后 5、15、30 min和 1、2、3、4、6、8、
12、24 h（分别相当于给药开始后 1.083、1.25、1.5、
2、3、4、5、7、9、13和 25 h）于前肢小隐静脉采
集静脉血 2.0 mL；在实验第 105、120天单次采集
静脉血 2.0 mL。加入 12 μL 肝素钠抗凝，2 000 r/min
离心 15 min，取血浆置于−20 ℃保存。
2.4 血浆样品处理方法
取血浆样品 200 μL置于 7 mL离心管中，加入
0.05 μg/mL IS溶液、甲醇和 1 mol/L盐酸水溶液各
20 μL，涡旋 1 min，加醋酸乙酯 3 mL，涡旋震荡
10 min，4 000 r/min离心 10 min后，取上清液 2.0
mL，50 ℃减压挥干，用 100 μL甲醇复溶，涡旋震
荡 5 min，12 000 r/min离心 10 min，取上清液 5 μL
进样测定。
2.5 NCTD测定方法[10]
2.5.1 质谱条件 离子源为电喷雾离子（ESI）源，
正离子扫描，毛细管电压 1.6 kV，二级锥孔电压 3.0
V，RF电压 0.5 V，离子源温度 100 ℃，脱溶剂气
温度 400 ℃，脱溶剂气体积流量 500 L/h，锥孔反
吹气体积流量 50 L/h，扫描方式为多重反应监测
（MRM），用于定量分析的离子反应分别为：NCTD
m/z 169.02→123.10，一级锥孔电压 40 V，碰撞能量
10 eV；IS m/z 256.20→166.90，一级锥孔电压 30 V，
碰撞能量 15 eV；扫描时间 0.2 s。
2.5.2 色谱条件 ACQUITY UPLC® BEH C18色谱
柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm），流动相为 0.1%甲
酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脱程序：0～1.0 min，
80%→20% A；1.0～2.2 min，20% A；2.2～2.5 min，
20%→80% A；2.5～3.0 min，80% A。体积流量
0.2 mL/min，柱温 35 ℃，进样量 5 μL。
3 结果
3.1 方法学考察
3.1.1 专属性考察结果 按“2.4”项方法处理空白
血浆（不加 IS 溶液）、空白血浆加入 NCTD 对照品
溶液和 IS溶液，以及静脉滴注NCTD-LM和NCTD-I
结束后 5 min血浆样品加入 IS溶液，按“2.5”项方
法进样检测，色谱图见图 1。NCTD 和 IS 的保留时
间分别约为 0.86、1.47 min。结果表明，空白血浆中




20.02
0.83
0.13 0.650.56
0.24
1.03
1.32
2.12
1.47 1.72 1.92 2.29 2.812.492.52 2.8










2













1.13
0.84
0.76
0.650.29
0.88
1.29
1.55
1.75
1.97 2.07 2.552.37 2.59 2.92




1.03



69 0
2







图 1 空白血浆 (A)、空白血浆＋NCTD对照品＋IS (B)、静脉滴注 NCTD-LM (C)、NCTD-I (D)结束后 5 min血浆样品＋IS
的 UPLC-MS/MS色谱图
Fig. 1 UPLC-MS/MS of blank plasma (A), blank plasma + NCTD + IS (B), plasma sample after 5 min of iv administration of
NCTD-LM + IS (C), and plasma sample after 5 min of iv administration with NCTD-I + IS (D)
t/min

