全 文 :植物外源激素对丹参生长和丹参酮类物质积累的影响
孙玉新1 , 郭亚勤2 , 吴慧贞1 ,刘德辉1 *
( 1 南京农业大学资源与环境科学学院, 江苏 南京 210095; 2 安徽工程科技学院, 安徽 芜湖 241000)
摘 要:目的 研究植物外源激素赤霉素( GA 3 )和吲哚乙酸( IAA)对丹参生长和丹参酮类物质积累的影响。方法
采用温室石英砂盆栽试验与室内分析相结合的方法。结果 单独施用 GA 3 有利于丹参地上部分生物量的增加,
但对地下部分生物量表现一定抑制作用;施用低浓度和高浓度 GA 3 均有利于 3 种丹参酮(隐丹参酮、丹参酮 、丹
参酮! A)的累积, 施用中等浓度 GA 3 则不利于 3 种丹参酮的累积。单独施用 IAA 对丹参地上部分和地下部分生
物量的影响呈现先升后降趋势,但统计学差异不显著,且对株高、根长的影响亦不显著; 总体来看,施用低质量浓度
IAA( 0. 5 mg/ L )有利于丹参根中 3 种丹参酮的累积,但随着 IAA 处理浓度增加, 仅隐丹参酮量有所增加, 而丹参酮
和丹参酮! A 量反而下降。两种激素配施时,低浓度 GA 3 与低浓度 IAA 组合处理对丹参的生长表现出显著促
进作用,并能显著提高丹参根中 3 种丹参酮的量。结论 施用适量的植物外源激素 GA 3 和 IAA 能够促进丹参的
生长和丹参根中 3 种丹参酮类物质的积累。
关键词:丹参; 赤霉素;吲哚乙酸; 丹参酮类物质
中图分类号: R284 1 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 05081306
Effects of exogenous hormones on growth and tanshinones accumulation
in radix of Salvia miltiorrhiza
SU N Yux in1 , GUO Yaqin2 , WU Huizhen1 , LIU Dehui1
( 1 Co llege o f Resources and Env ironmental Sciences, Nanjing Ag ricult ur al Univ ersity , Nanjing 210095, China;
2 Anhui Co llege o f Eng ineer ing Science and Techno log y, Wuhu 241000, China)
Abstract: Objective T o study the ef fects of ex ogenous hormones, g ibberellin ( GA 3 ) and indole3
acetic acid ( IAA) , on g row th and tanshinones accumulat ion in the radix o f S alvia mi lt ior rhiz a Methods
The herb characters and contents o f tanshinones ( cryptotanshinone, tanshinone , and tanshinone !A )
in the radix of S milt ior rhi z a w ith differ ent ho rmone tr eatments w ere invest ig ated and compared in the
combination of t rail pot and indoo r analysis Results It promoted aboveground biomass in the radix of S
mil t iorr hiz a incr easing w ith sing le GA 3 But it inhibited underground biomass incr easing T he exogenous
addit ion of lowlev el and highlev el GA 3 was benef it for tanshinones accumulat ion, w hereas the m iddlelev
el GA 3 wasn∀t T he aboveg round and underg round biomass in the radix of S milt ior rhiz a increased indis
