全 文 ：量也高。
李绍军等[11 ]关于丹参种子组分系统分析得出丹
参种子粗脂肪量为 16. 28 % ,蛋白质总量为14. 46 %
(其中疏水蛋白约占了 82. 97 %) ,可溶性总糖量为
5. 3 %。由此结论可知 ,丹参种子含油量较高 ,因此容
易引起脂质过氧化 ,这是丹参种子不耐贮藏的一个重
要原因 :其次 ,疏水蛋白和粗脂肪量高 ,而亲水的糖量
低 ,因此可以得出采用合适的干燥方法可以将丹参种
子含水量降到较低水平 ,适当降低种子含水量可以减
少种子膜脂质过氧化 ,从而提高丹参种子的耐藏性 ,
这一结论在本实验中也得到了证实。此外 ,还可以看
出丹参种子本身的可溶性糖量并不高 ,仅仅依靠可溶
性糖的作用来维持膜系统显然是不够的。还有研究
也表明两性物质在脱水过程中从水相进入脂相的行
为有利于种子细胞忍耐水分丧失 ,是种子耐脱水性的
主要因子之一。因此两性物质的研究是今后探索种
子耐藏机制的一个重要方向。
由于时间限制 ,本实验结果只适用于丹参种子
短期贮藏 ,关于丹参种子长期超干贮藏的最适含水
量有待于进一步研究。
参考文献 :
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蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷量的研究
张静赟 ,李 　炜 3 ,杨飞快 ,朱清风①
(西安天健医药科学研究所 ,陕西 西安 　710075)
摘 　要 :目的 　研究蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷的量。方法 　以蒺藜新苷为对照 ,采用紫外分光光度法测
定甾体皂苷的量 ;以槲皮素、山柰酚、异鼠李素为对照 ,采用高效液相法测定总黄酮醇苷的量。结果 　不同产地和
采收期蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷的量有较大差异 ,蒺藜全草部位中以叶中量最高 ,果实量最低。结论
所建立的分析方法准确可行 ,可用于蒺藜药材质量控制 ;以期为蒺藜全草的资源利用及质量控制提供一定的科学
依据。
关键词 :蒺藜全草 ;甾体皂苷 ;总黄酮醇苷
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2010) 0520829204
　　蒺藜 T ribul us terrest ris L1 为蒺藜科蒺藜属植
物 ,其果实为传统中药 ,为历版药典收载 ,具有平肝
解郁、活血祛风、明目、止痒的功效[1 ] 。蒺藜花、苗、
根也有药用记载[2 ] 。现代研究表明 ,蒺藜含有皂苷
类、黄酮类、生物碱等多种成分 ,已开发成多种制剂 ,
用于医学和保健领域[3 ] 。皂苷类成分具有防治心脑
血管疾病、增强性功能、抵制迟发型变态反应及抗衰
老等药理活性[ 3 ] ;黄酮类成分有促进混合培养的鼠
视网膜神经细胞存活的作用 ,并且在心血管系统等
方面也有一定活性[ 4 ] 。目前对蒺藜的质控方面研究
少有报道[5 ,6 ] 。笔者参考相关文献资料[1～7 ] ,以槲皮
素、山柰酚、异鼠李素为对照 ,采用高效液相色谱法
测定总黄酮醇苷的量 ;并研究用紫外分光光度法 ,以
蒺藜新苷[8 ] 为对照 ,测定蒺藜中总甾体皂苷的量。
·928·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
①收稿日期 :2009208214　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　3 通讯作者　李　炜　E2mail :xinyao21 @126. com
采用上述方法 ,对不同产地、不同生长期、不同部位
蒺藜中甾体皂苷和总黄酮的量进行考察 ,为蒺藜的
资源利用及质量控制提供了一定的科学依据。
1 　仪器与试药
TU —1810 紫外可见分光光度计 (北京普析) ;
SSI 高效液相色谱仪 (美国 SSI 公司) , HW —2000
色谱工作站 (千谱软件有限公司 ) ; 赛多利斯
BP211D 电子天平。
蒺藜新苷对照品 (自制 ,采用归一化法计算其质
量分数为 99. 2 %) ,槲皮素 (批号 008129304 ,供定量
测定用) 、山柰酚 (批号 1108612200808 ,供定量测定
