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ｍｅｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｅｌＢｉｏｌ，１９９２，１１９：４９３１．
Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｒｏｍｅｘｔｒａｃｔｏｆ
Ａｃｔｉｎｉｄｉａｒｕｆａｒｏｏｔ
ＬＩＮＧｕｏｂｉａｏ１，ＺＨＯＮＧＺｈｅｎｇｕｏ１，ＺＨＡＮＧＷｅｎｙａｎ１，ＺＨＡＮＧＦｅｎｇｆｅｎ１，ＣＨＥＮＸｉｈｕｉ２，ＨＵＡＮＧＣｈｕｓｈｅｎｇ３
（１．ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＣｏｌｅｇｅｏｆＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００１，Ｃｈｉｎａ；３．ＧｕａｎｇｘｉＮｏｒｍａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｅｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｎＢｕｔａｎｏｌｌｙｓａｔｅｏｆａｌｃｏｈｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＡｃｔｉｎｉｄｉａｒｕｆａｒｏｏｔ（ｍｏｎｏｍｅｒ
ｏｆＲ６，Ｒ８）．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｕｎｅｌ，Ｗｒｉｇｈｔ＇ｓｓｔａｉｎｗｉｔｈＧｉｅｍｓａ＇ｓｓｔａｉｎｄｙｅｉｎｇ，ａｎｄＨｏｅｃｈｓｔ３３２５８ＰＩｄｏｕｂｌｅｄｙｅｉｎｇａｓｓａｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔ
ｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＳＧＣ７９０１ｔｕｍｏｒｃｅｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＲ６，Ｒ８．ＴｈｅＳＧＣ７９０１ｔｕｍｏｒｃｅｌｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｔｗｏ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ０．０５ｇ·Ｌ－１Ｒ６，Ｒ８，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｆｏｒ７２ｈ）．ＦＣＭａｓｓａｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ａｇａｒｏｓｅｅｌｅｃ
ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｓｓａｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＤＮＡｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｓａｎｄｒｅｖｅａｌａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｐｅｒ
ｃｅｎｔａｇｅｏｆｔｈｅｔｕｍｏｒｃｅｌｉｎ２４ｈ，４８ｈ，７２ｈｗａｓ（１７．０８±２．７８）％，（２９．６８±２．９６）％，（５２．４６±３．８１）％；（１４．７５±２．１４）％，
（２７３５±３．７９）％，（４５．６４±５．２４）％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐ，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（１．９４±
