全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 1 期 2011 年 1 月 • 61 •

不同动物皮肤对小儿腹泻脐贴膏体外经皮渗透的研究
蒋 俊 1, 2，贾晓斌 2, 3，李 平 1，高成林 2，王静静 2，蔡宝昌 3，吴 皓 3
1. 镇江出入境检验检疫局 国家食品添加剂及调味品检测重点实验室，江苏 镇江 212008
2. 江苏省中医药研究院 中药新型给药系统重点实验室，国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室，江苏 南京
210028
3. 南京中医药大学 江苏省中药炮制重点实验室，江苏 南京 210029
摘 要：目的 考察不同动物皮肤和透皮促进剂不同质量浓度对小儿腹泻脐贴膏的经皮渗透性的影响。方法 以小儿腹泻脐贴
膏为模型药物，采用 Franz 扩散池法，以补骨脂素、异补骨脂素为指标成分，比较大鼠腹部皮肤、家兔腹部皮肤、小鼠背部
皮肤以及猪耳廊背面皮肤对小儿腹泻脐贴膏的经皮渗透性的差异，同时比较 1%、3%、5%氮酮对小儿腹泻脐贴膏的经皮渗
透性的影响。结果 大鼠腹部皮肤对补骨脂素和异补骨脂素的 24 h 累积透过量均最大，渗透速率最高；氮酮质量浓度为 1%
时对补骨脂素和异补骨脂素的透皮促进作用最强。结论 选择 1%的氮酮作为透皮促进剂，且选用大鼠腹部皮肤作为透皮促
进剂筛选的皮肤模型时，小儿腹泻脐贴膏的透皮效果最好。
关键词：小儿腹泻脐贴膏；不同皮肤；补骨脂素；异补骨脂素；经皮渗透
中图分类号：R284.2; R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)01 - 0061 - 04
In vitro transdermal permeability of Xiaoer Fuxie Navel Plaster investigated
on different animals’ skin
JIANG Jun1, 2, JIA Xiao-bin2, 3, LI Ping1, GAO Cheng-lin2, WANG Jing-jing2, CAI Bao-chang3, WU Hao3
1. State Key Laboratory of Food Additive and Condiment Testing, Zhenjiang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,
Zhenjiang 212008, China
2. Key Laboratory of New Drug Delivery System of Chinese Materia Medica, Key Laboratory of Oral Drug Delivery System
of Chinese Materia Medica, Jiangsu Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210028, China
3. Key Laboratory of Processing of Chinese Materia Medica, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210029, China
Abstract: Objective To investigate the effect of different animal’s skin and different concentration of one penetration enhancer on the
transdermal permeability of Xiaoer Fuxie Navel Plaster. Methods Using Franz diffusion cell and HPLC, and taking psoralen and
isopsoralen as index components, the differences in transdermal permeability of abdominal skin of rats and rabbits, back skin of mice,
and ear skin of pigs, and the effects of different concentration of 1%, 3%, and 5% of Azone on transdermal permeability of Xiaoer Fuxie
Navel Plaster were compared and studied. Results Abdominal skin of rats profited to the transdermal penetration of psoralen and
isopsoralen, the 24 h-accumulated permeattion of both psoralen and isopsoralen reached the maximum and the penetration rate was the
highest and the effect of penetration enhancers was the strongest at the concentration of 1% Azone. Conclusion The transdermal
effect of Xiaoer Fuxie Navel Plaster could be best when choosing 1% Azone as the penetration enhancer and abdominal skin of rats as
screening model of penetration enhancer.
