全 文 ：图 3 SA-BSA结合程度参数和理化特性参数的拟合曲线图
Fig1 3 Correlation between SA-BSA binding parameter Y
and physicochemical property parameters
时分子的极性表面积减小, 与蛋白的结合作用将增
强;在游离羟基数目一定的情况下,相对分子质量增
大,将使单位相对分子质量下的分子极性表面积减
小,其与蛋白的结合作用将增强。因此, 分子中结构
中羟基数目和分子体积综合影响 SA-BSA 的相互
作用,疏水性和氢键结合能力是与丹参酚酸-BSA 结
合程度相关的两个理化特性。
3 讨论
本实验研究结果表明, 对于天然的小分子 SA
类化合物, 在药物设计中, 综合考虑脂-水分配系数
和单位相对分子质量下的拓扑分子极性表面积这两
个理化参数来预测其与蛋白的结合作用程度, 将可
以获得切实可靠的参考数据。
参考文献:
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半夏白术天麻汤提取液的血清指纹图谱研究
王淑玲1 ,孙秀梅2 ,张兆旺2 ,谢 恬1*
( 11 杭州师范大学 生物医药与健康研究中心 ,浙江 杭州 310012; 21 山东中医药大学药学院,山东 济南 250014)
摘 要:目的 比较半夏白术天麻汤 4 种方法提取液的血清指纹图谱。方法 取大白兔, ig 半仿生-生物酶提取
( SBEE)液, 采集不同时刻的血样, 分离含药血清,用 HPLC 法和 UV 法测定,将 H PLC 色谱峰数目、峰总面积以及
紫外吸光度平均值标准化处理,加权求和后得综合评判 Y 值,以 Y 值大者为较佳采血时刻; 然后对 4 种方法提取液
此时刻的含药血清进行指纹图谱比较。结果 给药后 2 h 的含药血清综合评判 Y 值最大; 4 种方法提取液 2 h 含
药血清以 SBEE 液综合评判 Y 值最大。结论 SBEE 液含药血清较水提法、醇提法、SBE 法提取液含药血清中成分
量高。
关键词:半夏白术天麻汤; 4种提取液; 含药血清指纹图谱
中图分类号: R2841 2 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 08-1274-06
Comparison of serum fingerprint in extract solution from Banxia Baizhu Tianma Decoction
WANG Shu-ling1 , SUN Xiu-mei2 , ZHANG Zhao-w ang2 , XIE T ian1
( 11 Biomedicine and H ealth Inst itute of H ang zhou No rmal U niversit y, H angzhou 310012, China; 21 Co llege
of Pharmacy, Shandong Univ ersity of T r aditional Chinese Medicine, Jinan 250014, China)
Abstract: Objective Comparing the serum fingerprint of four kinds of ex tr act so lut ion f rom Banxia
#1274# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
* 收稿日期: 2009- 10-29 作者简介:王淑玲( 1972 ) ) ,女,山东东营人,讲师、博士, 1995年获山东中医药大学学士学位, 2005年获江西中医学院中药学硕士学位,
2009年获山东中医药大学药学院中药学博士学位,从事中药新药研究与中药炮制原理研究的科研、教学工作。
T el: ( 0671) 28868269 E-mail: w sling000@ 1631 com
Baizhu Tianma Decoct ion1 Methods Taking rabbits as exper iment animals, collecting blood, and separa-
t ing serum af ter drenching sem-i bionic enzyme ex t ract ing ( SBEE) solution1 HPLC was used to detect the
fingerpr ints o f medicated serum at dif ferent blood-collect ing t ime in o rder to opt imize the best blood col lec-
t ing time, then the serum fingerpr ints of four kinds of solut ion collected w er e compared1 Results HPLC
show ed that w hen blood collecting t ime w as 2 h, the number and total area of chromatog raphic peak had
the max imum value; SBEE Solut ion had the the max imum number and total area of chromatographic peak