用) 、异鼠李素 (批号 1108602200608 ,供定量测定
用)均购自中国药品生物制品检定所 ;其他试剂均为
分析纯 ;蒺藜全草样品 ( 2008 年 5～ 10 月 ,共 33
份) ,经陕西省食品药品检验所严智慧主任中药师鉴
定 ;乙腈为色谱纯 ;水为超纯水。
2 　甾体皂苷的测定
2. 1 　对照品溶液的制备 :取蒺藜新苷对照品 15. 15
mg ,置 25 mL 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,制
成 0. 606 mg/ mL 对照品溶液。
2. 2 　供试品溶液的制备 :取本品粗粉约 1. 5 g ,精密
称定 ,加石油醚 (60～90 ℃) 30 mL 回流提取 30 min ,
滤过 ,弃去石油醚液 ,药渣挥去石油醚 ,加甲醇 50 mL
回流提取 4 h ,提取液蒸干 ,残渣加甲醇于 25 mL 量瓶
中溶解并定容至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶液。
2. 3 　标准曲线的考察 :分别精密吸取配制好的对照
品溶液 1、2、3、4、5 mL 置 10 mL 量瓶中 ,精密加改
良对二甲氨基苯甲醛溶液 5 mL ,并用甲醇定容至刻
度 ,密塞 ,摇匀 ,置 (58 ±2) ℃水浴中加热 2 h ,迅速
冷却至室温 ,以相应试剂为空白 ,按照分光光度法于
515 nm 波长处测定吸光度。以对照品量 ( X) 对吸
光度 ( Y) 进行线性回归 ,回归方程为 Y = 0 . 270 6
X - 0 . 018 8 , r = 0 . 999 6 ,结果表明蒺藜新苷在
0. 606～3. 03 mg 对照品量与吸光度线性关系良好。
2. 4 　精密度试验 :取同一供试品溶液 ,重复测定 5
次 ,结果 RSD 为 0. 37 %。
2. 5 　重现性试验 :取同一批供试品 5 份 ,以拟定的
方法制备供试品溶液 ,按“2. 3”项下方法测定吸光
度 ,结果质量分数的 RSD 为 0. 51 %。
2. 6 　稳定性试验 :取同一份供试品溶液分别在 0、
2、4、6、8 h 测定吸光度值 ,结果 RSD 为 0. 85 % ,即
供试品溶液在 8 h 内稳定。
2. 7 　回收率试验 :取已知量的同一批蒺藜药材 9
份 ,每份约 0. 75 g ,精密称定 ,置具塞三角瓶中 ,分别
精密加入蒺藜新苷对照品 8. 0、10. 0、12. 0 mg 各 3
份 ,按“2. 2”项下方法制备供试品溶液 ,测定吸光度
值 ,结果蒺藜新苷低、中、高 3 个水平的回收率分别
为 95. 6 % ( RSD = 1. 40 %) 、96. 2 % ( RSD =
1. 27 %) 、98. 5 % ( RSD = 1. 82 %) ; 平均回收率为
96. 8 %( n = 9) 。
2. 8 　样品测定 :分别取不同的蒺藜药材 ,按 2. 2 项
制备供试品溶液 ,精密量取供试品溶液 2 mL ,置 10
mL 具塞试管中 ,照线性关系考察项下的方法 ,自
“精密加改良对二甲氨基苯甲醛溶液 5 mL”起 ,依法
测定吸光度 ,从标准曲线上读出供试品溶液中甾体
皂苷的量 ,计算 ,即得。测定结果见表 1。
3 　总黄酮醇苷的测定
3. 1 　色谱条件 :色谱柱为 Phenomenex ODS (250
mm ×4. 6 mm , 5μm) ;流动相为甲醇20. 4 %磷酸
(50 ∶50) ;体积流量为 1. 0 mL/ min ;检测波长为
360 nm ;柱温为室温 ;进样量 :10μL 。
3. 2 　对照品溶液的制备 :分别精密称取经五氧化二磷
干燥至恒重的槲皮素、山柰酚、异鼠李素对照品适量 ,
分别加甲醇制成含 20、10、5μg/ mL 的混合溶液 ,即得。
3. 3 　供试品溶液的制备 :取蒺藜全草粉碎成细粉 ,
取约 2 g ,精密称定 ,加石油醚 (60～90 ℃) 50 mL ,回
流提取 1 h 时 ,弃去石油醚液 ,药渣挥干石油醚 ,加
甲醇 100 mL ,回流提取 4 h ,滤过 ,滤液蒸干 ,加入甲
醇 :25 %盐酸溶液 (4 ∶1) 混合溶液 20 mL ,回流 30
min ,转移至 25 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,用
微孔滤膜 (0. 45μm)滤过 ,即得。
