全 文 ：高效液相色谱法测定蓍草中绿原酸的含量
方华民１，周　凯２，鞠爱华３
（１．宁夏自治区人民医院 药剂科，宁夏 银川 ７５００２１；
２．内蒙古食品药品检验所，内蒙古 呼和浩特 ０１００２０；
３．内蒙古医学院，内蒙古 呼和浩特 ０１００５９）
［收稿日期］　２００８１２２４
［通信作者］　 方华民，Ｔｅｌ：１３６０４７１４６４４，Ｅｍａｉｌ：５５３９６０６４７＠
９９ｃｏｍ
　　蓍草来源于菊科植物蓍 Ａｃｈｉｌｅａａｌｐｉｎａ的干燥
全草［１］。为常用蒙药，蒙药名图格勒其乌布斯［２］。
广泛分布于我区各地，尤其是东部地区。民间用作
抗癌药物，疗效显著。为了有效控制本品质量，本研
究对其质量标准进行了研究，建立起以绿原酸为指
标成分的含量测定方法。
１　仪器与试药
大连伊利特高效液相色谱仪、Ａｕｔｏｓｃｉｅｎｃｅ（奥特
赛恩斯）ＡＳ３１２０型超声仪。绿原酸对照品（中国药
品生物制品检定所，批号 １１０７５３２００２１２）；乙腈为
色谱纯，水为超纯水；其他试剂均为分析纯。蓍草药
材为自采于内蒙古根河、大青山等地，并经内蒙古医
学院生药学教研室鞠爱华教授生药学鉴定。
２　色谱条件
ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）；流动相：乙腈０４％磷酸水溶液（１１∶８９）；流速
１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长３２７ｎｍ，柱温为室温。理
论板数按绿原酸峰计算不低于６０００。
３　方法与结果
３．１　对照品溶液的制备与测定　精密称取绿原酸
对照品适量，置棕色瓶中，加５０％甲醇制成每１ｍＬ
含１００μｇ的溶液，即得。
Ａ．对照品；Ｂ．供试品；１．绿原酸。
图１　蓍草供试品ＨＰＬＣ图
３．２　供试品溶液的制备与测定　取本品粉末（过
四目筛），约０５ｇ，精密称定，加５０％甲醇５０ｍＬ，称
定重量，超声处理３０ｍｉｎ，放冷。用５０％甲醇补充
减失的重量，取续滤液５ｍＬ置１０ｍＬ棕色瓶中，加
５０％甲醇至刻度，摇匀，即得。
３．３　线性关系考察　精密称取绿原酸对照品 １
ｍｇ，加５０％甲醇制成１００μｇ·ｍＬ－１的标准品溶液。
精密吸取１０，１５，２０，２５，３０ｍＬ置１０ｍＬ量瓶
中，用５０％甲醇稀释至刻度，分别吸取２０μＬ进样，
按上述色谱条件测定。结果峰面积 Ｙ与进样量 Ｘ
之间呈现良好的线性关系，回归方程 Ｙ＝３９８４Ｘ－
１３６，ｒ＝０９９９８。
３．４　精密度试验　取供试品溶液，连续进样６次，
测得绿原酸峰面积积分值。结果ＲＳＤ０４５％。
３．５　稳定性试验　取蓍草供试品溶液，分别于０，
１，２，４，６，８ｈ进样，记录峰面积积分值，供试品溶液
在８ｈ内稳定。结果ＲＳＤ１４％。
３．６　重复性试验　取同一批次蓍草粉末５份，精密
称定，每份取样量约为０５ｇ。分别按样品制备方法
制备并测定每份的含量。结果平均含量０５８％ ，
ＲＳＤ１５％。
３．７　回收率试验　取同一批次蓍草粉末６份，分别
精密称定。每份加入绿原酸对照品１５ｍｇ。按照
样品制备方法操作并测定每份含量，计算回收率。
结果见表１。
表１　绿原酸加样回收率
取样量
／ｍｇ
样品含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
２５５２ １４６ １５ ２９６ １００４ ９９２ １４
２４４７ １４２ １５ ２９２ １０１５ 　 　
２４０９ １３７ １５ ２８５ ９８７
２４７８ １４１ １５ ２８８ ９７８ 　 　
２４９６ １４２ １５ ２９０ ９８５ 　 　
２４５１ １３９ １５ ２８７ ９８０ 　 　
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第３４卷第６期
２００９年３月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　６
　Ｍａｒｃｈ，２００９
３．８　样品的测定　取不同产地，不同批次蓍草粉
末，精密称定，按照样品制备方法操作，采用外标一
点法计算含量，结果见表２。
表２　蓍草样品中绿原酸的质量分数（ｎ＝２） ％　
采集地 采集日期 绿原酸
根河　 ２００５２００９ ０３９
　 ２００６２００７ ０４０
　 ２００６２００９ ０３８
兴安盟 ２００６２００７ ０５６
　 ２００６２００９ ０５７
乌拉山 ２００６２００８ ０３６
　 ２００６２００９ ０３５
大青山 ２００６２００７ ０５９
　 ２００６２００８ ０５７
蛮汉山 ２００６２００８ ０４５
４　讨论
４．１　提取条件的选择　参照文献［３］及药典的加
热回流提取方法，经实验研究，用超声３０ｍｉｎ提取
的方法，被测成分提取完全，且杂质干扰小，结果理
想。
４．２　流动相的选择　参照药典及有关文献［３］，比
较了两组流动相①甲醇３％醋酸水溶液（１６∶８４）；②
乙腈０４％磷酸水溶液（１１∶８９）。结果表明：以第２
个流动相出峰时间适中，色谱峰峰形理想，杂质少，分
离度好。故选择以乙腈０４％磷酸水溶液（１１∶８９）为
流动相。
４．３　检测波长的选择　文献［３］及药典２００５年版
中有关绿原酸的测定波长均为３２７ｎｍ，经在２００～
７００ｎｍ进行光谱扫描证明对照品及供试品均在３２７
ｎｍ处有最大吸收。故选择３２７ｎｍ为检测波长，既
可保证样品测定，又可排除其他组分的干扰。
［参考文献］
［１］　 江苏新医学院．中药大辞典．上册［Ｍ］．上海：上海科学技术
出版社，１９７７：５．
［２］　 中国医学百科全书编辑委员会．中国医学百科全书．蒙医分
卷［Ｍ］上海：上海科学技术出版社，２００４：２３３．
［３］　 宋小军，张永欣，张　颖，等．绵茵陈药材中绿原酸定性定量
方法研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００２，７（４）：２６７．
［责任编辑　周　驰］
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