in the four kinds of solut ion at the best blood co llect ing time1 Conclusion The component content in SBEE
medicated serum is higher than that by o ther method1
Key words: Banx ia Baizhu Tianma Decoct ion; four kinds of ex t ract solution; serum fingerpr int
半夏白术天麻汤来源于清代程国彭的5医学心
悟6, 是中医临床治疗风痰证的常用方。目前该方的
提取方法仍采用水提法。水提法易导致挥发性成分
的流失。半仿生-生物酶提取( Sem-i bionic enzyme
ex t ract ion, SBEE)法是在 SBE 法的基础上加入适
宜的生物酶形成的, SBEE 法是 SBE 法的进一步仿
生化,可以最大程度的提取活性混合物, 克服水提法
的缺点[ 1, 2]。笔者采用 SBEE 法对半夏白术天麻汤
进行了研究,优选了 SBEE 法提取工艺条件和较佳
组合方式, 然后对 4 种方法(水提法、醇提法、SBE
法、SBEE 法)提取液的指标成分、提取液指纹图谱
进行比较。由于中药发挥药效的物质基础, 可能是
中药提取液中的原型成分,也可能是代谢产物,对于
口服中药而言, 只有那些被吸收入体内的化学成分
才可能是真正发挥药效的物质。在以上研究的基础
上,本实验以新西兰大白兔为试验动物, 采用 HPLC
和 UV 两种测试方法,对 4种方法提取液的含药血
清进行指纹图谱的分析比较。
1 仪器与材料
Agilent1100高效液相色谱仪(美国) , G1311A
四元泵, Agilent 1100 LC 色谱工作站, G1315A/
BDAD检测器, G1316A柱温箱, Agilent 1100LC 在
线真空脱气机; UV ) 2450紫外可见分光光度仪(日
本岛津) ; pHS ) 3C 型精密 pH 计 (上海雷磁仪器
厂) ; LC5 ) 10B 高速离心机(北京医用离心机厂) ;
AE240S 电子天平(瑞士 MET TLER) ; 定量取液器
(上海金林生化试剂仪器厂)。
乙腈色谱纯(天津四友公司) ,其他试剂均为分析
纯。新西兰大白兔, 健康未孕, 雌性, 体质量( 21 5 ?
011) kg,购自山东中医药大学实验动物中心, 合格证
号: SCXK(鲁) 20080015。
2 方法与结果
21 1 样品液的制备: 由本课题组提供, 浓缩至相当
于半夏白术天麻汤处方药材 11 415 g/ mL。
21 2 色谱条件: Diamonsil TM (钻石) C18柱 ( 200
mm @ 41 6 mm, 5 Lm) ; 流动相: 乙腈( A)-水( B) , 线
性梯度洗脱, 0 y 45 min ( A: 5% y 45%) , 45 y 60
m in( A: 45% y 100%) ; 体积流量 11 0 mL/ min; 检测
波长 220、250、280 nm;柱温 25 e ;进样量 20 LL。
21 3 不同采血时刻含药血清 HPLC指纹图谱的测
绘[ 3] :取新西兰大白兔, 禁食 12 h 后, ig 给药, 剂量
22 g/ kg,分别于0、015、11 5、210、31 0、41 0、610、81 0 h心
脏取血,每次 5 mL, 血液凝固后 3 000 r/ min 离心
10 min,用一次性吸管分离出血清 A。精密吸取血
清 2 mL,按 01 5 mL/ mL 血清加入 10%三氯乙酸沉
淀蛋白, 10 000 r/ min离心 10 m in,取上清液真空冷
冻干燥 1~ 2 d,加入乙腈得含药血清 B。分别进样,
即得 3个检测波长下 0 、21 0 h 含药血清指纹图谱,
见图 1。可见保留时间在 10~ 52 min 空白血清对
含药血清的 HPLC 指纹图谱干扰较小,故只取10~
52 min色谱峰进行比较。
对每个检测波长下不同时刻的峰总面积和峰个
数按公式 Xci, j = ( X i, j - X j ) / S j 进行标准化处理[ 4]
(式中 X i, j为不同时刻的峰总面积, X j 为 7 个时刻
总面积的平均值, S j 为不同时刻峰总面积的标准偏
差,即 S j = E ( X i, j - X j ) 2
n- 1
, Xci, j 为标准化后的
值) ,按照公式 Y 220 = ( YA + Y n ) / 2即得综合评价指
标 Y 220值( Y 220为在 220 nm 检测波长处的特征值;
YA 为总面积的标准化值; Y n 为峰个数的标准化
值)。不同时刻 3个检测波长含药血清的色谱峰、总
面积及 Y 值见表 1~ 3。
21 4 不同采血时刻含药血清的紫外光谱测定: 取含
药血清 A, 用紫外分光光度仪在 200~ 700 nm 处,
20~ 300 min 内全程扫描, 测定吸光度。对不同采
血时刻的含药血清吸光度的平均值做标准化处理得
特征值( YU )。结果见表 4。
21 5 采血时刻的确定:为了消除量纲和单位不同带
#1275#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
图 1 空白血清( a)在 220 nm( a-1)、250 nm( a-2)、280 nm( a-3)以及半夏白术天麻汤 SBEE-2 h血清( b)在 220 nm
