全 文 ：试验结果表明, 采用 50%乙醇加热回流提取麻黄碱
的量高于水煎煮提取,故本工艺选择 50%乙醇作为
溶媒加热回流提取。
盐酸麻黄碱的测定采用高效液相色谱法, 经方
法学考察实验表明,本方法线性好, 精密度高, 重现
性及回收率均较好, 测得结果准确。
以盐酸麻黄碱作为指标考察提取工艺条件评价
因素的影响。3个因素对盐酸麻黄碱提取率的影响
程度依次为提取次数> 提取时间> 溶媒用量。综合
结果表明:麻黄药材采用 50%乙醇回流提取 2 次,
每次 2 h, 7倍量溶媒为最佳工艺。
参考文献:
[ 1] 中国药典 [ S ]1 一部1 20051
[ 2] 祝 婧,凌 云,龚千锋1 RP-H PLC法测定麻黄及其炮制品中
盐酸麻黄碱[ J]1 中草药, 2009, 40( 4) : 580-5821
HPLC法测定抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚
宁 洁 ¹
(天津市南开医院, 天津 300100)
摘 要:目的 应用 H PLC 法测定抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚。方法 采用 AGT C18色谱柱( 250 mm @ 41 6
mm, 5 Lm) ;流动相: 甲醇-01 1%磷酸( 85 B 15) ; 检测波长: 254 nm; 体积流量: 11 0 mL / min;柱温: 25 e ;进样量: 20
LL。结果 大黄素线性范围为 01 036~ 21 400 Lg / mL , r= 01 999 7, 回收率为 971 11% , RSD 为 11 11% ; 大黄酚线性
范围为 01 078~ 51 200 Lg / mL , r= 01 999 8, 回收率为 981 77% , RSD为 01 67% 。结论 该方法用于测定抗眩晕颗粒
中大黄素和大黄酚具有操作简便、结果准确、灵敏的特点, 可用于该制剂的质量控制。
关键词:抗眩晕颗粒; 大黄素;大黄酚; 高效液相色谱
中图分类号: R2861 02 文献标识码: B 文章编号: 0253-2670( 2010) 05-0749-02
抗眩晕颗粒主要由决明子、川芎、泽泻、益母草
等组成,具有化痰利水,平肝熄风, 活血通络的功效,
主要用于治疗痰浊中阻及肝阳上亢之眩晕、梅尼埃
氏病。决明子为方中主药之一,具有清热明目、润肠
通便的功效。以大黄素和大黄酚为代表的蒽醌类成
分是决明子主要药理成分, 与制剂质量有着密切的
关系。因此本实验采用 RP-HPLC法测定抗眩晕颗
粒中大黄素和大黄酚, 为制剂质量标准的制定提供
科学的依据。
1 仪器与材料
LC ) 10A 型高效液相色谱仪,岛津 SPD ) 10A
紫外检测器, AU TO SCIENCE AT ) 330柱温箱;
试剂均为色谱纯,水为娃哈哈饮用纯净水;大黄素和
大黄酚对照品(中国药品生物制品检定所) ; 抗眩晕
颗粒(自制)。
2 方法与结果
21 1 色谱条件: A GT C18色谱柱 ( 250 mm @ 41 6
mm, 5 Lm) ;流动相: 甲醇-01 1%磷酸( 85 B 15) ; 检
测波长: 254 nm; 体积流量: 11 0 mL/ min; 柱温: 25
e ;进样量: 20 LL。见图 1。
1-大黄素 2-大黄酚
1-emodin 2- chrys ophan ol
图 1 对照品( A)、抗眩晕颗粒( B)和阴性对照( C)的
HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC Chromatograms of mixed ref erence
substances ( A) , Kangxuanyun Granula (B) ,
and negative sample ( C)
21 2 对照品溶液的制备: 精密称取大黄素对照品
21 40 mg, 甲醇溶解并稀释至 10 mL, 制得 240 Lg/
mL 大黄素对照品溶液母液; 精密称取大黄酚对照
品 51 20 mg, 甲醇溶解并稀释至 10 mL, 制得 520
Lg/ mL 大黄酚对照品溶液母液。分别精密吸取两
种对照品溶液母液各 01 5 mL, 用甲醇溶解并稀释至
10 mL,即得混合对照品溶液(含大黄素 12 Lg/ mL、
含大黄酚 26 Lg/ mL)。
#749#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
¹ 收稿日期: 2009-10-07 基金项目:天津市卫生局中西医结合资助课题( 07018)作者简介:宁 洁( 1968 ) ) ,女,天津市人,主管药师, 1991年毕业于天津第二医学院药学系药剂专业,从事医院药剂的管理工作。
