全 文 ：四逆汤预防性给药抗心肌细胞凋亡的作用机制探讨
刘 颖t 3 o吴伟康u o陈 晨v o段新芬u
kt1 广东药学院 病理生理教研室 o广东 广州 xtsuuw ~u1 中山大学 中西医研究所 o广东 广州 xtss{s ~
v1 解放军 wut医院 检验科 o广东 广州 xtsvt{l
≈摘要  目的 }探讨四逆汤预防性给药 uw «后能否抑制心肌缺血再灌注kŒr• l后心肌细胞凋亡的发生及其可
能涉及的线粒体机制 ∀方法 }≥⁄大鼠分为正常对照组 !假手术组 !缺血再灌注组 !四逆汤预处理组 ∀缺血再灌注组
采用经典大鼠冠脉结扎 o缺血 t «o再灌 t «∀四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃kx ª#®ªp t#§ptl连续 v §o末次灌药 uw
«后心肌缺血 t «o再灌 t «∀流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率 o进行细胞色素 ≤及抗凋亡蛋白 ¥¦¯2¬¯ 的 • ¶¨·¨µ± ¥¯²·2
·¬±ª分析并检测 ¦¤¶³¤¶¨2v的活性 ∀结果 }四逆汤预处理 uw «后可以减少 Œr• 后心肌细胞凋亡率 o减少细胞色素 ≤
自线粒体的释放 o上调 ¥¦¯2¬¯ 蛋白的表达 o抑制¦¤¶³¤¶¨2v的活化 ∀结论 }四逆汤预防性给药 uw «后可以减少 Œr• 造
成的细胞凋亡 o其机制可能与抑制细胞凋亡的线粒体信号转导通路有关 ∀
≈关键词  四逆汤 ~延迟预适应 ~细胞凋亡 ~¥¦¯2¬¯ ~细胞色素 ≤ ~¦¤¶³¤¶¨2v
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuy|2sw
≈收稿日期  ussx2s|2ux
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|zzs|vyl
≈通讯作者  3 刘颖 o ר¯ }ksuslv|vxut{z o∞2°¤¬¯ }¯¼¯ ¼ª½ ƒ «²·2
°¤¬¯1¦²°
近年的研究显示 o细胞凋亡是心肌缺血再灌注
kŒr• l后心肌细胞死亡的最主要形式 ∀然而 o关于
Œr• 导致心肌细胞凋亡的研究大部分集中在凋亡
现象的发现及某些尝试性的干预措施 o凋亡的分子
机制尚不十分清楚 ∀随着研究的深入 o线粒体在
Œr• 导致心肌细胞凋亡过程中的调控作用逐渐被
揭示 o这被认为是凋亡信号转导研究的重大进展之
一 ∀目前 o心肌延迟预适应k⁄°≤l对 Œr• 所造成的
细胞凋亡的影响引起了研究者的关注 ∀资料显示 o
心肌细胞凋亡与 ⁄°≤ 保护作用中心肌梗死面积的
减少有关≈t  ∀作者在前阶段的实验中已经证实 o四
逆汤预处理 uw «后可以模拟 ⁄°≤ 样心肌保护效
应≈u ov  ∀本实验在此基础上观察四逆汤预防性给药
uw «后能否抑制 Œr• 后心肌细胞凋亡的发生 o并
以线粒体为切入点 o探讨其可能的抗凋亡机制 ∀
1 材料
111 动物 ≥°ƒ级雄性 ≥⁄大鼠 vu只 o体重 uxs ∗
vss ªo由中山大学动物实验中心提供kussv „szs 粤
检证字l ∀
112 主要试剂 四逆汤煎剂由附子 !干姜 !甘草按
xΒvΒu比例煎制成 t ª#°pt生药 ots h水合氯醛 k广
