全 文 :麦冬须根与麦冬块根中麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量比较
胥秀英,郑一敏,傅善权,韩玉梅,杨艳红
(重庆理工大学 化学与生物工程学院,重庆 400050)
[摘要] 目的:比较麦冬须根与麦冬块根中麦冬皂苷 Ra(ophiogenin3OαL鼠李糖βD葡萄糖)和慈溪麦冬皂苷 A含
量。方法:采用WatersC18色谱柱(46mm×150mm,5μm);流动相为乙腈水(35∶65),流速10mL·min-1,检测波长208
nm,柱温室温。结果:麦冬皂苷Ra线性范围,094~470μg,r=09995,平均回收率与RSD分别为1002%,16%;慈溪麦冬
皂苷A线性范围098~490μg,r=09996,平均回收率与RSD分别为996%,17%。结论:麦冬须根和块根中麦冬皂苷Ra
和慈溪麦冬皂苷A差异不明显。
[关键词] 麦冬须根;麦冬块根;HPLC;麦冬皂苷Ra;慈溪麦冬皂苷A
[收稿日期] 20090301
[基金项目] 重庆市科委攻关项目(CSTA,2008AC5029);重庆市科
委产业化项目(CSTC,2008AB5116)
[通信作者] 胥秀英,女,副研究员。Tel/Fax:(023)68662335,E
mail:yxx651116@cqut.edu.cn
麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬 Ophiopogon
japonicus(L.f.)KerGaw1的肉质块茎[12]。主
产于浙江、四川等地,为常用中药品种。用于治
疗冠心病、心绞痛等症[3]。其主要化学成分有甾
体皂苷、多糖、高异黄酮类、氨基酸等,其中麦冬
甾体皂苷作为主要的有效成分之一,具有明显的
抗缺氧、抗诱变及抑制肿瘤等活性[4]。麦冬历来
以块根入药,采挖时一般将须根弃之不用。本实
验以麦冬须根与麦冬块根为对象,对其中 2种皂
苷的含量进行了比较,以期为麦冬须根的综合开
发利用提供依据。
1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪(美国),1515泵,2487
检测器,Breeze工作站。
麦冬块根和麦冬须根均购于重庆市药材市场,
经本院傅善权副主任技师鉴定为麦冬O.japonicus。
麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷 A对照品,为本
实验室制备,批号分别为080602、080721,经 HPLC
归一化测定含量均不低于98%。乙腈为色谱纯,其
他试剂均为市售分析纯。
2 方法和结果
2.1 色谱条件 WatersC18色谱柱(46mm×150
mm,5μm);流动相:乙腈水(35∶65);流速:10mL·
min-1;检测波长208nm;柱温:室温。对照品与样
品色谱图见图1。
A.对照品;B.样品;1.慈溪麦冬皂苷A;2.麦冬皂苷Ra。
图1 麦冬对照品与样品色谱图
2.2 对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷 Ra
和慈溪麦冬皂苷 A,制成含麦冬皂苷 Ra浓度为
094g·L-1和慈溪麦冬皂苷A浓度为098g·L-1
的混合甲醇溶液,作为对照品储备液,再分别取该储
备液适量,用甲醇稀释制成含麦冬皂苷 Ra分别为
0094,0188,0282,0376,0470g·L-1和慈溪麦
冬皂苷 A为0098,0196,0294,0392,0490g·
L-1的混合液,045μm滤膜滤过,备用。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取经干燥粉碎过
40目筛的麦冬块根和须根10g各3份,分别加入药
材量的10倍,8倍,7倍水在80~90℃煎煮3次(经
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正交优化实验获得的最佳提取条件),收集滤液,冷
后过预先处理好的大孔吸附树脂柱,再分别用80%
乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩至干,分别得块根
和须根提取物平均值(n=3)为011g和012g,提
取率分别为11%和12%。各称取该提取物50
mg,用甲醇溶解定容制成50g·L-1的溶液,045
μm滤膜滤过,备用。
2.4 线性关系考察 分别精密取22项下对照品
混合液10μL进样,以色谱峰面积(Y)对质量浓度
(X)进行回归统计,麦冬皂苷Ra的回归方程为 Y=
75740X+7274,r=09995,线性范围为 098~
490μg;慈溪麦冬皂苷A线性方程为Y=77247X+
4730,r=09996,线性范围094~470μg。
2.5 最低检测限的测定 在21色谱条件下,按
信噪比大于3时测定最低检测限,麦冬皂苷 Ra最
低检测限为6ng,慈溪麦冬皂苷 A最低检测限为
10ng。
2.6 精密度实验 取22项下对照品溶液(含麦冬
皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A分别为0282g·L-1和
