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麦冬须根与麦冬块根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A含量比较



全 文 :麦冬须根与麦冬块根中麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量比较
胥秀英,郑一敏,傅善权,韩玉梅,杨艳红
(重庆理工大学 化学与生物工程学院,重庆 400050)
[摘要] 目的:比较麦冬须根与麦冬块根中麦冬皂苷 Ra(ophiogenin3OαL鼠李糖βD葡萄糖)和慈溪麦冬皂苷 A含
量。方法:采用WatersC18色谱柱(46mm×150mm,5μm);流动相为乙腈水(35∶65),流速10mL·min-1,检测波长208
nm,柱温室温。结果:麦冬皂苷Ra线性范围,094~470μg,r=09995,平均回收率与RSD分别为1002%,16%;慈溪麦冬
皂苷A线性范围098~490μg,r=09996,平均回收率与RSD分别为996%,17%。结论:麦冬须根和块根中麦冬皂苷Ra
和慈溪麦冬皂苷A差异不明显。
[关键词] 麦冬须根;麦冬块根;HPLC;麦冬皂苷Ra;慈溪麦冬皂苷A
[收稿日期] 20090301
[基金项目] 重庆市科委攻关项目(CSTA,2008AC5029);重庆市科
委产业化项目(CSTC,2008AB5116)
[通信作者] 胥秀英,女,副研究员。Tel/Fax:(023)68662335,E
mail:yxx651116@cqut.edu.cn
  麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬 Ophiopogon
japonicus(L.f.)KerGaw1的肉质块茎[12]。主
产于浙江、四川等地,为常用中药品种。用于治
疗冠心病、心绞痛等症[3]。其主要化学成分有甾
体皂苷、多糖、高异黄酮类、氨基酸等,其中麦冬
甾体皂苷作为主要的有效成分之一,具有明显的
抗缺氧、抗诱变及抑制肿瘤等活性[4]。麦冬历来
以块根入药,采挖时一般将须根弃之不用。本实
验以麦冬须根与麦冬块根为对象,对其中 2种皂
苷的含量进行了比较,以期为麦冬须根的综合开
发利用提供依据。
1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪(美国),1515泵,2487
检测器,Breeze工作站。
麦冬块根和麦冬须根均购于重庆市药材市场,
经本院傅善权副主任技师鉴定为麦冬O.japonicus。
麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷 A对照品,为本
实验室制备,批号分别为080602、080721,经 HPLC
归一化测定含量均不低于98%。乙腈为色谱纯,其
他试剂均为市售分析纯。
2 方法和结果
2.1 色谱条件 WatersC18色谱柱(46mm×150
mm,5μm);流动相:乙腈水(35∶65);流速:10mL·
min-1;检测波长208nm;柱温:室温。对照品与样
品色谱图见图1。
A.对照品;B.样品;1.慈溪麦冬皂苷A;2.麦冬皂苷Ra。
图1 麦冬对照品与样品色谱图
2.2 对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷 Ra
和慈溪麦冬皂苷 A,制成含麦冬皂苷 Ra浓度为
094g·L-1和慈溪麦冬皂苷A浓度为098g·L-1
的混合甲醇溶液,作为对照品储备液,再分别取该储
备液适量,用甲醇稀释制成含麦冬皂苷 Ra分别为
0094,0188,0282,0376,0470g·L-1和慈溪麦
冬皂苷 A为0098,0196,0294,0392,0490g·
L-1的混合液,045μm滤膜滤过,备用。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取经干燥粉碎过
40目筛的麦冬块根和须根10g各3份,分别加入药
材量的10倍,8倍,7倍水在80~90℃煎煮3次(经
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正交优化实验获得的最佳提取条件),收集滤液,冷
后过预先处理好的大孔吸附树脂柱,再分别用80%
乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩至干,分别得块根
和须根提取物平均值(n=3)为011g和012g,提
取率分别为11%和12%。各称取该提取物50
mg,用甲醇溶解定容制成50g·L-1的溶液,045
μm滤膜滤过,备用。
2.4 线性关系考察 分别精密取22项下对照品
混合液10μL进样,以色谱峰面积(Y)对质量浓度
(X)进行回归统计,麦冬皂苷Ra的回归方程为 Y=
75740X+7274,r=09995,线性范围为 098~
490μg;慈溪麦冬皂苷A线性方程为Y=77247X+
4730,r=09996,线性范围094~470μg。
2.5 最低检测限的测定 在21色谱条件下,按
信噪比大于3时测定最低检测限,麦冬皂苷 Ra最
低检测限为6ng,慈溪麦冬皂苷 A最低检测限为
10ng。
