全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 1 期 2012 年 1 月
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苦味叶下珠的化学成分研究
孙 伟
上海市奉贤区中心医院，上海 201400
摘 要：目的 对苦味叶下珠 Phyllanthus amarus 的化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex-20 柱色谱、重结
晶及制备高效液相色谱等技术提取分离苦味叶下珠的化学成分，采用 UV、IR、EI-MS、1H-NMR、13C-NMR、HMQC 及 HMBC
等光谱方法鉴定化合物结构。结果 从苦味叶下珠乙醇提取物的石油醚部位分离得到化合物 1～3，分别鉴定为棕榈酸（1）、
对羟基苯甲醛（2）、齐墩果酸（3）；从二氯甲烷部位分离得到化合物 4～9，分别鉴定为 stigmast-5-en-3-ol, oleate（4）、4-羟
基-3-甲氧基苯甲酸（5）、胡萝卜苷（6）、芹菜素（7）、木犀草素（8）、叶下珠新苷（9）。结论 化合物 9 是新化合物，命
名为叶下珠新苷，化合物 4～8 为首次从苦味叶下珠中分离得到。
关键词：苦味叶下珠；叶下珠新苷；齐墩果酸；4-羟基-3-甲氧基苯甲酸；芹菜素
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)01 - 0023 - 04
Chemical constituents of Phyllanthus amaus
SUN Wei
The Central Hospital of Fengxian District, Shanghai 201400, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents of Phyllanthus amarus. Methods Chromatography on silica gel column,
Sephadex LH-20 columm, recrystallization, and preparative HPLC technique were used to isolate and purify the compounds.
Spectroscopic methods including UV, IR, EI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR, HMQC, and HMBC were used to elucidate the structures of
compounds. Results Nine compounds were obtained and identified as palmitic acid (1), 4-hydrobenzal dehyde (2), oleanolic acid (3),
stigmast-5-en-3-ol, oleate (4), 4-hydroxy-3-methoxy-benzoic acid (5), daucosterol (6), apigenin (7), luteolin (8), and phyllanoside (9).
Conclusion Compound 9 is a new compound, named phyllanoside. Compounds 4—8 are isolated from the plant for the first time.
Key words: Phyllanthus amarus Schum. et Thonn.; phyllanoside; oleanolic acid; 4-hydroxy-3-methoxy-benzoic acid; apigenin
苦味叶下珠 Phyllanthus amaus Schum. et Thonn.
为大戟科叶下珠属植物，为一年生草本，在我国主
要分布于云南、海南、广东、广西等亚热带地区，
生长在村旁、路边、河流两岸、荒滩等地。苦味叶
下珠是傣族民间草药，其味微苦，性凉，归肝、脾、
肾经。功能为清热解毒、利水消肿、明目消积。主
治痢疾、泄泻、黄疸、水肿、热淋、石淋、目赤、
夜盲、疳积、痈肿、毒蛇咬伤等征[1-5]。研究表明，
苦味叶下珠具有体外抗乙肝病毒（HBV）作用[6]，
并对血栓具有抑制作用[7]。本课题组对苦味叶下珠
的化学成分进行研究，从其全草乙醇提取物的石油
醚萃取物中分离并鉴定了棕榈酸（1）、对羟基苯甲
醛（2）、齐墩果酸（3）；从二氯甲烷萃取物中分离
得到 6 个化合物，其中，叶下珠新苷（9）是新化合
物，化合物 4～8 为首次从苦味叶下珠中分离得到。
1 仪器与材料
ZMD83—1 型电热熔点测定仪（上海精密仪器
仪表公司）；R205 型旋转蒸发器（上海申生科技有
限公司）；Bruker DEX—400 型核磁共振仪（TMS
为内标，德国布鲁克公司）；Varian MAT—212 质谱
仪（美国瓦里安公司）；Sephadex LH—20（上海安
玛西亚技术有限公司）；薄层色谱以及柱色谱所用硅
胶均为青岛海洋化工集团公司产品；所用试剂均为
分析纯（上海国药化学试剂有限公司）。
苦味叶下珠于 2010 年 9 月采自云南昆明，经山
东中医药大学药学院周长征副教授鉴定为大戟科叶
下珠属植物苦味叶下珠 Phyllanthus amaus Schum. et
Thonn.。
2 提取与分离
取苦味叶下珠干燥全草 30 kg，75%乙醇渗漉提