t inct ively with the increasing o f IAA concentrat ion and then decreased And the IAA solut ions also in
creased plant height and roo t length indist inctively in a who le, it w as benef it for tanshinones accumulat ion
w hen applying lowlevel IAA ( 0. 5 mg/ L) singly With the increasing of IAA concentrat ion, the content of
cryptotanshinone increased, but the contents of tanshinone and tanshinone !A decreased It promoted
S mil tior r hi z a r adix g row th and three tanshinones contents increasing obv iously w ith the combined appli
cation of tw o lowlevel hormones Conclusion The applying of GA3 and IAA is benef it for the grow th and
three tanshinones accumulation in the radix o f S milt ior rhiz a
Key words: the radix of S alvia mi lt ior rhiz a Bunge; g ibberel lins ( GA 3 ) ; indole3acetic acid ( IAA) ;
tanshinones
丹参 Salv ia mi lt ior rhiz a Bunge, 是一种多年
生常用活血化瘀的根类中药材[ 1] , 且是活血化瘀的
首选之品[ 2] ,具有活血祛瘀、调经止痛、清热安神等
功效。近年来随着人们应用丹参药物及其所含药用
#813#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
收稿日期: 20090831 基金项目:国家科技支撑计划∃ 有效恢复中药材生产产地条件与土壤微生态环境修复技术研究%项目( 2006BAI09B03)作者简介:孙玉新( 1984 & ) ,女,山东济南人,硕士研究生,主要从事中药材栽培理论与技术研究。 Em ail: 2007103096@ njau. edu. cn
* 通讯作者 刘德辉 T el: ( 025) 84395838 Email: liudehui@ njau. edu. cn
成分进行防病、治病日趋增多,对丹参药材的需求量
也随之加大。现在已形成了大规模的人工栽培。但
部分药农偏施化肥, 使得丹参枝繁叶茂,根部产量却
不高, 丹参酮类有效成分量亦偏低。对丹参研究目
前有药理活性成分[ 3] 及成分测定等方面[ 4] 。植物激
素是一类由人工合成且具有植物激素活性的调节植
物生长与发育的有机物质 [ 5] , 有关植物激素的研究
一直十分活跃,应用于中药研究很多方面[ 6~ 8] ,国内
外一些研究表明外源激素在农作物上的推广应用已
产生了巨大的经济效益和社会效益[ 9]。赤霉素
( GA 3 )对芽菜(如香椿芽菜、荞麦芽苗、萝卜芽菜和
胡萝卜芽苗)有增产作用[ 10~ 13] 。蔡葛平[ 14] 通过盆
栽试验的研究表明赤霉素能促进植物地上部分光合
作用产物的利用率, 使糖类成分代谢加快,并快速转
化为木质素等细胞结构物质。Yamamoto[ 15]研究发
现,在怀特培养基中添加 1 ∋ 10- 7 mo l/ L 吲哚乙酸
使得黄芩苷和汉黄芩素 7O葡萄糖苷酸的量分别
增加了 9. 07%和 6. 33%。GA 3 和 IAA 均广泛应用
于农作物栽培和提高作物产量, 但在栽培丹参中的
应用研究,尤其是对丹参产量和品质方面的研究甚
少。因此,探讨植物外源激素对丹参的调节作用和
改善植株生长发育中的代谢活动,从而改善其内在
品质具有重要的理论意义和应用价值。
1 材料与方法
1. 1 材料:丹参种苗由山东省临朐县丹参种植基地
提供。经江苏省中国科学院植物研究所姚淦研究员
(原标本馆负责人)鉴定为唇形科鼠尾草属的多年生
草本植物丹参 S alvia mi lt ior rhiz a Bunge。供试激
素赤霉素和吲哚乙酸均为化学药品,由上海惠兴生
