全 文 ：·研究报告·
白及药材中多糖的含量测定研究
王爱民，王永林，郑林，李勇军
（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 ５５０００４）
［摘要］ 目的：建立白及药材中白及多糖的含量测定方法。方法：采用水提醇沉制备供试品溶液，以０２％蒽酮硫酸显
色，紫外分光光度法测定多糖含量。结果：葡萄糖质量在００３６～０１８ｍｇ线性关系良好，本法稳定，平均回收率为１００２％，
ＲＳＤ２７％（ｎ＝９），人工栽培的白及药材中多糖含量差别不大，较为稳定。结论：所建立方法准确，简便，可为作为白及药材质
量评价的依据之一。
［关键词］ 白及；白及多糖；含量测定
［收稿日期］ ２００９０３２５
［基金项目］ 国家“十一五”科技支撑计划项目子课题（２００６ＢＡＩ０６
Ａ０１０３）；贵州科学技术基金项目黔科合［２００９］２１４９号；贵阳市科学
技术计划［２００８］筑科农合第１５２７号
［通信作者］ 王永林，Ｔｅｌ：（８５１）６９０８８９９，Ｅｍａｉｌ：ｇｙｗａｍ１００＠
ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ
白及为兰科植物白及 Ｂｌｅｔｉｌａｓｔｒｉａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）
Ｒｅｉｃｈｂ．ｆ．的干燥块茎，具收敛、止血、清热利湿、消
肿生肌之功效，用于治疗咳血、吐血、外伤出血、疮疡
肿毒、皮肤皲裂、溃疡出血等症。白及富含白及
胶［１］，现代药理研究表明白及胶能抑制肿瘤血管生
成，兼有抗感染、抗肿瘤和促进凝血的功能［２３］，白及
胶质的主要成分为大分子多糖，同时含联苄类、二氢
菲类、双菲醚类、双氢菲并吡喃类，菲类、菲螺内酯类
５０余种化合物［４］。作者在对贵州省正安县白及
ＧＡＰ种植基地产白及进行质量评价时，发现《中国
药典》２００５年版一部对白及的质量控制仅有性状和
薄层色谱鉴别，没有对白及中具有药理活性的白及
多糖和相关指标成分进行质量控制，有关白及药材
中白及多糖和其他有关成分的含量测定较少报道，
也未见有关白及药材质量评价的报道，为了较为全
面的评价贵州正安白及药材的质量，作者通过对白
及药材化学成分的研究，从中制备出白及多糖和分
离出含量较高的双［４（βＤ吡喃葡萄糖氧）苄基］
２异丁基苹果酸酯（ｍｉｌｉｔａｒｉｎｅ），分别以白及多糖和
指标成分ｍｉｌｉｔａｒｉｎｅ对白及药材的质量进行评价。
１ 材料
ＵＶ２４０１ＰＣ紫外可见光分光光度计（日本岛
津），ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０电子天平（梅特勒脱利多仪
器［上海］有限公司）；Ｄ无水葡萄糖对照品（中国药
品生物制品检定所，批号１１０８３３２００３０２）；蒽酮（分
析纯，上海试剂一厂）；硫酸、无水乙醇等为国产分
析纯。
白及药材来源为贵州正安白及药材 ＧＡＰ种植
基地，贵州正安县野生，安徽亳州市中药饮片厂和广
西河池野生，以上白及药材均由由贵州大学生命科
学院石建明教授鉴定为Ｂ．ｓｔｒｉａｔａ。
２ 方法与结果
２．１ 对照品储备液的制备
精密称取经１０５℃干燥至恒重的无水葡萄糖对
照品１７８０ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶中，加水溶解并稀释
至刻度，摇匀，即得。
２．２ 供试品溶液制备
取本品粉末（过三号筛）０２ｇ，精密称定，置园
底烧瓶中，精密加水５０ｍＬ，称重，用电加热器直接
加热回流１ｈ（保持微沸），放冷，用水补足减失的质
量，摇匀，滤过。精密量取续滤液５ｍＬ，加无水乙醇
３０ｍＬ，摇匀，放置１ｈ，离心（４０００ｒ·ｍｉｎ－１）５ｍｉｎ，
倾去上清液，沉淀用热水溶解，放冷，置１００ｍＬ量瓶