州化学试剂公司l o细胞色素 ≤ 一抗k‘¨º ¤µ®¨µl o
Š„⁄°‹和 ¥¦¯2¬¯ 一抗k≤¨¯¯ ≥¬ª±¤¯l o• ¶¨·¨µ± ¥¯²·¬±ª二
抗k博士德生物工程有限公司l o¦¤¶³¤¶¨2v试剂盒k美
国 …¬²√¬¶¬²±公司l ∀
2 方法
211 动物模型的复制 用 ts h水合氯醛ks1vx ª#
®ªpt o¬³l麻醉大鼠 ∀气管插管连接动物呼吸机 o频
率每分钟 zs ∗ {s次 o潮气量 w ∗ y °o呼Β吸为 uΒt ∀
持续记录心电图变化 ∀在胸骨左缘 s1x ¦°处剪断
第 v肋骨 o分离组织 o轻压暴露心脏 o用穿有 x2s缝
合线的 vr{弯针从左心耳下缘 t °°处进针 o钩绕左
冠状动脉前降支主干 o于肺动脉圆锥旁出针 ∀两线
间放置一根聚乙烯小管 o拉紧丝线形成闭环并用止
血钳固定即产生缺血 o放松丝线即发生再灌注 ∀
212 分组 vu只大鼠随机分 w组 ∀除给药组外 o
其余各组均灌服生理盐水 x °#®ªpt ∀各组处理方
案如下 }正常对照组不做任何处理 ~假手术组只穿
线 o不结扎 ~缺血再灌注组kŒr• l缺血 t «o再灌 t «~
四逆汤预处理组大鼠灌胃连续 v §ox ª#®ªpt#§pt o末
次灌药 uw «后使心肌缺血 t «o再灌注 t «∀
213 流式细胞仪检测细胞凋亡 取新鲜心尖组织
约 vs °ªo在小玻璃皿内加入约 ts °冷 °…≥ o将组
织在 °…≥液中放在 tss目铜网上轻轻研磨至无组织
颗粒 ∀将 °…≥细胞混悬液用 vss目尼龙网过滤 o收
#|yut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
集滤液 ∀w ε t sss µ#°¬±pt离心 x °¬±o弃上清 o重
悬沉淀于冷 °…≥ ow ε t sss µ#°¬±pt离心 x °¬±o弃
上清 o沉淀用 t °冷 zx h乙醇固定 ow ε 冰箱过夜 ∀
w ε t sss µ#°¬±pt离心 x °¬±o弃上清 o重悬沉淀于
冷 °…≥ owss目的筛网过滤 t次 ow ε t sssµ#°¬±pt离
心 x °¬±o弃上清 o重悬沉淀于冷 °…≥调至细胞量为
x ≅ tsy#pt o加入 • ‘¤¶¨ 降解 • ‘„ o加入 xss ˏ碘化
丙啶k°Œl o避光冰浴 ts °¬±o流式细胞仪k∞³µ¬¦¶÷
美国 …¨ ¦®°¤± ≤²∏¯¯ ·¨µ公司l分析细胞凋亡率 ∀
214 细胞色素 ≤k≤¼·≤l及 ¥¦¯2¬¯ 检测 实验结束时
取心肌组织约 tss °ªo放入预冷的 s1x °细胞溶解
液中 o在冰浴中迅速将组织剪碎 o再用内切式匀浆仪
冰上匀浆 o释放出蛋白 ∀w ε ts sss µ#°¬±pt离心 t
°¬±o转吸离心后上清液至离心管中 o用紫外分光光
度计检测 uys ±°和 u{s ±°吸光度kΑl o计算细胞浆
中蛋白量≈蛋白量k°ª#°ptl € t1xx ≅ Αu{s p s1zx ≅
Αuys  ∀取离心后上清 ow ε ts sss µ#°¬±pt离心 ts
°¬±o收集上清分装k此部分蛋白不含线粒体 o¥¦¯2¬¯
的检测略去此步l op us ε 冻存 ∀ ≥⁄≥2°„Š∞采用
tu h的分离胶及 x h的浓缩胶 o蛋白经电转膜系统
k≤ … ≥ ˜≥„l转移至硝酸纤维膜 ox h脱脂奶粉封闭 u
