免费文献传递   相关文献

Establishment of prokaryotic expression and optimization of expression conditions of Eleutherococcus senticosus P450 gene

刺五加P450基因原核表达体系的建立与表达条件的优化



全 文 :)$5
x
&
y â
&$
ãâ
%
|
M-Yc&$$ ;-+% 2JEGY$ )$5
Íæç
#&5$
¦èÃÄÅÆéׅ
êßÂÅÆëì…í_
tu
!
vwx
!
>yy
!
z{|
!

¸vðñ6€ ié!€€l
!
¸v òx
$#4$$$#

gh
#!
¬îŽÀÁõF…Íæç
#&5$
¦è…
,T;2
FВ]ܢ
$
†êÍæç
#&5$
¦è…ÃÄÅÆ~é
JOB4$I3@&5$$
€x…ÄeF
SA)=JOB4$I3@&5$
…ÃÄÅÆëìœm5£¤í_
(
?v›Eâi
$JOB4$I3@&5$
h_F¨Be
SA)
“|?
Ñ
#&5$
¦è…ÃÄÅÆ
$ 8T83@2?O
ŽÇâiÜ¡
54 UTI
‚Bâ8|}ë¢
)
ÅÆéׅ-b|}HD=
)% e4% f$
-b
:@B?
XD=
..-Y,A
k
$
-bj†¦=
AS
Léj†¦
$
-b|}Oè=
)& X(
è.
$
Íæç
#&5$
¦è‰`@€ÅÆ~é
SA)=JOB4$I3@&5$
?Ñ4¦è…ÃÄÅÆ
$
4éׅ|}HD
%:@B?
XD
%
j†¦ú?<Û|}OèŠ|ÔÕ(…¤¸…Å
Æ1
$
ïÔÕ{Døù
(

ijk
#!#&5$
¦è
)
ÃÄÅÆé×
)
ÅÆëì

lm)(
#!)$&33)5

nopT
#!
¸vÃ{|!€}µ
3
¬oóôkoðñst}µf€
K)$)&$$$##%
¸vëßË!sf€
C;)$&$)#%
¸vðñ6€Þ
ß}µf€
?@)$4$$##%
¸vðñ6€ÅÆ!€st}µf€
)`$4)#

qrAs
#!
!
z{|
!
«¬
!
st4æç‘åio€
(
opqrõöªÄ
!BWY$ $45#4%)55(! QI7$$45#4%)#4&!O3.IGY$ 7_FXW\\1
)#c,-.