中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
２．３ 蒽酮试液的配制
取蒽酮０２ｇ，用浓硫酸溶解并稀释至１００ｍＬ，
临用时配制。
２．４ 测定波长的选择
分别精密量取 Ｄ无水葡萄糖对照品溶液和供
试品溶液适量，分别置１０ｍＬ刻度试管中，加水稀释
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至２０ｍＬ，加０２％蒽酮硫酸溶液显色，以相应试
剂为空白，置分光光度计上绘制光谱图，葡萄糖对照
品与白及供试品均在６２５ｎｍ处有最大吸收。
２．５ 标准曲线的制备
精密量取对照品储备液 ０２，０４，０６，０８，１
ｍＬ，分别置１０ｍＬ刻度试管中，各加水至２０ｍＬ，摇
匀，精密加入０２％蒽酮硫酸溶液６ｍＬ，混匀，置沸
水浴中加热 １０ｍｉｎ，取出，立即置冰浴中冷却 １０
ｍｉｎ，取出，以相应试剂为空白。在６２５ｎｍ波长处测
定吸光度，以吸光度（Ａ）为纵坐标，质量（Ｘ）为横坐
标，绘制工作曲线。线性回归方程为 Ａ＝６０６Ｘ＋
９９×１０－３，ｒ＝０９９９７，试验结果表明，葡萄糖质量
在００３６～０１８ｍｇ，用０２％蒽酮硫酸溶液显色后
的线性关系良好。
２．６ 重复性试验
取正安ＧＡＰ样品（批号２００５１０２７）６份，按供试
品溶液制备方法制备供试液，精密取量供试液 １
ｍＬ，照标准曲线的制备项下的方法，自“精密加入
０２％蒽酮硫酸溶液６ｍＬ”起，依法测定吸光度，计
算，其中白及多糖以无水葡萄糖计为３２６７％，ＲＳＤ
２５％（ｎ＝６）。
２．７ 对照品溶液和供试品溶液显色后稳定性考察
分别取葡萄糖对照品和白及供试品溶液适量用
０２％蒽酮硫酸溶液显色，以相应的试剂作空白，置
比色皿中，在分光光度计上于６２５ｎｍ测定吸光度，
每隔１０ｍｉｎ读数，共考察６０ｍｉｎ，结果对照品溶液
和供试品溶液显色后在６０ｍｉｎ稳定。
２．８ 准确度试验
２．８．１ 白及多糖的提取与精制［５７］ 取白及药材粗
粉２５ｇ，加８０％乙醇回流提取２次，每次２ｈ，药渣
挥干后，用沸水提取２次，提取液浓缩，加乙醇使含
醇量为 ８０％，放置过夜，离心收集沉淀物，再溶于
水，加０１％活性炭脱色，滤过，滤液再加乙醇使含
醇量为８０％，放置过夜，离心收集沉淀物，用适量水
溶解，采用Ｓｅｖａｇｅ法除蛋白，反复进行至无蛋白层，
经双缩脲反应呈阴性表明无蛋白质存在，再醇沉，沉
淀物用无水乙醇、丙酮依次洗涤，挥去有机溶剂，６０
℃减压干燥，得白及多糖。
２．８．２ 换算因子的测定［８１０］ 精密称取６０℃减压
干燥至恒重的白及多糖２１４２ｍｇ，置１００ｍＬ量瓶
中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该液５
ｍＬ，置１０ｍＬ量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为
白及多糖供试品溶液，精密量取１ｍＬ，照标准曲线
的制备项下的方法测定吸光度，按下式计算换算因
子：ｆ＝Ｗ／Ｃ，式中 Ｗ为多糖质量数（ｍｇ），Ｃ为葡萄
糖质量数（ｍｇ），测得换算因子平均值为 ｆ＝１１１１
３，ＲＳＤ２１％（ｎ＝３）。
２．８．３ 回收率试验 取已测定含量的白及药材样
品９份（平均含量以无水葡萄糖计为３２６７％，计算
回收率时用换算因子将无水葡萄糖换算为白及多
糖），精密称定，分别置园底烧瓶中，照２２项下制
成供试品溶液，分别显色，测定，结果见表１。
表１ 白及多糖加样回收率试验
样品量
／ｍｇ
含多糖量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
１０２３ ３７１４ １８０３ ５４５４ ９６５１
１０６５ ３８６６ １７４４ ５６５９ １０２８
