全 文 ：高效毛细管电泳法测定复方苦参结肠溶胶囊中氧化苦参碱
仝战旗1 ,高建义2 , 陈丙跃3
( 1 解放军总医院 南楼中医针灸科,北京 100853; 2 中国航天员科研训练中心,北京 100094;
3 北京中惠药业有限公司, 北京 100085)
摘 要:目的 建立 H PCE 测定复方苦参结肠溶胶囊中氧化苦参碱的方法。方法 选用苯异丙胺硫酸盐为内标,
石英毛细管柱( 50 cm 50 m,有效柱长 45 cm) , 30 mmo l/ L pH 5 8 的磷酸缓冲液, 分离电压 20 kV ,紫外检测波
长为 214 nm,柱温( 25 ! 1) ∀ 。结果 氧化苦参碱测定的线性范围为 30~ 240 g/ mL, 平均回收率为 99 54% ,
RSD为 1 86%。结论 该法结果准确, 操作简单, 重现性好, 可作为复方苦参结肠溶胶囊中氧化苦参碱的质量控
制方法。
关键词:复方苦参结肠溶胶囊; 氧化苦参碱;高效毛细管电泳
中图分类号: R286 02 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 05072503
Determination of oxymatrine in Compound Kushen Colonspecific Capsula
by capillary electrophoresis
TONG Zhanqi1 , GA O Jianyi2 , CHEN Bingyue3
( 1 Department of Chinese Medicine, PLA Genera l H ospital, Beijing 100853, China; 2 China Astronaut Research
and T raining Center, Beijing 100094 , China; 3 Beijing Zhonghui Pharmacy Co L td , Beijing 100085, China)
Abstract: Objective T o establish an H PCE method for the determ inat ion of ox ymatrine in Compound
Kushen Colonspecific Capsula Methods Amphetamine sulfate w as used as the internal standar d The
separat ion w as obtained w ith silica capillary column ( 50 cm 50 m, ef fect ive length 45 cm ) , 30 mmo l/
L pho sphate buf fer ( pH 5 8) at a constant voltage of 20 kV, and temperature at ( 25 ! 1) ∀ , the detect ive
w avelength 214 nm Results T he linear determinat ion range w as 30 # 240 g/ mL and the average recovery
and RSD were 99 54% and 1 85%, respect ively Conclusion T he method is simple and accurate, and can
be used for quality cont rol of Compoud Kusheng Colonspecif ic Capsula
Key words: Compound Kushen Colonspecific Capsula; oxymatrine; high performance capillary
electr ophoresis ( H PCE)
复方苦参结肠溶胶囊为灌肠剂型改制而成, 由
苦参、地榆、青黛和白芨等组成,具有生肌止血、消肿