Astu
#!
tu
!
Û܊
!
st4æç‘åio€
!O3.IGY$*\JW0VqXW\\1)#+,-.
(8/+:-,84*52/06910R+1>0/,F5C91588,02+2.09/,*,Q+/,0206
5C91588,02F02.,/,028068%4+.-,3,334$$#+3,$4$9&5$ O525
]L@W0V$ a:LAW3RXI0$ A:QWG3^WG$ a:;? X`I-3FG0
!
!6+1*;*+,@(,*!/(*%/*$ J*D*(<%(*. <%(3*?&(9$ I0%;&70% $#4$$$$ 67(%0
*@:8/1+F/+N2,,-EZG0VH-HXWRWb\W0,W-^#&5$ ,T;2-^P1*)7*?+/+//)&&*%(/+&)&$ RJW,G^G,JEG.WER*WEWZWRGV0WZc@E-UIE6-HG,W73
JEWRRG-0 dW,H-EJOB4$I3@&5$ *IR,-0RHE\,HWZ I0Z HXWJE-UIE6-HG,W7JEWRRG-0 ,-0ZGHG-0R*WEW-JHG.G_WZc>WR\YHRRX-*WZ HXIHHXWSA)
I^HWEFWG0VHEI0R^-E.WZ *GHX HXWEW,-.FG0I0HW7JEWRRG-0 dW,H-EI,,\.\YIHWZ HXWXGVX I.-\0H-^EW,-.FG0I0HJE-HWG0c8T83@2?OI0IY63
RGRRX-*WZ HXIHHXWEW,-.FG0I0HJE-HWG0 *IRIF-\H54 UTIcBXWEW,-.FG0I0HI,,\.\YIHWZ HXWXGVXWRHI.-\0H-^EW,-.FG0I0HJE-HWG0 I^3
HWE:@B?! ..-Y,A
k
IH)%34% f -^E)& Xc<-0RWb\W0HY6#&5$ VW0W-^PQ&*%(/+&)&,-\YZ FWW7JEWRRWZ R\,,WRR^\Y6F6JE-UIE6-H3
G,W7JEWRRG-0 dW,H-EJOB4$I3@&5$c:0Z\,HG-0 HW.JWEIH\EW$ :@B?,-0,W0HEIHG-0$ .WZG\.H6JWI0Z I.-\0H-^G0Z\,HG-0 HG.W,-\YZ IY
G0 Y^\W0,WHXWW7JEWRRG-0 -^HIEVWHJE-HWG0$ F\HHXWG.JI,HRHEW0VHX *IRZG^WEW0Hc
*]5> L01.8+!#&5$ VW0W) JE-UIE6-HG,W7JEWRRG-0) W7JEWRRG-0 ,-0ZGHG-0R
.0,#!& %`abDF[F**&!#&$!&
!!
Íæç
P1*)7*?+/+//)&&*%(/+&)&!>\JEcWH9I73
G. 9I7G.
/š%WuA,†Þ
$
‹Båú,—”
ô
$
L>?_¾¢
---
Íæç¢J/܋Œ…,™
Žï[
*+
(
ï/îܺ,™´¢òo
$
Ü¢J^
1žküX
*)+
(
!L>?_¾¢…Ñ¢¾{
Å/?ѽ™PÒ*6龍\@€¦è**
x_ÑÓL>?_¾¢…Ö1¦¨
*4+
(
¡Íæç
¢JÑ¢¾…“|Âl€$
$
p¡[?³§
,&%),
mJ
#
Íæç
#&5$
¦èÃÄÅÆéׅêßÂÅÆëì…í_
؊¥…Íæç
@&5$
¿
!,6H-,XE-.W@&5$ -^
Pc&*%(/+&)&$@&5$O<
ÝÌ_˜™
$
ÜÅÆ1…BX
ÂÍæç¢J^1…å}p¡qôâ8gòÖÖ
×
$
/Íæç¢J¾€…[`Ö1¿
*+
(
¥¦LH
@&5$
¿
!,6H-,XE-.W@&5$$@&5$
zvp¡§Ñ¢é…wúÄh$
$
/±Gñ
$-‹Ì_˜™…Ñ¢Ì_5
*&35+
(
ì§6陴
¢$C_
@&5$
¿tŽn”
*5+
$
è.
$
½™*eé
ÉÅÆ
#&5$
¦è
$
=š›
@&5$
¿……ŒL€
(
F(¾=0
$
¡æ>ÅÆ×u$ÅƀõFˆ‰ä
󅴢
#&5$
Š¥‹Œ›$¡Å΢ú$
(
òû
¢îž@´¢
$
,™´¢$ÞB}=¢ú?Ñ5
_‰š›
*#3+
$
ïbmÖ§Íæç³´¢
#&5$
¦è
éÉÅƅòÖj©
(
~^¬î~?vUv|ÀÁõF…

`³§
؊¥…Íæç
#&5$
¦è
!
~^$rš›
…Íæç
#&5$
¦èŠY4¦è

…
,T;2

!?W0WSI0U
o<
PQ&(5($
*(+
$
†ê…ÄÚ
$

4¦èÃÄÅÆ
$
€xÅÆëìœmí_£¤
$

“š›
@&5$O<
…›†
%
ˆ‰ŽÇJßó¦¨
(
!N
„.Âñò
!T!N
?v½Þ
ÃÄÅÆ~é
JOB4$I
Õ±23pâqÑ¢(
)BCDE
$
ÀÁeFF¨Be
BD@$
îÅÆeF
F¨Be
SA)
ͱG„_&(
!
23