１０８４ ３９３５ １６８３ ５５８３ ９７９２
１０２２ ３７１１ ４０２０ ７７１７ ９９６５
１０４６ ３７９７ ３６３１ ７５３９ １０３１ １００２ ２７
１０１９ ３７００ ３９０９ ７４９７ ９７１３
１０９４ ３９７２ ５６７５ ９８２８ １０３２
１０１１ ３６７１ ５４１５ ９０４８ ９９３０
１０２８ ３７３２ ５６２８ ９４７７ １０２１
注：白及多糖质量数（ｍｇ）＝换算因子（ｆ）×无水葡萄糖质量
（ｍｇ）。
２．９ 样品测定
按上述对照品溶液和供试品溶液的制备方法制
备供试品溶液和对照品溶液，用０２％蒽酮硫酸溶
液显色，测定，见表２。
表２ 白及药材多糖含量测定（ｎ＝２）
Ｎｏ． 批号 样品说明
多糖含量
（以无水葡萄糖计）／％
１ ２００５１０２７ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３２７
２ ２００５１１０１ 正安ＧＡＰ基地二年生 ２８６
３ ２００６０１２８ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３６５
４ ２００６０３３０ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３１４
５ ２００６０５２９ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３２８
６ ２００６０７３０ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３３８
７ ２００６０９３０ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３３９
８ ２００６１０１３ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３０６
９ ２００６１１３０ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３４１
１０ ２００６１２２８ 正安ＧＡＰ基地二年生 ３０５
１１ ２００７０２２６ 正安ＧＡＰ基地二年生 ２８０
１２ ２００５０１１５ 正安野生白及 ３６５
１３ ２００６０４０１ 正安野生白及 ２４２
１４ ２００６０９３０ 正安野生白及 ３２５
１５ ０５１１０６ 安徽亳州市中药饮片厂 ２５３
１６ ２００５０６１０ 广西河池野生 ３１４
１７ ２００６０７３０ 广西河池野生 ２３５
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３ 结果与讨论
以蒽酮硫酸显色法测定了各产地多批白及药
材中白及多糖的含量，试验还对显色剂的选择、显色
剂的浓度、样品提取的方法、醇沉条件等进行了考
察，结果样品先用水提取，醇沉得到白及多糖再用
０２％蒽酮硫酸进行显色，测定，经方法学验证表
明，该法灵敏可靠、重复性和准确度好，可用于白及
药材中白及多糖的含量测定。
以白及药材中活性成分白及多糖作为质量指标
进行测定，从表２结果可见，由于人工栽培条件和生
长环境的不同等因素，导致多糖含量具有一定的差
异，以贵州正安ＧＡＰ种植基产白及药材中多糖含量
较为稳定，其连续三年二年生９批白及多糖的质量
分数为 ２８０％ ～３６５％，平均值为 ３２０％，ＲＳＤ
７９％（ｎ＝９），而野生白及多糖含量变化较大，质量
分数为 ２３５％ ～３６５％，平均值为 ２８９％，ＲＳＤ
１８４％（ｎ＝６）。
［参考文献］
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［责任编辑 周驰］
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