2.6 精密度实验 取22项下对照品溶液(含麦冬
皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A分别为0282g·L-1和
0294g·L-1),分别在21色谱条件下连续进样10
μL6次,测得麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A的峰
面积RSD分别为16%和19%。
2.7 稳定性实验 取23麦冬块根供试品溶液,分
别在0,2,4,8,16h进样10μL,测定麦冬皂苷Ra和
慈溪麦冬皂苷 A的峰面积 RSD分别为 14%和
16% ,表明样品溶液在16h内稳定。
2.8 重复性实验 取同一批麦冬块根样品,按22
制备方法制备6份,分别进样10μL,测定麦冬皂苷
Ra和慈溪麦冬皂苷 A的含量 RSD为 25%和
22%,表明该方法的重复性较好。
2.9 回收率实验 取同一批麦冬块根6份,分别加
入麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A对照品,按 23
方法制备,在21色谱条件下进样10μL,计算麦冬
皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A平均回收率与RSD分别
为1002%,16%和996%,17%,表明该方法准
确度较好(表1)。
表1 麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A加样回收率(n=6)
  药材称量/g 样品含量/mg 加入量/mg 测定量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
麦冬皂苷Ra 5794 562 580 1148 1010 1002 16
  5608 544 580 1125 1001    
  5763 559 580 1136 995    
  5856 568 580 1151 1005    
  5567 540 580 1134 1024    
  5897 572 580 1138 976    
慈溪麦冬皂苷A 5794 241 254 501 1024 996 17
  5608 230 254 485 1004    
  5763 236 254 486 984    
  5856 240 254 488 976    
  5567 228 254 480 992    
  5897 242 254 495 996    
210 样品含量测定
各取3批麦冬块根和须根样品,按23制备方
法制备成样品溶液,在21色谱条件下进样10μL
(3次平行),测定峰面积,由线性方程计算3批麦冬
块根和须根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量
见表2,3。
表2 麦冬块根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A
质量分数(n=3) % 
块根编号 麦冬皂苷Ra 慈溪麦冬皂苷A
081201 00097 00041
081209 00110 00053
081225 00121 00051
表3 麦冬须根中麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A
质量分数(n=3) %
须根编号 麦冬皂苷Ra 慈溪麦冬皂苷A
081104 00092 00037
081120 00105 00048
081128 00112 00056
3 讨论
本实验曾采用超声、回流提取样品直接进样,由
于多糖等杂质较多,导致色谱干扰较大,而采用水提
取大孔树脂吸附,可以除去大量非皂苷类杂质,而且
成本低无污染物排出,是一种理想的皂苷类提取方
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法。
麦冬为常用中药,有关提取、成分分离的参考文
献达千余篇,但有关须根的报道仅有十多篇,且无须
根中关于麦冬皂苷Ra和慈溪麦冬皂苷A含量测定
的报道。本文重点对麦冬药材和须根中2种有效成
分进行了定量测定,为麦冬药材的质量控制提供了
依据。
麦冬为《中国药典》2005年版一部收载的品种,
原标准中只有显色鉴别反应,缺乏麦冬有效成分定
性和定量检测,本文建立的含量测定方法为麦冬药
材及须根的定性与定量检测提供了实验依据。
由该实验结果看出,3批样品麦冬须根与麦冬
块根中麦冬皂苷 Ra和慈溪麦冬皂苷 A含量接近,
因此可以为麦冬须根的综合开发利用提供依据。
[参考文献]
[1] 肖培根.新编中药志.第 2卷[M].北京:化学工业出版社,
2002:481.
[2] 阳美平,吴皓,尹莲,等.麦冬皂苷和多糖类成分的研究进展
[J].中华中医药学刊,2008,26(10):2170.
[3] 王建中,陈小兵,王锋鹏,等.川麦冬皂苷类化学成分的研究
[J].有机化学,2008,28(9):1620.
[4] 姜宇,段昌令,柴兴云,等.麦冬须根化学成分研究[J].中国中
药杂志,2007,32(11):1111.
[责任编辑 王亚君]
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