１５５）％，（２．７８±１．８４）％，（１１．８±２．７９）％（Ｐ＜０．０１）ｂｙｔｕｎｎｅｌａｓｓａｙ．Ｗｒｉｇｈｔ＇ｓｓｔａｉｎｗｉｔｈＧｉｅｍｓａ＇ｓｓｔａｉｎｄｙｅｉｎｇａｓｓａｙ，Ｈｏｅｃｈｓｔ
３３２５８ＰＩａｎｄＦＣＭｄｏｕｂｌｅｄｙｅｉｎｇａｓｓａｙｓｈｏｗｅｄｓａｍｅａｃｔｉｏｎ．Ｒ６ａｎｄＲ８ｈａｄｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｉｎｄｕｃｉｎｇｔｈｅＤＮＡｈｉｓｔｏｇｒａｍｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｓ
（Ｐ＜００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｍａｙｂｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｄｕｃｉｎｇｔｈｅｉｎｊｕｒｙｏｆＤＮＡａｎｄｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｒｏｏｔｓｏｆＡｃｔｉｎｉｄｉａｒｕｆａ；ｔｕｍｏｒｃｅｌｓｔｒａｉｎ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒｍｅｃｈａｎｉｓｍ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００７０８１０
［基金项目］ 重庆市教委基础研究项目（０５０２０７）
［通讯作者］ 周才琼，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｏｕｃａｉｑｉｏｎｇ＠ｓｗｕｅｄｕｃｎ
印度人参根提取物对免疫低下小鼠免疫功能的影响
周才琼，张 雨
（西南大学 食品科学学院，重庆 ４００７１６）
［摘要］ 目的：印度人参根提取物（ＩＲＲＥ）对免疫低下小鼠的免疫调节作用。方法：给免疫低下小鼠灌胃印度
人参根提取物５，２５，０８５ｇ·ｋｇ－１体重，观察其对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果：印度人参根提取物可减缓
由环磷酰胺引起的生长缓慢和脏器指数下降，对小鼠迟发型变态反应和抗体生成细胞有增强作用，在刀豆球蛋白
Ａ（ＣｏｎＡ）刺激的淋巴细胞转化实验中，印度人参根提取物各剂量组显著高于环磷酰胺组（Ｐ＜００５）。各剂量组骨
髓ＤＮＡ含量、血清一氧化氮（ＮＯ）含量显著高于空白组和环磷酰胺组，但磷酸酶活性变化不大。结论：印度人参根
提取物对由环磷酰胺导致的巨噬细胞吞噬功能下降和脾脏损伤有一定恢复能力，能有效保护环磷酰胺所导致的骨
髓抑制作用。
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第３３卷第１６期
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００８
［关键词］ 印度人参；免疫低下小鼠；ＤＮＡ含量；ＮＯ含量；磷酸酶活性；免疫作用
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１６２０１４０５
印度人参 Ｗｉｔｈａｎｉａｓｏｍｎｉｆｅｒａ是茄科睡茄属植
物，用于印度草医学已有３０００多年的历史，在印度
长期以来都作为堕胎药、抗生素、壮阳药、收敛剂、通
便剂、利尿剂、止痛剂和滋补剂使用。近年来，常被
用于治疗支气管炎、哮喘、溃疡、失眠、老年痴呆、焦
虑、帕金森症等［１］。有研究报道，印度人参根提取
物具有增强免疫功能的作用［２３］，能显著降低用环磷
酰胺引起的Ｓｗｉｓｓ白化病小鼠白细胞减少症［４］。本
研究探讨了印度人参根提取物对免疫低下小鼠的免
疫调节作用。
１ 材料
１．１ 动物 昆明种小鼠，１８～２２ｇ，普通级，合格证
号０００２４１８。豚鼠，体重４５０～５００ｇ。购自第三军
医大学实验动物中心，合格证号 ０００２４１８。饲养室
温度（２０±２）℃，湿度６５％～８０％。