敛疮、清热解毒、燥湿、杀虫、凉血止血的功效 [ 1, 2]。
在临床上对溃疡性结肠炎有一定的的疗效[ 3]。苦参
为其君药, 其中氧化苦参碱的量较高。研究发现氧
化苦参碱具有抗炎、镇痛、解热、降温、抗心律失常等
作用[ 4, 5] 。本实验以氧化苦参碱作为质量标准评价
指标,采用内标法建立复方苦参结肠溶胶囊中氧化
苦参碱的高效毛细管电泳测定方法。
1 仪器与试药
Bechman P/ ACE system 5000 高效毛细管电
泳仪( DAD检测器, 自动进样器)。氧化苦参碱对照
品(批号 0780200004, 中国药品生物制品检定所) ,
苯异丙胺硫酸盐 (批号 971020, 上海医药工业公
司) ,所用化学试剂均为分析纯。水为重蒸馏水。复
方苦参结肠溶胶囊由北京中惠药业有限公司提供。
2 方法与结果
2 1 电泳条件: 石英毛细管柱( 50 cm 50 m, 有
效柱长 45 cm) , 30 mmo l/ L pH 5 8的磷酸缓冲液,
分离电压 20 kV,压力进样5 s,紫外检测波长为 214
nm,柱温( 25 ! 1) ∀ ,检测窗 100 m 200 m。内
标:苯异丙胺硫酸盐。理论塔板数按氧化苦参碱计
不低于 200 000。图谱见图 1。
2 2 溶液的制备
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收稿日期: 20091017 基金项目:北京市科委% 创新药物研究开发&资助项目(D08080200290805)作者简介:仝战旗( 1966 # ) ,男,河北定州人,副主任医师,硕士, 1989年毕业于天津中医药大学,研究方向为呼吸系统疾病中医诊治和中药新型给药系统研究。T el: ( 010) 66876048 Email: t on g. zhanqi@ 163. com
1内标 2氧化苦参碱
1internal standard 2 oxymat rine
图 1 氧化苦参碱和内标苯异丙胺硫酸盐( A)、复方苦参
结肠溶胶囊(含内标) (B)的 HPCE图谱
Fig 1 HPCE Chromatograms of oxymatrine ref erence
substance and amphetamine sulfate internal
standard ( A) , and Compound Kusheng Colon
specif ic Capsula ( with internal standard) ( B)
2 2 1 内标溶液的制备:精密称取内标苯异丙胺硫酸
盐适量,加水制成1 mg/ mL的溶液,作为内标溶液。
2 2 2 对照品溶液的制备:精密称取氧化苦参碱对
照品适量, 加无水甲醇制成 480 g / mL 的溶液, 作
为对照品溶液。
2 2 3 供试品溶液的制备: 精密称取本品内容物
3 g ,置 50 mL 量瓶中,加甲醇 45 mL,浓氨液1 mL,
超声处理 60 min, 放冷, 滤过; 同法提取 2次, 合并
滤液至 100 mL 量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 摇匀。
精密吸取 1 250 L 置 2 mL 量瓶中, 加内标 500
L, 用 0 1 mol/ L 盐酸稀释至刻度, 摇匀, 滤膜滤
过,即得。
2 3 线性关系考察:分别精密吸取氧化苦参碱对照
品溶液 125、250、375、500、750、1 000 L, 置 2 mL
量瓶中,加内标溶液 500 L, 用 0 1 mol/ L 盐酸稀
释至刻度,所得溶液中氧化苦参碱的质量浓度分别
为30、60、90、120、180、240 g/ mL,按上述色谱条件
测定。以氧化苦参碱质量浓度为横坐标, 氧化苦参
碱与内标的峰面积比为纵坐标,得标准曲线, 拟合回
归方程为 Y= - 0 017 42+ 0008 44 X , r= 0999 9,
表明氧化苦参碱在 30~ 240 g / mL 具有良好的线
