全 文 ：ＵＰＬＣ测定益母草颗粒和益母草膏中益母草碱含量
陈?，宋康，李晓娟，王灵聪
（浙江省中医院 国家中医临床研究基地，浙江 杭州 ３１０００６）
［摘要］ 目的：分析不同厂家生产的益母草颗粒及益母草膏中益母草碱的含量，为益母草颗粒和益母草膏的质量标准建
立提供参考。方法：采用超高效液相色谱分析，ＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣ１８色谱柱（２１ｍｍ×１００ｍｍ，１７μｍ）；甲醇１０ｍｍｏｌ·
Ｌ－１甲酸铵缓冲液（ｐＨ４０）为流动相梯度洗脱，检测波长为２７７ｎｍ。结果：不同企业生产的益母草颗粒和益母草膏中益母草
碱介于４５６～１９３０μｇ·ｇ－１。结论：该方法操作简便，结果稳定可靠，可用于益母草相关制剂的质量评价。
［关键词］ 益母草颗粒；益母草膏；超高效液相；益母草碱
［收稿日期］ ２００９０１２０
［通信作者］ 陈?，Ｔｅｌ：（０５７１）８６６２０２８０，Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｚｈｅ＿ｚｊｔｃｍ＠
ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
益母草 ＨｅｒｂａＬｅｏｎｕｒｉ为唇形科植物，其主要有
效成分为丁香酸、益母草碱等［１］。益母草碱具有活
血化瘀、利水消肿的作用，是中医妇科良药。它能够
抑制血小板的聚集，防止血栓的形成［２］；可扩张外
周血管，降低血管阻力，具有一定的抗高血压，降低
冠脉阻力，增加冠脉血流量，保护心脏等药理作
用［３５］。益母草生物碱的测定方法有雷氏盐剩余比
色法、雷氏盐沉淀溶解比色法、紫外分光光度法、薄
层扫描法、高效液相色谱法［６９］等。在《中国药典》
及各级别标准中，益母草制剂的质量控制都是以总
生物碱为指标的，对于益母草碱的含量标准却没有
要求，这样不能保证益母草及其制剂的安全、有效。
本实验采用超高效液相法（ＵＰＬＣ）对不同企业生产
的益母草颗粒及益母草膏中的益母益母草碱的含量
进行测定，从而为益母草制剂的质量控制提供了参
考方法。
１ 材料
Ｗａｔｅｒｓ超高效液相色谱仪（ＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣ，Ｗａ
ｔｅｒｓ，ＵＳＡ）包括在线真空脱气系统，四元超高压泵系
统，自动进样器，柱温箱，二极管阵列检测器；
ＳＢ２２００超 声 清 洗 机 （ＳＨＡＮＧＨＡＩＢＲＡＮＳＯＮ）；
ＡＥ２００电子分析天平（ＭＥＴＦＬＥＲ）。
益母草碱（ｌｅｏｕｒｉｎｅ）对照品（安徽新星药物开发
有限责任公司，批号 ２００８０７０３０９）；甲醇为色谱纯
（ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）；水为 Ｍｉｌｉｐｏｒｅ纯净水；其他试剂
为分析纯 （杭州华东医药有限公司）。
益母草颗粒由山东三九药业有限公司和四川志
远广和制药有限公司提供；益母草膏由山东三九药
业有限公司和广西南宁维威制药有限公司提供。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣｌ８色谱柱
（２１ｍｍ×１００ｍｍ，１７μｍ）；流动相甲醇１０ｍｍｏｌ
·Ｌ－１甲酸铵缓冲液（ｐＨ４０）梯度洗脱（１３ｍｉｎ内
甲醇由５％升至９５％），检测波长２７７ｎｍ，流速０３
ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温为３０℃，进样量１０μＬ。
在此色谱条件下，益母草碱和样品中其他组分
色谱峰线基本分离，益母草碱与其相邻色谱峰的分
离度大于１５，色谱图见图１。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取益母草碱对照
品适量，加甲醇制成每１ｍＬ含０５ｍｇ的溶液，作为
对照品溶液。
２．３ 供试品溶液的制备 取各样品，精密称取４０
ｇ，精密加入 １５％甲酸溶液 ２０ｍＬ，超声处理 ４０
ｍｉｎ，放冷，滤过，滤液转移至５０ｍＬ量瓶中，加水至
刻度，摇匀，滤过，滤液用微孔滤膜（０２２μｍ）滤过，
即得。
２．４ 标准曲线与线性范围 精密称取干燥２４ｈ的
益母草碱对照品适量，加甲醇制成分别配置 １０，
２５，５，１０，２５，５０，１００，２５０ｍｇ·Ｌ－１的溶液。将上述
对照品溶液进样，进样量１０μＬ，以对照品的进样量
对峰面积积分值进行回归，得方程 Ｙ＝３９８０００Ｘ－
