全 文 ：清脑滴丸对急性脑缺血海马 ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ
表达变化的调节作用
张允岭１，张綦慧１，白　文２，韩振蕴１，郑　宏１，张　锦１，黄启福３
（１．北京中医药大学 东方医院，北京 １０００７８；
２．北京大学 人民医院，北京 １０００４４；３．北京中医药大学 基础医学院，北京 １０００２９）
［摘要］　目的：观察清脑滴丸对急性脑缺血海马ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ表达变化的影响，探讨其对急性脑缺血损害
（ＰＫＣＭＡＲＣＫＳ）的调节作用。方法：采用同种系体外微栓子注入法复制急性多发脑梗死大鼠模型，将大鼠随机分
为５组，正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组，每组１２只。正常组、假手术组和模型组给予等体积生理盐水
灌胃，中药组和西药组分别给予清脑滴丸１３３２８ｍｇ·ｋｇ－１，尼莫地平７２５ｍｇ·ｋｇ－１。各组于造模前３ｄ开始灌胃
给药，每日１次。应用光学显微镜（ＨＥ染色）和透射电子显微镜观察急性脑缺血大鼠脑组织形态学改变，应用半定
量ＰＣＲ法检测各组患侧海马ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ表达水平。结果：正常组海马神经细胞紧密整齐，模型组、中药组和
西药组神经细胞分别有不同程度受损，但中药组损伤程度相对较轻；模型组、中药组和西药组海马ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ
均过高表达，但中药组明显低于模型组（Ｐ＜００１）。结论：清脑滴丸可以减轻急性脑缺血时海马组织损伤，下调
ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ的过高表达，其机制可能是通过调节ＰＫＣＭＡＲＣＫＳ信号转导系统而起到神经保护作用。
［关键词］　清脑滴丸；急性多发脑梗死；ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ；调节作用
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）２４２９３８０５
［收稿日期］　２００８０７１０
［基金项目］　２００４年教育部博士点基金（２００４００２６０１１）；２００５
年教育部科学技术重点项目；２００３年教育部优秀青年教师基金
［通讯作者］　张允岭，Ｔｅｌ：（０１０）６７６８９６３４，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｎｌｉｎｇ
ｚｈａｎｇ２００４＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
　　急性脑梗死时某些信号转导蛋白，如脑内的一
些神经递质、神经肽、细胞因子会应激性的发生变
化，成为异常的不受控制的激活状态，从而使神经细
胞失去对环境的适应及应变能力，发生凋亡或坏死。
ＭＡＲＣＫＳ（ｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｅｄａｌａｎｉｎｅｒｉｃｈＣｋｉｎａｓｅｓｕｂ
ｓｔｒａｔｅ，ＭＡＲＣＫＳ）是一种存在于中枢神经系统（以海
马、皮层为主）内，与大脑生长发育密切相关的蛋白
质［１］。ＷｕＷＣ等［２］在１９８２年首次发现，蛋白激酶
Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）可以调节大脑内突触小体
的１个分子质量为８７×１０３底物的磷酸化的蛋白质
被命名为 ＭＡＲＣＫＳ。１９９５年美国哈佛医学院 Ｄｒ
Ｓｔｕｍｐｏ教授［３］发现破坏小鼠ＭＡＲＣＫＳ基因，中枢神
经细胞广泛坏死，大脑发育异常，且随年龄增长，脑
中此蛋白含量呈降低趋势。目前已发现 ＭＡＲＣＫＳ
与脑组织的发育，神经分泌作用的调节紧密相关，参
与细胞的转移、黏附、分泌，以及细胞的内摄、外放和
吞噬作用［４６］，并通过肌动蛋白容纳细胞骨架结构的
调节而对突触小泡传输、神经递质的释放等许多神
经元功能起作用［７］。
本课题组前期研究发现，急性脑缺血时海马
ＭＡＲＣＫＳ和ｐＭＡＲＣＫＳ表达异常升高，中药对此具
有明显的下调作用［８］，且在急性脑缺血２４ｈ时，多
发脑梗死大鼠海马缺血损害最为明显［９］。本研究
通过在急性缺血损害最显著的２４ｈ这一时间点，观
察清脑滴丸对急性脑缺血时海马 ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ
表达变化的作用，以探讨其对急性脑缺血海马ＰＫＣ
ＭＡＲＣＫＳ信号转导系统的调节作用。
１　材料
１．１　动物　健康的雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ６０只，体重