0294g·L-1),分别在21色谱条件下连续进样10
μL6次,测得麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A的峰
面积RSD分别为16%和19%。
2.7 稳定性实验 取23麦冬块根供试品溶液,分
别在0,2,4,8,16h进样10μL,测定麦冬皂苷Ra和
慈溪麦冬皂苷 A的峰面积 RSD分别为 14%和
16% ,表明样品溶液在16h内稳定。
2.8 重复性实验 取同一批麦冬块根样品,按22
制备方法制备6份,分别进样10μL,测定麦冬皂苷
Ra和慈溪麦冬皂苷 A的含量 RSD为 25%和
22%,表明该方法的重复性较好。
2.9 回收率实验 取同一批麦冬块根6份,分别加
入麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A对照品,按 23
方法制备,在21色谱条件下进样10μL,计算麦冬
皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A平均回收率与RSD分别
为1002%,16%和996%,17%,表明该方法准
确度较好(表1)。
表1 麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A加样回收率(n=6)
药材称量/g 样品含量/mg 加入量/mg 测定量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
麦冬皂苷Ra 5794 562 580 1148 1010 1002 16
5608 544 580 1125 1001
5763 559 580 1136 995
5856 568 580 1151 1005
5567 540 580 1134 1024
5897 572 580 1138 976
慈溪麦冬皂苷A 5794 241 254 501 1024 996 17
5608 230 254 485 1004
5763 236 254 486 984
5856 240 254 488 976
5567 228 254 480 992
5897 242 254 495 996
210 样品含量测定
各取3批麦冬块根和须根样品,按23制备方
法制备成样品溶液,在21色谱条件下进样10μL
(3次平行),测定峰面积,由线性方程计算3批麦冬
块根和须根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量
见表2,3。
表2 麦冬块根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A
质量分数(n=3) %
块根编号 麦冬皂苷Ra 慈溪麦冬皂苷A
081201 00097 00041
081209 00110 00053
081225 00121 00051
表3 麦冬须根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A
质量分数(n=3) %
须根编号 麦冬皂苷Ra 慈溪麦冬皂苷A
081104 00092 00037
081120 00105 00048
081128 00112 00056
3 讨论
本实验曾采用超声、回流提取样品直接进样,由
于多糖等杂质较多,导致色谱干扰较大,而采用水提
取大孔树脂吸附,可以除去大量非皂苷类杂质,而且
成本低无污染物排出,是一种理想的皂苷类提取方
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法。
麦冬为常用中药,有关提取、成分分离的参考文
献达千余篇,但有关须根的报道仅有十多篇,且无须
根中关于麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A含量测定
的报道。本文重点对麦冬药材和须根中2种有效成
分进行了定量测定,为麦冬药材的质量控制提供了
依据。
麦冬为《中国药典》2005年版一部收载的品种,
原标准中只有显色鉴别反应,缺乏麦冬有效成分定
性和定量检测,本文建立的含量测定方法为麦冬药
材及须根的定性与定量检测提供了实验依据。
由该实验结果看出,3批样品麦冬须根与麦冬
块根中麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量接近,
因此可以为麦冬须根的综合开发利用提供依据。
[参考文献]
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2002:481.
[2] 阳美平,吴皓,尹莲,等.麦冬皂苷和多糖类成分的研究进展
[J].中华中医药学刊,2008,26(10):2170.
[3] 王建中,陈小兵,王锋鹏,等.川麦冬皂苷类化学成分的研究
[J].有机化学,2008,28(9):1620.
[4] 姜宇,段昌令,柴兴云,等.麦冬须根化学成分研究[J].中国中
药杂志,2007,32(11):1111.
[责任编辑 王亚君]
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