全 文 ：215 　样品测定 :取 3 种不同来源的板蓝根多糖 ,按照
上述方法进行样品制备和测定 ,计算得到木糖、阿拉伯
糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、组成半乳糖物质量的比分
别为 ( n = 3) :1 号 1169 ∶9104 ∶5311 ∶1100 ∶1167 ∶
6151 ;2 号 0165 ∶5179 ∶2915 ∶1100 ∶3128 ∶4107 ;3 号
1112 ∶3163 ∶1918 ∶1100 ∶1188 ∶2164。
3 　讨论
虽然实验结果表明 3 个不同来源板蓝根多糖的
单糖组成类似 ,但其组成比例差异显著。中药内在
质量的稳定性是实现中药质量控制的前提 ,中药标
准化研究急需突破。
曾选择硫脲、苯巴比妥、水杨酸等作为内标物 ,
鉴于样品成分复杂 ,最终选用硫脲作为内标物 ,保留
时间适宜 ,且其他成分对选取的内标电泳峰无干扰。
马莉等[4 ]报道通过薄层色谱分析 ,所得到板蓝
根多糖的 4 种组分均由单一木糖组成。而本实验结
果表明板蓝根多糖含有木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠
李糖、甘露糖和半乳糖等多种单糖。结果的差异可
能是因为文献采用了不同来源的板蓝根药材所含多
糖种类不同 ,也可能是文献采用的薄层色谱法分辨
率不理想造成了结果的差异。毛细管电泳法柱效
高、分离能力强 ,用于分析多糖的单糖组成 ,专属性
高 ,可靠性强。
参考文献 :
[ 1 ] 　肖珊珊 ,金　郁 ,孙毓庆1 板蓝根化学成分、药理及质量控制研
究进展 [J ]1 沈阳药科大学学报 ,2003 ,20 (6) : 45524591
[ 2 ] 　雷黎明 ,潘清平1 板蓝根化学、药理、质量及提取方法的研究进
展 [J ]1 时珍国医国药 ,2007 ,18 (10) : 2578225801
[ 3 ] 　吴寿金 ,赵　泰 ,秦永奇1 现代中草药成分化学 [ M ]1 北京 :中
国医药科技出版社 ,20021
[ 4 ] 　马　莉 ,唐健元 ,李祖伦 ,等1 板蓝根多糖分离纯化及其性质的
研究 [J ]1 中草药 ,2007 ,38 (8) : 1143211461
[5 ] 　王志远 ,戴　玲 ,朱业云 ,等 1 半杖莲酸性多糖 SBPs 的纯化、
性质及抗氧化活性研究[J ]1 中草药 ,2009 ,40 (5) : 72827311
[ 6 ] 　陈　蕾 ,吴　昊1 多糖降解方法的研究进展 [J ]1 中华中医药
学刊 ,2008 ,26 (1) : 13321351
正交试验法优选麻黄的提取工艺研究
吴晓云
①
(杭州市第三人民医院 药剂科 ,浙江 杭州 　310009)
摘 　要 :目的 　筛选 50 %乙醇回流法提取麻黄中盐酸麻黄碱的最佳工艺。方法 　采用正交试验法 ,以提取次数、提
取时间、溶媒用量为因素 , HPLC 法测定盐酸麻黄碱并作为评价指标。采用 Dikma Diamonsil C18柱 (250 mm ×416
mm ,5μm) ;流动相 :012 %磷酸水溶液2乙腈 (96 ∶4) ;检测波长 :205 nm ;体积流量 :1 mL/ min。结果 　盐酸麻黄碱
在 01488～31416μg 线性关系良好 ,平均回收率为 100126 % ,RSD 为 2117 %。提取次数对盐酸麻黄碱的提取率有
显著性影响。结论 　麻黄中盐酸麻黄碱的最佳提取工艺为 50 %乙醇回流提取 2 次 ,每次 2 h ,7 倍量溶媒。
关键词 :麻黄 ;盐酸麻黄碱 ;提取工艺 ;正交试验
中图分类号 :R28412 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2010) 0520747203
　　麻黄为麻黄科植物草麻黄 Ep hed ra si nica
Stapf 、中麻黄 E1 i ntermedi a S chrenk et C1 A1 Mey1
或木贼麻黄 E1 equiset i na Bag1 的干燥草质茎。味
辛、微苦 ,性温 ,具发汗散寒、宣肺平喘、利水消肿之