１０１，ｒ＝０９９９８，益母草碱在２５～２００μｇ呈良好的
线性关系。
２．５ 精密度试验 取同一供试品溶液，连续进样７
次，结果ＲＳＤ０６８％（ｎ＝７），表明仪器精密度良好。
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第３４卷第１２期
２００９年６月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ １２
Ｊｕｎｅ，２００９
１．益母草碱；Ａ对照品；Ｂ．南宁益母草膏；
Ｃ．山东益母草膏；Ｄ．四川益母草颗粒；Ｅ．山东益母草颗粒。
图１ 益母草对照品及其制剂ＵＰＬＣ图
２．６ 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于０，
６，ｌ２，１８，２４ｈ进样，测得峰面积，计算得峰面积的
ＲＳＤ１１％。表明供试品溶液在２４ｈ内基本稳定。
２．７ 重复性试验 取同一批次（０８０３１１０）样品，按
供试品溶液制备方法操作，按前述超高效液相色谱
法，重复测定样品５份，ＲＳＤ１４％（ｎ＝５）；表明此
法重复性良好。
２．８ 回收率试验 精密称取已测知含量的样品
（０８０３１１０）约２０ｇ，共９份，分别准确加入一定量的
益母草碱对照品溶液，依上述方法进行含量测定并
计算回收率，见表１。方法平均回收率为９８５％ ，
ＲＳＤ２３％（ｎ＝９）。
２．９ 样品测定 将不同批次的产品，按２．２方法
制备供试品溶液，按２．１法进行测定，以外标法计
算益母草碱含量，结果显示不同企业生产的益母
草颗粒和益母草膏中益母草碱介于 ４５６～１９３０
μｇ·ｇ－１。其中，益母草膏中益母草碱均在１５０μｇ
·ｇ－１以上，明显高于其在益母草颗粒中含量。不
同厂家生产的益母草颗粒中益母草碱的含量也存
在较大差异。
表１ 益母草碱加样回收率
取样量
／ｇ
样品中量
／μｇ
加入量
／μｇ
测得量
／μｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
２００１ １１５ １００ ２１０ ９７６
２０１３ １１６ １００ ２１４ ９９０
２００５ １１５ １００ ２１４ ９９５
２０９２ １２０ ２００ ３１４ ９８１
２０００ １１５ ２００ ３０７ ９７５ ９８５ ２３
２０２４ １１６ ２００ ３０８ ９８８
２０６３ １１９ ３００ ４１０ ９７９
２００４ １１５ ３００ ４１２ ９９２
２００１ １１５ ３００ ４０９ ９８５
３ 讨论
３．１ 提取方法及提取时间的选择 比较了加乙醇
或纯水水超声提取及２．２方法，结果表明用１５％
甲酸溶液作提取溶液提取效率最高。对超声提取时
间进行了考察，结果表明超声处理４０ｍｉｎ已基本提
取完全。
３．２ 超高效液相色谱条件优化 比较了不同洗脱
体系（甲醇水、乙腈水、甲醇０１％甲酸、甲醇
０１％三乙胺、甲醇甲酸铵）的色谱分析条件，结果
表明供试样品成分复杂，只有在甲醇甲酸铵为流动
相梯度洗脱条件下，益母草碱和样品中其他组分才
能够基线分离。
３．３ 不同厂家药品质量比较 根据对不同厂家生
产的益母草颗粒和益母草膏中益母草碱的含量比
较，益母草颗粒和益母草膏中益母草碱的含量存在
一定差异，不同厂家之间益母草碱的含量存在一定
差异，同一厂家的不同批次之间也有一定差异。为
控制药品质量，生产厂家应加强药材质量以及制剂
工艺的控制，使其产品质量稳定均一。
［参考文献］
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Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｅｏｎｕｒｉｎｅｉｎｌｅｏｎｕｒｕｓｇｒａｎｕｌｅａｎｄ
ｅｘｔｒａｃｔｕｍｂｙＵＰＬＣ
ＣＨＥＮＺｈｅ，ＳＯＮＧＫａｎｇ，ＬＩＸｉａｏｊｕａｎ，ＷＡＮＧＬｉｎｇｃｏｎｇ
（ＮａｔｉｏｎａｌＣｌｉｎｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈＢａｓｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，
Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＵＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｅｏｎｕｒｉｎｅｉｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＡｎＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（２１ｍｍ×１００ｍｍ）ｗｉｔｈ１７μｍｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｗａｓｕｓｅｄ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆ
ｍｅｔｈａｎｏｌａｎｄａｍｍｏｎｉｕｍｆｏｒｍａｔｅｂｕｆｅｒ（ｐＨ４０）ｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｍｏｄｅ．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ０３ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄｔｈｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｉｃｒｕｎ
ｔｉｍｅｗａｓ１８ｍｉｎｆｏｒｏｎｅｓａｍｐｌｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｅｏｎｕｒｉｎｅｉｎｔｈｅｌｅ
ｏｎｕｒｕｓｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃｏｍｐａｎｉｅｓ．Ｔｈｅｌｅｏｎｕｒｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｏｓｅｐｒｏｄｕｃｔｓｉｓｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ４５６１９３μｇ·
ｇ－１．Ｃｏｎｄｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ．Ｉｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｒｅｌａｔｅｄｄｒｕｇｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｌｅｏｎｕｒｉｎｅ；ＵＰＬＣ；ｌｅｏｎｕｒｕｓｇｒａｎｕｌｅ；ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｅｘｔｒａｃｔｕｍ
［责任编辑 周 驰］
第三次全国道地药材学术研讨会暨中药资源生态专业委员会换届选举大会征文通知
第三届中药资源生态学学术研讨会定于２００９年９月１８～２０日在山东济南召开。本次会议由中国生态学学会中药资源
生态专业委员会主办。会议主要内容为中药资源生态学，特别是中药道地药材学术研讨，经验交流。本次会议将邀请中药学
和生态学及相关领域的科技工作者参加。现将征文事宜通知如下：
一、会议议题
１．中药道地药材的研究；２．中药资源生态学及其相关研究；３．中药资源生物多样性及保护利用，４．中药资源可持续发展；
５．中药栽培中的环境问题及对策；６．濒危中药资源及保护现状；６．新技术在中药资源研究中的应用；７．当今世界生态学发展的
前沿及热点研究问题及其对中药资源生态学研究的影响等。
二、征文要求
１．参会者与论文作者请填写报名回执，并于２００９年７月３０日前寄回大会秘书处；２．征文截止日期：２００９年７月３０日；３．
论文长度不超过８０００字，摘要３００字左右。文章题目请用四号黑体居中，题目下方的作者姓名用小四楷体居中，正文小五号
宋体。文章可分段落，但不设各级标题；４．作者简介限１００字，请用小五号宋体，（包括：姓名、性别、出生年月、工作单位、职务、
职称、专业领域、主要成就、联系地址、邮政编码、电话、传真与电子信箱）附于摘要下方；５．文稿录入请用Ｗｏｒｄ。每位作者请提
交磁盘和１份文本清样，欢迎使用电子信箱。
三、会议规模
８０～１００人。
四、会议秘书处联系地址
地址：１００７００北京东直门内南小街１６号 中国中医科学院中药研究所；联系人：林淑芳、张霁、郭兰萍
电话：０１０６４０１４４１１２９５５或２９５６；传真：０１０８４０２７１７５
电子信箱：ｚｈｏｎｇｙａｏｓｈｅｎｇｔａｉ＠１２６．ｃｏｍ。
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第３４卷第１２期
２００９年６月
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