Key words: Xiaoer Fuxie Navel Plaster; different skin; psoralen ; isopsoralen ; transdermal permeability

小儿腹泻脐贴膏由补骨脂、吴茱萸等 5 味中药
组成，具有芳香燥湿、温脾止泻、散寒止痛的功效，
临床上用于治疗小儿脾胃虚寒所致的泄泻、脘腹疼
痛等病症，疗效确切。原剂型为糊剂，使用不便且
影响疗效，因此根据脐部特殊生理结构，选用新的
辅料海藻酸钠等研制了可塑性脐贴膏，该剂型具有
可塑性好、载药量高，且与脐部结合更加紧密等优
点。为评价小儿腹泻脐贴膏体外经皮渗透性，人体
皮肤是最佳的皮肤模型，但受到人体皮肤来源所限，
因而采用动物皮肤代替人体皮肤进行透皮吸收研究

收稿日期：2010-05-07
基金项目：国家“十一五”科技支撑计划项目(2008BAI53B072)；江苏省中医药领军人才项目(2006)；江苏省中医药局科研项目(HL07091)
*通讯作者 贾晓斌 Tel: (025)85637809 E-mail: jxiaobin2005@hotmail.com
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具有一定的实际意义[1]。因此本实验选择 4 种不同
动物皮肤对小儿腹泻脐贴膏透过动物皮肤渗透的差
异性进行了研究，以筛选出合适的动物皮肤模型来
预测小儿腹泻脐贴膏的体外经皮渗透能力。
1 仪器与试药
Agilent 1200 型高效液相色谱仪：包括 DAD 检
测器，四元泵；BP－211D 分析电子天平(德国
Sartorius 公司，十万分之一)；TP—3 透皮扩散仪(南
京新联电子设备有限公司)；DHG—9070A 型电热恒
温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；DZF—
6051 真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。SD
大鼠购于上海斯莱克实验动物有限责任公司；昆明
种小鼠购于上海斯莱克实验动物有限责任公司；新
西兰大耳白兔购于南京金陵种兔厂；猪耳购于南京
晓庄屠宰场。
补骨脂素(批号 110739-20051)、异补骨脂素(批
号 738-9907)对照品购于中国药品生物制品检定所；
乙腈(TEDIA， 色谱纯)；聚乙二醇 400(国药集团化
学试剂有限公司)；氮酮(福建寿宁美菲思生物化学
品厂)；其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 小儿腹泻脐贴膏的制备
按比例将水、甘油和 PVP-K30，80 ℃水浴加
热至溶解，放冷至 60 ℃时，加入海藻酸钠，不断
搅成胶状，加入氧化锌，不断搅拌均匀，加入补骨
脂流浸膏、吴茱萸和复方水提液浸膏、挥发油、透
皮促进剂，搅匀，涂抹于自制模具中，在 40 ℃的
烘箱中固化 3.5 h，置于医用橡皮膏中，保存备用。
2.2 补骨脂素、异补骨脂素的测定
2.2.1 对照品的配制 精密称取补骨脂素对照品
2.06 mg，异补骨脂素对照品 2.01 mg，置于 10 mL
量瓶中，用甲醇定容（补骨脂素 0.206 mg/mL，异
补骨脂素 0.201 mg/mL）作为储备液。
2.2.2 供试品溶液的配制 取 24 h 内透皮实验的
接收液于 80 ℃水浴浓缩至一定质量浓度，甲醇定
容至 2 mL，14 000 r/min 离心 15 min，即得。
2.2.3 标准曲线的绘制 精密移取补骨脂素和异
补骨脂素储备液 0.5 mL 置 10 mL 量瓶中，分别配
成 10.30、10.05 μg/mL 溶液。分别吸取 2、5、10、
15、20、25、30 μL 进样，记录峰面积；以进样质
量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得
补骨脂素的线性方程为 Y＝89.193 X－24.855，r＝
0.999 6，表明补骨脂素在 2.06～30.90 μg 与色谱峰
面积呈良好的线性关系；异补骨脂素的线性方程为
Y＝94.939 X +6.106，r＝0.999 7，表明异补骨脂素
在 2.01～30.15 μg与色谱峰面积呈良好的线性关系。
2.2.4 精密度试验 取质量浓度分别为 10.30、
10.05 μg/mL 混合对照品溶液，连续进样 5 次，记录
峰面积，计算 RSD 分别为 0.69%、0.23%。
2.2.5 稳定性试验 取同 1 份供试品溶液，分别在