m/z 256.20→166.90
m/z 169.02→123.10
IS
A B C
0 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 0 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 0 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 0 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50
IS IS
NCTD NCTD NCTD
D
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的内源性物质不干扰NCTD的测定，方法专属性高。
3.1.2 线性关系考察结果 取 Beagle 犬空白血浆
200 μL，分别加入 NCTD系列对照品溶液 20 μL，
配制成 NCTD 质量浓度分别为 0.01、0.02、0.05、
0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL的
血浆样品，按“2.4”项方法处理，“2.5”项方法进
样检测。以 NCTD质量浓度为横坐标（X），NCTD
与 IS峰面积比值为纵坐标（Y），用加权（1/X2）最
小二乘法进行回归运算，求得标准曲线方程。血浆
中 NCTD的标准曲线方程为 Y＝4.14 X－2.11；r＝
0.993 8。在 0.01～20 μg/mL 内线性关系良好。
3.1.3 最低定量下限 参照文献方法 [11-12]，取
Beagle 犬空白血浆 200 μL，加入质量浓度为 0.1
μg/mL 的 NCTD对照品溶液 20 μL，配制成 NCTD
质量浓度为 0.01 μg/mL 的血浆样品（即标准曲线最
低点），按“2.4”项方法处理，平行分析 6个样本，
并根据当日标准曲线计算每一样本测得质量浓度。
RSD 为 9.6%，准确度为（91.7±13.5）%，表明本
方法最低定量下限可达 0.01 μg/mL。
3.1.4 精密度与准确度试验结果 向Beagle犬空白血
浆中分别加入不同质量浓度的NCTD对照品溶液，配
制成低、中、高 3个质量浓度（0.02、0.5、1.6 μg/mL）
的质控（QC）样品，按“2.4”项方法处理，每一质
量浓度进行 6样本分析，连续测定 3 d，根据当日标准
曲线，求算 QC样品质量浓度，根据 QC样品结果计
算本法的精密度与准确度。结果显示，低、中、高浓
度QC样品批内精密度（RSD）分别为 4.1%～15.4%、
2.5%～6.8%、1.8%～11.2%，均小于 20%；批间精密
度（RSD）分别为 7.6%、7.5%、7.9%，均小于 15%；
准确度分别为（91.5±14.2）%～（96.8±10.6）%、
（92.9±4.7）%～（106.8±2.6）%、（101.8±2.6）%～
（111.2±2.6）%，均在 85%～115%内。结果表明本分
析方法精密度和准确度均符合要求。
3.1.5 提取回收率试验结果 （1）取 Beagle 犬空
白血浆 200 μL，分别加入 NCTD 系列对照品溶液
20 μL，配制低、中、高 3个质量浓度（0.02、0.5、
1.6 μg/mL）样品，按“2.4”项方法处理，“2.5”项
方法进样检测。每一质量浓度进行 6样本分析，记
录色谱图，得血浆样品中 NCTD峰面积。（2）另取
Beagle犬空白血浆 200 μL，除不加 IS溶液，按“2.4”
项血样处理方法操作至“4 000 r/min离心 10 min”，
取上清液加入相应质量浓度的NCTD对照品溶液和
IS溶液各 20 μL，按“2.4”项方法“4 000 r/min离
心 10 min”后面步骤操作，记录色谱图，得未经提
取的 NCTD 峰面积（取 6 次测定的平均值）。以每
一质量浓度 2种处理方法峰面积之比计算提取回收
率。在低、中、高质量浓度下 NCTD提取回收率分
别为（58.5±3.3）%、（57.6±3.5）%和（69.2±4.6）%。
3.1.6 基质效应试验结果 取 Beagle 犬空白血浆
200 μL，操作同“3.1.5（2）”项，记录 NCTD 和
IS的峰面积。另取蒸馏水 200 μL代替 Beagle犬空
白血浆，同法处理，得 NCTD和 IS的峰面积（取 6
次测定的平均值）。以每一质量浓度 2种处理方法峰
面积之比计算基质效应。结果显示，NCTD 基质效
应为（99.0±9.2）%～（103.1±2.1）%，在 85%～
115%内，表明 Beagle犬血浆内源性物质对 NCTD的
测定基本无干扰。
3.1.7 稳定性试验结果 Beagle 犬空白血浆配制
QC样品，每个质量浓度 36份。每 6份分别室温放
置 6 h后、置−20 ℃左右冰箱中储存 6个月后、置
−20 ℃左右冰箱中于 24、48和 72 h取出反复冻融，
按“2.4”项方法处理，并进样分析，考察其稳定性；
另取 6份按“2.4”项方法处理，将复溶离心后上清
液样品置进样室储存 24 h后，进样分析，考察其进
样室稳定性。结果显示，室温贮存 6 h后、−20 ℃
左右冰箱中储存 6个月后、经 3次冻融循环后、进