３２０～３５０ｇ，由北京维通利华实验动物技术有限公
司提供，动物许可证号ＳＣＷＫ（京）２００２２００３。
１．２　药物与试剂　清脑滴丸（三七、栀子和冰片组
成）由北京中医药大学提供科研用药，已经进入临
床试验阶段。尼莫地平由海南普利制药有限公司提
供，批号０４１１２２。总 ＲＮＡ提取试剂盒、ＲＴＰＣＲ试
剂盒购自 Ｐｒｏｍｅｇａ公司，琼脂糖购自 Ｓｉｇｍａ公司，
ＧｏｌｄＶｉｅｗ，ＤＮＡＭａｒｋｅｒ（５００，４００，３００，２００，１００，２５
·８３９２·
第３３卷第２４期
２００８年１２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２４
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００８
ｂｐ）均购自北京赛百盛基因技术有限公司。
１．３　仪器　Ａｓｐ－３００型组织自动脱水机（Ｌｅｉｃａ公
司），ＥＧ－１１５０Ｃ型组织包埋机（Ｌｅｉｃａ公司），ＲＭ－
２１３５型石蜡切片机（Ｌｅｉｃａ公司），ＢＸ５１型正置显微
镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ公司），ＪＥＭ１２３０型透射电子显微镜（日
本电子公司），ＡＧ－２２３３１型 ＰＣＲ仪（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公
司），ＤＹＹ－６Ｃ型水平电泳仪（北京六一仪器厂）。
２　方法
２．１　分组与给药　大鼠随机分为５组，正常组、假
手术组、模型组、中药组、西药组，每组１２只。根据
实验设计动物间的剂量换算中等效剂量的直接折算
法［１０］，中药组和西药组分别给予清脑滴丸 １３３２８
ｍｇ·ｋｇ－１，尼莫地平７２５ｍｇ·ｋｇ－１。正常组、假手
术组和模型组大鼠均给予等体积的生理盐水。各组
于造模前３ｄ开始灌胃给药，每天１次，共３ｄ。
２．２　模型制备及取材　采用同种系体外微栓子注入
法［１１］：同种Ｗｉｓｔａｒ大鼠左心室内采血，于８０℃温箱
内干燥４ｈ，研碎后用２００μｍ筛孔过筛，应用时取血
栓栓子１ｍｇ加生理盐水０５ｍＬ，摇匀成混悬液。大
鼠以１０％水合氯醛（３５ｍｇ·ｋｇ－１）腹腔麻醉，颈正中
切开皮肤，剥离肌群，暴露右侧颈总动脉、颈外动脉与
颈内动脉，暂时夹闭右侧颈总动脉，于右侧颈外动脉
逆行插管注入栓子溶液０３ｍＬ，推注同时开放右侧
颈总动脉，使栓子通过右侧颈内动脉进入颅内至大脑
各动脉，然后结扎右侧颈外动脉，缝合皮肤。假手术
组手术方法同上，但注射为等体积的生理盐水。
各组大鼠于造模后２４ｈ处死。组织形态学取
材参见光镜标本制作方法和电镜标本制作方法；提
取总ＲＮＡ的所有大鼠在冰上断头、取脑（整个过程
应在５ｍｉｎ内完成），取患侧海马置于液氮中保存。
２．３　光镜组织标本制作　腹腔注射麻醉，剪开胸
腔，暴露心脏，从心尖部插导管于左心室并固定，用
含１２５００Ｕ肝素钠的温生理盐水 ２００ｍＬ快速灌
洗，至右心耳流出液无色透明，再用４％多聚甲醛溶
液灌注固定，待大鼠肢体、尾巴僵直后，迅速断头取
脑，继续置于４％多聚甲醛溶液中固定至少２４ｈ以
上。从前脑额极至枕叶平均间隔２ｍｍ做连续冠状
切片，常规梯度乙醇脱水，石蜡包埋，连续切片（４
μｍ），ＨＥ染色。
２．４　电镜组织标本制作　腹腔注射麻醉，剪开胸
腔，暴露心脏，从心尖部插导管于左心室并固定，用
含１２５００Ｕ肝素钠的温生理盐水 ２００ｍＬ快速灌
洗，至右心耳流出液无色透明，再用４℃，３％戊二
醛溶液灌洗固定，迅速断头取脑，于患侧海马、额叶
皮层部位取１ｃｍ３组织块，继续置于３％戊二醛中后
固定２ｈ，分别用１％四氧化锇作用２ｈ，梯度乙醇脱
水，环氧丙烷置换，Ｅｐｏｎ８１２环氧树脂包埋，切片机
切片，厚度５０～６０ｎｍ，电子染色，用透射电子显微
镜观察细胞形态及超微结构。
２．５　急性缺血海马组织总ＲＮＡ提取和 ＲＴＰＣＲ反
应　提取总ＲＮＡ：应用Ｐｒｏｍｅｇａ公司提取总ＲＮＡ试
剂盒提取总ＲＮＡ，具体操作见说明书。并用紫外分
光光度计测定并记录波长２６０ｎｍ（Ａ２６０）及２８０ｎｍ
（Ａ２８０）时的吸光度值、两者之间的比值及样品中总
ＲＮＡ的浓度。
ＲＴＰＣＲ引物设计：本实验测试ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ
的表达，用βａｃｔｉｎ作为内对照，以纠正因加样量误差
导致的ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ测试误差。设计引物如下：β
ａｃｔｉｎ上游引物５′ＡＧＣＣＡＴＧＴＡＣＧＴＡＧＣＣＡＴＣＣ３′，下
游引物 ５′ＣＴＣＴＣＡＧＣＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＡＡ３′，ＭＡＲＣＫＳ
上游引物５′ＧＴＧＧＴＧＣＣＡＧＧＴＡＣＴＧＧＴＴＴ３′，下游引
物５′ＣＣＴＧＴＣＧＧＡＡＴＧＧＴＧＧＴＡＡＣ３′，引物均由北京