化试剂有限公司生产。
1. 2 方法:试验在南京农业大学温室中进行, 采用
温室砂培方法。选用高 22 cm, 直径 10 cm 的塑料
瓶,瓶底配托盘,每瓶装入 1. 5 kg 石英砂(试验用石
英砂用稀盐酸浸泡后洗净, 晾干) ,并用遮光布包裹
全瓶。于 2006年 5月 8日选择长势一致的丹参苗
栽种,每瓶定植一株。试验处理如下:不施激素处理
( CK)、GA 3 ( 50 mg / L )、GA 3 ( 150 mg / L )、GA 3 ( 300
mg/ L ) ; IAA ( 0. 5 mg / L )、IAA ( 2 mg/ L )、IAA ( 10
mg/ L) ; GA 3 ( 50 mg / L ) + IAA ( 0. 5 mg/ L )、GA 3
( 150 mg / L ) + IAA ( 2 mg/ L )。9 个处理均重复 5
次,共计 45盆。生长期内, 根据丹参生长需要和外
部环境条件定期浇灌霍格兰营养液或水。于 2006
年 6月 22日进行激素浇灌处理:各处理所用激素先
用少量无水乙醇溶解, 然后用蒸馏水配成一定浓度
的母液,再用蒸馏水稀释至各处理所需浓度,分别缓
慢浇灌丹参,浇灌至托盘中渗出滤液为止(约 80 mL
浇灌液) , 每个处理均只浇灌一次, 丹参于 2006年
11月 2日采收。植物样品采集后, 于 90 ( 杀青 30
m in, 50 ( 烘干,粉碎过 0. 5 mm 筛, 用封口袋避光
保存备用。
1. 3 生物学指标:测定株高、根长、地上和地下部分
的生物量。
1. 4 丹参根的丹参酮 !A、丹参酮 和隐丹参酮的
测定
1. 4. 1 样品的制备:取风干样品 0. 075 g 于具塞试
管中, 加入二氯甲烷与甲醇的混合溶液( 8 ) 2) 10
mL,超声震荡 30 min, 1 000 r/ min离心 10 min, 吸
取上清液过 0. 45 m 的微孔滤膜, 避光保存, 上高
效液相色谱测定[ 16] 。
1. 4. 2 液相色谱条件: 隐丹参酮 ( cryptotashi
none)、丹参酮 ( tanshinone )、丹参酮 !A ( tan
shinone !A )的标准样品购自中国药品生物制品检
定所; 色谱纯甲醇, 水为超纯水。高效液相色谱仪
(日本岛津公司, LC & 20A 泵, SPD & 20AT 紫外检
测器) ; Nucleosil C18色谱柱( 250 mm ∋ 4. 6 mm, 5
m)。流动相为甲醇水( 85 )15) , 体积流量为 1. 0
mL/ min, 检测波长为 270 nm, 进样体积 20 L。隐
丹参酮、丹参酮 、丹参酮 !A 的出峰时间分别为
10、12、16 min, 色谱图见图 1。
1隐丹参酮 2丹参酮 3丹参酮!A
1 cryptotanshinone 2t anshin on e 3t anshin on e !A
图 1 对照品( A)及丹参样品( B)的 HPLC图
Fig. 1 HPLC Chromatograms of reference substances
(A) and radix of S miltiorrhiza (B)
2 结果与分析
2. 1 不同种类激素、不同浓度激素配比对丹参生物
学性状的影响
2. 1. 1 不同浓度的 GA 3 和 IAA 及其不同浓度配
施对丹参地上部分生物量的影响: 不同浓度的 GA 3
和 IAA 及其不同浓度配施对丹参地上部分生物量
#814# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
的影响见表1。从表 1可知,除 IAA 高浓度处理(吲
哚乙酸10 mg/ L )外,其余各处理的丹参地上部分生
物量均较 CK 有不同程度的增加, 表明单施一定浓
度的 GA 3 和 IAA及其一定浓度混配施用均促进了
丹参茎叶的生长, 这和 GA 3 与 IAA 混配施用可以
促进烟草细胞分裂的研究结果基本一致[ 17] 。激素
单施时, 中等浓度的 GA 3 (赤霉素 150 mg/ L )和中
等浓度的 IAA(吲哚乙酸 2 mg/ L )对丹参地上部分
生长的促进作用最好, 且中等浓度的 GA 3 (赤霉素
150 mg / L )处理与 CK 之间差异显著; GA 3 是一类
属于双萜类化合物的高效能植物生长激素 [ 18] ,它能
显著地促进植物茎、叶生长,特别是对遗传型和生理
型的矮生植物有明显的促进作用。这也可能是单独
施用 GA 3 有利于丹参地上部分生物量增加的原因。
