全 文 ：不同产地浙贝母药材中３种活性成分的分析研究
薛 燕１，王 峰２
（１．中国医学科学院 中国协和医科大学 药物研究所，北京 １０００５０；
２．沃特斯中国有限公司 北京代表处，北京 １０００５０）
［摘要］ 目的：利用ＲＰＨＰＬＣＥＬＳＤ测定不同产地的浙贝母类药材中的浙贝母碱、去氢浙贝母碱、浙贝宁的含
量。方法：ＸｔｅｒａＲＰ１８色谱柱（３９ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），流动相乙腈１０ｍｍｏｌ·Ｌ
－１ＮＨ４ＨＣＯ３（ｐＨ１０１０），梯度洗
脱，以ＥＬＳＤ检测。结果：浙贝母碱在０１２～２４０μｇ，去氢浙贝母碱在０１３～２６０μｇ，浙贝宁在０１６～３１０μｇ与
峰面积的对数值呈线性关系；平均回收率分别为９８２％，９８２％，９６５％；ＲＳＤ分别为１３％，１７％，２２％。结论：
本方法用于测定浙贝母药材中的主要生物碱浙贝母碱、去氢贝母碱、浙贝宁的含量简便、准确。
［关键词］ 浙贝母；浙贝母碱；去氢浙贝母碱；浙贝宁；ＨＰＬＣＥＬＳＤ
［中图分类号］Ｒ２８４１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１６１６２８０３
［收稿日期］ ２００５１０２９
［基金项目］ 科技部中央级科研院所科技基础性工作专项研
究项目
［通讯作者］ 薛燕，Ｔｅｌ：（０１０）６３０２５９８１
中药浙贝母为百合科植物浙贝母 Ｆｒｉｔｉｌａｒｉａ
ｔｈｕｎｂｅｒｇｉＭｉｑ．的干燥鳞茎。浙贝母的有效成分为
生物碱，其中含量较高的浙贝母碱、去氢浙贝母碱、
浙贝宁属异甾体生物碱。由于异甾体生物碱的结构
中缺少光化学特征，用常见的光学检测器不能很好
地检测到，本试验采用ＨＰＬＣＥＬＳＤ对浙贝母药材中
的浙贝母碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁建立了含量测
定方法，为中药浙贝母药材的质量控制，制剂及临床
用药方面提供有利的依据。
１ 仪器与试药
ＷａｔｅｒｓＡｌｉａｎｃｅ２６９０高效液相色谱仪，Ｗａｔｅｒｓ
ＥＬＳＤ－２４２０型蒸发光散射检测器，ＥｍＰｏｗｅｒ色谱管
理软件。
浙贝母碱、去氢浙贝母碱对照品及浙贝母 Ｆｒｉｔ
ｉｌａｒｉａｔｈｕｎｂｅｒｇｉＭｉｑ．、川贝母Ｆ．ｃｉｒｈｏｓａＤ．Ｄｏｎ．对
照药材均购自中国药品生物制品检定所；浙贝宁
（自制，纯度 ＞９８％），其理化性质和光谱数据与文
献报道一致［１］，其他浙贝母药材购自各地药材公司
或产地，由中国医学科学院药物研究所陈毓亨教授
鉴定为Ｆ．ｔｈｕｎｂｅｒｇｉ。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＸｔｅｒａＴＭＲＰ１８色谱分析柱（３９ｍｍ×
１５０ｍｍ，５μｍ），流动相 Ａ乙腈，Ｂ１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＮＨ４ＨＣＯ３（浓氨水调 ｐＨ１０１０）；梯度洗脱（见表
１）；流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温度４０℃；进样量２０
μＬ；ＥＬＳＤ参数：漂移管温度 ８５℃，氮气压力 ０２１
ＭＰａ。
表１ 流动相比例
时间／ｍｉｎ Ａ／％ Ｂ／％
０ ３５ ６５
２ ３５ ６５
５ ４５ ５５
１５ ４５ ５５
３５ ９０ １０
５５ ９０ １０
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取浙贝母碱、去氢
浙贝母碱及浙贝宁对照品适量，加甲醇制成内含浙
贝母碱１２０ｍｇ·ｍＬ－１，去氢浙贝母碱１３０ｍｇ·
ｍＬ－１、浙贝宁１５５ｍｇ·ｍＬ－１的溶液作为对照品溶
液，备用。
２．３ 供试品溶液的制备 精密称取浙贝母粉末
（约８０目）约３ｇ，置磨口三角瓶中，加１２ｍＬ氨水
放置３０ｍｉｎ，待之湿润，加入氯仿２０ｍＬ，密塞，放置
２０ｈ后，过滤［２］，吸取续滤液１０ｍＬ，回收氯仿至干，
残渣加甲醇定容于２ｍＬ量瓶中，以０４５μｍ微孔
滤膜过滤，备用。
２．４ 线性关系考察 取已配好的对照品溶液，分别
取０１，０５，１０，５，１０，２０μＬ依次进样，按上述色谱
分析条件测定。以 ｌｇＡ为纵坐标，ｌｇＣ为横坐标作
图，得浙贝母碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁的回归方
·８２６１·