样室储存 24 h后，低、中、高质量浓度 QC样品中
NCTD 的准确度分别为 91.6%～111.2%、93.3%～
109.6%、91.3%～110.9%、103.5%～111.3%，均在
85%~115%。表明各储存条件下 NCTD 血浆样品均
稳定。
3.2 毒动学血药浓度-时间曲线
Beagle犬分别连续静脉滴注 0.8、1.6、3.2 mg/kg
NCTD-LM和 2.4 mg/kg NCTD-I后，各时间点血药
浓度的平均值与时间的关系见图 2。停药 15、30 d
后，即在第 105、120天各给药组血药浓度均低于定
量下限，未检测到 NCTD的存在。
3.3 毒动学参数统计结果
各给药组血药浓度数据利用 DAS 2.0软件，采
用非隔室模型（统计矩法）估算毒动学参数，并利
用 SPSS 11.5软件，采用独立样本 t检验对各组数据
进行统计学比较。结果见表 1～4。
4 讨论
Beagle犬首次静脉滴注 NCTD-LM的低、中、
高 3个剂量组，其给药剂量比为 1∶2∶4，而相应剂
量的 Cmax和AUC0-∞比均约为 1∶2∶6；连续给药第
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图 2 Beagle犬静脉滴注NCTD-LM 0.8 (A)、1.6 (B)、3.2 (C) mg/kg和NCTD-I 2.4 mg/kg (D) 后第 1天 (n = 8)、第 44天 (n = 8)
和第 90天 (n = 6) 的血药浓度-时间曲线图
Fig. 2 Plasma concentration versus time profiles on days 1 (n = 8), days 44 (n = 8) , and days 90 (n = 6) after iv administration
of 0.8 (A), 1.6 (B), 3.2 (C) mg/kg NCTD-LM and 2.4 mg/kg NCTD-I (D)
表 1 Beagle犬静脉滴注 NCTD-LM 0.8 mg/kg各项毒动学参数
Table 1 Toxicokinetic parameters of NCTD after iv administration of 0.8 mg/kg NCTD-LM to Beagle’s dog
参数 单位 1 d (n = 8) 44 d (n = 8) 90 d (n = 6)
AUC0-t h·mg·L−1 2.22±0.53 2.95±0.77* 3.58±0.95**
AUC0-∞ h·mg·L−1 2.24±0.53 2.99±0.78* 3.63±0.95**
MRT0-t h 1.80±0.15 2.64±0.43** 2.58±0.75*
t1/2 h 1.37±0.18 4.07±1.89** 3.87±1.90**
tmax h 0.83±0.14 0.90±0.09 0.83±0.17
CL L·h−1·kg−1 0.37±0.08 0.29±0.08* 0.24±0.07**
Vz L·kg−1 0.74±0.20 1.55±0.53** 1.23±0.57*
Cmax mg·L−1 1.26±0.40 2.12±1.61 2.33±1.18*
与给药后第 1天比较：*P＜0.05 **P＜0.01，下同
*P < 0.05 **P < 0.01 vs paremeter of 1 d after iv administration of NCTD-LM or NCTD-I, same as below
表 2 Beagle犬静脉滴注 NCTD-LM 1.6 mg/kg各项毒动学参数
Table 2 Toxicokinetic parameters of NCTD after iv administration of 1.6 mg/kg NCTD-LM to Beagle’s dog
参数 单位 1 d (n = 8) 44 d (n = 8) 90 d (n = 6)
AUC0-t h·mg·L−1 4.77±1.13 8.08±2.70* 11.40±2.00**
AUC0-∞ h·mg·L−1 4.79±1.13 8.25±2.76** 11.60±2.00**
MRT0-t h 2.12±0.22 3.42±0.43** 3.02±0.72**
t1/2 h 1.64±0.42 5.85±2.00** 5.75±3.29**
tmax h 0.93±0.10 0.73±0.23 0.82±0.19
CL L·h−1·kg−1 0.35±0.08 0.21±0.07** 0.14±0.03**
Vz L·kg−1 0.82±0.30 1.83±0.96* 1.18±0.74
Cmax mg·L−1 2.82±0.55 3.39±1.19 4.93±1.29*
0 5 10 15 20 25
t/h
0 5 10 15 20 25
t/h
0 5 10 15 20 25
t/h
0 5 10 15 20 25
t/h
10 000
1 000
100
10
1
10 000
1 000
100
10
1
10 000
1 000
100
10
1
100 000
10 000
1 000
100
10
1
A B
C D