两种激素配施时, 低水平配施( GA3 50 mg/ L+ IAA
0. 5 mg/ L)的效果优于中水平配施( GA3 150 mg/ L+
IAA 2 mg/ L)的效果(增加 31. 06%) , 两种激素低水
平配施亦优于其他大部分单施处理的效果(分别增加
19. 41%、24. 92%、44. 41%、23. 03%、61. 37% ,仅中等
浓度的 GA 3 处理( 150 mg/ L)例外。
表 1 不同种类激素、不同浓度激素配比对丹参生物学性状的影响
Table 1 Ef fects of various hormones at different concentration on biological characteristics in radix of S miltiorrhiza
激素处理/ ( mg # L- 1) 地上干质量/ g 地下干质量/ % 根冠比 株高/ cm 根长/ cm
对照( CK) 4. 118 ∗ 1. 475 b 7. 668 ∗ 1. 825 a 2. 048 ∗ 0. 833 ab 34. 86 ∗ 12. 64 b 22. 61 ∗ 2. 76 a
GA 3 50 5. 038 ∗ 1. 033 b 6. 666 ∗ 1. 865 ab 1. 372 ∗ 0. 446 b 41. 10 ∗ 10. 35 ab 34. 80 ∗ 4. 80 a
GA 3 150 7. 066 ∗ 1. 341 a 6. 448 ∗ 1. 150 ab 0. 858 ∗ 0. 241 b 52. 54 ∗ 11. 62 a 25. 44 ∗ 2. 78 a
GA 3 300 4. 816 ∗ 0. 255 b 4. 738 ∗ 1. 312 b 0. 976 ∗ 0. 238 b 47. 14 ∗ 10. 84 ab 25. 24 ∗ 2. 70 a
IAA 0. 5 4. 166 ∗ 1. 103 b 6. 938 ∗ 1. 364 ab 1. 758 ∗ 0. 519 ab 38. 64 ∗ 12. 08 ab 23. 46 ∗ 3. 84 a
IAA 2 4. 890 ∗ 1. 860 b 8. 018 ∗ 2. 446 a 1. 836 ∗ 0. 777 ab 44. 46 ∗ 15. 83 ab 26. 54 ∗ 7. 49 a
IAA 10 3. 728 ∗ 1. 509 b 7. 458 ∗ 1. 478 a 2. 270 ∗ 0. 839 a 35. 04 ∗ 13. 84 b 25. 18 ∗ 4. 55 a
GA 350+ IAA0. 5 6. 016 ∗ 1. 224 ab 8. 136 ∗ 2. 388 a 1. 448 ∗ 0. 618 b 35. 02 ∗ 12. 31 b 26. 72 ∗ 4. 01 a
GA 3150+ IAA2 4. 590 ∗ 1. 492 b 4. 584 ∗ 1. 459 b 1. 046 ∗ 0. 365 b 49. 74 ∗ 19. 01 ab 26. 44 ∗ 2. 51 a
表中同一列中的不同字母表示 Duncan∀s试验 5%水平差异显著,下同
Dif ferent letters mean a signi ficant diff erence at 5% level at Duncan∀s test , foll ow ing tab le is same
2. 1. 2 不同浓度的 GA 3 和 IAA 及其不同浓度配施
对丹参地下生物量的影响: 由表 1可以看出,与 CK
比较,只有单施中等浓度的 IAA 处理(吲哚乙酸)和
两种低水平激素配施处理( GA 350 mg/ L+ IAA 0. 5
mg/ L)对丹参地下部分生物量呈现正效应(分别为
4. 56%和 6. 10% ) ,且差异未达显著水平,其余激素
单施和配施处理均对丹参地下部分生物量呈现负效
应,总体看来,两种激素均对丹参地下部分生物量累
积不利。苑博华等[ 19] 指出, IAA 能够促进植物叶片
的扩大、茎的伸长、不定根以及侧根的形成, 但对块
根的形成有抑制作用,本试验结果与此基本相符;对
于 GA 3 而言,其对丹参根的抑制作用随其浓度的升
高而增强。结合 GA 3 对地上部分生物量的效应可
以看出, GA 3 主要刺激丹参地上部分的分枝和叶的
生长,而不利于丹参根生物量的累积。蔡葛平等[ 14]
的研究结果表明,对黄芩幼苗叶面喷施 GA 3 可使黄
芩地上部分生物量增加, 并能增加黄芩的株高,但地
下部分生物量则降低, 这与本实验在丹参上浇灌