收稿日期：2011-10-26
作者简介：孙 伟，男，讲师，主要从事治疗小儿新药开发。Tel: (021)57420711 E-mail: skeyan@yahoo.cn
网络出版时间：2011-12-23 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20111223.1143.001.html
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取 6 次，每次 2 h，合并渗漉液，减压浓缩至无醇味。
得到的混悬液依次用石油醚、二氯甲烷萃取，合并
萃取液，减压浓缩，分别得到石油醚部分 101 g，二
氯甲烷部分 280 g。石油醚部分（101 g）经反复硅
胶柱色谱，得到化合物 1（59 mg）、2（45 mg）、3
（61 mg）；二氯甲烷部分（220 g）经反复硅胶柱色
谱，再经 Sephadex LH-20 及制备高效液相分离纯
化，得到化合物 4（42 mg）、5（71 mg）、6（47 mg）、
7（55 mg）、8（62 mg）、9（73 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1：白色颗粒状结晶（石油醚-醋酸乙酯），
易溶于氯仿。mp 61～62 ℃。EI-MS m/z: 256 [M]+。
1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 2.35 (2H, t, J = 7.6
Hz), 1.63 (2H, m), 1.25 (24H, brs), 0.88 (3H, t, J = 6.8
Hz)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ: 180.7 (C-16),
34.1 (C-15), 31.9 (C-14), 29.6 (C-13), 29.4 (C-12),
29.3 (C-11), 29.2 (C-10), 29.0 (C-9), 24.6 (C-8), 22.7
(C-7), 14.1 (C-6)。与文献报道数据基本一致[8]，故
鉴定化合物 1 为棕榈酸。
化合物 2：白色针状结晶，mp 115～118 ℃。
EI-MS m/z: 121 [M－H]－。1H-NMR (500 MHz,
CDCl3) δ: 9.80 (1H, s, -CHO), 7.76 (2H, d, J = 6.4 Hz,
H-2, 6), 6.93 (2H, d, J = 6.6 Hz, H-3, 5)；13C-NMR
(125 MHz, CDCl3) δ: 191.4 (-CHO), 163.1 (C-4),
132.4 (C-2, 6), 128.8 (C-1), 115.8 (C-3, 5)。与文献报
道一致[9]，故鉴定化合物 2 为对羟基苯甲醛。
化合物 3：白色针晶（氯仿-甲醇），mp 308～
311 ℃。TLC喷雾H2SO4-MeOH显紫色。 KBrmaxIR ν (cm−1):
3 412, 2 922, 2 851, 1 703, 1 468, 1 385, 1 377, 1 360,
1 322, 1 270。EI-MS m/z: 457 [M＋H]+, 456 [M]。1H-
NMR (500 MHz, C5D5N) 在高场区有 7 个角甲基 δ
0.75, 0.77, 0.90, 0.91, 0.92, 0.98, 1.13 (each 3H, s,
-CH3)、双键氢 δ 5.28 (1H, brs, H-12), 3.24 (1H, dd,
J = 10.2, 6.2 Hz, H-3α)；13C-NMR (100 MHz, C5D5N)
δ: 180.5 (C-28), 145.6 (C-13), 122.9 (C-12), 79.0
(C-3), 56.0 (C-5), 48.5 (C-9), 46.7 (C-17), 46.5
(C-19), 42.3 (C-14, 18), 39.8 (C-4, 8), 39.5 (C-1), 34.5
(C-21), 33.6 (C-29), 33.4 (C-22), 32.9 (C-7), 31.3
(C-20), 29.2 (C-2), 28.9 (C-23), 28.5 (C-15), 26.3
(C-27), 23.8 (C-16), 23.5 (C-30), 18.9 (C-6), 17.6
(C-26), 16.9 (C-24), 15.7 (C-25)。以上数据与文献报
道一致[9]，故鉴定化合物 3 为齐墩果酸。
化合物 4：白色粉末，mp 156～159 ℃，EI-MS
m/z: 414[M]+。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) 谱具有 β-
谷甾醇的特征，δ 0.70～2.40 为甾体骨架上众多的亚
甲基和次甲基信号相互重叠产生。δ 0.66 和 1.01 的
两个甲基峰是 C18和 C19上质子信号，δ 5.33 为 H-6
典型的烯氢信号，3.99 (1H, m, H-3), 5.46 (2H, m,
H-9′, 10′)；13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ: 39.4 (C-1),
29.4 (C-2), 79.7 (C-3), 38.5 (C-4)，其余碳信号与 β-
谷甾醇一致，δ: 175.1 (C-1′), 130.6 (C-9′, 10′), 35.4