3. 4 　线性关系考察 :取槲皮素对照品溶液 (102. 2
μg/ mL) 用甲醇配成质量浓度为 5. 01、10. 02、
20. 04、40. 08 和 60. 12μg/ mL 的对照品溶液 ,注入
液相色谱仪 ,按拟定的色谱条件进样 ,记录峰面积 ;
以峰面积 ( Y)对进样量 ( X)进行线性回归 ,回归方程
为 : Y = 3 617 417 X + 24 263 , r = 0 . 999 9 ;结果表
明在 50. 1～601. 2 ng 槲皮素的峰面积与进样量有
良好的线性关系。
取山柰酚对照品溶液 (101. 2μg/ mL) 加甲醇配
成质量浓度为 3. 036、6. 072、12. 14、18. 22 和 24. 29
μg/ mL 的对照品溶液 ,按拟定的色谱条件进样 ,记
录峰面积 ,以峰面积 ( Y) 对进样量 ( X) 进行线性回
归 ,回归方程为 : Y = 3 359 038 X + 16 444 , r =
0. 999 3 ;结果表明在 30. 36～242. 9 ng 山柰酚峰面
积与进样量有良好的线性关系。
　　取异鼠李素对照品溶液 (100. 7μg/ mL) 用甲醇
配浓度为 2. 014、4. 028、6. 042、8. 056 和 10. 07μg/ mL
·038· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
表 1 　蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷的测定结果 ( n = 3)
Table 1 　Determination of steroid saponins and total flavonol glycoside in whole plant of T1 ter rest ris ( n = 3)
药材编号 采集地点 采集日期 样品部位
甾体皂苷/
(mg ·g - 1 )
总黄酮醇苷/
(mg ·g - 1 )
121 渭南 ·大荔 2008205 地上 40. 8 5. 04
122 渭南 ·华阴 2008205 地上 35. 4 4. 26
123 渭南 ·大荔 2008207 地上 29. 7 2. 75
124 渭南 ·华阴 2008207 地上 24. 7 2. 55
125 渭南 ·大荔 2008207 地上 27. 2 2. 43
果实 8. 2 0. 87
茎 　 10. 6 1. 05
叶 　 59. 3 5. 08
126 渭南 ·大荔 2008209 地上 20. 4 2. 22
127 渭南 ·华阴 2008209 地上 19. 6 1. 84
128 渭南 ·华县 2008209 地上 20. 8 2. 36
129 渭南 ·大荔 2008210 地上 17. 6 2. 01
1210 渭南 ·华阴 2008210 地上 18. 5 1. 68
221 西安 ·高陵 2008205 地上 44. 8 4. 86
222 西安 ·长安 2008205 地上 39. 6 4. 05
223 西安 ·高陵 2008207 地上 24. 0 2. 68
果实 7. 5 1. 08
茎 　 10. 2 1. 31
叶 　 52. 6 5. 57
224 西安 ·长安 2008207 地上 21. 6 1. 84
225 西安 ·户县 2008207 地上 22. 4 2. 67
226 西安 ·长安 2008209 地上 15. 8 1. 88
227 西安 ·高陵 2008209 地上 20. 6 2. 19
228 西安 ·户县 2008209 地上 17. 3 2. 07
321 宝鸡 ·太白 2008207 地上 18. 5 2. 17
药材编号 采集地点 采集日期 样品部位
甾体皂苷/
(mg ·g - 1 )
总黄酮醇苷/
(mg ·g - 1 )
322 宝鸡 ·渭滨 2008207 地上 16. 1 1. 86
果实 6. 8 0. 79
茎 　 8. 4 0. 86
叶 　 29. 5 3. 54
323 宝鸡 ·太白 2008209 地上 14. 2 1. 68
324 宝鸡 ·渭滨 2008209 地上 16. 6 1. 53
421 榆林 ·榆阳 2008207 地上 21. 4 1. 69
422 榆林 ·米脂 2008207 地上 18. 7 1. 75