GA 3 得到的结果相似。
2. 1. 3 GA 3 和 IAA 对丹参根冠比的影响: 外源激
素 GA 3 对丹参地上部分生物量的积累有一定促进
作用, 而对地下部分生物量的积累则显示一定抑制
作用。除 IAA 高质量浓度处理(吲哚乙酸 10 mg/
L)外,其余各激素单施或配施处理的丹参根冠比均
低于对照。
2. 1. 4 GA 3 和 IAA 对丹参株高和根长的影响: 各
激素处理丹参的株高均高于 CK ( 34. 86 cm ) , 增高
0. 16~ 17. 68 cm ,增高幅度为 0. 46% ~ 50. 72%, 其
中 GA 3 150 mg/ L 处理的丹参株高最高 ( 52. 54
cm) ,与 CK处理达到显著差异。另一方面, IAA 10
mg/ L 处理 的丹 参 株高 ( 35. 04 cm ) 和 GA 3
50 mg/ L+ IAA 0. 5 mg/ L 处理的丹参株高( 35. 02
cm)与 CK差异不大,说明激素对丹参株高的影响除
与激素种类有关外(本实验条件下 GA 3 优于 IAA) ,
还与施用激素的浓度有关(本实验条件下中等浓度
的 GA 3 较佳)。盛束军等[ 20] 研究认为 GA 3 的∃促
长%效应主要通过益母草叶片、叶柄细胞的伸长生长
而实现, GA 3 对益母草的生长,尤其对株高的促进作
用较其他处理显著。
两种激素对丹参根长的影响较小, 不同浓度的
GA 3 和 IAA 及其不同浓度配施各处理的丹参根长
与 CK均无显著差异。一定浓度的外源激素能促进
丹参地上部分和根的伸长, IAA 能够促进植物不定
根、侧根的形成,但对块根的形成有抑制作用 [ 18]。结
合丹参生物量数据考虑, 可以推测, GA 3、IAA 对丹
参根系的抑制作用主要表现在其抑制根系膨大方
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面,即抑制丹参根茎的增粗上, 而不是分根数的
增加。
2. 2 不同种类激素、不同浓度激素配比对丹参根中 3
种丹参酮量的影响:两种激素不同浓度处理丹参根 3
种丹参酮的量见表 2。首先, 从 3种丹参酮量的总量
来看,与 CK相比,除 GA3 150 mg/ L和 GA3 150 mg/ L
+ IAA 2 mg/ L 两处理外,其余各激素处理的丹参根
中3种丹参酮的总量均有所增加, 增幅为 25. 35%~
103. 03%。其中 GA3 低质量浓度+ IAA 低质量浓度
( GA3 50 mg/ L+ IAA 0. 5 mg/ L )处理和 GA3 低质量
浓度( 50 mg/ L )处理的丹参根中 3种丹参酮的总量增
幅最大。表明在一定浓度范围内施用 GA3 和 IAA有
利于丹参酮类物质的累积,且低浓度的 GA 3 单施或与
低浓度的 IAA混施的促进效果最佳。袁媛等[ 21]的研
究也表明, GA 3 可以促进丹参毛状根中丹参酮类活性
物质的积累。
表 2 不同种类激素、不同浓度激素对丹参中 3 种丹参酮量的影响
Table 2 Effects of various hormones at dif ferent concentration on contents of cryptotanshinone,
tanshinone , and tanshinone !A in radix of S miltiorrhiza
激素处理/ ( mg # L- 1 ) 隐丹参酮/ ( mg # g- 1) 丹参酮 / ( mg # g- 1 ) 丹参酮!A ( mg # g- 1 ) 3种丹参酮总量/ ( mg # g- 1 )
对照( CK) 0. 943 ∗ 0. 342 c 0. 193 ∗ 0. 041 bc 1. 436 ∗ 0. 272 b 2. 572
GA 3 50 2. 954 ∗ 0. 190 a 0. 278 ∗ 0. 067 ab 1. 976 ∗ 0. 700 ab 5. 208
GA 3 150 0. 915 ∗ 0. 257 c 0. 138 ∗ 0. 020 c 0. 807 ∗ 0. 095 c 1. 860
GA 3 300 1. 607 ∗ 0. 094 b 0. 343 ∗ 0. 094 ab 1. 977 ∗ 0. 440 ab 3. 927
IAA 0. 5 1. 232 ∗ 0. 596 bc 0. 349 ∗ 0. 089 a 1. 830 ∗ 0. 451 ab 3. 411
IAA 2 1. 395 ∗ 0. 184 bc 0. 267 ∗ 0. 050 ab 1. 583 ∗ 0. 507 ab 3. 245