«∀兔抗 ≤¼·≤ 抗体 k稀释后终浓度为 s1zx Λª#
°ptl o兔抗 ¥¦¯2¬¯ 抗体k稀释后终浓度为 u Λª#
°ptl o小鼠抗 Š„⁄°‹抗体k稀释后终浓度为 {1{ Λª
#°ptl ovz ε 振荡孵育 u «o用 s1su °°²¯#pt °…≥×
洗涤 °∂⁄ƒ膜 x °¬± ≅ u次 ∀羊抗兔或羊抗小鼠 ŒªŠ
抗体ktΒwssl ovz ε 振荡孵育 xs °¬±o用 s1su °°²¯#
pt °…≥×洗涤 °∂⁄ƒ 膜 x °¬± ≅ x次 ∀加入 ⁄„…显
色 o显色后蒸馏水洗涤终止反应 ∀吹干后与蛋白质
标准膜拼接 o扫描记录目的带灰度值 o与 Š„⁄°‹ 比
较进行半定量统计学分析 ∀
215 ¦¤¶³¤¶¨2v活性检测 实验结束后 o取新鲜的心
肌组织 tss °ª放入预冷的 t °细胞裂解液中 o在
冰上迅速用眼科剪将组织剪碎 o再用超声波破碎仪
破解细胞 o制备细胞匀浆 ∀细胞匀浆冰上孵育 ts
°¬±ow ε t sssµ#°¬±pt离心 t °¬±o转吸上清液k细胞
浆抽取物l至干净试管中 o放置冰上 o用紫外分光光
度计测定各管 Αo并计算蛋白量 ∀稀释 tss Λª蛋白
于 xs ˏ的细胞裂解液中 o加 xs ˏ的 u ≅反应缓冲
液于每一样品管中并加 x ˏ底物 ovz ε 水浴 t ∗ u
«∀于 wsx ±°比色 o得出 ¦¤¶³¤¶¨2v的活力 o结果用 Α
表示 ∀
216 统计处理 数据均以 cξ ? σ表示 o多组间比较
采用 ’±¨ 2 • ¤¼ „‘’∂ „ 分析 o比较统计量 Φ值 ∀结
果应用 ≥°≥≥r°≤ tt1s统计软件进行统计分析 ∀
3 结果
311 大鼠心肌细胞凋亡率的比较 结果显示 o缺
血再灌注后心肌细胞出现了明显的凋亡 o而四逆汤
预处理组心肌细胞凋亡率较缺血再灌注组显著降低
k Π s1stlk表 tl ∀
表 t 各组大鼠心肌细胞凋亡率的比较kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt 凋亡率r h
正常对照 p s qvz ? t qss
假手术 p s qv| ? t qts
缺血再灌注 p | qvw ? t qttt ovl
四逆汤预处理 x z qts ? t qs|tl
注 }与正常对照组比tl Π s qst oul Π s qsx ~与四逆汤预处理组
比vl Π s qstk表 u ∗ w同l
312 大鼠心肌细胞线粒体内细胞色素 ≤ 的释放情
况 正常心肌细胞细胞色素 ≤ 主要位于线粒体 o胞
浆中含量极少 ∀ • ¶¨·¨µ± ¥¯²·¬±ª分析显示 o缺血再灌
注后可见胞浆中细胞色素 ≤ 显著增多k Π s1stl ∀
四逆汤预处理 uw «后 o可明显抑制细胞色素 ≤ 从线
粒体的释放k Π s1stlk表 ul ∀
表 u 各组大鼠心肌细胞线粒体内细胞色素 ≤
的释放情况kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt ≤¼·≤rŠ„⁄°‹
正常对照 p s qswz ? s qsuz
假手术 p s qsyt ? s qsut
缺血再灌注 p s quv ? s qsyyt ovl
四逆汤预处理 x s qtu ? s qsuxul
313 大鼠心肌 ¥¦¯2¬¯ 蛋白表达的比较 • ¶¨·¨µ±
¥¯²·¬±ª分析显示 o缺血再灌注组心肌中 ¥¦¯2¬¯ 的表