( b-1)、250 nm( b-2)、280 nm(b-3)的指纹图谱
Fig1 1 Fingerprint of blank serum (a) at 220 nm (a-1) , 250 nm (a-2) , 280 nm (a-3) wavelength, and Banxia Baizhu
Tianma Decoction SBEE-2h serum ( b) at 220 nm ( b-1) , 250 nm (b-2) , and 280 nm ( b-3) wavelength
表 1 SBEE液不同采血时刻含药血清 HPLC测定结果( 220 nm)
Table 1 Serum fingerprint of SBEE solution at different blood-collecting time by HPLC (220 nm)
峰
序
01 5 h
tR/ min 峰面积
11 5 h
tR/ min 峰面积
21 0 h
tR/ min 峰面积
31 0 h
tR / m in 峰面积
41 0 h
t R/ m in 峰面积
61 0 h
tR/ min 峰面积
81 0 h
tR/ min 峰面积
1 111 64 7061 37 111 65 9541 84 111 652 12611 19 111 43 6881 79 111 40 5041 53 111 28 7081 86 111 45 3451 53
2 161 25 231 99 161 30 431 55 161 26 451 48 151 96 401 01 151 96 181 71 151 90 271 48 111 79 101 46
3 241 11 141 71 161 92 311 49 161 90 471 47 161 61 241 65 161 74 251 10 161 79 371 57 151 78 1231 06
4 261 02 241 96 221 28 161 45 181 23 201 95 241 19 141 33 251 17 131 39 221 11 131 96 161 80 201 69
5 261 89 3561 75 241 11 171 56 201 68 131 67 241 83 201 79 261 49 9621 96 241 20 201 30 221 73 191 71
6 271 39 121 81 251 02 281 10 221 28 211 37 251 18 141 05 271 55 301 51 251 10 221 81 261 62 2491 99
7 511 26 671 80 251 46 121 77 241 15 211 08 261 49 2111 92 511 05 181 81 261 38 13111 12 271 94 191 11
8 261 04 291 09 251 02 341 08 271 57 161 97 271 57 251 63
9 261 94 3491 59 251 48 171 66
10 271 40 161 46 261 03 311 15
11 511 25 471 14 261 93 3681 40
12 271 43 121 22
总面积 1 2071 39 1 5471 05 1 8941 72 1 0311 52 1 5741 00 2 1671 73 7881 56
峰个数 71 00 111 00 121 00 81 00 71 00 81 00 71 00
Y A - 01 518 7 01 182 3 01 899 8 - 01 881 6 01 237 9 11 463 3 - 1 383 1
Y n - 01 759 1 11 173 1 11 656 2 - 01 276 0 - 01 759 1 - 01 276 0 - 01 759 1
Y 220 - 01 638 9 01 677 7 11 278 0 - 01 578 8 - 01 260 6 01 593 6 - 1 071 1
表 2 SBEE液不同采血时刻含药血清 HPLC测定结果( 250 nm)
Table 2 Serum fingerprint of SBEE solution at different blood-collecting time by HPLC (250 nm)
峰
序
01 5 h
tR/ min 峰面积
11 5 h
tR/ min 峰面积
21 0 h
tR/ min 峰面积
31 0 h
tR / m in 峰面积
41 0 h
t R/ m in 峰面积
61 0 h
tR/ min 峰面积
81 0 h
tR/ min 峰面积
1 111 63 461 66 111 65 631 57 101 28 51 00 111 43 451 23 111 40 341 57 111 28 511 15 111 45 231 62
2 121 67 581 42 121 70 791 48 111 65 811 98 121 40 621 03 121 44 521 09 111 88 411 36 141 12 361 01
3 161 16 741 51 161 22 1211 23 121 64 901 57 151 87 941 93 151 96 51 14 151 91 551 57 161 24 221 40