IAA 10 1. 666 ∗ 0. 493 b 0. 244 ∗ 0. 012 b 1. 562 ∗ 0. 464 ab 3. 472
GA 350+ IAA0. 5 2. 462 ∗ 0. 647 a 0. 351 ∗ 0. 039 a 2. 409 ∗ 0. 276 a 5. 222
GA 3150+ IAA2 1. 200 ∗ 0. 258 bc 0. 154 ∗ 0. 042 bc 0. 717 ∗ 0. 277 c 2. 071
从隐丹参酮的量来看, GA 3 ( 50 mg/ L )、GA 3 ( 300
mg/ L)、IAA( 10 mg/ L )和 GA3 ( 50 mg/ L ) + IAA0. 5
mg/ L 4个处理隐丹参酮量显著高于 CK, 其中 GA3
50 mg/ L、GA3 50 mg/ L+ IAA 0. 5 mg/ L 的隐丹参酮
量居前两位,其量分别为对照的 3. 13倍和 2. 61倍。
在单施 GA 3 的 处理中, GA3 50 mg/ L 和 GA3
300 mg/ L处理丹参根的隐丹参酮量较对照显著增
加,而 GA 3 150 mg/ L 处理丹参根的隐丹参酮量较对
照稍有降低,这说明低浓度和高浓度的 GA3 有利于
丹参根中隐丹参酮的积累,而中等浓度的 GA 3 则不
利于丹参根中隐丹参酮的积累。在单施 IAA的 3个
处理中,丹参根中隐丹参酮的量随着 IAA 浓度的增
加而增加,但 3者之间差异未达显著水平。以两种激
素低、中浓度配施的两处理,与对照相比,低浓度配施
处理的丹参根中隐丹参酮的量显著高于中浓度配施
处理, 两者之间达到显著水平, 且前者高出后者
105. 2%。总的看,低浓度和高浓度的 GA 3 处理、高
浓度的 IAA处理以及两者低浓度配施处理均对丹参
根隐丹参酮量产生显著正效应,但在本试验条件下,
两者配施并不表现叠加效应。
从丹参酮 的量来看,与对照相比,除 GA 3 150
mg/ L 和 GA 3 150 mg/ L+ IAA 2 mg/ L 处理的丹参
酮 量略有下降外, 其余处理的丹参酮 量均有所
增加,并且 IA A 0. 5 mg/ L 和 GA 3 50 mg / L+ IAA
0. 5 mg / L 两处理的增加值达到显著水平。在单施
GA 3 的 3个处理中, GA 3 50 mg/ L 和 GA 3 300 mg/
L 处理丹参酮 的量较对照显著增加, 而 GA3 150
mg/ L 处理丹参根的丹参酮 量较对照有较大幅度
降低,这说明低浓度和高浓度的 GA 3 有利于丹参酮
的积累,而中等浓度的 GA 3 则不利于丹参根中丹
参酮 的积累; GA 3 对丹参酮 的效应与对隐丹参
酮的效应基本相同。在单施 IAA 的处理中, IA A对
丹参酮 的效应不同于对隐丹参酮的效应,丹参中
丹参酮 的量随着 IAA 浓度的增加而减少,且 IAA
10 mg/ L 处理的丹参酮 的量显著低于 IAA 0. 5
mg/ L 处理。两种激素低、中浓度配施的两处理,与
对照相比,低浓度配施处理的丹参根中丹参酮 的
量显著高于中浓度配施处理,两者之间达显著水平,
且前者高出后者 127. 9%。此外, 低浓度配施处理
的丹参酮 量亦高于两种激素不同浓度的单施处
理。这表明低浓度的 IAA 和低浓度 GA 3 配施十分
有利于丹参酮 的积累, 且两种激素低浓度配施时
表现出一定程度的叠加效应。
从丹参酮 !A 的量来看, 与对照相比, 除 GA 3
( 150 mg/ L)和 GA 3 ( 150 mg / L ) + IAA( 2 mg / L )处
理的丹参酮 !A 量显著下降 (分别下降 43. 80%和
50. 07% )外,其余处理的丹参酮 !A 量均有所增加,
并且两激素低水平配施处理的丹参酮 !A 量的增加
达到显著水平。单施 GA 3 处理中, 50 mg/ L 和 300
mg/ L 处理的丹参酮 !A 量较 GA 3 150 mg/ L 和对
照高,这说明浇灌低浓度和高浓度的赤霉素有利于
丹参酮 !A 的积累;单施 IAA 的处理, 随着 IAA 浓
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度的增加, 丹参酮 !A 量呈降低趋势, 但差异不显
著;配施处理中,低浓度配施处理的丹参酮 !A 量显
著高于高浓度配施处理, 且高于两激素各浓度单施
处理。可见, GA 3 处理对丹参酮 !A 量有显著影响,