达显著减少k Π s1stl o四逆汤组 ¥¦¯2¬¯ 的表达较缺
血再灌注组明显增多k Π s1stl o说明四逆汤预处
理可促进 ¥¦¯2¬¯ 蛋白的表达k表 vl ∀
表 v 各组大鼠心肌 ¥¦¯2¬¯ 蛋白表达的结果
比较kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt ¥¦¯2¬¯rŠ„⁄°‹
正常对照 p s qwvw ? s qsv|
假手术 p s qwu{ ? s qsw{
缺血再灌注 p s qtv ? s qsvyt ovl
四逆汤预处理 x s quw ? s qsvvtl
314 各组大鼠 ¦¤¶³¤¶¨2v活性比较 ¦¤¶³¤¶¨2v活性
测定显示 o缺血再灌注后心肌 ¦¤¶³¤¶¨2v的活性明显
升高k Π s1stl o而四逆汤预处理 uw «后可明显抑
制其活性的增高k表 wl ∀
#szut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
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∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
表 w 各组大鼠 ¦¤¶³¤¶¨2v活性k Αwsxl比较kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量rª#®ªpt Αwxs
正常对照 p s quz ? s qsv
假手术 p s qvw ? s qs|
缺血再灌注 p s qzx ? s qttt ovl
四逆汤预处理 x s qwy ? s qtsul
4 讨论
目前认为细胞凋亡的发生机制主要存在 u条通
路 }一为死亡受体信号通路 ~二就是以细胞色素 ≤
释放及 ¦¤¶³¤¶¨2| o¦¤¶³¤¶¨2v活化为标志的线粒体信
号通路 ∀本研究发现 oŒr• 后大鼠心肌出现明显的
细胞凋亡伴随线粒体内细胞色素 ≤的释放 o¥¦¯2¬¯ 蛋
白表达下调 o并使 ¦¤¶³¤¶¨2v活性升高 ∀细胞色素 ≤
位于线粒体内膜 o心肌缺血再灌注时 o线粒体通透转
换孔k°×孔l受损开放 o致使细胞色素 ≤ 进入胞浆 ∀
细胞色素 ≤作为一种促凋亡因子被释放后 o与胞浆
中的凋亡激活因子2tk„³¤©2tl的 ≤末端及 „×°结合 o
依次激活半胱酸蛋白酶家族中的 ¦¤¶³¤¶¨2| o¦¤¶³¤¶¨2
v而启动细胞凋亡的线粒体信号通路 o引发凋亡≈w  ∀
…¦¯2u家族蛋白对于 °×孔的开放和关闭起着关键的
调节作用 o其中的抗凋亡蛋白 ¥¦¯2¬¯ 可通过抑制促
凋亡蛋白 …¤¬的活化 o从而阻碍 °×孔的开放 o此外 o
¥¦¯2¬¯ 还可与 „³¤©2t结合 o抑制凋亡的发生≈x  ∀ Œr
• 后 ¥¦¯2¬¯ 表达的减少促进了心肌细胞凋亡的发
生 ∀
心肌延迟预适应k⁄°≤l在缺血性刺激后 uw «发
生 o可持续 zu «∀现在认为它的发生机制为短暂的
缺血再灌注或利用某些药物促使心肌组织释放多种
内源性生物活性物质 o通过与细胞膜上受体结合或
直接激活细胞内信号传导通路 o产生心脏保护效
应≈z  ∀前阶段 o作者已经证实四逆汤预处理 uw «后
可模拟 ⁄°≤ 样心肌保护作用 o包括缩小心梗面积 !