１．２ 药物 采用引种至重庆北碚西南大学农业综合
开发实验室实验基地栽培的印度人参。３月份播种，
常规管理，当年１０月底到１１月收获，５０℃下烘干。
取过４０目筛印度人参根按１∶１０加入６０％乙醇５０℃
回流提取４８ｈ，共２次，合并２次提取液，减压浓缩得
醇提物，于４℃冰箱保存备用。
１．３ 试剂 ２，４二硝基氟苯（ＤＮＦＢ）；环磷酰胺
（ＣＰ）；左旋咪唑（ＬＭＳ）；巴比妥酸；巴比妥钠；伴刀
豆球蛋白 Ａ（ＣｏｎＡ）；噻唑蓝（ＭＴＴ）；绵羊红细胞
（ＳＲＢＣ）；ＲＰＩＭ１６４０干粉培养基（ＧＩＢＣＯ公司）；酸
性磷酸酶试剂盒；碱性磷酸酶试剂盒；一氧化氮
（ＮＯ）试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
主要配制试剂［５７］：Ｈａｎｋ＇ｓ液；ＰＢＳ缓冲液；ＭＴＴ
（５ｇ·Ｌ－１）液；Ｇｉｅｍｓａ染液；ＳＡ缓冲液；无血清 ＲＰ
ＭＩ１６４０培养液；ＣｏｎＡ液；酸性异丙醇；ＤＮＦＢ溶液
（现用现配）。
１．４ 仪器 ＳＷ－ＣＪ－Ｆ无菌工作台（苏州安乐空
气技术有限公司）；ＳＺ－９３自动双重纯水蒸馏器（上
海沪西分析仪器厂）；ＸＤＳ－１Ｂ倒置显微镜（重庆光
电仪器有限公司）；ＭＢ－Ⅳ酶标仪（上海麦莎生物
科技有限公司）；ＨＨＣＰ－ＴＷ二氧化碳培养箱（上
海贺德实验设备有限公司）。
２ 方法
２．１ 实验用血及制备 鸡红细胞悬液制备：取鸡血
置有玻璃珠的锥形瓶中，一个方向充分摇动以脱纤
维。用生理盐水洗涤２～３次，２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心
１０ｍｉｎ，去上清，用生理盐水配成２０％的鸡红细胞悬
液，４℃保存。绵羊血：第三军医大学实验动物中心
所喂养绵羊静脉取血，将羊血放入有玻璃珠的灭菌
锥形瓶中，朝一个方向摇动以脱纤维，置４℃冰箱保
存备用，可保存２周。豚鼠血制备补体：豚鼠心脏采
血，及时分离血清，使用前将１ｍＬ压积 ＳＲＢＣ加入
到５ｍＬ豚鼠血清中，放４℃冰箱３０ｍｉｎ，经常振荡，
离心取上清，分装小瓶，－７０℃保存。用时以（ＳＡ）
液按１∶１０稀释［５７］。
２．２ 免疫低下小鼠造模及给药 小鼠６０只，雌雄
各半，称重编号，采用随机数字法分成６组，设正常
组，ＣＰ组，ＬＭＳ组和印度人参根提取物（ＩＲＲＥ）高、
中、低剂量组［８］。正常组每日生理盐水灌胃，连续
１５ｄ；ＣＰ组从第１天开始，每天１次腹腔注射ＣＰ（２０
ｍｇ·ｋｇ－１），共注射５次；ＬＭＳ组除隔天１次腹腔注
射ＣＰ（剂量同 ＣＰ组，共 ５次）外，每日用 ＬＭＳ（２０
ｍｇ·ｋｇ－１）灌胃给药，连续１５ｄ；印度人参根提取物
剂量组前５ｄ每天注射 ＣＰ，按照给药剂量（５，２５，
０８５ｇ·ｋｇ－１）分别灌胃给药，连续１５ｄ［９］。
２．３ 脏器指数观察 给小鼠称重并记录，按剂量灌
胃，最后１ｄ断头处死小鼠，解剖取出肝脏、胸腺、脾
脏和肾脏，分别用生理盐水漂洗后滤纸吸干，称重并
计算脏器指数。
肝脏指数（％）＝肝脏质量（ｇ）／体重（ｇ）×１００％
脏器指数＝脏器质量（ｍｇ）／体重（ｇ）
２．４ ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验（ＭＴＴ
法） 脾细胞悬液制备：无菌取脾，研磨，过２００目
筛网，ＰＢＳ液冲洗，收集分离的脾细胞悬液，１５００ｒ
·ｍｉｎ－１离心５～１０ｍｉｎ，弃上清；加红细胞裂解液
１０ｍＬ，混匀脾细胞，静置４～５ｍｉｎ，待红细胞完全破
碎，１５００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，弃上清去除红细胞，
ＰＢＳ液洗２～３遍后将细胞悬浮于１ｍＬ完全培养液
中，台盼蓝染色计数活细胞数在９５％以上，调整细
胞密度２×１０６个／ｍＬ。
淋巴细胞增殖反应：将细胞悬液加入９６孔细胞
培养板，每孔１００μＬ。每个实验组设６个复孔，同
时设对照孔６个，分别加 ＣｏｎＡ液５０μＬ（相当于５