4 251 03 161 09 251 01 161 70 161 19 1301 74 241 86 121 98 261 49 521 29 261 38 761 13 261 62 141 79
5 261 90 241 43 261 95 241 77 201 74 31 05 261 50 111 72 511 06 151 96 451 01 141 93
6 511 27 141 72 511 27 91 81 251 07 201 00
7 251 97 51 73
8 261 92 271 77
9 341 09 31 13
10 451 06 71 15
11 511 28 41 01
总面积 2341 83 3151 56 3791 14 2261 89 2061 05 2251 21 111 76
峰个数 61 00 61 00 11 5 51 00 41 00 51 00
Y A - 01 093 8 01 859 4 11 610 2 - 01 187 6 - 01 433 7 - 01 207 4 - 1 547 1
Y n 01 00 01 00 21 165 1 - 01 433 0 - 01 433 0 - 01 866 0 - 01 433 0
Y 250 - 01 046 9 01 429 7 11 887 6 - 01 310 3 - 01 433 3 - 01 546 7 - 01 990 0
#1276# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
表 3 SBEE液不同采血时刻含药血清 HPLC测定结果( 280 nm)
Table 3 Serum fingerprint of SBEE solution at different blood-collecting time by HPLC (280 nm)
峰 序 01 5 h
tR/ min 峰面积
11 5 h
tR/ min 峰面积
21 0 h
tR/ min 峰面积
31 0 h
tR / m in 峰面积
41 0 h
t R/ m in 峰面积
61 0 h
tR/ min 峰面积
81 0 h
tR/ min 峰面积
1 111 634 1151 67 111 64 1571 75 101 08 21 47 111 43 1131 70 111 40 831 15 111 28 1191 58 111 28 1211 12
2 161 13 201 80 121 77 181 05 111 65 1961 89 151 94 211 28 161 00 121 93 151 85 151 91 151 85 151 93
3 221 28 51 76 161 27 271 29 121 68 211 55 211 88 61 20 211 87 51 59 161 76 71 99 211 73 61 45
4 261 89 711 79 221 33 61 25 161 24 291 97 251 18 31 89 261 49 1841 58 211 74 61 46 261 38 2581 36
5 511 27 71 05 251 47 41 59 161 90 101 79 261 50 361 55 511 06 91 31 261 38 2591 06
6 261 47 41 90 221 32 71 47
7 261 94 691 96 251 47 51 39
8 511 28 41 35 251 97 31 38
9 261 93 731 52
10 511 27 21 01
总面积 2211 07 2931 13 3531 46 1811 60 2951 56 4091 00 401 86
峰个数 5 8 10 5 5 5 4
Y A - 11 003 4 - 01 171 2 01 525 5 - 11 459 2 - 01 143 1 11 166 9 1 084 5
Y n - 01 462 9 01 925 8 11 851 6 - 01 462 9 - 01 462 9 - 01 462 9 - 01 925 8
Y 280 - 01 733 2 01 377 3 11 188 6 - 01 961 1 - 01 303 0 01 352 0 01 079 3
表 4 SBEE液不同采血时刻含药血清吸光度测定结果
Table 4 Serum fingerprint of SBEE solution at dif ferent blood-collecting time by absorbance
峰 序 015 h
nm A
11 5 h
nm A
21 0 h
nm A
31 0 h
nm A
41 0 h
nm A
610 h
nm A
81 0 h
nm A
1 576 - 01 069 576 - 01 036 576 01051 576 01 032 576 01 071 576 01 030 576 01 072
2 541 - 01 073 540 - 01 037 541 01062 541 01 019 541 01 061 541 01 023 541 01 061
3 413 01 392 413 01 696 414 11720 414 11 270 414 11 530 414 11 103 421 01 404