功效[ 1 ] 。主要成分为盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱。
本实验以盐酸麻黄碱为指标 ,采用 H PL C 法测定 ,
利用正交试验设计 ,以 50 %乙醇为溶媒加热回流提
取 ,考察影响盐酸麻黄碱提取率的因素 ,筛选麻黄的
最佳提取工艺条件。
1 　仪器与试药
Perkin Elmer Series 200 高效液相色谱仪
( PerkinElmer 公司) ; Perkin Elmer Lanmda 20 紫
外/ 可见分光光度仪 ( Perkin Elmer 公司) ; Dikma
Diamonsil C18柱 (迪马公司) ; AB204 —S 电子分析
天平 (Mettler Tolrd 公司) 。
乙腈 (色谱纯 , TEDIA 公司) ;盐酸麻黄碱对照
品 (购自中国药品生物制品检定所 , 批号 7222
200006) ;麻黄药材购自萧山市医药有限责任公司中
药分公司 ,经浙江省中药研究所药材资源室鉴定为
草麻黄。
·747·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
①收稿日期 :2009210223　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :吴晓云 (1981 —) ,女 ,浙江庆元人 ,中药师 ,2002 年毕业于浙江中医药大学药学系 ,从事中药成分测定及中药不良反应研究。Tel :
(0571) 87823122 　E2mail :yaojianmeng @126. com
2 　方法与结果
211 　正交试验设计因素与水平 :以盐酸麻黄碱的量
为指标 ,选用 L9 (34 )正交试验表 ,对提取次数、提取
时间、溶媒用量进行考察 ,因素与水平见表 1。
表 1 　因素水平
Table 1 　Factors and levels
水平
因　素
A 提取次数/ 次 B 提取时间/ h C 溶媒用量/ 倍
1 1 1 5
2 2 2 7
3 3 3 9
212 　盐酸麻黄碱的 H PL C 法测定[2 ]
21211 　测定波长的确定 :取盐酸麻黄碱对照品适
量 ,加水溶解 ,稀释至一定刻度 ,置紫外/ 可见分光光
度仪中 ,在 190～400 nm 扫描 ,绘制紫外吸收光谱。
结果表明盐酸麻黄碱在 205 nm 处有最大吸收。因
此 ,将测定波长定为 205 nm。
21212 　色谱条件 :Dikma Diamonsil C18色谱柱 (250
mm ×416 mm ,5μm ,迪马公司) ;流动相 : 012 %磷
酸水溶液2乙腈 (96 ∶4) ;体积流量 :1 mL/ min ;检测
波长 :205 nm ;柱温 :30 ℃ ;进样量 :10μL 。理论塔
板数按盐酸麻黄碱计不低于 3 000。
21213 　对照品溶液的制备 :精密称取真空干燥至恒
重的盐酸麻黄碱对照品适量 ,加流动相溶解 ,制成
150μg/ mL 溶液 ,作为对照品溶液。
21214 　供试品溶液的制备 :取 1～9 号样品各约
110 mL ,分别精密称定 ,置 10 mL 量瓶中 ,加 5 %甲
醇至刻度 ,超声提取 20 min ,取出 ,放冷 ,摇匀 ,用
0145μm 的微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,即得。
21215 　线性范围考察 :精密称取盐酸麻黄碱适量 ,
置 50 mL 量瓶中 ,加流动相溶解分别制成 4818、
9716、14614、19512、22410、29218、34116μg/ mL 的
对照品溶液 ,分别进样 10μL ,测定峰面积 ,以进样
量为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,求得回归方程为 Y =
566 680 X - 18 313 , r = 01999 8 ,结果表明盐酸麻黄
碱在 01488～31416μg 呈良好的线性关系。
21216 　精密度试验 :取同一 01146 4 mg/ mL 盐酸
麻黄碱对照品溶液重复进样测定 6 次 ,进样量 10
μL ,测定色谱峰面积 ,RSD 为 1161 %。