第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７
程，回归方程见表２。
表２ ３种生物碱的线性方程、相关系数及线性范围
对照品 线性方程 ｒ 线性范围／μｇ
浙贝母碱 Ｙ＝１２１Ｘ＋４９９ ０９９９７ ０１２～２４０
去氢浙贝母碱 Ｙ＝１１９Ｘ＋４９５ ０９９８０ ０１３～２６０
浙贝宁 Ｙ＝１１３Ｘ＋４４２ ０９９６４ ０１６～３１０
２．５ 精密度试验 取对照品溶液，重复进样５次，
每次２０μＬ，浙贝母碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁峰面
积积分值的ＲＳＤ分别为０６１％，１２％，０６４％。
２．６ 重复性试验 精密称取同批浙贝母药材粉末
约３ｇ，共５份，按２３项下方法操作，并取２０μＬ进
样。同批浙贝母药材中浙贝母碱、去氢浙贝母碱、浙
贝宁的含量分别为 ００３２１％，００２５８％，０００２
２％；ＲＳＤ分别为２２％，２２％，２６％。
２．７ 加样回收率试验 精密称取已知含量的浙江
磐安样品粉末约３ｇ，共５份，加入内含１１０ｍｇ·
ｍＬ－１的浙贝母碱、１２１ｍｇ·ｍＬ－１的去氢浙贝母碱、
及１３０ｍｇ·ｍＬ－１浙贝宁对照品标准溶液，按２３
项下方法操作，并取２０μＬ进样。测定并计算回收
率，浙贝母碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁的平均回收率
分别为９８２％，９８２％，９６５％；ＲＳＤ分别为１７％，
２２％，１３％。
２．８ 样品的测定 取所收集的不同产地、来源的浙
贝母药材粉末及浙贝母、川贝母对照药材粉末，按
２３项下方法操作，并取２０μＬ进样。结果见表 ３
及图１。
表３ 不同来源浙贝母中浙贝母碱、去氢
浙贝母碱及浙贝宁质量分数 ％
样品 产地 浙贝母碱 去氢浙贝母碱 浙贝宁
１ 浙江磐安 ００３１０ ００２３２ ０００４７
２ 浙江磐安 ００３６６ ００３２４ ０００５７
３ 浙江磐安 ００２７３ ０２５５０ ０００４９
４ 浙江磐安 ００３１４ ００２１３ ０００２０
５ 浙江磐安 ００３８９ ０２１３０ ０００７１
６ 浙江东阳 ００２５０ ００１７７ ０００１５
７ 浙江东阳 ００２１７ ００２７２ ０００２７
８ 浙江东阳 ００２２９ ００１９１ ０００３４
９ 浙江东阳 ００２７４ ００２３９ ０００４０
１０ 浙贝对照药材 ００３５６ ０００２４ ００００２
１１ 川贝对照药材 ００００６ － ００００７
３ 讨论
贝母类生物碱属于异甾类生物碱，结构中缺少
光化学特征，无紫外吸收，故其含量测定方面的研究
一直无重大进展。已有的测定方法如薄层扫描
法［３］，ＨＰＬＣ［４］，柱前衍生化 ＨＰＬＣ［５，６］，柱前衍生化
图１ 对照品及样品的高效液相色谱图
１贝母碱；２去氢贝母碱；３浙贝宁
Ａ对照品；Ｂ样品；Ｃ浙贝母对照药材；Ｄ川贝母对照药材
ＧＣ［７］，这些方法或是由于灵敏度不同，或是操作繁
琐，而不够理想，因而用于异甾类生物碱测定的方法
学仍需要深入地研究。
利用不依赖于样品吸收特征的 ＥＬＳＤ检测器，
配合梯度洗脱，直接测定样品中的贝母类生物碱。
结果表明，按照上述的液相条件对药材中的浙贝母
碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁进行定量测定，其分离度
·９２６１·
第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７
及重现性均令人满意，样品制备简单，是一种操作简
单、干扰因素少、结果准确可靠的异甾类生物碱的测
定方法，可以利用此方法通过检测这３种成分的含
量，配合其他鉴别方法，更好地监控中药浙贝母的内
在质量。
从色谱图上看，在此分离条件下，被测样品中的
浙贝母碱、去氢浙贝母碱及浙贝宁能够很好地被分
离，这３种成分也是浙贝母药材中的主要成分，色谱
图中的其他成分也能得到很好的分离，川贝母药材
和浙贝母的色谱图区别很明显，用此梯度洗脱、
ＥＬＳＤ检测不失为一种很好的浙贝母指纹图谱检测
法。
另外，从收集到的样品测定结果来看，磐安产的
浙贝母中，不少样品中的浙贝母碱、去氢浙贝母碱及
浙贝宁的含量高于东阳地区产的浙贝母，这种现象
是否是一种趋势，是否会对浙贝母临床疗效产生影
响还有待于进一步的收集样品以研究。
［参考文献］
［１］ 张建兴，马广恩，劳爱娜，等．浙贝母化学成分研究［Ｊ］．药学学
报，１９９１，２６（３）：２３１．