第 1天
第 44天
第 90天
N
CT
D
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
N
CT
D
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
N
CT
D
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
N
CT
D
血
药
浓
度
/(n
g·
m
L−
1 )
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表 3 Beagle犬静脉滴注 NCTD-LM 3.2 mg/kg各项毒动学参数
Table 3 Toxicokinetic parameters of NCTD after iv administration of 3.2 mg/kg NCTD-LM to Beagle’s dog
参数 单位 1 d (n = 8) 44 d (n = 8) 90 d (n = 6)
AUC0-t h·mg·L−1 13.40±3.60 12.40±2.60 23.50±3.90**
AUC0-∞ h·mg·L−1 13.50±3.70 12.60±2.70 24.00±3.90**
MRT0-t h 2.29±0.40 3.51±0.31** 3.71±0.46**
t1/2 h 1.98±0.25 5.58±2.42** 5.84±2.45*
tmax h 0.91±0.11 0.90±0.09 0.92±0.20
CL L·h−1·kg−1 0.26±0.09 0.26±0.06 0.14±0.03**
Vz L·kg−1 0.73±0.23 2.01±0.70** 1.18±0.65
Cmax mg·L−1 6.93±1.32 4.77±0.97** 8.73±1.31*
表 4 Beagle犬静脉滴注 NCTD-I 2.4 mg/kg各项毒动学参数
Table 4 Toxicokinetic parameters of NCTD after iv administration of 2.4 mg/kg NCTD-I to Beagle’s dog
参数 单位 1 d (n = 8) 44 d (n = 8) 90 d (n = 6)
AUC0-t h·mg·L−1 9.07±2.09 11.60±2.00* 14.10±3.00**
AUC0-∞ h·mg·L−1 9.14±2.09 11.60±2.10* 14.20±3.10**
MRT0-t h 2.17±0.26 2.99±0.27** 3.00±0.49**
t1/2 h 2.84±1.34 3.25±1.27 3.53±1.26
tmax h 0.85±0.04 0.91±0.09 0.88±0.27
CL L·h−1·kg−1 0.27±0.06 0.21±0.04* 0.18±0.04**
Vz L·kg−1 1.12±0.55 0.95±0.22 0.88±0.28
Cmax mg·L−1 4.80±1.20 6.05±1.67 5.76±1.13
44天时，相应剂量的 AUC0-∞比均约为 1∶3∶4；连
续给药第 90天后，相应剂量的 AUC0-∞比均约为 1∶
3∶6。此结果表明NCTD在 Beagle犬体内，在 0.8～
3.2 mg/kg的剂量内符合非线性动力学特征。此外，
NCTD-LM以低、中剂量给药时，其在 Beagle犬体
内药动学行为基本相似；而高剂量组，其药物消除速
度略见减慢但无显著性差异，提示当NCTD以高剂量
给药时应密切关注其毒性反应。此结果与文献报道结
果较为相似，前期研究结果显示[10]NCTD脂质微球和
NCTD-I在大鼠体内，在 1.35～4.05 mg/kg剂量内均
呈现非线性动力学特征；Liu等[13]研究发现在0.38～
1.6 mg/kg剂量内静脉注射给予 Beagle犬 NCTD-I，
药物呈现非线性动力学特征；且随着给药剂量的增
加，药物消除速度显著降低。魏春敏[14]研究结果显
示 NCTD在人体内 24 h后约有 30%的药物从尿中
以原形排泄；ig给予小鼠 2 h后，血清中原型药物
比例仅为 10%，另 2 种主要代谢产物比例分别为
30%和 40%；ig给予大鼠后尿液中可检测到原型药
物（NCTD）和其代谢产物（环氧化物水合酶作用
下的水合产物）[15]。上述文献结果显示 NCTD在体
内主要以代谢消除为主，由于目前尚无关于 NCTD
体内非线性药动学机制的研究，其体内代谢机制仍
需进一步深入研究。
Beagle 犬以 0.8 mg/kg 连续 90 d 静脉滴注
NCTD-LM，经 t检验，其连续给药 44、90 d与首
次给药相比，AUC0-t、AUC0-∞、MRT0-t、t1/2、CL
和 Vz 均具有显著性差异（P＜0.05、0.01）。tmax、
Cmax随用药时间延长无显著性差异（P＞0.05）。CL
随给药时间延长而呈现减小趋势，并且在给药过程
中，前一天给药结束后 24 h（即开始给药后 25 h，
次日给药前 0 h）的血药浓度也随着用药时间的延长
而增加。Beagle犬以 1.6 mg/kg连续 90 d静脉滴注
NCTD-LM，经 t检验，其连续给药 44、90 d与首
次给药相比，AUC0-t、AUC0-∞、MRT0-t、t1/2 和 CL
均具有显著性差异（P＜0.05、0.01），tmax无显著性
差异（P＞0.05），CL随给药时间延长而呈现减小趋
势。Beagle 犬以 3.2 mg/kg 连续 90 d 静脉滴注
NCTD-LM，经 t检验，其连续给药 44、90 d与首
次给药相比，MRT0-t、t1/2和 Cmax均具有显著性差异
（P＜0.05、0.01），CL 随给药时间延长而呈现减小
趋势。但在停药 15和 30 d后，即在第 105、120天，
低、中、高各剂量组 Beagle犬体内的血药浓度均低
于定量下限，未检测到药物的存在。表明 NCTD-LM
以 0.8、1.6 和 3.2 mg/kg 剂量连续静脉给予 Beagle
犬 90 d，其在 Beagle犬体内动力学特征虽有一定的
变化，药物清除速度减慢，但在停药后其在 Beagle
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 23期 2015年 12月