改善心功能等≈u ov  ∀本实验中观察到 o四逆汤预处
理组心肌细胞凋亡数减少 o¥¦¯2¬¯ 蛋白表达增加 o细
胞色素 ≤的释放受阻 o¦¤¶³¤¶¨2v活性下降 ∀作者推
测这些现象的出现是因为四逆汤预处理后通过诱导
抗凋亡蛋白 ¥¦¯2¬¯ 的表达 o抑制 °× 孔的开放 o阻碍
Œr• 所引起的细胞色素 ≤ 自线粒体向胞浆的释放
及 ¦¤¶³¤¶¨2v 的激活 o从而抑制心肌细胞凋亡的发
生 ∀这说明了四逆汤抗凋亡机制可能是通过干扰细
胞凋亡的线粒体途径起作用的 ∀
本研究发现四逆汤预防性给药 uw «后可抑制
Œr• 后心肌细胞凋亡的发生 o这为将四逆汤运用到
延迟预适应的药物模拟研究提供重要的实验依据 ∀
≈参考文献 
≈t  …¤ª«¨ ¤¯¬Žo Šµ¤«¤° o • ¦¨«¶¯ µ¨„ ≥ o ·¨¤¯ q ⁄¨ ¤¯¼¨ § °¼²¦¤µ§¬¤¯
³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ª¥¼ ¤t2¤§µ¨±²¦¨³·²µ¶¬±√²¯√¨ ¶¬±«¬¥¬·¬²± ²©¤³²³·²¶¬¶q
׫²µ¤¦≤¤µ§¬²√¤¶¦≥∏µªot||| ottzk{l }|{s q
≈u  刘 颖 o吴伟康 o赵明奇 o等 q四逆汤预处理诱导大鼠心肌延
迟预适应的一氧化氮机制 q中成药 oussx ouzkul }t{z q
≈v  刘 颖 o吴伟康 o陈 晨 o等 q核因子2ϑ…在四逆汤预处理诱
导大鼠心肌延迟预适应中的作用 o中国中药杂志 oussx ovs
kyl }wxv q
≈w  • ª¨∏¯¤ Ž  o ∞±¶Žo Ž¬µ¶«¨ ±¥¤∏° „ q ¬·²¦«²±§µ¬¤2¤¶¶¬¶·¨§ ¦¨¯¯
¶∏¬¦¬§¨ }¤ ¬¯¦¨±¶¨ ·²®¬¯¯ q ²¯ ≤¨¯¯ ≤¤µ§¬²¯ oussv ovxkyl }xx| q
≈x  ¬±± „ o…²¬¶¨ ‹ o׫²°³²¶²± ≤ …q…¦¯2÷¶¤±·¤ª²±¬½¨ ¶·«¨ ³µ²·¨¦2
·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²© …¦¯ ÷q…¬²¯ ≤«¨ ° ot||y ouztkyl }yvsy q
≈y  ¤µ¥¨µ ≥ o¤·¦«°¤± ⁄≥ o • ¤¯®¨µ o ·¨¤¯ q≤¤µ§¬¤¦¶·µ¨¶¶³µ²·¨¬±
¨¯ √¨¤·¬²± uw «²∏µ¶¤©·¨µ¥µ¬¨©¬¶¦«¨ °¬¤²µ«¨¤·¶·µ¨¶¶¬¶¤¶¶²¦¬¤·¨§ º¬·«
µ¨¶¬¶·¤±¦¨ ·² °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬±©¤µ¦·¬²±q≤¬µ¦∏¯¤·¬²±ot||v o{{kvl }tuyw q
≈z  …²¯ ¬¯• q׫¨ ¤¯·¨ ³«¤¶¨ ²©³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ªq ≤¬µ¦• ¶¨ousss o{zkul }
|zu q
Εφφεχτ οφ δελαψεδ πρεχονδιτιονινγ ινδυχεδ βψ Σινι δεχοχτιον ον
µψοχαρδιαλ χελλ αποπτοσισ ανδ ιτσ µιτοχηονδριαλ µεχηανισµ
Œ˜ ≠¬±ªt o • ˜ • ¬¨2®¤±ªu o≤‹∞‘≤«¨ ±v o⁄˜„‘÷¬±2©¨ ±ªu
(t1 ∆επαρτµεντ οφ Πατηοπηψσιολογψ οφ Γυανγδονγ Πηαρµαχολογιχαλ Χολλεγε , Γυανγζηου xtsuuw , Χηινα ;