4 214 11 335 283 21 445 280 31045 281 31 024 281 21 603 283 11 996 345 01 141
5 271 21963 265 31 035 204 01 991
6 265 21973 256 21 994
7 250 21927 248 21 996
X 01 396 01 767 11963 11 910 11 066 01 788 01 334
YU - 01 955 1 - 01 397 9 11398 2 11 318 6 01 051 1 - 01 366 4 - 11 048 3
来的影响,将指纹图谱的总峰面积和峰的个数进行标
准化处理,再按照关系式 Y= ( YA+ Yn ) / 2加权求和,
得3个检测波长的 HPLC血清指纹图谱的标准化值
Y200、Y250、Y280 ,将紫外吸光度的平均值进行标准化处
理得标准化值 YU , 再按照关系式 Y总 = ( Y200 + Y 250 +
Y280+ YU ) / 4加权求和后的得 Y总。根据 Y总的大小确
定较佳取血时间。结果显示不同取血时刻的含药血
清指纹图谱 Y总有明显差异, 以 2 h的 Y总最大,故较
佳采血时刻确定为给药后 2 h。见表 5。
表 5 不同采血时刻各指标标准化值及综合评价值
Table 5 Standardized value and comprehensive
evaluation value of each index
at different blood-collecting time
时间/ h Y200 Y250 Y280 YU Y总
01 5 - 01638 9 - 01 046 9 - 01 733 2 - 01 955 1 - 01 593 5
11 5 01677 7 01 429 7 01 377 3 - 01 397 9 01 271 7
21 0 11278 0 11 887 6 11 188 6 11 398 2 11 438 1
31 0 - 01578 8 - 01 310 3 - 01 961 1 11 318 6 - 01 132 9
41 0 - 01260 6 - 01 433 3 - 01 303 0 01 051 1 - 01 2364 5
61 0 01593 6 - 01 536 7 01 352 0 - 01 366 4 01 010 6
81 0 - 11071 1 - 01 990 0 01 079 3 - 11 048 3 - 01 757 5
21 6 4种方法提取液含药血清 HPLC 指纹图谱的
比较:取新西兰大白兔, 禁食 12 h 后, 用 SBEE 液、
SBE 液、水提( WE)液、醇提( AE)液, ig 给药, 剂量
为 22 g 生药/ kg 体质量,药后 2 h,心脏取血 5 mL,
制备含药血清 A、B, 测定, 结果见表 6~ 8。结果 3
个检测波长下均以 SBEE液的 Y 值最大。
21 7 4种方法提取液含药血清紫外吸光度的比较:
取含药血清 A, 用紫外分光光度仪在 200~ 700 nm
处全程扫描, 测定吸光度。对不同提取液的含药血
清吸光度的平均值做标准化处理得特征值 ( YU )。
结果 SBEE液的 YU 最大,见表 9。
结果显示,不同方法提取液的含药血清指纹图
谱 Y总 有明显差异,以 SBEE 液的 Y总 最大, 大小顺
序为 Y SBEE> YWE> Y SBE> YAE。进一步验证了半夏
白术天麻汤用 SBEE法提取与其他 3种方法相比较
为佳。见表 10。
3 讨论
实验用 HPLC 法和 UV 法对半夏白术天麻汤
的 4种方法提取液( SBEE法、SBE法、WE法、AE
#1277#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
表 6 4 种方法提取液含药血清 HPLC测定结果( 220 nm)
Table 6 Serum fingerprint of four kinds of extracting solution by HPLC ( 220 nm)
峰 序 SBEE法
tR/ min 峰面积
SBE法
tR/ min 峰面积
WE法
tR/ min 峰面积
AE 法
tR / min 峰面积
1 111 65 1 2611 19 111 75 3531 78 111 75 211 47 11168 921 77
2 161 26 451 48 151 60 41 53 161 10 1171 07 15199 531 65
3 161 90 471 47 161 09 491 55 221 23 31 04 22105 431 90
4 181 23 201 95 221 24 21 22 241 04 91 20 25145 91 63
5 201 68 131 67 231 99 91 67 241 29 51 42 26199 4471 47
6 221 28 211 37 251 48 51 57 251 53 61 60 31178 131 48
7 241 15 211 08 251 91 121 67 271 11 8881 86
8 251 02 341 08 271 10 1 4001 44 281 69 71 21
9 251 48 171 66 281 69 61 44 321 66 51 61
10 261 03 311 15 311 85 31 58