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μｇ·ｍＬ－１）或ＲＰＭＩ１６４０培养液至终体积２００μＬ。
置５％ＣＯ２，３７℃培养箱中培养７２ｈ。培养结束前４
ｈ，每孔加入２０μＬＭＴＴ，继续培养４ｈ。培养结束
后，１０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，弃上清，每孔加１００
μＬ酸性异丙醇，吹打均匀，使紫色结晶完全溶解，酶
标仪５７０ｎｍ处测吸光度（Ａ）。淋巴细胞增殖活力
用加ＣｏｎＡ孔的Ａ减去不加ＣｏｎＡ孔的Ａ表示。
２．５ ＤＮＦＢ诱导小鼠迟发型变态反应（ＤＴＨ） 灌
胃至第１４天时，每鼠腹部用硫化钡脱毛约３ｃｍ２，用
５０μＬＤＮＦＢ溶液均匀涂抹于右耳两面进行攻击，攻
击后２４ｈ，颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳片，用打
孔器取下 ８ｍｍ耳片称重。用左右耳质量差表示
ＤＴＨ的程度。
２．６ 抗体生成细胞检测（Ｊｅｒｎｅ改良玻片法） 取脱
纤维绵羊血，生理盐水洗涤３次，每次离心（２０００ｒ
·ｍｉｎ－１）１０ｍｉｎ，计数细胞，在第１０天时每只鼠经
腹腔注射用生理盐水配成２％的细胞悬液０２ｍＬ。
将ＳＲＢＣ免疫５ｄ后的小鼠颈椎脱臼处死，取
出脾脏，放入盛有Ｈａｎｋｓ液的小平皿内，轻轻撕碎脾
脏，制成细胞悬液，经 ２００目筛网过滤，１０００ｒ·
ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，用 Ｈａｎｋｓ液洗２遍，最后将细胞
悬浮在５ｍＬＲＰＭＩ１６４０培养液中，计数细胞，调整
细胞密度５×１０６个／ｍＬ。
将表层培养基（１ｇ琼脂加双蒸水至１００ｍＬ）加
热溶解后，４５℃水浴保温，与等量 ｐＨ７２～７４，２
倍浓度的Ｈａｎｋｓ液混合，分装小试管，每管０５ｍＬ，
再向管内加５０μＬ１０％ ＳＲＢＣ（ＳＡ液配制），２０μＬ
脾细胞悬液（５×１０６个／ｍＬ），迅速混匀，倾倒于已刷
琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣
放在片架上，放入ＣＯ２培养箱中温育１～１５ｈ，然后
用ＳＡ缓冲液稀释的补体按体积（１∶１０）加入到凹槽
内，继续温育１～１５ｈ，计数溶血空斑数。
２．７ 巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验 小鼠腹腔注射
２０％鸡红细胞悬液１ｍＬ。间隔３０ｍｉｎ，颈椎脱臼处
死动物，仰位固定于鼠板，正中剪开腹壁皮肤，经腹
腔注入生理盐水２ｍＬ，转动鼠板１ｍｉｎ。然后吸出
腹腔洗液１ｍＬ，平均分滴于２片载玻片上，放入垫
有湿纱布的搪瓷盒内，移入３７℃孵箱温育３０ｍｉｎ。
孵毕，生理盐水漂洗除去未贴片细胞。晾干，以丙
酮甲醇（１∶１）固定，４％Ｇｉｅｍｓａ磷酸缓冲液染色 ３
ｍｉｎ，再用蒸馏水漂洗晾干，上镜观察。计算巨噬细
胞吞噬率和吞噬指数。
吞噬率（％）＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数／计数的巨
噬细胞数×１００％
吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数／计数的巨噬细胞
２．８ 血清酸、碱性磷酸酶活性及 ＮＯ含量测定 摘
除眼球取血，室温下静置１０ｍｉｎ使血液凝固，置４℃
冰箱冷藏过夜，使血清析出，按试剂盒提供测定方法，
分别测定血清中酸、碱性磷酸酶活性和ＮＯ含量。
２．９ 骨髓 ＤＮＡ含量测定 取小鼠右侧股骨，除净
软组织，用０００５ｍｏｌ·Ｌ－１ＣａＣｌ２１０ｍＬ将全部骨髓
冲入离心管，置４℃冰箱３０ｍｉｎ，２５００ｒ·ｍｉｎ－１离
心１５ｍｉｎ，弃上清，将沉淀物加入 ０２ｍｏｌ·Ｌ－１
ＨＣｌＯ４５ｍＬ，９０℃加热 １５ｍｉｎ，冷却过滤，滤液在
２６０ｎｍ处测Ａ（１Ａ代表５０μｍ·ｍＬ－１双链ＤＮＡ）。
２．１０ 数据处理 实验结果采用软件包 ＳＰＳＳ１２０