0、1、2、4、8、12、24 h 进样分析，记录峰面积，
其 RSD 分别为 1.62%、1.69%，表明供试品溶液在
室温放置至少 24 h 内稳定。
2.2.6 回收率试验 精密移取 24 h 透皮接收液
1 mL，接收液中补骨脂素和异补骨脂素质量浓度分
别为 7.201 1、6.076 3 μg/mL，9 份，分别精密加入
一定量的补骨脂素（5.645 0、7.198 0、8.770 0 μg）
和异补骨脂素（5.085 0、6.068 0、7.620 0 μg）对照
品，定容至 2 mL，制备供试品溶液，测定并计算加
样回收率，结果分别为 99.08%、100.41%，RSD 分
别为 2.1%、1.9%。
2.3 不同动物皮肤制备
用脱毛剂将动物皮肤上的毛发小心脱去，24 h
后处死动物，剪下大鼠腹部、家兔腹部、小鼠背部
皮肤，小心剔除脂肪及黏液组织，选取完整皮肤，
用生理盐水反复冲洗干净，−20 ℃冰箱保存待用；
猪在屠杀后，立即取其耳朵，剃除廊背面的毛，剥
离皮肤，刮去皮下脂肪组织，选取完整皮肤，用生
理盐水反复冲洗干净，−20 ℃冰箱保存待用[2]。
2.4 体外透皮试验方法
分别以质量浓度为 1%、3%、5%的氮酮作为透
皮促进剂，以小鼠背部、大鼠腹部、家兔腹部以及猪
耳皮肤作为皮肤模型，分别取贴膏 1/5（约 0.50 g），
将其制成面积为 2.00 cm2、厚度为 2 cm 的药膏粘于
不同皮肤上，排除贴膏与皮肤之间的气泡，固定在
垂直式 Franz 扩散池上，开动磁力搅拌器和恒温水
浴，磁力搅拌转速设定为 300 r/min，水浴温度（32±
0.5） ℃；接收液为 20% PEG400 的生理盐水，在 1、
2、4、6、8、10、12、24 h 分别取出接收液 10 mL，
同时立即补加同样体积的新鲜接收液。将接收液水
浴浓缩后用甲醇定容，14 000 r/min 离心 15 min，
HPLC 测定补骨脂素和异补骨脂素的质量浓度，计
算累积透过量（Qs）和稳态渗透速率常数（Js）[3-4]。
Qs A
)V(CVC
n
i iion
∑ ×+×=
=
=
1
1
其中 Cn为 t 时间浓度的测量值，Ci为 t 时间以
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前浓度的测量值，V0 为接收液的总体积，Vi 为每次
取样的体积，A 为扩散池面积，Qs 为单位面积累积
透过量，以扩散平衡后的Qs对渗透时间 t进行回归，
所得的直线斜率即为稳态渗透速率常数（Js）。
2.5 透皮实验结果
2.5.1 补骨脂素体外经皮渗透性结果 补骨脂素以
大鼠腹部皮肤为皮肤模型时，未加透皮促进剂时的
稳态渗透速率为（3.779 3±0.38) μg/(cm2·h)，以未加
透皮促进剂的给药组累积透皮量作为对照，氮酮质
量浓度为 1%时对补骨脂素的促透作用最强，可达到
1.68 倍；以 1%氮酮为透皮促进剂，不同皮肤对补骨
脂素的透过顺序为大鼠腹部皮肤＞家兔腹部皮肤＞
小鼠背部皮肤＞猪耳皮肤，结果见表 1。
2.5.2 异补骨脂素体外经皮渗透性结果 补骨脂素
以大鼠腹部皮肤为皮肤模型时，未加透皮促进剂时
的稳态渗透速率为（2.910 6±0.57） μg/(cm2·h)，
以未加透皮促进剂的给药组累积透皮量作为对照，
氮酮质量浓度为 1%时对异补骨脂素的促透作用最
强，可达到 1.63 倍；以 1%氮酮为透皮促进剂为对
照，可见不同皮肤对异补骨脂素的透过顺序为：大
鼠腹部皮肤＞家兔腹部皮肤＞小鼠背部皮肤＞猪
耳皮肤，结果见表 2。
3 讨论
实验中采用的均是完整皮肤，各种动物皮肤对
表 1 补骨脂素在不同动物皮肤中的经皮渗透性参数（n=3）
Table 1 Transdermal permeability parameters of psoralen in different animal’s skin (n=3)
皮肤来源 透皮促进剂 渗透方程 渗透速率
/(μg·cm-2·h-1)
24 h 累积透过量
/(μg·cm-2)
促渗倍数
无透皮促进剂 Y＝3.779 3 X－3.911 9 3.779 3±0.38 86.70±1.58 −
1%氮酮 Y＝6.648 7 X－4.642 7 6.648 7±0.98 145.93±2.72 1.68
3%氮酮 Y＝6.175 6 X－5.082 6 6.175 6±1.22 138.57±2.28 1.60
大鼠
5%氮酮 Y＝6.175 6 X－5.082 6 6.175 6±1.45 136.83±2.83 1.58
1%氮酮 Y＝3.453 2 X＋2.946 7 3.453 2±1.54 82.26±2.93 0.95