21217 　稳定性试验 :取 6 号供试品溶液 ,分别于放
置 0、2、4、8、12、24 h 后 ,注入液相色谱仪 ,测定盐酸
麻黄碱色谱峰面积 , RSD 为 1170 % ,结果表明供试
品溶液在 24 h 内基本稳定。
21218 　重现性试验 :取 6 号样品 ,制备 6 份供试品
溶液 ,测定峰面积 ,计算盐酸麻黄碱质量分数的
RSD 为 1188 %。
21219 　回收率试验 :精密称取 6 号样品 015 g ,取 5
份 ,置 10 mL 量瓶中 ,分别加入 01224 mg/ mL 盐酸
麻黄碱对照品溶液 3 mL ,制成供试品溶液 ,依法进
行测定 ,计算得平均回收率为 100126 % , RSD 为
2117 %。
212110 　样品测定 :取 1～9 号样品 ,制备供试品溶
液 ,用 0145μm 的微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,按上述
色谱条件测定色谱峰面积 ,计算样品中盐酸麻黄碱
提取率 (盐酸麻黄碱提取率 = 样品中盐酸麻黄碱总
量/ 投入药材中盐酸麻黄碱总量 ×100 %) 。
213 　提取方法 :取麻黄 (切成约 1 cm 的小段) 100 g ,
按 L 9 (34 )正交试验表设计分别进行提取 ,所得的提
取液经合并、滤过 ,浓缩至一定体积 ,作为 1～9 号样
品。结果见表 2。
表 2 　L9 ( 34 )试验安排和结果
Table 2 　Arrangement and results of L9 ( 34 ) orthogonal test
试验号 A B C 提取率/ %
1 1 1 1 1 35187
2 1 2 2 2 48111
3 1 3 3 3 57165
4 2 1 2 3 67103
5 2 2 3 1 63176
6 2 3 1 2 66125
7 3 1 3 2 71118
8 3 2 1 3 62145
9 3 3 2 1 65177
K1 141163 174108 1641 57 1651 40
K2 197104 174132 1801 91 1851 54
K3 199140 189167 1921 59 1871 13
R 57177 15159 281 02 211 73
　　可知在 3 个因素中 ,对盐酸麻黄碱提取率的影
响程度依次为 :A > B > C。据测定结果并考虑省时
节能、降低成本的角度 ,优选出最佳提取工艺为
A2B2 C2 ,即 50 %乙醇回流提取 2 次 ,每次 2 h ,7 倍
量溶媒。
214 　工艺验证试验 :取同批麻黄药材 (切成约 1 cm
的小段) 3 份 ,每份 100 g ,分别按照最佳提取工艺进
行试验 ,制得的样品测定盐酸麻黄碱。结果见表 3。
表 3 　验证试验( n = 3)
Table 3 　Verif ication test ( n = 3)
样品
药材中盐酸麻黄
碱/ (mg ·g - 1)
样品中盐酸麻黄
碱总量/ mg
平均提取率/ %
1 1213 886152
2 1213 897123 71199
3 1213 872156
3 　讨论
有效成分盐酸麻黄碱既溶于醇又溶于水 ,经预
·847· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
试验结果表明 ,采用 50 %乙醇加热回流提取麻黄碱
的量高于水煎煮提取 ,故本工艺选择 50 %乙醇作为
溶媒加热回流提取。
盐酸麻黄碱的测定采用高效液相色谱法 ,经方
法学考察实验表明 ,本方法线性好 ,精密度高 ,重现
性及回收率均较好 ,测得结果准确。
以盐酸麻黄碱作为指标考察提取工艺条件评价
因素的影响。3 个因素对盐酸麻黄碱提取率的影响
程度依次为提取次数 > 提取时间 > 溶媒用量。综合
结果表明 :麻黄药材采用 50 %乙醇回流提取 2 次 ,
每次 2 h ,7 倍量溶媒为最佳工艺。
参考文献 :
[ 1 ] 　中国药典 [ S]1 一部120051
[2 ] 　祝　婧 ,凌　云 ,龚千锋1 RP2HPLC 法测定麻黄及其炮制品中
盐酸麻黄碱[J ]1 中草药 ,2009 ,40 (4) :58025821