赛百盛基因技术有限公司合成。
ＲＴＰＣＲ反应：应用 Ｐｒｏｍｅｇａ公司 ＲＴＰＣＲ一步
法试剂盒进行，具体操作方法见说明书，每反应体系
中应用总ＲＮＡ０４μｇ，ＲＴＰＣＲ条件为：４５℃逆转
录４５ｍｉｎ，９４℃预变性１ｍｉｎ，９４℃３０ｓ变性、５８℃
３０ｓ退火，７２℃ ３０ｓ延伸、７２℃延伸５ｍｉｎ，３５循
环。取１０μＬＲＴＰＣＲ产物与２μＬ６×上样缓冲液
混合后上样，同时加入 ＤＮＡＭａｒｋｅｒ作为目的片断
长度的参照，在８０Ｖ恒压条件下１５％琼脂糖电泳
约２ｈ，在凝胶成像分析仪上保存电泳条带的图像，
并用Ｇｅｎｅｔｏｏｌｓ分析软件对电泳各条带进行半定量
分析，结果以ＭＡＲＣＫＳ／βａｃｔｉｎＡ比值计算ＭＡＲＣＫＳ
ｍＲＮＡ表达量相对变化。
２．６　统计学处理　用 ＳＰＳＳ１３０统计软件进行统
计学分析。实验数据进行正态分布检验和方差齐性
检验，以 珋ｘ±ｓ表示，组间比较采用单因素方差分析
（ＯｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ），Ｐ＜００５有显著性差异。
３　结果
３．１　急性脑缺血大鼠海马组织形态学改变　正常
组：神经细胞多层排列，且紧密、整齐，核膜清晰，核仁
明显。假手术组：神经细胞数目及排列与正常组无明
显差异。模型组：神经细胞排列稀疏，间质水肿，有软
·９３９２·
第３３卷第２４期
２００８年１２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２４
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００８
化灶。中药组：神经细胞略有减少，排列不整齐。西 药组：神经细胞排列不整齐，轻度肿胀（图１）。
１．正常组：海马ＣＡ１区和齿状核有大量神经细胞，规则排列，没有病理改变；２．模型组：海马神经细胞稀疏，神经细胞水肿，核固缩，
有软化灶；３．中药组：海马神经细胞数目略有减少，排列不整齐；４．西药组：海马神经细胞数目略有减少，轻度肿胀
图１　急性脑缺血大鼠海马形态学改变（ＨＥ，×１００）
３．２　急性脑缺血大鼠海马超微结构改变　电镜下见
正常组：细胞核双层核膜，核膜清晰，细胞器结构正
常。假手术组：神经细胞器结构和形态接近正常。模
型组：神经细胞坏死，周围液化，神经细胞脱髓鞘。中
药组：胞质水肿改变，细胞器稀少。西药组：神经细胞
肿胀，染色质凝集，胞浆水肿，细胞器消失（图２）。
１．正常组：细胞核膜清晰，细胞器结构正常（×４０００）；２．模型组：神经细胞坏死，周围液化（×２７００）；
３．中药组：胞质水肿改变，细胞器稀少（×４０００）；４．西药组：神经细胞肿胀，染色质凝集，胞浆水肿，细胞器消失（×８０００）
图２　急性脑缺血大鼠海马神经细胞超微结构改变
３．３　急性脑缺血大鼠患侧海马 ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ的
表达　与正常组比较，假手术组大鼠海马 ＭＡＲＣＫＳ
ｍＲＮＡ无明显差异；与假手术组比较，急性脑缺血各
组大鼠海马 ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ均过高表达（Ｐ＜
００１）；中药组和西药组海马 ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ明显
低于模型组，有显著性差异（Ｐ＜００５～００１）（见
表１，图３）。
表１　急性脑缺血大鼠患侧海马ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ（Ａ）的表达
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＭＡＲＣＫＳ
／βａｃｔｉｎ
正常　 － ０１６９±０００９
假手术 － ０２０７±００３２
模型　 － ０３７９±００５２１）
中药　 １３３２８ ０２８２±００２０２）
西药　 ７２５ ０３１４±００４３３）
　　注：与假手术组比较１）Ｐ＜００１；与模型组比较 ２）Ｐ＜００５，
３）Ｐ＜００１
４　讨论
急性脑缺血后发生一系列的级连反应，涉及到
　　
１．正常组；２．假手术组；３．模型组；４．中药组；５．西药组
图３　急性脑缺血大鼠患侧海马ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ的表达
能量衰竭、钙超载、炎性反应、神经递质的兴奋毒性
效应等等，其结果导致神经元死亡或凋亡，脑组织坏
死。当急性脑缺血发作时，脑内的一些神经递质、神
经肽、细胞因子会应激性的发生变化，这些细胞外信
号蛋白可作为配体与细胞膜上的受体相结合，使受
体分子双聚化，使与 Ｇ蛋白相藕连的受体激活，从
而激活了肌醇磷脂信号转导通路，生成第二信使甘
油二酯（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ，ＤＧ），进一步激活了 ＰＫＣ