423 榆林 ·米脂 2008207 地上 15. 4 1. 63
424 榆林 ·榆阳 2008207 地上 17. 6 1. 31
果实 5. 4 0. 79
茎 　 6. 2 0. 77
叶 　 40. 1 2. 34
426 榆林 ·榆阳 2008210 地上 12. 4 1. 25
427 榆林 ·榆阳 2008210 地上 13. 7 1. 53
521 武威 ·古浪 2008207 地上 18. 5 2. 11
果实 7. 4 1. 08
茎 　 9. 5 1. 26
叶 　 36. 4 3. 78
522 武威 ·古浪 2008210 地上 15. 2 1. 38
621 洛阳 ·孟津 2008207 地上 20. 6 2. 11
果实 6. 3 0. 75
茎 　 10. 5 1. 42
叶 　 46. 2 4. 21
622 洛阳 ·孟津 2008209 地上 16. 8 2. 04
的对照品溶液 ,按拟定的色谱条件进样 ,记录峰面
积 ;以峰面积 ( Y)对进样量 ( X) 进行线性回归 ,回归
方程为 : Y = 3 484 548 X + 7 970 , r = 0 . 999 8 ;结果
表明在 20. 14～100. 7 ng 异鼠李素峰面积与进样量
有良好的线性关系。
3. 5 　精密度试验 :取同一供试品溶液 ,在上述色谱
条件下连续进样 5 次 ,测定峰面积。结果槲皮素、山
柰酚和异鼠李素峰面积的 RSD 分别为 0. 35 %、
0. 61 %、0. 47 %。
3. 6 　重现性试验 :取同一批蒺藜药材粉末 5 份 ,按
“3. 3”项下方法制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下
进行分析测定。结果样品中槲皮素、山柰酚和异鼠
李素质量分数的 RSD 分别为 0. 68 %、0. 85 %、
0. 51 %。
3. 7 　稳定性试验 :取同一供试品溶液分别在 0、2、
4、6、8、12 h 进样 ,结果槲皮素、山柰酚和异鼠李素
峰面积的 RSD 分别为 0. 86 %、1. 25 %、1. 72 % ,即
供试品溶液在 12 h 内稳定。
3. 8 　回收率试验 :精密称取已测定的蒺藜药材粉末
1. 0 g ,共 9 份 ,分成 3 组 ,分别精密加入槲皮素对照品
溶液 (60. 12μg/ mL) 、山柰酚对照品溶液 (15. 18μg/
mL)和异鼠李素对照品溶液 (11. 22μg/ mL) 4、5、6 mL
各 3 份 ,挥干甲醇 ,制成加标样品 ,按“3. 3”项下方法
制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下进行分析测定 ,
计算回收率。结果槲皮素低、中、高 3 个水平的回收
率分别为 97. 4 % ( RSD = 0. 86 %) 、99. 5 % ( RSD =
0. 72 %) 、98. 8 %( RSD = 1. 02 %) ;山柰酚低、中、高 3
个水平的回收率 ( n = 3) 分别为 98. 1 % ( RSD =
1. 04 %) 、96. 6 % ( RSD = 1. 17 %) 、99. 2 % ( RSD =
0. 93 %) ( n = 3) ;异鼠李素低、中、高 3 个水平的回收
率分别为 96. 7 % ( RSD = 1. 84 %) 、95. 4 % ( RSD =
1. 77 %) 、98. 1 %(RSD = 1. 95 %) ( n = 3) 。
3. 9 　样品测定 :分别取采集的蒺藜样品粉末 ,按
“3. 3”项下方法制备供试品溶液 ,在上述色谱条件下
进行分析 ,测定峰面积 ,计算样品中总黄酮醇苷的
量 ,测定结果见表 1 ,色谱图见图 1。
4 　讨论
4. 1 　检测波长的选择 :取蒺藜新苷对照品溶液与对
二甲氨基苯甲醛反应后 ,在 400～600 nm 扫描 ,结
果在 515 nm 处有最大吸收 ,因此选择 515 nm 作为
蒺藜新苷的测定波长 ;紫外扫描结果表明 ,槲皮素、
山柰酚、异鼠李素溶液均在 360 nm 有最大吸收峰 ,
故选择 360 nm 作为槲皮素、山柰酚、异鼠李素的检
测波长。
·138·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
12槲皮素　22山柰酚　32异鼠李素