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犬体内无蓄积作用。
Beagle犬以 2.4 mg/kg连续 90 d静脉滴注给予
NCTD-I，连续给药 44、90 d 与首次给药相比，
AUC0-t、AUC0-∞、MRT0-t和 CL 均具有显著性差异
（P＜0.05、0.01），CL 随给药时间延长而呈现减小
趋势；并且在给药过程中，前一天给药后 24 h（即
开始给药后 25 h，次日给药前 0 h）的血药浓度也
随着用药时间的延长而增加，说明 NCTD-I 2.4
mg/kg连续给药 90 d后其清除速度显著减慢。但在
停药 15和 30 d后，即在第 105、120天给药，Beagle
犬体内的血药浓度均低于定量下限，未检测到药物
的存在。表明其停药一段时间后药物可代谢完全。
以上主要动力学参数的变化和血药浓度的比较
说明在增加给药剂量且连续给药的过程中，NCTD
在 Beagle犬体内的代谢动力学发生了一定变化，药
物消除速度均不同程度减慢，以 NCTD-LM 3.2
mg/kg和 NCTD-I 2.4 mg/kg减慢最为显著。推测可
能原因为：①在连续给药过程中，与 NCTD代谢相
关的代谢酶部分饱和，使 Beagle犬体内的药物代谢
功能受到影响，导致随着给药时间延长，药物消除
速度减慢；②与药物排泄相关的转运载体存在饱和
效应，随着给药时间的延长，有效转运载体逐渐减
少，导致药物转运速度下降；③药物分布相关血浆/
组织蛋白存在饱和效应，随时间的延长，可供药物
有效结合的蛋白减少，导致分布速度减慢。在以高
剂量给药时，上述与药物分布、代谢和排泄相关的
代谢酶及转运载体系统更易达到饱和，因此高剂量
连续给药时，药物消除速度减慢更为显著。
此外在连续给药过程中，NCTD-LM低、中、高
剂量组均未见动物死亡，但NCTD-I 2.4 mg/kg剂量组
引起 1 例动物死亡，因此在高剂量连续使用
NCTD-LM时需密切关注其毒性反应，防止药物蓄积。
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