(C-2′), 34.7 (C-16′), 33.8 (C-7′, 12′), 33.5 (C-6′, 13′,
14′), 33.1 (C-5′), 33.0 (C-15′), 29.5 (C-4′), 28.2 (C-8′),
26.1 (C-3′), 23.9 (C-17′), 14.1 (C-18′)。与文献报道一
致[9]，鉴定化合物 4 为 satigmast-5-en-3-ol, oleate。
化合物 5：白色针状结晶，mp 81～83 ℃。EI-MS
m/z: 151 [M－H]－, 303 [2M－H]－。1H-NMR (500
MHz, CDCl3) δ: 9.83 (1H, s, -CHO), 7.04 (1H, d,
H-6), 7.42 (2H, t, H-2, 5), 3.97 (3H, s, -OCH3)；
13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ: 190.9 (-CHO), 151.7
(C-3), 147.2 (C-4), 129.9 (C-1), 127.5 (C-6), 114.4
(C-5), 108.8 (C-2), 56.1 (-OCH3)。经图谱综合解析，
鉴定化合物 5 为 4-羟基-3-甲氧基苯甲醛。
化合物 6：白色粉末（氯仿-甲醇），mp 286～
287 ℃，Libermann-Burchard 反应呈阳性，Molish
反应呈阳性。IR 中出现 3 400 cm−1 的羟基吸收峰及
1 000～1 200 cm−1 的苷键吸收峰，与文献报道胡萝
卜苷 IR 数据一致[8]，TLC 中与胡萝卜苷对照品显色
一致。故鉴定化合物 6 为胡萝卜苷。
化合物 7：浅褐色粉末（丙酮），mp 340～342 ℃，
盐酸镁粉反应呈阳性。 MeOHmaxUV λ (nm): 266, 297,
337。EI-MS m/z: 271 [M＋H]+。1H-NMR (500 MHz,
DMSO-d6) δ: 6.20 (1H, d, J = 1.4 Hz, H-6), 6.49 (1H,
s, H-8), 6.78 (1H, s, H-3), 6.93 (2H, d, J = 8.4 Hz,
H-3, 5), 7.93 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2, 6), 10.61 (2H,
brs, OH-4, 7), 12.98 (1 H, s, OH-5)；13C-NMR (125
MHz, DMSO-d6) δ: 164.2 (C-2), 102.8 (C-3), 181.7
(C-4), 161.4 (C-5), 98.8 (C-6), 163.7 (C-7), 93.9
(C-8), 157.3 (C-9), 103.6 (C-10), 121.1 (C-1′), 161.2
(C-4′), 115.9 (C-3′, 5′), 128.4 (C-2′, 6′)。波谱数据与
文献报道基本一致[10]，故鉴定化合物 7 为芹菜素。
化合物 8：淡黄色粉末（醋酸乙酯），mp 283～
286 ℃，薄层色谱（硅胶 H-CMC 板）自然光下呈
黄色斑点，NH3熏后更加亮黄醒目。在石油醚-醋酸
乙酯（1∶2）和苯-醋酸乙酯-甲酸（8∶8∶0.1）两
个展开系统中的 Rf 值均与木犀草素对照品一致。
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MeOH
maxUV λ (nm): 268, 346 nm。 KBrmaxIR ν (cm−1): 3 413,
1 653, 1 609, 1 512, 1 443, 1 373, 1 265, 1 164, 1 119,
1 030, 838。EI-MS m/z: 287 [M＋H]+。1H-NMR (500
MHz, DMSO-d6) δ: 6.18 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-6),
6.45 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-8), 6.64 (1H, s, H-3), 6.88
(1H, d, J =9.0 Hz, H-5′), 7.39 (1H, d, J = 2.4 Hz,
H-2′), 7.40 (1H, dd, J =9.0, 2.4 Hz, H-6′)；13C-NMR
(125 MHz, DMSO-d6) δ: 164.3 (C-2), 102.8 (C-3),
181.6 (C-4), 161.4 (C-5), 98.8 (C-6), 163.9 (C-7), 93.8
(C-8), 157.2 (C-9), 103.6 (C-10), 118.9 (C-1′), 113.3
(C-2′), 149.8 (C-3′), 145.8 (C-4′), 116.0 (C-5′), 121.4
(C-6′)。以上数据与文献报道一致[11]，故鉴定化合物
8 为木犀草素。
化合物 9：白色粉末，mp 252～253 ℃；紫外
光谱显示化合物无明显紫外吸收。 KBrmaxIR ν (cm−1):
3 338, 2 948, 2 863, 1 608, 1 094, 1 040, 1 727,
1 691； 20D]α[ −26.11 (c 3.0, MeOH)；HR-FAB-MS m/z:
1 126.189 7 [M＋Na]+，确定化合物的分子式为
C54H86O23。1H-NMR (500 MHz, C5D5N) 和 13C-NMR
(125 MHz, C5D5N) 数据见表 1。