BCD
E
$
™§ká…Åá=:éBÍæç
#&5$
¦è
,T;2
FЅ
J?93B

$k%$ f
4µ@p
(
!TN
:5ÖÛ*‹¿
#,) T;2
+¾¿
$T;29IEUWETA5$$$$
¤¸m
9IEUWE
ͱG„_&(
!
23

BCDE
)B&
T;2
:é¿
%
C¯ô8)¿
=05J
)
$!01
)Õ±
;OS
DE
)T;2
EèC_:5Ö
%
mÕ7P:5Ö
=
S:D9:?2
DEÓÞ
)
×r‚H
!PI0$:@B?$

®¯JŠ=%Ó\œbŽÇC:5
(
!T^N
Íæç
#&5$
¦è…
@<>

!T^T!N
Ü¢…’]¾
!
”꾍
#&5$
¦è
…
,T;2
FВ][x9æôÜ¢
$
_¢Ü¢
@&5$98# 5i36C6??2BB<2B??2BϢܢ
@&5$9a#5i36C?BÜ¢ìÑ*Ñ¢*
!
_
H

ٜBCDE¾
(
]ká7€RD=
&)%
FJ$
Ü$_¢îÏ¢ŽåÜV
=05J

!01
)¿)â
:
!
ÏåÇÞÉ

î@‡{¦
!
séÞÉ
(
!T^TN
(…7€…káÂEè
!
<:éBÍæç
#&5$
¦è
,T;2
FЅ
J?93B
mÕ=Åáœm
@<>

$
Ì¥é×DÏ
# ,T;2
Å á
%
Ü ¢
@&5$9a$
Ü¢
@&5$98$#,) T;2
+¾¿w

!
A$
$ r#,) S\ 5^
!
A$Z;B@!)c5 ..-Y,A
k
&
!
A$
î
e]C6
4%
!
A(
Ì¥ëìDÏ
#(& f
ƒô

.G0)(& f
ƒô
4$ R$# f
pG
4$ R$%) f
_t
($ R$
45
`[M
)%) f
_t
5 .G0( @<>
káÓ¢çÜÜ
»³U¯Eè:5ÖrÉñò
$
<
)c$g
Ü»³U
¯UVTŽK
$
Eè(…ë¢
(
!T%N
…ÄmÕ
JOB4$I3@&5$
…†êÂäó
ºEè…
@<>
Ó¢Â
JOB4$I
mՙ
=05J

!01
)œm-¿)“EèC_
$
C_Ó¢œmÜ»³
U¯UVv
(

B&
:鿺¿)Ó¢:é
$
†
ê
JOB4$I3@&5$
ÅÆ~é
(
ºÅÆ~éh_FF
¨Be
BD@$
$
$
½™^B
PI0
+ô…
A\EGI3SWEHI0G
!AS
aᣤõÀôÀÁeF
(
º£¤õ…Àôe
Fh
AS
Léj†¦$j†“œmeL
@<>$
£¤
õ-íeF
$
O™mÕ7P:5Ö7PÜ
JOB4$I3
@&5$

(
ºr7m՜m
@<>%
»¿)
%
-¿)î
TFvA
$
<äó~éÂ(…¦è…:ég›
(
!T#N#&5$
¦è¡F¨Be
SA)!TO4
$…ÅÆ
º…ÄmÕ
JOB4$I3@&5$
h_F¨Be
SA)
!TO4$
†ê…ÄeF
SA)=JOB4$I3@&5$(
º¹
AS
aᣤ€…R’-í…eÉéú§
AS
Léj†¦
!
^
PI0 .V,A
k