12quercetin 　22kaempferol 　32isorhamnetin
图 1 　对照品( A)及样品( B)色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatograms of reference
substance ( A) and sample ( B)
4. 2 　以槲皮素、山柰酚、异鼠李素为对照 ,计算总黄
酮醇苷的量 ,公式为 :总黄酮醇苷量 = (槲皮素量 +
山柰酚量 + 异鼠李素量) ×2. 51。实验结果表明 ,蒺
藜中以槲皮素为母核的黄酮类成分量最高。
4. 3 　研究结果表明 ,同一采收期蒺藜全草中 ,以渭
南、西安等地的蒺藜全草中甾体皂苷及总黄酮的量
较高 ;藜蒺全草不同部位中以叶所含甾体皂苷和总
黄酮的量最高 ,茎次之 ,果实最低 ;在同一地区、不同
采收时期 ,以 5 月份所采样品中甾体皂苷及总黄酮
的量最高 ,但考虑到 5 月份所采蒺藜药材植株太小 ,
仅处于生长初期 ,故以 7 月份蒺藜枝叶茂盛时采收
为宜。
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高效液相色谱法测定祖师麻药材中祖师麻甲素
刘 　冰 ,吕曙华 ,吴贵华 , 郭景强
①
(天津市药品检验所 ,天津 　300070)
摘 　要 :目的 　建立祖师麻药材定量测定方法。方法 　采用高效液相色谱法。色谱柱为 Phenomenex L una C18
(250 mm ×4. 6 mm , 5μm) ;流动相 :甲醇20. 5 %醋酸溶液 (25 ∶75) ;体积流量 :1. 0 mL/ min ;检测波长 :327 nm ;柱
温 :30 ℃;进样量 :10μL 。结果 　祖师麻甲素在 0. 146 7～2. 200 5μg 线性关系良好 ( r = 0. 999 9) ,平均回收率为
100. 88 % ,RSD 为 1. 60 %( n = 6) 。结论 　本法操作简便、准确、重现性好 ,可用于祖师麻药材的质量控制。
关键词 :高效液相色谱法 ;祖师麻 ;祖师麻甲素
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2010) 0520832203
　　祖师麻 (祖司麻) 系瑞香科植物黄瑞香 D a p hne
gi ral di i Nit sche、甘肃瑞香 (陕甘瑞香、唐古特瑞
香) D1 t ang utica Maxim1 及凹叶瑞香 D1 ret usa
Hemsl1 的干燥茎皮及根皮 ,有祛风湿、活血止痛之
功效[ 1 ] ,产于甘肃、四川、陕西、山西等省山区。民间
广泛用于治疗疼痛、跌打损伤、风湿性关节炎和支气
管炎等症 ,俗称“打得地上爬 ,离不开祖师麻”[2 ] 。祖
师麻中主要含有香豆素类、二萜类、木质素类、黄酮
类、蒽醌类及甾醇类等化学成分 ,主要含有祖师麻甲
素 (瑞香素) 、祖师麻乙素 (瑞香苷) [2 ] 、祖师麻丙素
(紫丁香苷) [3 ] ,其中祖师麻甲素具有明显的镇痛、抗
炎[4 ,5 ] 、抑菌[2 ] 、抗血栓[6 ] 、中枢神经抑制作用[7 ] 、降
压[8 ] 、降血脂[9 ] 、抗缺氧[ 10 ] 、抗腹泻[11 ] 等药理作用 ,
是祖师麻抗炎、镇痛的有效成分。对于祖师麻的定
量测定也有相关报道[ 12 ,13 ] ,为更好地控制药材质
量 ,本实验采用高效液相色谱法 ,以祖师麻甲素为定
量指标 ,建立祖师麻药材的定量测定方法。
1 　仪器与试药
Agilent1100 高效液相色谱仪 , DAD 检测器 ,
chemstation 工作站 ,M ET TL ER A E260 电子天平 ,
M ET TL ER A G135 电子天平 ;祖师麻甲素对照品
(中国药品生物制品检定所 ,批号 09002200001 ,供
·238· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
①收稿日期 :2009208209　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :刘　冰 (1975 —) ,男 ,主管药师 ,研究方向为中药质量标准的研究与制定。
Tel : (022) 23374076 　E2mail :wennshui @163. com