而 IAA 影响不显著,两激素低浓度配施能够显著提
高丹参酮 !A 的量,且表现出一定的叠加效应。
从以上分析可知,两种激素不同浓度单施或混
施对丹参根 3种丹参酮的影响而言, GA3 对它们的
影响基本一致, 都是低浓度 ( 50 mg / L ) 和高浓度
( 300 mg / L )对 3种丹参酮的积累显示促进作用, 中
等浓度 GA 3 ( 150 mg/ L )表现出一定的抑制效应;
IAA 对隐丹参酮的影响表现为随 IAA 浓度的增加
而增大, 而对丹参酮 和丹参酮 !A 的影响则表现
为随 IAA 浓度的增加而减少。
据前期研究 [ 22] ,丹参根中的丹参酮是二萜醌类
物质,其合成前体很可能是酚类物质,丹参酮类物质
的生成很可能是在丹参中多酚氧化酶、过氧化物酶
的作用下完成的。根系的形成与许多内外因素有
关,尤其是植物激素。生长素在促进不定根和侧根
生长过程中起着关键的作用, 但生长素调控根生长
发育的作用机制目前还不十分清楚 [ 23]。袁媛等 [ 21]
的研究表明外源 GA 3 可以促进丹参毛状根中丹参
酮!A 等化合物的积累, 推测 GA 3 可以作为一种有
效的丹参酮类活性成分的诱导因子。然而各种激素
调节植物生命过程不是单一的, 而是形成相互交织
的网,单守明 [ 24] 的试验表明秋季叶面喷施 IAA、
GA 3 和 6BA 显著增加草莓植株各器官的干质量,
提高了草莓植株的根冠比, 说明它们在提高 Pn 的
同时,也促进了同化物向根、茎中的分配, 从而促进
了茎加粗和根系生长。关于 GA 3 和 IAA 促进丹参
生长和有效成分累积的作用机制有待进一步研究。
2. 3 不同种类激素、不同浓度激素配比对整株丹参
根中 3种丹参酮总量的影响:两种激素不同浓度配
比对单株丹参中各种丹参酮及 3种丹参酮总量的影
响见表 3。从 3种丹参酮的总量来看, GA 3 中、高浓
度水平单施处理和两激素中水平配施处理不利于 3
种丹参酮的积累, 而其余处理 3种丹参酮总量均有
不同程度的提高, 其中以两激素低水平配施处理的
丹参中 3 种丹参酮总量增幅最大, 达到115. 67%。
IAA 3浓度单施的处理随着浓度的增加, 3种丹参
酮总量依次呈小幅增加, 而 GA 3 3个浓度单施处理
的 3种丹参酮总量的差异很大, GA 3 150 mg / L 处
理的 3种丹参酮总量比对照大幅增加( 76. 03% ) ,而
GA 3 150 mg / L 处理则比对照大幅降低( 39. 19%) ,
GA 3 300 mg / L 处理比对照小幅减少( 5. 66% ) ; 两
激素中水平配施处理不论对各种丹参酮的累积影响
还是对 3种丹参酮总量的影响都表现出强烈的抑制
效应,反之, 两激素低水平配施处理无论对单株丹参
中 3种丹参酮的生成或者 3 种丹参酮总量都表现
最佳。
表 3 不同种类激素、不同浓度激素配比对整株丹参中 3种丹参酮总量的影响
Table 3 Effects of various hormons at different concentration on contents of cryptotanshinone,
tanshinone , and tanshinone !A in radix of S miltiorrhiza
处理/ ( mg # L- 1 ) 隐丹参酮/ ( mg # 株- 1) 丹参酮 / ( mg # 株- 1 ) 丹参酮!A / ( mg # 株- 1 ) 3种丹参酮总量/ ( mg # 株- 1 )
对照( CK) 7. 231 1. 480 11. 011 19. 722
GA 3 50 19. 691 1. 853 13. 172 34. 716
GA 3 150 5. 900 0. 890 5. 204 11. 994
GA 3 300 7. 614 1. 625 9. 367 18. 606
IAA 0. 5 8. 548 2. 421 12. 696 23. 665
IAA 2 11. 185 2. 141 12. 524 25. 850
IAA 10 12. 425 1. 820 11. 806 26. 051
GA 3 50+ IAA 0. 5 20. 031 2. 856 19. 560 42. 537
GA 3 150+ IAA 2 5. 458 0. 700 3. 261 9. 419
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548
芫花高效液相色谱指纹图谱研究
逄楠楠,毕开顺, 闫宝庆,陈晓辉*