$
$4% f

8
#$$
ÿ=
$c)5 e
$c&
O
$
çV
:@B?
PXD=
$c# ..-Y,A
k
$4% f

( X$
PeL
c5 .A$
Ì2µð
&
Ð
$
KSP_ª
œm
8T83@2?O
UVT¤¸ÅÆ;<
(
!TaN
…ÄeFÃÄÅÆëì…í_
º…ÄeF
SA)=JOB4$I3@&5$
çÜ
g
…é
ú1éúF
$ .A
…
AS
j†¦
!
^
PI0 .V,
A
k

…23$
$4% f

8
#$$
ÿ=
$c)5 e$c&
O
$
O™DÏøùj†ëìœmj†“
$
œm
8T83
@2?O
UVT¤¸ÅÆ;<
$
€O™ì
C\I0HGH6
D0Wd&c#)
x¤¸…ÅÆ1œmŽÇ
(
ŽåçV
:@B?
PXD=
$c$ $c4$ $c5$ $c%$ $c($ c$
..-Y,A
k
$4% f
|}j†
X

(
#çV
:@B?
PXD=
$c# ..-Y,A
k
$
Žå§
%$))$)%$4)$
4% f
Ï|}j†
X

(
$çV
:@B?
PXD
=
$c# ..-Y,A
k
$4% f
æ;j†
$
Žå§çV
,5%),
)$5
x
&
y â
&$
ãâ
%
|
M-Yc&$$ ;-+% 2JEGY$ )$5
:@B?
“…
&$$)$#$)$$)& X

(
º…ÄeF
SA)=JOB4$I3@&5$
çÜ
g
…é
ú1ŽåéúF
$ .A
…
AS$8\JWEDJHG.IYSE-HX
!8DS$BWEG^G,SE-HX!BS$BXI6WE9IEHG0 2VIE!B9
j†¦
!
^
PI0 .V,A
k

…23$
$4% f


8
#$$
ÿ=
$c)5 e$c&
O
$
çV
:@B?
PXD=
$c# ..-Y,A
k
$4% f
Ï|}j†
X

$
œm
8T83@2?O
UVT¤¸ÅÆ;<
(
N
›E
T!NJOB4$I3@&5$
ÅÆ~酆ê
…ÄmÕ¹-¿)“
$
õFF:ÿ=
&$$$
5 &$$ FJ
…
)
`7€
!
p
$
¹»¿)“
$
õFF:
ÿ=
# $$ FJ
…[`Çô7€
!
p
$
|›E

$@<>
›EõFÂ(…7€F:òÿ…Ó¢
(
x
…Äm՜mTF
$
›Eâi
$
ÔV7€RD=
&$
FJ$
7€RDÂ{¦FÐÂÍæç
#&5$ ,T;2

pv[‹
$
…ÄmÕ
JOB4$I3@&5$
†êˆ
(
9cT;29IEUWE)c
b¿)…
JOB4$I3@&5$

))c
»¿)……Äm
Õ
)4c
-¿)……ÄmÕ
(
p
!
ÅÆ~é¿)T
QGVc!O7JEWRRG-0 dW,H-EW0_6.WZGVWRHG-0 EWI,HG-0
TN#&5$
¦è¡F¨Be
SA)!TO4
$…ÃÄ
ÅÆ
…ÄeF¹
:@B?
|}“
$
B