11 261 93 3681 40
12 271 43 121 22
总面积 1 8941 72 1 8481 46 1 0641 50 6601 90
峰个数 121 00 101 00 91 00 61 00
YA 01 871 1 01 794 7 - 01 499 7 - 11 166 1
Yn 11 100 01 300 - 01 100 - 11 300
Y220 01 985 6 01 547 4 - 01 299 9 - 11 233 1
表 7 4 种方法提取液含药血清 HPLC测定结果( 250 nm)
Table 7 Serum fingerprint of four kinds of extracting solution by HPLC ( 250 nm)
峰 序 SBEE法
tR/ min 峰面积
SBE法
tR/ min 峰面积
WE法
tR/ min 峰面积
AE 法
tR / min 峰面积
1 101 28 51 00 91 21 291 77 91 30 71 22 12105 701 65
2 111 65 811 98 111 75 261 25 91 94 101 23 16106 1201 61
3 121 64 901 57 121 10 211 26 121 17 1971 62 25104 51 02
4 161 19 1301 74 161 25 921 21 161 16 1821 72 26199 651 42
5 201 74 31 05 251 09 71 85 251 09 121 92 44167 171 46
6 251 07 201 00 271 10 731 16 271 12 481 23 50148 231 51
7 251 97 51 73 451 00 111 01 441 96 81 36 51128 261 16
8 261 92 271 77 511 30 41 89
9 341 09 31 13
10 451 06 71 15
11 511 28 41 01
总面积 3791 14 2611 51 4721 20 3281 84
峰个数 11 7 8 7
YA 01 210 9 - 11 114 6 11 259 6 - 01 355 9
Yn 11 452 7 - 01 660 3 - 01 132 1 - 01 660 3
Y250 01 831 8 - 01 887 5 01 563 8 - 01 508 1
表 8 4 种方法提取液含药血清 HPLC测定结果( 280 nm)
Table 8 Serum fingerprint of four kinds of extracting solution by HPLC ( 280 nm)
峰 序 SBEE法
tR/ min 峰面积
SBE法
tR/ min 峰面积
WE法
tR/ min 峰面积
AE 法
tR / min 峰面积
1 101 08 21 47 91 22 41 99 91 30 31 10 11169 191 38
2 111 65 1961 89 111 75 561 53 111 75 371 95 12107 181 68
3 121 68 211 55 161 27 201 98 121 16 461 75 16110 301 21
4 161 24 291 97 271 10 2731 63 161 17 481 29 22107 121 72
5 161 90 101 79 511 30 31 11 221 53 21 33 26199 801 07
6 221 32 71 47 271 11 1651 79 50147 61 17
7 251 47 51 39 511 29 21 09 51128 41 86
8 251 97 31 38
9 261 93 731 52
10 511 27 21 01
总面积 3531 46 3591 23 3061 30 1721 09
峰个数 10 5 7 7
YA 01 639 6 01 705 8 01 098 0 - 11 443 3
Yn 11 333 9 - 11 091 4 - 01 121 3 - 01 121 3
Y280 01 986 7 - 01 192 8 - 01 011 7 - 01 782 3
#1278# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
表 9 4 种方法提取液含药血清吸光度测定结果
Table 9 Serum fingerprint of four kinds of extracting
solution by absorbance
峰
序
SBEE法
nm A
SBE 法
nm A
WE法
nm A
AE法
nm A
1 576 01 051 576 01 053 576 - 01 057 576 01 055
2 541 01 062 540 01 059 542 - 01 078 541 - 01 078
3 414 11 720 413 21 480 414 11 630 280 21 050
4 280 31 045 280 31 120 281 21 580 272 11 930
5 271 21 963 270 31 070 271 21 350 265 21 450
6 265 21 973 265 21 270 265 31 010 251 21 530