性关系。
2 4 精密度试验:同一日内对240、120、30 g/ mL 氧
化苦参碱对照品溶液进行了5次测定,分别测定氧化
苦参碱与苯异丙胺硫酸盐峰面积比值,得 RSD分别
为1 05%、1 30%、062%; 连续 5 d对 240、120、30
g/ mL 氧化苦参碱对照品溶液进行了 3 次/ d测定,
分别测定氧化苦参碱与苯异丙胺硫酸盐峰面积比
值,得 RSD分别为 3 89%、2 58%、1 98%。
2 5 重现性试验:取同一批样品5份,制备供试品溶液,
测定氧化苦参碱的质量分数,结果RSD为165%。
2 6 稳定性试验:取同一供试品溶液,分别于 0、1、
2、4、12 h测定氧化苦参碱的质量浓度,结果 RSD为
2 04% ,表明供试品溶液在 12 h 内基本稳定。
2 7 加样回收率试验: 同一批样品 5份, 取适量胶
囊内容物(含氧化苦参碱约 0 6 mg ) , 精密称定, 加
入 0 6 mg 氧化苦参碱对照品, 制备供试品溶液,进
样测定, 计算加样回收率, 结果平均回收率为
99 54% , RSD为 1 86%。
2 8 样品测定:取 9批复方苦参结肠溶胶囊样品,
制备供试品溶液, 进样测定, 每个样本重复测量 3
次,取平均值,按内标法计算样品中氧化苦参碱的质
量分数,结果见表 1。
表 1 复方苦参结肠溶胶囊中氧化苦参碱测定结果(n= 3)
Table 1 Determination f oxymatrine in Compound
Kushen Colonspecific Capsula ( n= 3)
批 号 氧化苦参碱/ % 批号 氧化苦参碱/ %
011210 0 68 011017 069
011219 0 87 011010 075
011227 0 77 011011 075
011013 0 80 011012 075
011015 0 80
3 讨论
3 1 电泳条件选择
缓冲液选择: 对比了 pH 5 8、7 0、7 8磷酸缓
冲液,发现 pH 5 8磷酸缓冲液氧化苦参碱的峰形
较好,而 pH 7 0、7 8 磷酸缓冲液氧化苦参碱的峰
正好与溶剂峰部分重叠, 影响定量。所以选择 pH
5 8磷酸缓冲液作为分离介质。
缓冲液浓度选择:比较了将 pH 5 8 磷酸缓冲
液用水稀释不同倍数后的色谱峰情况, 稀释分别为
1∋ 0、1 ∋1、1∋2、1∋3,发现稀释倍数对样品峰影响
不大,但对分离过程中的电流影响较大,其中 1∋ 3稀
释时分离电流为 15 A 左右, 最适宜分离,如果过高
则产热增加,过低不利于分离。故选择将 pH 5 8磷
酸缓冲液用水按 1∋3稀释后作为分离介质。
运行电压选择: 比较了分离电压为 10、15、20、
25 kV的情况,发现分离电压对氧化苦参碱的峰形
影响不大,但对分离电流影响较大,电压越大分离电
流越高,其中 20 kV 时分离电流为 15 A 左右, 最
适宜分离,如果过高则产热增加, 过低不利于分离。
故选择分离电压为 20 kV。
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3 2 样品 pH 值选择: 比较样品用 pH 5 8磷酸缓
冲液(用水 1 ∋ 3 稀释后)、0 1 mo l/ L 盐酸、0 1
mol/ L 氢氧化钠按 1 ∋ 1体积稀释后氧化苦参碱的
峰形情况, 发现用适量 0 1 mol/ L 盐酸稀释样品使
样品体系保持酸性, 可减少峰拖尾。
3 3 内标物质的选择: 为了选择合适的内标物质,
将一系列生物碱分别与氧化苦参碱同时测定, 发现
苯异丙胺硫酸盐是最合适的内标物。氢溴酸东莨菪
碱、盐酸樟柳碱、盐酸山梗菜碱、苯丙胺、硫酸阿托品
这几种物质,在所确定的分离条件下与氧化苦参碱
不能分离。
3 4 HPCE 测定样品时, 虽然用外标法进行定量
时,由于受外界条件影响稳定性比 HPLC 差些, 这
限制了其在定量测定领域的应用; 但是采用内标法,
可以克服其不足, 而其水溶性流动相、高分辨率、快