ëâ8ÅÆë¢
õÑ¡
&4 e##c) UTI$
â„/ï
&4 UTI$
T…
@&5$
¤¸õхâ„[‹
$
€ù4뢡0~eF
$bõÑ
!
p
)(
›¾?v€uJ
$
4¤¸ë¢
=…Ä
@&5$
¤¸
$
ŏÍæç
#&5$
¦è‰`¡F
¨Be$…ÅÆ
(
e&c
…ÄV©
)0~xÜ
)9c
¤¸m
9IEUWE(
p
)!#&5$
¦è¡
SA)!TO4
$…ÃÄÅÆ
QGVc)!#&5$ VW0WGRJE-UIE6-HG,W7JEWRRWZ G0 SA)!TO4
T^N
|}HD
%
|}Oèx
#&5$
¦èÃÄÅƅ
ÔÕ
|}HD™
% f
F
4% f
\.áçO
$
(…¤
¸ÅÆ뢅ÈDÛyäláçb’
$
Ü$
% f
(
…¤¸ÅÆ1-}
$)) f
OB§
% f$
ïônü
)%$4)$4% f
…ÅÆ1Šâê:
$5
ëV©$…(
…¤¸ë¢…òxI(DkÛ|}HD…áçøá
ç
$
Ü$ì
% f
F
)) f
OÅÆ1áçøâ8
$))
f
F
)% f
OÅÆ1áçâ8
$
ï
)%$4)$4% f

ÅÆ1OBáB
$
v.è¿æøâ8
(
Ü$
$
ž|}
HD=
4% f
O
$
(…¤¸ÅÆ1-B
(
|}
& X
Oe餸ÅÆ1-}
$
|}
$)$
#$)$$)& X
e餸ÅÆ1åÐðB
$#
ëV©$
…(…¤¸ë¢…òxI(DkÛ|}Oè…áç
øáç
$
€ùv.ïè¿æâ8
!
p
4(
e#c
|}OèŽå=
)&$)$$#$)$$& X
O
$
…ÄeF…¤¸ÅÆ
;<
)%c
0~eF…¤¸ÅÆ;<
)9c
¤¸m
9IEUWE) e)c%$
))$)%$4)$4% f
O
$
…ÄeF…¤¸ÅÆ;<
(
p
4!
|}HDÛ|}Oèx
#&5$
¦èÃÄÅƅÔÕ
QGVc4!O^W,H-^G0Z\,HG-0 HW.JWEIH\EWI0Z G0Z\,HG-0 HG.W-0 HXW
JE-UIE6-HG,W7JEWRRG-0 -^#&5$ VW0W
T%N:@B?
XDx
#&5$
¦èÅƅÔÕ
ž
:@B?
XDì
$c e ..-Y,A
k
\.áçO
$
(…¤¸ÅÆ뢅ÈDÛyäòo
$#
ëV©$…
(…¤¸ë¢…òxI(DkÛ
:@B?
XD…áçø
OBáç
$
ïv.¿æøâ8
(
Ü$
$:@B?
XD=

..-Y,A
k
O
$
(…¤¸ÅÆ1-B
!
p
&(
T#N
|}™j†¦x
#&5$
¦èÅƅÔÕ
ìp
&
|$

AS
j†¦…eéÂO
™
8DS
j†¦…eé(…¤¸ÅÆ1òï
$

B9
j†¦î
BS
j†¦…eé(…¤¸ÅÆ1Š
}§O™
AS
î
8DS
j†¦
$&
ëV©$…(…¤
¸ë¢…òxI(Dk
$

8DS
j†¦îO™
AS
j†¦â8B§O™
BS
î
B9
j†¦
(
,#%),
mJ
#
Íæç
#&5$
¦èÃÄÅÆéׅêßÂÅÆëì…í_
e#c:@B?
XDŽå=
c$$$c($$c%$$c5$$c4$$c ..-Y,A
k
O
$
…
ÄeF…¤¸ÅÆ;<
)%c
0~eF…¤¸ÅÆ;<
)9c
¤¸m
9IEUWE) ec8DS$B9$BS$AS
j†¦$…ÄeF…¤¸ÅÆ;<
(
p
&!:@B?
XDÛj†¦?²x
#&5$
¦èÃÄÅƅÔÕ
QGVc&!O^W,H-^:@B?I0Z .WZG\.H6JW-0 HXWJE-UIE6-HG,W73
JEWRRG-0 -^#&5$ VW0W
^N
ŽÇþ
F¨Be$ÅÆ´¢Æ>…
@&5$
¿[6/D
õ…”Äï[
*$+
(
~š›†ê5Íæç
#&5$
¦è
……Ä~é
JOB4$I3@&5$$
O™à¾5
B%
.eé¦
èÄ
$