(沈阳药科大学药学院 ,辽宁 沈阳 110016)
摘 要:目的 研究芫花药材的高效液相色谱指纹图谱。方法 采用 RPH PLC 法。色谱柱: K romasil C18 ( 250
mm ∋ 4. 6 mm, 5 m) , 流动相:甲醇0. 05%磷酸水, 梯度洗脱, 体积流量: 1. 0 mL/ min,柱温: 35 ( , 检测波长: 238
nm。结果 在色谱指纹图谱中, 确立了其中 21个共有峰, 建立了芫花药材的共有模式, 在 19 批芫花药材中有 17
批样品的指纹图谱相似度在 0. 90 以上。结论 该方法简便、准确、重现性好, 为评价芫花药材的质量提供了依据。
关键词:芫花; 指纹图谱; RPH PLC
中图分类号: R282 7 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 05081804
Fingerprint analysis of Flos Genkwa by HPLC
PANG Nannan, BI Kaishun, YA N Baoqing, CHEN Xiaohui
( Schoo l of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical Univ ersity , Shenyang 110016, China)
Abstract: Objective T o establish the chromatographic fingerprint analysis fo r the quality cont ro l of
Flos Genkwa Methods RPHPLC M ethod w as applied to establish the chromatographic f ing erprint The
separat ion w as performed on a Kromasil C18 co lumn ( 250 mm ∋ 4. 6 mm , 5 m) w ith a gr adient elut ion
composed o f methanol and 0. 05% phosphate acid The column temperature w as set at 35 ( and the f low
rate w as 1. 0 mL/ min T he detect ive w avelength w as at 238 nm Results T w entyone characterist ic peaks
w ere established in the fingerpr int T he mutual model o f F los Genkwa was established and the similarit ies
w ere calculated T he similarity of 17 samples in all the 19 samples w as more than 0. 90 Conclusion The
method is simple and accurate w ith good reproducibility It can be used fo r the quality cont rol of Flos
Genkwa
Key words: Flos Genkwa ; f ing er print; RPH PLC
芫花始载于+神农本草经,[ 1] ,为瑞香科植物芫
花 Dap hne g enkw a Sieb et Zucc的干燥花蕾,收载
于+中国药典,2005年版(一部) ,味苦、辛, 性温, 有
毒,归肺、脾、肾经[ 2] , 其为传统的泻下逐水药。内服
用于治疗水肿胀满、胸腹积水、痰饮积聚、气逆咳喘、
二便不利,外用治疗疥癣秃疮、冻疮。现代研究表明
芫花还具有镇痛、镇静、抗惊厥、抗炎、抗肿瘤、免疫
调节、抗生育等作用[ 3, 4]。
#818# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
收稿日期: 20090910 作者简介:逄楠楠( 1984 & ) ,女,山东龙口人,硕士研究生,研究方向为中药质量控制研究。
T el : ( 024) 23986292 Email: nnange132@ 163. com
* 通讯作者 陈晓辉 T el: ( 024) 23986259 Email: cxh _syphu@ yahoo. com