ＭＡＲＣＫＳ信号转导系统，并产生了相应的靶效应，
对细胞的运动、分泌起着重要的调节作用。在这一
　　·０４９２·
第３３卷第２４期
２００８年１２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２４
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００８
过程中，出现众多细胞信号转导异常，所有参与信号
转导的物质基础，包括第一信使、受体、蛋白激酶、联
结蛋白、Ｇ蛋白和第二信使等，若任何一种或几种出
现显著升高，均可使信号转导通路异常。因此当发
生急性脑梗死时，激活了 ＰＫＣＭＡＲＣＫＳ系统，
ＭＡＲＣＫＳ表达上调，发生磷酸化反应，参与跨膜信
息传递及细胞机能调节的过程，ＰＫＣＭＡＲＣＫＳ信号
转导通路的活性与急性脑缺血的发生和程度有关。
具有解毒通络功用的清脑滴丸是经过长期临床
实践总结的方剂，由栀子、三七和冰片三味药物组成。
其中栀子味苦，性寒，能泻火解毒。《药类法象》载栀
子可以“泻三焦火，清胃脘血，治热厥心痛，解热郁，行
结气”。三七具有活血化瘀之功效，《本草新编》曰：
“三七根，味甘、辛，气微寒，入五脏之经。”《医学衷中
参西录》记载“三七……善化瘀血，又善止血妄行，为
吐衄要药，病愈后不至瘀血留于经络……化瘀血而不
伤新血，允为理血妙品”。冰片味苦，性微寒，香窜善
走，无处不到。能散郁火，通诸窍，且能醒脑开窍。
《医林纂要》中载“冰片主散郁火，能透骨热，治惊痫、
痰迷……性走而不守，亦能生肌止痛。然散而易竭，
是终归阴寒也”。由此，栀子配三七、冰片，可共奏活
血化瘀、解毒通络之功。在国家科技部“九五”攻关项
目研究中，笔者所在研究小组曾用与清脑滴丸组成相
同的药物治疗多发梗塞性痴呆，临床上取得了较好的
疗效。本实验中，清脑滴丸能够明显减轻急性脑缺血
大鼠海马组织损伤和神经细胞损伤，降低急性脑缺血
时ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ的过表达。其下调ＭＡＲＣＫＳｍＲ
ＮＡ的过高表达，可能是通过干预急性脑缺血损害时
ＰＫＣＭＡＲＣＫＳ信号转导系统，减缓神经细胞的死亡，
从而减轻急性脑缺血损害。
［参考文献］
［１］　 ＳａｓａｋｉＹ．Ｎｅｗａｓｐｅｃｔｓｏｆｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｅｒｒｅｌｅａｓｅａｎｄｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ：
ＲｈｏｋｉｎａｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｅｄａｌａｎｉｎｅｒｉｃｈＣｋｉｎａｓｅｓｕｂ
ｓｔｒａｔｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎ
ｎｅｕｒｏｎａｌｃｅｌｓ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＳｃｉ，２００３，９３（１）：３．
［２］　 ＷｕＷＣ，ＷａｌａａｓＳＩ，ＮａｉｒｎＡＣ，ｅｔａｌ．Ｃａｌｃｉｕｍ／ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ
ｒｅｇｕｌａｔｅｓｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆａＭｒ“８７ｋ”ｓｕｂｓｔｒａｔｅｐｒｏｔｅｉｎｉｎ
ｂｒａｉｎｓｙｎａｐｔｏｓｏｍｅｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１９８２，７９
（１７）：５２４９．
［３］　 ＳｔｕｍｐｏＤＪ，ＢｏｃｋＣＢ，ＴｕｔｌｅＪＳ，ｅｔａｌ．ＭＡＲＣＫＳｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｉｎ
ｍｉｃｅｌｅａｄｓｔｏａｂｎｏｒｍａｌｂｒａｉｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｅｒｉｎａｔａｌｄｅａｔｈ
［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１９９５，９２（４）：９４４．
［４］　 ＡｄｅｒｅｍＡ．ＴｈｅＭＡＲＣＫＳｂｒｏｔｈｅｒｓ：ａｆａｍｉｌｙｏｆｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ
ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ［Ｊ］．Ｃｅｌ，１９９２，７１（５）：７１３．
［５］　 ＢｌａｃｋｓｈｅａｒＰＪ．ＴｈｅＭＡＲＣＫＳｆａｍｉｌｙｏｆｃｅｌｕｌａｒｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ
ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，１９９３，２６８（３）：１５０１．
［６］　 ＳｕｎｄａｒａｍＭ，ＣｏｏｋＨＷ，ＢｙｅｒｓＤＭ．ＴｈｅＭＡＲＣＫＳｆａｍｉｌｙｏｆ
ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＤａｎｄ
ｏｔｈｅｒｃｅｌｕｌａｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍＣｅｌＢｉｏｌ，２００４，８２（１）：
１９１．
［７］　 ＳａｓａｋｉＹ．Ｎｅｗａｓｐｅｃｔｓｏｆｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｅｒｒｅｌｅａｓｅａｎｄｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ：
ＲｈｏｋｉｎａｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｅｄａｌａｎｉｎｅｒｉｃｈＣｋｉｎａｓｅｓｕｂ
ｓｔｒａｔｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎ
ｎｅｕｒｏｎａｌｃｅｌｓ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＳｃｉ，２００３，９３（１）：３５．
［８］　 白　文，张允岭，韩振蕴，等．急性多发脑梗塞大鼠海马皮层
ＭＡＲＣＫＳ蛋白的表达与活性的变化［Ｊ］．中国病理生理杂志，
２００５，２１（１）：１３４．
［９］　 张綦慧，张允岭，娄金丽，等．急性多发脑梗死大鼠海马
ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ表达的动态变化［Ｊ］．中国病理生理杂志，
２００６，２２（５）：９６４．
［１０］　徐叔云，卞如濂，陈　修．药理实验方法学［Ｍ］．３版．北京：人
民卫生出版社，２００３：２０２．
［１１］　ＪｏｓｕｈｕａＢ，ＢｅｄｅｒｓｏｎＭＤ，ＬａｗｒｅｎｃｅＨ，ｅｔａｌ．Ｒａｔｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅ
ｂｒａｌａｒｔｅｒｙｏｃｃｌｕｓｉｏｎ：ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｏｄｅｌａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ
ａｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｔｒｏｋｅ，１９８６，１７（３）：４７２．
ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＱｉｎｇｎａｏｄｒｏｐｐｉｌｕｌａｔｏＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ
ｅｘｐｒｅｓｓｃｈａｎｇｅｓｉｎａｃｕｔｅｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ
ＺＨＡＮＧＹｕｎｌｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧＱｉｈｕｉ１，ＢＡＩＷｅｎ２，ＨＡＮＺｈｅｎｙｕｎ１，ＺＨＥＮＧＨｏｎｇ１，ＺＨＡＮＧＪｉｎ１，ＨＵＡＮＧＱｉｆｕ３
（１．ＤｏｎｇｆａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００７８，Ｃｈｉｎａ；
２．ＰｅｏｐｌｅＨｏｓｐｉｔａｌ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００４４，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２９，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＱｉｎｇｎａｏｄｒｏｐｐｉｌｕｌａｔｏｔｈｅａｌｔｅｒａｔｉｏｎｏｆｍｙｒｉｓｔｏｙｌａｔｅｄａｌａｎｉｎｅｒｉｃｈＣｋｉ
ｎａｓｅｓｕｂｓｔｒａｔｅ（ＭＡＲＣＫＳ）ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎａｃｕｔｅｍｕｌｔｉｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｒａｔｍｏｄｅｌｓｏｆａｃｕｔｅｍｕｌｔｉｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ
·１４９２·
第３３卷第２４期
２００８年１２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２４