B%
ÅÆ×u…F¨Be
SA)!TO4
˜
=ÅÆˋ
$
?Ñ5Íæç
#&5$
¦è…ÃÄÅÆ
(
~š›lÑ
:@B?
XD
%
|}HD
%
|}OèÛ
j†¦ú?Š|ÔÕÍæç
@&5$
¤¸…ÅÆ1
$
ï
ÔÕ{Døù
$4% f
|}Oeé(…¤¸^1-
B
$ :@B?
XDx(…¤¸ÅÆ1…ÔÕøâ8
$
†
¢
#&5$
¦è…š››E
*+
€ø[‹
(
ÖÉ
$
|}OèxÍæç
@&5$
…éÉÅÆ1…ÔÕâ8
$
ùÛ|}Oè…áç(…¤¸ÅÆ1ùOáç
$
†
ÂÂw¹
*)+
J…š››E[‹
(
»x
*4+
J…š›
ŏ
$
¡ÃÄÅÆO
$
ÅÆ~éîˋx(…¤¸Å
Æ6a…BXÔÕsF
$
x
?
¤¸y–*é…éÉ
Åƅš›Å
$
¦è(Êڅê?ôT/ÔÕé
ÉÅÆ6a…èHï[
*&+
(
è.
$#&5$
¦è…Æ
>¢úøù
%
ÅÆeF
%
…Ä~é…øù
$
´|‰/
}‹†ú|}ëìÔÕ&E…øù…Ãè
(
½™¦è*îãÑ¢*()ºãÑ¢œm
rú“™§>?_¾¢\ÜÑ¢¾$èÓ¢…*
x_ÑÓ
$
Ž¹=5ïxÆ>?PҚ›-F…
È:ï[
*5$5+
$
êÍ(
%
·ÐH
%
)»¢JJ,™
Ž…Ñ¢¾$è鎹¡*eF$õF5B^
1¾
*5$#3%+
(
ì§ÈFå=>?_¾¢Ñ¢¾
“|Âl{Å
$
<ۓ|Âl¿…˜™®¯(¾‹
bpv˜
$
(¾?Ñ>?_¾¢…ãÑ¢¾‹
p¡sF”D
*5+
$
~š›…E=z“ŽK7CÍ
æç
@&5$
¿
$
€ŽÇÜÑ¢ˆ‰
$
=˜Íæç
J…Ñ¢¾{Å
$
?ÑÍæçJ…ãÑ¢¾7
B—þî?v¦¨
(