速分离等优点就非常突出。本实验通过测定复方制
剂中氧化苦参碱, 考察了方法的可靠性, 证明用
HPCE 通过内标法测定氧化苦参碱的方法可行。
参考文献:
[ 1] 周玲玲,方泰惠,杨舜民,等 复方苦参胶囊对二硝基氯苯所致
豚鼠溃疡性结肠炎的保护作用 [ J ] 南京中医药大学学报,
2004, 20( 2) : 107109
[ 2] 范 恒,庄 熊,段雪云 复方苦参结肠溶胶囊治疗溃疡性结
肠炎临床观察及其对结肠黏膜 IB 表达的影响 [ J] 中西医
结合研究, 2009, 1( 3) : 141
[ 3] 仝战旗,吴整军,赵美玲,等 复方苦参结肠溶胶囊治疗溃疡性
结肠炎临床研究[ J] 中国中医药信息杂志, 2009, 16( 9) : 67
68
[ 4] 陈 霞,刘 芬,吕文伟,等 氧化苦参碱的镇痛作用及其机制
研究[ J] 中草药, 2006, 37( 2) : 255257
[ 5] 孙宏丽,商 蕾,初文峰,等 氧化苦参碱心肌保护作用及其作
用靶点的研究[ J] 中草药, 2007, 38( 1) : 6972
复方石韦片的薄膜包衣工艺研究
刘振华1 ,李忠思2 , 董晓强3
( 1 承德医学院附属医院 药剂科,河北 承德 067000; 2 承德医学院中药研究所 河北省中药研究与开发重点实验室,
河北 承德 067000; 3 承德颈复康药业集团有限公司,河北 承德 067000)
摘 要:目的 确定复方石韦片的薄膜包衣工艺。方法 采用正交试验设计、综合评分的方法优化复方石韦片薄
膜包衣的工艺参数。结果 薄膜包衣最佳工艺参数是:包衣液质量浓度 0 14 g/ mL ,包衣液喷量 16~ 20 g/ min, 进
筒风温 75 ∀ 。结论 验证试验和放大试验表明, 此工艺可用于复方石韦片薄膜包衣的生产。
关键词:复方石韦片; 薄膜包衣;正交试验
中图分类号: R284 2 文献标识码: B 文章编号: 02532670( 2010) 05072703
复方石韦片是承德颈复康药业集团有限公司根
据(证治汇补)中的石韦散开发研制的片剂, 为国家
中药保护品种, 具有清热燥湿、利尿通淋之功效, 临
床应用前景广阔 [ 1]。笔者已报道了复方石韦片颗粒
的喷雾制粒工艺[ 2] 。复方石韦片原为半浸膏糖衣
片,由于糖衣片存在包衣时间长、成品易吸潮褪色等
缺陷,而薄膜包衣具有质量相对稳定、生产效率高、
片剂增重小等优势 [ 3, 4]。为更有效地保证药品质
量,现已将包衣工序的包糖衣改为薄膜包衣。本实
验采用包衣粉作为薄膜包衣材料,通过正交设计对
复方石韦片进行薄膜包衣,以确定最佳工艺参数。
1 仪器与试药
BGB # 10型高效包衣机、BGB # 150C型高效包衣
机(北京航空工艺研究所) ; ZB # 1B型智能崩解仪(天
津大学无线电厂) ;脆碎度测定仪(北京同立和分析仪
器技术开发有限责任公司) ;复方石韦素片(承德颈复
康药业集团有限公司,自制,崩解时限为 28 min,脆碎
度0 15%,水分4 3%,平均片质量0 392 6 g/片) ;包衣
粉(温州小伦包衣技术有限公司)。
2 方法与结果
2 1 薄膜包衣工艺的正交设计: 薄膜包衣过程中,
由于包衣溶液的配方设计不当、包衣工艺参数的选
择不当或包衣设备选择不当都会使薄膜包衣产品产
生缺陷。实验采用药用薄膜包衣预混辅料即包衣粉
作为包衣材料,不涉及包衣材料的配方设计,设备为
定型的薄膜包衣设备, 仅讨论包衣工艺参数对薄膜
∃727∃中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 5 期 2010 年 5 月
收稿日期: 20091230 作者简介:刘振华( 1969 # ) ,女,河北省河间市人,副主任药师,硕士, 1992年毕业于河北医科大学药学专业, 2004年获得河北医科大学硕士学位,主要研究方向为医院临床药学及中药现代化,发表论文 10余篇。
T el : ( 0314)2279505 Email: liu zhenhua1969@ 126 com