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００８
ｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｊｅｃｔｉｎｇｔｈｅｅｍｂｏｌｕｓｏｆｂｌｏｏｄｐｏｗｄｅｒｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｒｉｇｈｔｅｘｔｅｒｎａｌｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｙｉｎｔｏｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｙ，ｒａｔｓ
ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ（ｎ＝１２ｉｎｅａｃｈ）：ｎｏｒｍａｌ，ｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｍｏｄｅｌ，Ｃｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄＷｅｓｔｅｒｎ
ｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｑｉｎｇｎａｏｄｒｏｐｐｉｌｕｌａ（１３３．２８ｍｇ·ｋｇ－１），ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ（７．２５ｍｇ·ｋｇ－１）ｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｔｏＣｈｉ
ｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｂｙｇａｖａｇｅ，ｅｑｕａｌｖｏｌｕｍｅｏｆｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｗｅｒｅｇｉｖｅｎｔｏｔｈｒｅｅ
ｇｒｏｕｐｓ．Ｒａｔｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｒｕｇｓｓｔａｒｔｉｎｇａｔ３ｒｄｄａｙｂｅｆｏｒｅｔｈｅｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｏｎｅｔｉｍｅｐｅｒｄａｙ．Ｏｂｓｅｒｖｉｎｇｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃｃｈａｎｇｅｓｉｎｈｉｐ
ｐｏｃａｍｐｕｓｂｙｏｐｔｉｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．ＤｅｔｅｃｔｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡｉｎｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｂｙｓｅｍｉｑｕａｎ
ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＰＣＲｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｃｅｌｓａｒａｎｇｅｔｉｄｙ，ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｖｅｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｃｔｎｅｓｓｉｎｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｃｈｃｅｌｓ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｙｉｍｐａｉｒｅｄｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐ．Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｃｅｌｓ
ｄａｍａｇｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｈａｖｅｍｏｒｅｒｅｃｋｌｅｓｓｔｈａｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｉｎｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ．ＴｈｅＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡｗｅｒｅｅｘ
ｐｒｅｓｓｏｎｅｄｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｖｓｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓ，ｉｎＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｖｓｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｑｉｎｇ
ｎａｏｄｒｏｐｐｉｌｕｌａｃａｎａｌｅｃｉａｔｅｈｉｓｔｏｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｌｅｓｉｏｎｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｗｈｅｎｏｃｃｕｒｉｎｇａｃｕｔｅｍｕｌｔｉｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，ｔｏｔｕｒｎｓｌｏｗｅｒＭＡＲＣＫＳ
ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｍａｙｐｌａｙａｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｒｏｌｅｔｈｒｏｕｇｈａｃｃｏｍｍｏｄａｔｉｎｇＰＫＣＭＡＲＣＫＳｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｑｉｎｇｎａｏｄｒｏｐｐｉｌｕｌａ；ａｃｕｔｅｍｕｌｔｉｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ；ＭＡＲＣＫＳｍＲＮＡ；ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｆｕｃｔｉｏｎ
［责任编辑　古云侠］
［收稿日期］　２００８０１２０
［基金项目］　国家自然科学基金项目（３０７７０７８５）；国家重点基
础研究发展计划（９７３计划）（２００７ＣＢ５１２００５）；教育部科技创新工程
重大项目培育资金项目（７０５０４５）
［通讯作者］　马欣，Ｔｅｌ：（０２９）８２６５５１６５，Ｅｍａｉｌ：ｍａｘｉｎ０１３１＠
ｔｏｍ．ｃｏｍ
丹参素异丙酯对大鼠肺动脉平滑肌的作用
李　静，马　欣，臧伟进
（西安交通大学 医学院 药理学系，陕西 西安 ７１００６１）
［摘要］　目的：研究丹参素异丙酯对离体血管平滑肌的作用。方法：制备大鼠肺动脉条，采用离体血管灌流方
法，观察丹参素异丙酯对去甲肾上腺素（ＮＥ）预收缩动脉的舒张作用以及对多种血管收缩药量效曲线的影响。结
果：丹参素异丙酯可浓度依赖性舒张ＮＥ预收缩的完整内皮血管，去内皮后该作用明显降低；对５羟色胺（５ＨＴ）、
内皮素（ＥＴ１），Ｕ４６６１９和ＫＣｌ量效曲线均表现浓度依赖性抑制。结论：丹参素异丙酯可内皮依赖性地舒张大鼠肺
动脉，机制可能与调节钙通道活动有关。
［关键词］　丹参素异丙酯；肺动脉；钙通道
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）２４２９４２０４
　　丹参 Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ为唇形科鼠尾草属植物
的干燥根部，包括水溶性和脂溶性两大类有效成
分［１］，具有增强心功能、扩血管、抗血小板聚集、改
善微循环以及增加机体对缺氧的耐受力等作用［２４］。
目前有关丹参制剂的研究较为广泛，但对丹参的体
内活性代谢物了解较少。丹参素异丙酯（ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ
３（３，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）２ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐａｎｏａｔｅ）是西
北大学中草药现代化研究及工程中心研究复方丹参
滴丸在人体内的相关代谢产物过程中发现的，结构
为β（３，４二羟基苯基）α羟基丙酸异丙酯，是丹参
的水溶性成分丹参素在体内的主要代谢产物［５］。
丹参素具有显著的舒张血管作用［６］，而代谢产物丹
参素异丙酯是否同样具有舒张血管的作用，尚未见
相关报道。本实验旨在观察丹参素异丙酯对离体大
鼠肺动脉的作用，并探讨其可能的作用机制。
１　材料与方法
１．１　动物　健康ＳＤ大鼠，体重２６０～３２０ｇ，雌雄兼
用，由西安交通大学实验动物中心提供，合格证号陕
医动字第０８００５。
１．２　药品及试剂　丹参素异丙酯由西北大学中草
药现代化研究及工程中心提供，纯度９８５％。去甲
·２４９２·
第３３卷第２４期
２００８年１２月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　２４
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００８