3%氮酮 Y＝3.227 0 X＋0.276 8 3.227 0±0.97 75.43±2.19 0.87
小鼠
5%氮酮 Y＝3.372 9 X－0.794 1 3.372 9±1.07 76.22±2.36 0.88
1%氮酮 Y＝4.350 7 X－3.773 4 4.350 7±1.02 97.59±2.47 1.13
3%氮酮 Y＝3.445 9 X－5.533 5 3.445 9±1.21 77.40±2.66 0.89
家兔
5%氮酮 Y＝3.958 8 X－1.587 2 3.995 9±1.05 90.96±2.36 1.05
1%氮酮 Y＝2.368 8 X－1.326 2 2.368 8±0.97 54.84±2.38 0.63
3%氮酮 Y＝1.970 1 X－2.454 1 1.970 1±0.78 43.67±1.87 0.50
猪
5%氮酮 Y＝2.005 0 X－0.576 8 2.005 0±0.59 44.94±1.08 0.52
表 2 异补骨脂素在不同皮肤中的经皮渗透性参数（n=3）
Table 2 Transdermal permeability parameters of isopsoralen in different animal’s skin (n=3)
皮肤来源 透皮促进剂 渗透方程 渗透速率
/(μg·cm−2·h−1)
24 h 累积透过量
/(μg·cm−2)
促渗倍数
无透皮促进剂 Y＝2.624 8 X－3.3802 2.910 6±0.57 63.33±1.72 −
1%氮酮 Y＝4.608 4 X－4.3144 4.608 4±0.94 103.68±3.36 1.63
3%氮酮 Y＝4.354 1 X－5.6318 4.354 1±1.18 97.39±2.13 1.54
大鼠
5%氮酮 Y＝3.898 9 X－4.0269 3.898 9±0.89 88.84±2.75 1.40
1%氮酮 Y＝3.048 7 X＋1.4423 3.048 7±0.56 71.70±1.49 1.13
3%氮酮 Y＝2.721 5 X－0.5963 2.721 5±0.88 62.95±2.36 0.99
小鼠
5%氮酮 Y＝2.755 7 X＋0.0400 2.755 7±0.54 63.66±1.53 1.01
1%氮酮 Y＝3.886 5 X－4.4649 3.886 5±0.57 86.96±1.47 1.37
3%氮酮 Y＝2.874 2 X－5.0966 2.874 2±0.68 64.47±1.85 1.02
家兔
5%氮酮 Y＝3.549 0 X－2.2007 3.549 0±0.98 81.39±2.56 1.29
1%氮酮 Y＝2.063 9 X－1.4329 2.063 9±0.72 47.80±1.59 0.75
3%氮酮 Y＝1.247 4 X－2.6049 1.247 4±0.69 28.72±1.34 0.45
猪
5%氮酮 Y＝1.610 6 X－1.7234 1.610 6±1.03 34.45±2.98 0.54
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药物的渗透性与皮肤的厚度有一定关系。在选用的
4 种动物不同部位的皮肤中，大鼠腹部皮肤最薄，
对补骨脂素和异补骨脂素的通透量最大。虽然文献
报道猪的皮肤与人的皮肤组织结构相似[5]，但是其
毛囊比人的皮肤毛囊粗，真皮厚度大，皮肤处理比
较困难，同时其来源不如大鼠方便，价格相对较高，
因此大鼠腹部皮肤可作为小儿腹泻脐贴膏透皮促进
剂筛选的合适皮肤模型。
实验中选择了氮酮作为透皮促进剂，它是第一
个专门作为皮肤通透促进剂使用而开发的化合物，
对亲水性和亲脂性化合物均有良好的促透效果[6]。氮
酮的常用质量浓度为 0.1%～5%，再增加氮酮质量浓
度并不能增强其效果[7]。本实验 4 种动物皮肤均考察
了不同质量浓度的氮酮的促进作用，结果均显示 1%
氮酮对补骨脂素和异补骨脂素的通透效果最佳。
药物的体外经皮渗透性评价常需要采用一定的
皮肤模型，人的皮肤是最理想的皮肤模型，但是受
其来源的限制，许多研究均采用的是动物皮肤。本
实验对常见的 4 种动物皮肤进行了比较，为药物制
剂的体外经皮渗透性评价中皮肤的选择提供了一定
的参考。
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社, 2006.

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