7 250 21 927 250 21 030 250 31 680
8 204 11 298
X 11 963 11 798 11 874 11 489
Y U 01 883 4 01 082 5 01 451 4 - 11 417 4
表 10 4 种方法提取液血清指纹图谱标准化值
Table 10 Standardized value of serum f ingerprint
in four kinds of extracting solution
方 法 Y200 Y250 Y 280 YU Y总
SBEE 01985 6 01 831 8 01 986 7 01 883 4 01 921 9
SBE 01547 4 - 01 887 5 - 01 192 8 01 082 5 - 01 112 6
WE - 01299 9 01 563 8 - 01 011 7 01 451 4 01 175 9
AE - 11233 1 - 01 508 1 - 01 782 3 - 11 417 4 - 01 985 2
法)的血清指纹图谱进行研究比较,对指纹图谱峰面
积和个数以及紫外吸收度进行了标准化处理, 加权
求和后得标准化值, 结果以新西兰兔用药后 2 h 含
药血清的指纹图谱的综合 Y 值最大, 4种方法提取
液给药后 2 h含药血清的综合 Y 值,以 SBEE 液最
大,进一步说明半夏白术天麻汤用 SBEE 法提取较
其他 3种提取方法优越。
通过 DAD检测器和紫外全波长扫描, 该样品
在220、250、280 nm 处有较强吸收,故分析这3个检
测波长下的血清指纹图谱。
4种方法提取液 220 nm 处含药血清 HPLC 指
纹图谱的标准化值 Y 的大小顺序为: Y SBEE> Y SBE>
YWE> YAE ; 250 nm 处的标准化值 Y 的大小顺序为:
Y SBEE> YWE > Y SBE > YAE ; 280 nm 处的标准化值 Y
的大小顺序为: Y SBEE> YWE> Y SBE> YAE ( WE 和 SBE
的 Y 值无显著性差异, P> 01 05) ;吸光度的标准化
值 Y 的大小顺序为: Y SBEE> YWE> Y SBE> YAE ; 4种方
法提取液血清指纹图谱的综合 Y 值大小顺序为:
Y SBEE> YWE > Y SBE > YAE。说明 SBE 液中吸收短波
长的成分较多, WE 液吸收较长波长的成分较多。
SBEE 液无论短波长还是长波长,均有较强吸收,说
明 SBEE 液中成分的数量和种类多于其他 3种提取
液,能较大程度的提取活性混合成分。
不同的分析方法只能检测到相应结构的成分,
应该使用多种分析方法, 多角度分析验证。这个问
题有待继续研究探讨。对于指纹图谱中各个峰位所
对应的成分的确定也有待于进一步深入研究。
参考文献:
[ 1] 王淑玲,孙秀梅,张兆旺,等1 半夏白术天麻汤 4种方法提取液
指纹图谱比较[ J ]1 杭州师范大学学报:自然科学版, 2010, 9
( 2) : 127-1341
[ 2] 王淑玲, 张兆旺,孙秀梅, 等1 半仿生-酶法提取的半夏白术天
麻汤中甘草次酸的含量测定[ J ]1 承德医学院学报, 2008, 25
( 2) : 119- 1201
[ 3] 李小娜,王 巧,张国华,等1 山茱萸提取液指纹图谱及其不同
有效部位的血清指纹图谱研究 [ J]1 中华中医药杂志, 2006, 21
( 10) : 617-6191
[ 4] 孙秀梅,张兆旺,郭 婕,等1 黄精不同炮制品半仿生提取液与
水提取液成分的比较[ J]1 中草药, 2007, 38( 11) : 1648-16511
正交试验优选人参中人参皂苷 Rg1 的酶解工艺研究
赵啸虎1 ,张红梅3 , 杨金葳1 , 郭建鹏1, 2*
( 11 延边大学药学院, 吉林 延吉 133000; 21 长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室,吉林 延吉 133002;
31 长春市人民医院 药剂科,吉林 长春 130000)
摘 要:目的 优化酶解法提取人参皂苷 Rg1 的工艺条件。方法 采用高效液相色谱法为测定方法,以人参皂苷
Rg1 提取率为指标, 通过正交设计试验进行优选。结果 纤维素酶酶解为最优方法, 且酶用量、酶解时间、酶解温
度对人参皂苷 Rg 1 提取率有显著性影响; 提取人参皂苷 Rg1 的最佳工艺条件为: 纤维素酶用量为 11 4% , 酶解 60
min, 酶解温度为 45 e 。结论 优化后的提取工艺简单、稳定、提取率高。
关键词:人参; 人参皂苷 Rg 1; 正交设计;酶解 ;高效液相色谱
中图分类号: R2861 02 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 08-1279-04
#1279#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
* 收稿日期: 2009- 10-12 基金项目:吉林省中医药管理局中医药科技资助项目( 08SYS-102)作者简介:赵啸虎( 1984 ) ) ,男,硕士研究生,研究方向为中药新剂型与新技术。E- mail : xiaoh u2062@ tom1 com
* 通讯作者 郭建鹏 T el: ( 0433) 2660607 E- mai l: gjp807@ ybu1 edu1 cn