进行统计处理。同组样本前后比较采用配对 ｔ检
验。试验数据均以 珋ｘ±ｓ表示。
３ 结果
３．１ 根部乙醇提取物净重及得率 准确称取
１０００ｇ实验材料，按１２实验方法所提取的乙醇提
取物净重２３８ｇ，得率为２３８％。在印率人参根活
性成分定性研究中，显示根中含有机酸、酚类、水解
鞣质及黄酮类，内酯，甾体及其苷类，还有生物碱，这
几类成分的检查均为正反应［１０］。根的乙醇提取液
可能含极性较高的苷元、苷类，生物碱盐类，亲水性
生物碱，有机酸盐类及鞣质等成分［１１］。
３．２ ＩＲＲＥ对免疫抑制小鼠体重及脏器指数的影响
小鼠注射ＣＰ后，胸腺、脾脏和肝脏指数均有不同
程度下降，表明 ＣＰ可使小鼠上述器官萎缩。ＬＭＳ
组脏器指数均高于空白组，但无显著性差异。印度
人参根提取物各剂量组脏器指数均高于 ＣＰ组，其
中高剂量组脾脏指数和胸腺指数显著高于空白组
（Ｐ＜００５），说明ＩＲＲＥ对由 ＣＰ引起的免疫器官及
主要脏器的变化有一定保护作用。见表１。
３．２ ＩＲＲＥ对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响
ＩＲＲＥ对ＤＮＦＢ诱导的小鼠迟发性变态反应结果，高
剂量组比 ＣＰ组、ＬＭＳ组和空白组分别高 ５５７％，
４６％，９１％，表明 ＩＲＲＥ对由 ＣＰ造成的免疫低下
模型的迟发型变态反应有增强作用。见表２。
在ＣｏｎＡ诱导淋巴细胞转化实验中，ＩＲＲＥ各剂
量组显著高于ＣＰ组（Ｐ＜００５），高剂量组显著高于
空白组（Ｐ＜００５）。提示 ＩＲＲＥ对由 ＣＰ造成的脾
脏功能下降有一定恢复能力。
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表１ 印度人参根提取物对免疫抑制小鼠体重及脏器指数的影响（珋ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
ｎ
增重
／ｇ
胸腺指数
／ｍｇ·ｇ－１
脾脏指数
／ｍｇ·ｇ－１
肝脏指数
／ｇ·ｇ－１
肾脏指数
／ｍｇ·ｇ－１
空白 － １０ １３０±０６５ ２１８±０１５ ４１５±００６ ６４５±０２１ ７４９±０２５
ＬＭＳ － １０ １７０±０７１ ２７３±００１ ４６１±００２ ６５７±０１６ ７８５±００４
ＣＰ － ９ １００±０４５ １８８±００２ ３３７±００３ ５９８±０３６ ７６９±００５
ＩＲＲＥ ５ １０ ２５０±０８５ ３０７±００３１） ５８６±００６１，２） ６２４±０２１ ７９７±００２
２５ １０ ２２０±０３９ ２４３±００３ ３９３±００６ ６９４±０２１ ８３５±００２
０８５ ８ ３１０±０６１ ２８６±００３ ３９９±００５ ６２５±０５６ ７９０±００７
注：与空白组比１）Ｐ＜００５；与ＣＰ组比２）Ｐ＜００５
表２ ＩＲＲＥ对免疫抑制小鼠ＣｏｎＡ诱导淋巴细胞和
迟发型变态反应耳肿胀度的影响（珋ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
ｎ Ａ
肿胀度
／ｍｇ
空白 － １０ ０１８９±００２１ １９２±０２１
ＬＭＳ － １０ ０２６４±００１１２，４） １８４±０１８
ＣＰ － ９ ０１３７±００１８ １７６±０２７
ＩＲＲＥ ５ １０ ０２５５±００２４１，４） ２７４±０２２
２５ １０ ０２３２±００１６３） １５８±０２１
０８５ ８ ０２０１±００１３３） １２９±０３０
注：与空白组比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１；与 ＣＰ组比３）Ｐ＜００５，
４）Ｐ＜００１（表３～５同）
３．３ ＩＲＲＥ对免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响
ＣＰ组溶血空斑数最低，ＬＭＳ组最高；ＩＲＲＥ高、中剂
量组显著高于 ＣＰ组（Ｐ＜００５），也高于空白组，表
明ＩＲＲＥ可对抗 ＣＰ所致抗体生成细胞减少，对由