vw?x
#
* +!
m
$
|P
$
ªQ
$
J
+
Íæç
#&5$
¦èO0ÅÆ¿æÛ
¢J^1…òÖôŽÇ
*[++
z2wxFj
$)$&$4%
!4#)(+
* ) +!PG.B$ KI0 [$ K\X ?K$ WHIY+O7JEWRRG-0 I0Z \^0,HG-0IY,XIE3
I,HWEG_IHG-0 -^HXEWWRb\IYW0,WR60HXIRWVW0WRIRR-,GIHWZ *GHX RIJ3
-0G0 FG-R60HXWRGRG0 #0%0M;(%&*%; *[++@YI0H)$$ 5)!#)5+
* 4 +!
B,Ñ
$
ó¤I
$
o$
J
+
æML>¢JÑ¢¾ÂE…
š›œ
*[++
$Ë,
$)$$($&$!)#4)%+
* & +![W0RW0 P$ 9
-
YWESA+@YI0H;2T@K3,6H-,XE-.W@&5$ -7G3
Z-EWZ\,HIRWR*[++@X6H-,XW.GRHE6$ )$$$ %!)=4#4)+
* 5 +!K\V\WR>$ [WI0 OS$ S/-E0 K$ WHIY+<6H-,XE-.W@&5$3.WZGI3
HWZ .WHIF-YG,W0VG0WWEG0V# ,\EW0HJE-VEWRRI0Z \^H\EW,XIYW0VWR
*[++<\EDJG0 @YI0HSG-Y$ )$&$ (#)%+
* # +!
î{
$
za
$
À|
+
´¢¥¦LH
#&5$
¦è…æ>ÅÆ×
uš›œ
*[++
$%Ñ¢*-.
$)$$4$)4!%#4)+
* % +!8,X-W0Z-E^2$>GHX0WE9$WHIY+9-YW,\YIE,Y-3
0G0V-^I,6H-,XE-.W@&5$ HI7I0W$ FWHI3X6ZE-76YIRW,T;2 E^-.
I0M)&I0Z \^0,HG-0IYW7JEWRRG-0 G0 6WIRH*[++@E-,;IHY2,IZ 8,G
L82$ )$$$ (!$+
* +![\I0 ?$ N-0V/G0 [` $ 9IHXW*AK+WHIY+H\E0-dWE-^.GYHGEIZGW0WG0 HI0RXG0-0WRFG-R60HXWRGRI0Z W0IFYWR
XWHWE-Y-V-\RJE-Z\,HG-0 -^ W^E\VG0-YG0 6WIRHR*[++@E-,;IHY
2,IZ 8,GL82$ )$4$ $!)(#)$+
* ( +!
ºÕÉ
$
m
$
»00
$
J
+
Íæ祦LH
#&5$
¦è…ÀÁ
ÂÅƎÇ
*[++
Ñ¢()@j
$)$&!#)+
*$+!8-0V9<$PG.O[$PG.O$ WHIY+9G,E-FGIYFG-R60HXWRGR-^.W3
ZG,G0IY6G.J-EHI0HJYI0HRW,-0ZIE6.WHIF-YGHWR*[++;IH@E-Z
>WJ$ )$&$ 4!#&(%+
*+!
~}
$
»%
$
!~
$
J
+
$%x¥¦LH
#&5$
¦è
6R#&
Ã
ÄÅÆëìí_
*[++
Hñ&
$)$$ 45!(#&(+
*)+!
Âw¹
$
Aî
$
Š‰
$
J
+
€µ
6R#%(=5
¦è…ÀÁÛÃ
ÄÅÆ
*[++
93wxFj
$)$$$44!4#4+
*4+!
»x
$
»
$
j
$
J
+
s+³¿¦è
M9%=
¡øùF¨BeÅ
Æ×u$…ÅÆûü
*[++
¥™ÂM^Ñ¢j
$)$$%
!#$$+
*&+!
!q
$
1
$
â‚õ
+?
¤¸y–*é¡øùÅÆ×u$B
6aÅƅš›œ
*[++
Ñ&š›
$)$)$# !##5&5+
*5+!
!C%
$
ñÊ
$
1R·
$
J
+
´¢>?ÐÑPÒÛÜEÂ
*[++
$%&
#
Ñ&
$)$4!&4#$4$+
*#+!2/GU\.IE@P$ aGI-]K$ B6-PO$ WHIY+:R-JEW0-GZ JIHX*I6
-JHG.G_IHG-0 -^EBI7-YJEW,\ER-E-dWEJE-Z\,HG-0 G0 P&/7*?(/7(0 /+1(
*[++8,GW0,W$ )$$$ 44$#%$+
*%+!
 ™È
$
÷ˆ
$
1CJ
$
J
+
)»¢JÑ¢h_š›œ
*[++
$%$,-.
$)$&$4(!)$#4((+

yz-0
!
„…†
#
,%%),