E-mail: nankaiyiyuanxyk@ yahoo. com. cn
21 3 供试品溶液的制备:取抗眩晕颗粒适量,研细,
精密称取 5 g 于烧瓶中, 加氯仿 50 mL 加热回流 1
h, 放冷,滤过,滤液减压回收氯仿至干, 残渣加无水
乙醇-醋酸乙酯( 2B 1)溶解并定容至 10 mL,微孔滤
膜滤过,即得。
21 4 阴性样品溶液的制备:按处方取除决明子的各
味药材,煎煮,制成阴性样品, 按供试品溶液的制备
项下方法制得阴性样品溶液。
21 5 标准曲线的制备: 精密吸取混合对照品溶液
01 03、01 10、01 20、01 50、11 00、21 00 mL, 用甲醇稀释
并定容至 10 mL, 得到大黄素质量浓度为 01 036、
01 120、01 240、01 600、11 200、21 400 Lg/ mL; 大黄酚
质量浓度为 01 078、01 260、01 520、11 300、21 600、
51 200 Lg / mL 的对照品溶液的系列溶液。将上述
溶液进行测定, 以大黄素峰面积对其相应质量浓度
作线性回归,得回归方程 Y= 104 706 X + 1 6941 4,
r= 01 999 7,表明大黄素在01 036~ 21 400 Lg / mL 线
性关系良好;以大黄酚峰面积对其相应质量浓度作
线性回归,得回归方程 Y= 80 598 X + 3 1961 6, r=
01 999 8,表明大黄酚在 01 078~ 51 200 Lg/ mL 线性
关系良好。
21 6 精密度试验: 取批号为 20090218样品,制备供
试品溶液,连续进样 5次,测定峰面积值,得大黄素峰
面积 RSD为 11 49%;大黄酚峰面积 RSD为11 57%。
21 7 重现性试验:取批号为 20090218样品, 精密称
取 5份,制备供试品溶液, 进行测定,测定大黄素和
大黄酚质量分数,结果大黄素、大黄酚的 RSD 分别
为 11 62%、11 40%。
21 8 稳定性试验:取批号为 20090218样品, 制备供
试品溶液, 分别于 0、2、4、6、8 h 进行测定, 测定大黄
素和大黄酚质量分数, 结果大黄素、大黄酚的RSD
分别为 11 77%、11 61%。
21 9 回收率试验:取批号为 20090218样品,精密称
取 5份( 21 428、21 433、21 439、21 424、21 422 g ) ,每一
份分别加入大黄素对照品溶液母液 5 LL,大黄酚对
照品溶液母液 20 LL,制备供试品溶液, 进行测定,
计算回收率,结果大黄素的平均回收率为 971 11%,
RSD为 11 11% ; 大黄酚的平均回收率为 981 77%,
RSD为 01 67%。
21 10 样品测定:取两批抗眩晕颗粒, 每批次 2份,
制备供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试
品溶液各 20 LL 注入高效液相色谱仪, 采用外标法
计算各成分质量分数, 结果见表 1。
表 1 抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚的测定结果( n= 2)
Table 1 Determination of emodin and chrysophanol
in Kangxuanyun Granula ( n= 2)
批号 质量分数/ ( Lg # g
- 1)
大黄素 大黄酚
20090218 01 557 5 41 217 0
20090708 01 553 0 41 214 5
3 讨论
HPLC 法测定蒽醌类成分已有报道[ 1, 2] , 本实
验对流动相进行了优化,当甲醇与酸的比例为 85B
15时,保留时间适当,峰形好。
本实验分别以三氯甲烷超声提取, 三氯甲烷萃
取以及三氯甲烷加热回流提取考察大黄素、大黄酚
的提取方法。结果显示,加热回流提取效果为最好,
大黄素和大黄酚量之和最高,并最终确定了本实验
提取方法为加三氯甲烷 50 mL,加热回流提取 1 h。
参考文献:
[ 1] 杨文远,王天勇1 反相高效液相色谱法同时测定决明子中芦荟
大黄素和大黄素[ J]1 分析试验室, 1997, 16( 2) : 551
[ 2] 王云娇,李武毅,张永云 1 清火片中大黄素和大黄酚的 HPL C
法测定[ J]1 中草药, 2006, 37( 7) : 1034-10351
#750# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月