u1 Ινστιτυτε οφ Ιντεγρατεδ Τραδιτιοναλ Χηινεσε ανδ Ωεστερν Μεδιχινε , Συν Ψετ2Συν Υνιϖερσιτψ, Γυανγζηου xtss{| , Χηινα ;
v1 Νο . wut Ηοσπιταλ οφ ΠΛΑ, Γυανγζηου xtsvt{ , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²© °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶§∏µ¬±ª §¨ ¤¯¼¨ §³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ª¬±§∏¦¨§¥¼ ≥¬±¬§¨2
¦²¦·¬²± k≥‘⁄l q Μετηοδ : ≥⁄µ¤·¶º µ¨¨ §¬√¬§¨ ¬±·²©²∏µªµ²∏³¶}¦²±·µ²¯ o¶«¤° oŒr• ¤±§≥‘⁄ªµ²∏³¶q׫¨ µ¤·¶¬±Œr• ªµ²∏³o¯¨©·¤±·¨µ¬²µ§¨2
¶¦¨±§¬±ª¦²µ²±¤µ¼ ¤µ·¨µ¼ k„⁄l º¤¶²¦¦¯∏§¨§©²µt«¤±§µ¨³¨µ©∏¶¨§©²µt «q׫¨ µ¤·¶¬± ≥‘⁄ªµ²∏³º µ¨¨ ³µ¨·µ¨¤·¨§º¬·«≥¬±¬§¨¦²¦·¬²± kx ª#
#tzut#
第 vt卷第 tx期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussy
®ªpt#§ptl ©²µ·«µ¨¨§¤¼¶o·«¨ ¤¯¶··µ¨¤·° ±¨·º¤¶³µ¨·µ¨¤·¨§uw «¥¨©²µ¨ ·«¨ ¬±§¨¬²¦¦¯∏¶¬²±q≤¨¯¯¤³²³·²¶¬¶º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ©¯²º ¦¼·²° ·¨µ¼o
¦¼·²¦«µ²°¨≤ ¤±§¥¦¯2¬¯ º µ¨¨ §¨·¨¦·¨§¥¼ • ¶¨·¨µ± ¥¯²·¬±ª¤±§·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©¦¤¶³¤¶¨2v º¤¶§¨·¨¦·¨§¥¼ ¤¶¶¤¼ ®¬·qΡεσυλτ : „¶¦²°³¤µ¨§º¬·«
Œr• ªµ²∏³o¤³²³·²¶¬¶µ¤·¨ ²© °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¦¨¯¯ o·«¨ µ¨¯¨ ¤¶¨ ²©¦¼·²¦«µ²°¨≤ ©µ²° °¬·²¦«²±§µ¬¤¤±§·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©¦¤¶³¤¶¨2v º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¨2
¦µ¨¤¶¨§o¤±§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©¥¦¯2¬¯ ³µ²·¨¬± º¤¶¨¯ √¨¤·¨§¬± ≥‘⁄ªµ²∏³qΧονχλυσιον : ׫¨ §¨ ¤¯¼¨ §³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ª¬±§∏¦¨§¥¼ ≥¬±¬§¨¦²¦·¬²±
§¨¦µ¨¤¶¨§ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶q׫¨ ° ¦¨«¤±¬¶° °¤¼ ¥¨ µ¨ ¤¯·¨§·²·«¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ²© °¬·²¦«²±§µ¬¤¶¬ª±¤¯ ³¤·«º¤¼ ²©¤³²³·²¶¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] ≥¬±¬§¨¦²¦·¬²±~§¨ ¤¯¼¨ §³µ¨¦²±§¬·¬²±¬±ª~¤³²³·²¶¬¶~¥¦¯2¬¯ ~¦¼·²¦«µ²°¨ ≤ ~¦¤¶³¤¶¨2v