HPLC法测定抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚
宁　洁
①
(天津市南开医院 ,天津 　300100)
摘 　要 :目的 　应用 HPL C 法测定抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚。方法 　采用 A GT C18 色谱柱 (250 mm ×416
mm ,5μm) ;流动相 :甲醇2011 %磷酸 (85 ∶15) ;检测波长 :254 nm ;体积流量 :110 mL/ min ;柱温 :25 ℃;进样量 :20
μL 。结果 　大黄素线性范围为 01036～21400μg/ mL , r = 01999 7 ,回收率为 97111 % ,RSD 为 1111 % ;大黄酚线性
范围为 01078～51200μg/ mL , r = 01999 8 ,回收率为 98177 % ,RSD 为 0167 %。结论 　该方法用于测定抗眩晕颗粒
中大黄素和大黄酚具有操作简便、结果准确、灵敏的特点 ,可用于该制剂的质量控制。
关键词 :抗眩晕颗粒 ;大黄素 ;大黄酚 ;高效液相色谱
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2010) 0520749202
　　抗眩晕颗粒主要由决明子、川芎、泽泻、益母草
等组成 ,具有化痰利水 ,平肝熄风 ,活血通络的功效 ,
主要用于治疗痰浊中阻及肝阳上亢之眩晕、梅尼埃
氏病。决明子为方中主药之一 ,具有清热明目、润肠
通便的功效。以大黄素和大黄酚为代表的蒽醌类成
分是决明子主要药理成分 ,与制剂质量有着密切的
关系。因此本实验采用 RP2H PL C 法测定抗眩晕颗
粒中大黄素和大黄酚 ,为制剂质量标准的制定提供
科学的依据。
1 　仪器与材料
L C —10A 型高效液相色谱仪 ,岛津 SPD —10A
紫外检测器 , AU TO SCIENCE A T —330 柱温箱 ;
试剂均为色谱纯 ,水为娃哈哈饮用纯净水 ;大黄素和
大黄酚对照品 (中国药品生物制品检定所) ;抗眩晕
颗粒 (自制) 。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 : A GT C18 色谱柱 ( 250 mm ×416
mm ,5μm) ;流动相 :甲醇2011 %磷酸 (85 ∶15) ;检
测波长 : 254 nm ;体积流量 : 110 mL/ min ;柱温 : 25
℃;进样量 :20μL 。见图 1。
12大黄素　22大黄酚
12emodin 　22chrysophanol
图 1 　对照品( A) 、抗眩晕颗粒( B)和阴性对照( C)的
HPLC色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatograms of mixed reference
substances ( A) , Kangxuanyun Granula ( B) ,
and negative sample ( C)
212 　对照品溶液的制备 :精密称取大黄素对照品
2140 mg ,甲醇溶解并稀释至 10 mL ,制得 240μg/
mL 大黄素对照品溶液母液 ;精密称取大黄酚对照
品 5120 mg ,甲醇溶解并稀释至 10 mL ,制得 520
μg/ mL 大黄酚对照品溶液母液。分别精密吸取两
种对照品溶液母液各 015 mL ,用甲醇溶解并稀释至
10 mL ,即得混合对照品溶液 (含大黄素 12μg/ mL 、
含大黄酚 26μg/ mL) 。
·947·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
①收稿日期 :2009210207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :天津市卫生局中西医结合资助课题 (07018)
作者简介 :宁　洁 (1968 —) ,女 ,天津市人 ,主管药师 ,1991 年毕业于天津第二医学院药学系药剂专业 ,从事医院药剂的管理工作。
E2mail :nankaiyiyuanxyk @yahoo. com. cn