1H-NMR 中，显示该化合物有 8 个甲基取代，
其中 6 个为单峰 δ 1.03，1.07，1.25，1.49，1.68，
2.09（s, 6×-CH3），在 HMQC 图谱中（图 1），与之
相关的碳信号分别为 δ 23.5 (C-35), 33.1 (C-29), 17.7
(C-26), 27.5 (C-27), 18.3 (C-25), 65.3 (C-24)；两个为
双重峰 δ 1.73, 1.79 (d, 2×-CH3)，在 HMQC 图谱中
与之相关的碳信号为两个鼠李糖的末端碳信号，分
别为 δ 19.5, 18.2；δ 5.55 (s, 1H) 推测可能是双键上
的氢，根据 HMQC 图谱与之相关的碳信号为 δ
125.3，确定该氢信号是母核 C-12 上的氢信号；在
表 1 化合物 9 的 1H-NMR (500 MHz, C5D5N) 和 13C-NMR (125 MHz, C5D5N) 数据
Table 1 1H-NMR and 13C-NMR (500 MHz and 125 MHz, C5D5N) data of compound 9
位置 δH δC 位置 δH δC
1 38.9 28 172.3
2 26.3 29 1.07 (s) 33.1
3 4.42 (m) 80.8 30 1.03 (s) 23.5
4 43.4 28-O-Glc-1 6.32 (d, J = 8.4 Hz) 95.4
5 47.6 2 4.18 (m) 73.5
6 17.9 3 4.56 (t, J = 9.8 Hz) 78.6
7 33.2 4 4.25 (m) 70.5
8 40.6 5 4.31 (m) 77.8
9 46.3 6 4.76 (s) 69.1
10 37.5 Glc′-1 5.08 (d, J = 8.0 Hz) 104.5
11 24.3 2 4.03 (m) 75.2
12 5.55 (s) 125.3 3 4.29 (overlap) 76.3
13 140.9 4 4.44 (m) 78.0
14 48.5 5 3.75 (d, J = 10.0 Hz) 76.7
15 2.04 (d, J = 14.2 Hz) 46.3 6 4.28 (overlap) 61.0
16 208.7 Rha-1 5.95 (s) 102.4
17 59.7 2 4.64 (m) 72.4
18 47.3 3 4.76 (m) 72.3
19 46.3 4 4.40 (overlap) 73.6
20 30.9 5 4.88 (m) 70.2
21 35.2 6 1.79 (d, J = 6.0 Hz) 18.2
22 27.1 3-O-Rha′-1 6.67 (s) 102.6
23 63.5 2 5.04 (s) 72.4
24 2.09 (s) 65.3 3 4.91 (m) 72.8
25 1.68 (s) 18.3 4 4.66 (m) 74.2
26 1.25 (s) 17.7 5 5.05 (m) 71.0
27 1.49 (s) 27.5 6 1.73 (d, J = 6.0 Hz) 19.5
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图 1 化合物 9 的 HMBC 和 HMQC 关键相关
Fig. 1 Key HMBC and HMQC correlations of compound 9
HMQC 图谱上氢信号 δ 5.08 (d, J = 8.0 Hz), 5.95 (s),
6.32 (d, J = 8.4 Hz) 和 6.67 (d, J = 6.0 Hz) 分别与 δ
104.5, 102.4, 95.4, 102.6 相关，推测可能是糖上的端
基氢信号；δ 3.50～5.10 的氢可能是糖上的氢信号。
通过 13C-NMR 谱和 DEPT 谱，结合其相对分子质量
可确定该化合物的分子式为 C55H92O21。该化合物用
三氟乙酸水解后，衍生得糖腈乙酸酯衍生物，采用
GC-MS 分析，经与标准糖腈乙酸酯衍生物对照，结
构显示化合物 9 中存在 D-葡萄糖和 L-鼠李糖，组成
比例为 1∶1。
综上信息，推断该化合物为五环三萜皂苷类，
其苷元为齐墩果烷型，且连有 4 个糖，两个类型。
在 HMBC 谱中（图 1），糖的端基氢 (δ 6.67) 与 δ
80.8 的碳相关，所以表明化合物中的鼠李糖是连接
在苷元的 3 位上；同时，其中一葡萄糖的端基氢 (δ
6.32) 与 δ 172.3 的碳相关，说明另一糖链是链接在
苷元的 28 位上；另一葡萄糖端基氢 (δ 5.08) 与 δ
69.1 的碳相关，鼠李糖的端基氢 (δ 6.67) 与 δ 78.0
的碳相关，所以 28 位上的糖链链接顺序是
28-O-[β-D-吡喃葡萄糖基 (1→6)-β-D-吡喃葡萄糖
基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基]，结合相关谱图，对化
合物 9 的碳氢作做一步的归属，分析出化学结构式，
为一新化合物，命名为叶下珠新苷。
4 讨论
我国苦味叶下珠资源非常丰富，且能人工栽
培。目前，在苦味叶下珠的药理作用研究和临床应
用研究方面已经做了大量的工作，取得了一定的成
绩，也有很多苦味叶下珠制剂在临床应用。但是，
对苦味叶下珠有效部位及有效成分方面的研究较
少。本研究从苦味叶下珠的乙醇提取物中分离到 9
个化合物，为苦味叶下珠的质量评价指标的建立提
供参考。
参考文献
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