≈责任编辑 古云侠 
≈收稿日期  ussx2ts2sy
≈基金项目  四川省应用基础研究计划项目ksw≠su|2stu2tl
≈通讯作者  3 谢春光 oר¯ }ksu{l{||y{{ux o∞2°¤¬¯}¬¬¨¦ªussw ƒ
tuy q¦²°
参芪复方抗自发性糖尿病 ŠŽ大鼠早期动脉
粥样硬化的作用机制
张红敏t o陈世伟u o谢春光v 3 o谢毅强v o邓西方v
kt1 四川大学 华西医院 中西医结合科 o四川 成都 ytsswt ~
u1 四川大学 华西公共卫生学院 营养与食品卫生教研室 o四川 成都 ytsswt ~
v1 成都中医药大学 中医内科教研室 o四川 成都 ytsszxl
≈摘要  目的 }探讨参芪复方抗 u型糖尿病k×u⁄l早期动脉粥样硬化k„≥l的作用机制 ∀方法 }w月龄 ≥°ƒ级
ŠŽ大鼠按血糖水平随机分为模型对照组kx °#®ªp t#§pt无菌水l !雷米普利k阳性对照 ot °ª#®ªp t#§ptl !参芪复方
低 !高剂量组ks1zu ou1{{ ª#®ªp t#§ptl组 ~另设正常对照组kx °#®ªpt#§pt无菌水l ∀w组 ŠŽ大鼠在自由进食高脂饲
料同时 o腹腔注射kts °ª#®ªp t#§ptlΛ2Ν2硝基精氨酸甲酯(Λ2Ν„∞l诱导早期 „≥ ~正常对照组予普通饲料 o腹腔注射
生理盐水 ∀造模同时 o各组动物每天灌胃给予相应受试物 vu §∀实验结束时 o腹主动脉采血 o冰上取主动脉 ∀酶免
法检测血清单核细胞趋化蛋白2t k≤°2tl含量 o实时定量 • ×2°≤• 法检测主动脉 ≤°2t及过氧化物酶体增生物激活
受体 Χk°°„•Χl基因 °• ‘„表达 ∀结果 }参芪复方低 !高剂量组大鼠的血清 ≤°2t水平 !高剂量组主动脉 ≤°2t °• 2
‘„表达较模型组显著降低k Π s1sxl o参芪复方低 !高剂量组主动脉 °°„•Χ °• ‘„ 表达较模型组明显增加k Π
s1sx或 Π s1stl ∀结论 }抑制主动脉 ≤°2t °• ‘„及蛋白表达 o上调主动脉 °°„•Χ表达可能是参芪复方抗 ⁄ 性
„≥的部分作用机制 ∀
≈关键词  参芪复方 ~u型糖尿病 ~糖尿病性动脉粥样硬化 ~炎症 ~单核细胞趋化蛋白2t ~过氧化物酶体增生物
激活受体 Χ
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltx2tuzu2sx
参芪复方是成都中医药大学谢春光教授的经验
方 o主要由人参 !黄芪 !山药 !山茱萸 !生地黄 !天花
粉 !丹参 !制大黄等组成 o具有益气养阴 o清热生津 o
活血化瘀的作用 o体现了临床上糖尿病的常用治
法≈t  ∀本课题前期工作显示 o参芪复方具有减少糖
尿病k⁄l早期动脉粥样硬化k„≥l大鼠胸主动脉内
膜 „≥病变数目 o减轻内皮下细胞浸润和脂质沉积
的作用 ∀本研究对参芪复方抗自发性糖尿病 ŠŽ大
鼠早期动脉粥样硬化的作用机制进行了探讨 ∀
1 材料
111 动物
w月龄雄性 ≥°ƒ级自发性糖尿病 ŠŽ大鼠 xs只
及正常 •¬¶·¤µ大鼠 tu只k上海斯莱克 ≥„≤ 实验动
物有限责任公司l o按 u ∗ v只r笼饲养于独立通气笼
具kŒ∂ ≤l系统内 ∀
112 主要药品与试剂
参芪复方kt ª干燥粉相当于原生药 ts ªo四川
#uzut#
第 vt卷第 tx期
ussy年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tx
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