ＣＰ造成的脾脏损伤有一定恢复能力。见表３。
表３ 印度人参根提取物对免疫抑制小鼠抗体
生成细胞的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ｎ 溶血空斑／１０－６脾细胞
空白 － １０ ２６５０±１１３２
ＬＭＳ － １０ ２８８２±１２５４２）
ＣＰ － ９ １８８２±１５３１
ＩＲＲＥ ５ １０ ２８３０±１７２３２）
２５ １０ ２６５１±１４５７１）
０８５ ８ ２５９１±１３７６１）
３．４ ＩＲＲＥ对巨噬细胞吞噬功能的影响 ＣＰ组巨噬
细胞吞噬百分率及吞噬指数最低，ＬＭＳ组最高，ＩＲＲＥ
各剂量组较空白组均有一定提高，高、中剂量组显著
高于ＣＰ组（Ｐ＜００１），提示ＩＲＲＥ对由ＣＰ造成的巨
噬细胞吞噬功能下降有恢复作用。见表４。
３．５ ＩＲＲＥ对小鼠血清酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活
性的影响 ＣＰ组酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性最
高，分别高于空白组９８４％和２８７％。ＩＲＲＥ各剂
量组和ＬＭＳ组的酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性与
空白组相比，差异均无显著性意义。
３．６ ＩＲＲＥ对小鼠血清 ＮＯ和骨髓 ＤＮＡ含量的影
响 ＣＰ组骨髓ＤＮＡ含量最低，提示ＣＰ呈明显的骨
表４ 印度人参根提取物对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞
吞噬功能的影响（珋ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
ｎ
吞噬率
／％
吞噬指数
空白 － １０ ２８６０±３４５ ０３１±００１３
ＬＭＳ － １０ ３７６４±２１５４） ０３９±００１２２，４）
ＣＰ － ９ ２０３５±１２１ ０２１±００１４
ＩＲＲＥ ５ １０ ３３１６±１５７１，４） ０３５±００２１２，４）
２５ １０ ３０８４±２０１４） ０３３±００１６４）
０８５ ８ ２９１１±１５３３） ０３１±００２１
髓抑制作用；ＩＲＲＥ各剂量组 ＤＮＡ含量均显著高于
空白组和ＣＰ组（Ｐ＜００１），高剂量组高于 ＭＬＳ组，
表明ＩＲＲＥ对ＣＰ所致骨髓损伤具有一定的保护作
用。而ＩＲＲＥ各剂量组血清 ＮＯ含量显著高于空白
组和ＣＰ组（Ｐ＜００１），也高于ＭＬＳ组。见表５。
表５ 印度人参根乙醇提取物对免疫抑制小鼠骨髓
ＤＮＡ含量（Ａ）及血清中ＮＯ含量的影响（珋ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ１
ｎ ＤＮＡ
ＮＯ
／μｍｏｌ·Ｌ－１
空白 － １０ １２４±００５５ ８８９±１３３
ＬＭＳ － １０ １５４±００７８２，４） １４４４±０４５２，３）
ＣＰ － ９ １０４±００８０ １０５５±１３３
ＩＲＲＥ ５ １０ １５７±００４８２，４，５） ２０２８±１１１２，４，６）
２５ １０ １４６±００７３２，４） １６３８±２５６２，４）
０８５ ８ １３３±００８４１，４） １５２７±１６７２，３）
注：与ＬＭＳ组比较５）Ｐ＜００５，６）Ｐ＜００１
４ 讨论
印度人参含睡茄内酯、生物碱、睡茄醇、有机酸
及丰富的铁等，根部生物碱主要是睡茄碱（ｗｉｔｈａ
ｎｉｎｅ），生物碱含量在０１３％～０３１％［１２］，睡茄内酯
含量在００１９％ ～０４８４％［１３］。有报道睡茄内酯类
化合物具有免疫增强作用［２，４］。
磷酸酶是生物体内重要的解毒酶系，并在生物
体的骨化及在磷化物和其他一些营养物质的消化、
吸收和转运中起重要作用［１４］。其中，酸性磷酸酶是
巨噬细胞标志酶，其活性的高低可反映巨噬细胞被
激活的程度［１５］。本实验中ＣＰ组酸性磷酸酶和碱性
磷酸酶活性均高于其他各组，可能是 ＣＰ选择性杀
灭Ｔ细胞，而钙调神经磷酸酶对 Ｔ细胞的活化具有