［２］ 朱丹妮，谭丰萍，高山林．ＨＰＬＣＥＬＳＤ分析测定贝母类药材中
生物碱［Ｊ］．药物分析杂志，２０００，２０（９２）：８７．
［３］ 李 萍，徐国钧，徐珞珊．贝母中的贝母碱、去氢贝母碱含量测
定［Ｊ］．中草药，１９９３，２４（１１）：５７９．
［４］ 晁若冰，胡 玲．高效液相色谱法测定贝母中贝母辛的含量
［Ｊ］．药学学报，１９９３，２８（９）：７０５．
［５］ 王 癑，张庆林，陈信义，等．ＨＰＬＣ法测定市售贝母中贝母乙
素含量［Ｊ］．中草药，２００１，３２（１）：２４．
［６］ ＫａｎＤ，ＧｅＬ，ＹｅｅＰＨ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄｈｉｇｈｐｅｒ
ｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆｂｕｌｂｓｏｆ
Ｆｒｉｔｉｌｉａｒｉａ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＳｃｉ，１９９６，８５（１１）：１１７４．
［７］ 李松林，李 萍，林 鸽，等．药用贝母中几种活性异甾体生物
碱的分布［Ｊ］．药学学报，１９９９，３４（１１）：８４２．
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｅｉｍｉｎｅ，ｐｅｉｍｉｎｉｎｅａｎｄｚｈｅｂｅｉｎｉｎｅｉｎ
ＦｒｉｔｉｌａｒｉａｔｈｕｎｂｅｒｇｉｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｂｙＨＰＬＣＥＬＳＤ
ＸＵＥＹａｎ１，ＷＡＮＧｆｅｎｇ２
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＢｅｉｊｉｎｇＯｆｉｃｅ，ＷａｔｅｒａｓＣｈｉｎａＣｏＬｔｄ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｐｅｉｍｉｎｅ，ｐｅｉｍｉｎｉｎｅａｎｄｚｈｅｂｅｉｎｉｎｅｉｎＦｒｉｔｉｌａｒｉａｔｈｕｎｂｅｒｇｉｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙｂｙＲＰＨＰＬＣ
ＥＬＳＤ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅＨＰＬＣｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｗｉｔｈａＷａｔｅｒｓＡｌｉａｎｃｅ，Ｍｏｄｅｌ２６９０，ｅｑｕｉｐｐｅｄｗｉｔｈａｎＸｔｅｒａＴＭＲＰ１８ｃｏｌｕｍｎ（３９ｍｍ
×１５０ｍｍ，５μｍ），ａｎｄｅｖａｐｏｒａｔｅｄｌｉｇｈｔｓｃａｔｅｒｉｎｇｄｅｔｅｃｔｏｒ．Ｉｔｗａｓｅｌｕｔｅｄｇｒａｄｉｅｎｔｌｙｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｎｄ１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＮＨ４ＨＣＯ３
（ａｄｊｕｓｔｅｄｔｏｐＨ１０１０ｂｙａｍｍｏｎｉａｓｏｌｕｔｉｏｎ）．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓ（ｎ＝５）ｏｆｐｅｉｍｉｎｅ，ｐｅｉｍｉｎｉｎｅａｎｄｚｈｅｂｅｉｎｉｎｅｗｅｒｅ
９８２％ （ＲＳＤ１７％），９８２％ （ＲＳＤ２２％），９６５％（ＲＳＤ１３％）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄ
ｒｅｌｉａｂｌｅ．ＩｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｔｈｕｎｂｅｒｇｉ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｆｒｉｔｉｌａｒｉａｔｈｕｎｂｅｒｇｉ；ｐｅｉｍｉｎｅ；ｐｅｉｍｉｎｉｎｅ；ｚｈｅｂｅｉｎｉｎｅ；ＨＰＬＣＥＬＳＤ
［责任编辑 张宁宁
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
櫗
毉
毉
毉
毉
］
欢迎登陆《中国中药杂志》网站：
ｗｗｗ．ｃｊｃｍｍ．ｃｏｍ．ｃｎ
ｗｗｗ．中国中药杂志．ｃｏｍ
·０３６１·
第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７