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第３３卷第１６期
２００８年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００８
调控作用，当 Ｔ细胞水平降低时，机体会提高钙调
神经磷酸酶的表达，以增强Ｔ细胞的活化［１６１７］。
活化的巨噬细胞可分泌多种生物活性物质，如
ＮＯ，ＩＬ１，ＴＮＦα及活性氧等，ＮＯ是巨噬细胞发挥细
胞毒作用、免疫调节作用及细胞内杀菌作用等方面
的重要介质和始动因子，参与一系列免疫调节作
用［１５］，是机体抗感染防御体系中的一个重要因子，
而ＮＯ的增加可能是印度人参对免疫刺激的原因之
一。骨髓属一级免疫器官，机体内所有血细胞（包
括巨噬细胞、淋巴细胞、肥大细胞等）都能在骨髓中
产生，因此骨髓ＤＮＡ含量的恢复能在某种程度上反
映免疫功能的强弱［１８］。本研究发现 ＩＲＲＥ可显著
提高免疫低下小鼠骨髓ＤＮＡ含量，提示印度人参根
提取物能有效保护生物体免疫体系，明显提高小鼠
的非特异性免疫功能。
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ｏｆｄｅｌａｙｅｄｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆａｎｔｉｂｏｄｙｉｎｓｅｒｕｍ．ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＣｏｎＡｉｎｄｕｃｅｄｍｉｔｏｇｅｎｉｃｒｅｓｐｏｎｓｅｆｏｒｓｐｌｅｅｎｌｙｍ
ｐｈｏｃｙｔｅｗｅｒｅａｌｓｏｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＣＰｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．ＩＲＲＥｃｏｕｌｄｅｎｈａｎｃｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍａｒｏｗＤＮＡａｎｄＮＯｏｆｓｅ
ｒｕｍｗｉｔｈｎｏｃｈａｎｇｅｏｆａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅａｎｄａｌｋａｌｉｎｉｔｙｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＩＲＲＥｃｏｕｌｄｅｎｈａｎｃｅｔｈｅｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓｏｆｃｅｌｉａｃｍａｃ
ｒｏｐｈａｇｅ，ｐｒｏｔｅｃｔｔｈｅｓｐｌｅｅｎｆｒｏｍｄａｍａｇｅａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｍａｒｏｗｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｉｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｍｉｃｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｉｎｄｉａｎｇｉｎｓｅｎｇ；ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｍｉｃｅ；ＤＮＡｃｏｎｔｅｎｔ；ＮＯｃｏｎｔｅｎｔ；ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ；ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ
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［责任编辑 古云侠］
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Ａｕｇｕｓｔ，２００８