全 文 ：玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病
大鼠体内药动学的影响
段好刚１，２，魏玉辉１，李波霞１，２，张冬梅１，张进文１，２，武新安１
（１．兰州大学 第一医院 药剂科，甘肃 兰州 ７３００００；
２．兰州大学 药学院，甘肃 兰州 ７３００００）
［摘要］ 目的：研究玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内药动学过程的影响。方法：糖尿病模型大鼠灌
胃给予玉泉丸７ｄ后，给予盐酸二甲双胍，给药后于不同时间采集血样，用高效液相色谱方法测定血药浓度，计算药
动学参数。结果：二甲双胍组、联合用药组的药动学参数 Ｃｍａｘ分别是１８９５，２１７６ｍｇ·Ｌ
－１；ｔ１／２分别是１０６９８，
１７６７４ｍｉｎ；ＣＬ／Ｆ分别是００１３，０００８Ｌ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１；ＡＵＣ分别是１００４２１，１０７１２２ｍｇ·Ｌ－１·ｍｉｎ－１。结论：
盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内药动学过程符合一室模型，玉泉丸对盐酸二甲双胍在糖尿病大鼠体内的药动学有
显著影响。
［关键词］ 玉泉丸；盐酸二甲双胍；糖尿病大鼠模型；药动学
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１８２１３３０４
［收稿日期］ ２００８０２２０
［基金项目］ 甘肃省中医药管理局资助项目（ＧＺＫ２００７３６）
［通讯作者］ 武新安，Ｔｅｌ：（０９３１）８６１６３９２，Ｅｍａｉｌ：ｘｉｎａｎ
ｗｕ６５１１＠１６３．ｃｏｍ，ｄｕａｎｈｇ０６＠１６３．ｃｏｍ
盐酸二甲双胍（ｍｅｔｆｏｒｍｉｎｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＭＴ）是
一类双胍类口服降糖药，其作用主要有抑制肠壁细
胞吸收葡萄糖；增加骨骼肌和周围组织对葡萄糖的
摄取和利用；增加肝细胞对葡萄糖的摄取；抑制高血
糖素的释放等［１］，由于盐酸二甲双胍不良反应较
少，虽然长期使用后，一些患者可能导致高乳酸血
症［２］，但盐酸二甲双胍是临床上唯一能显著性增加
胰岛素敏感性的降糖药物［３］，且不导致体重增加，
还具有降低脂类的特性［４］，现临床上已广泛用于治
疗Ⅱ型糖尿病。玉泉丸是清代名医叶天士治疗消渴
病的经方，由葛根、天花粉、地黄、麦冬、五味子等组
成，现代工艺制成浓缩丸，具有益气生津，止渴除烦，
滋肾养阴的功效［５］。临床上，盐酸二甲双胍多和其
他口服降糖药联合用药来控制Ⅱ型糖尿病患者的血
糖［６８］，同时也存在盐酸二甲双胍与玉泉丸联合用药
来控制糖尿病患者血糖的治疗方案。
高效液相色谱法测定生物样品中盐酸二甲双胍
的浓度及其药代动力学研究已有许多报道［９１１］，对
于合用中成药后对其药代动力学的影响未见报道。
一般对盐酸二甲双胍的药代动力学研究都建立在正
常人的基础上，而盐酸二甲双胍在正常状况与病理
状况下的药代动力学过程有所不同，在联合用药的
情况下，盐酸二甲双胍的药动学过程势必更加复杂。
因此，有必要对病理状况下联合用药后盐酸二甲双
胍的药动学过程做一探讨，以便为临床合理用药提
供依据。本实验建立了一种简单、快速的高效液相
色谱法，测定糖尿病大鼠血浆中盐酸二甲双胍浓度，
对联合用药后，玉泉丸对盐酸二甲双胍药动学过程
的影响做了初步探讨。
１ 材料
１．１ 仪器
岛津ＬＣ－２０ＡＴ二元梯度泵，ＳＰＤ－Ｍ２０Ａ二极
管阵列检测器，ＤＧＵ－２０Ａ在线脱气系统，ＳＩＬ２０Ａ
自动进样系统，ＣＴＯ－２０Ａ柱温箱，ＬＣｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱
工作站（岛津，日本）；ＳＨＺ－Ⅲ型循环水真空泵（上
海亚荣生化仪器厂），高速离心机（深圳国华仪器
厂），ＸＷ －８０Ａ旋涡混合器（上海医科大学仪器
厂），ＬＴ－２２４Ｓ电子天平（北京赛多利斯）。
１．２ 药品与试剂
链脲佐菌素（Ｓｉｇｍａ公司，１８８８３６６４），盐酸二
甲双胍对照品（北京利铃制药公司，批号０７０５０５），
炔诺酮对照品（中国药品生物制品检定所，０５３
８６０１），盐酸二甲双胍片（白云山汤阳东泰药业，批
号０６０６０１），玉泉丸（成都九芝堂金鼎药业，批号
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第３３卷第１８期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
０６０６０１），乙腈为色谱纯（山东禹王实业公司禹城化
工厂），其他试剂均为国产分析纯。去离子水（兰州
大学第一医院自制）。
１．３ 动物
健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１５只，体重２００～２３０ｇ，
购于甘肃中医学院实验动物中心，合格证号 ＳＣＸＫ
（甘）２００４０００６。
１．４ 数据处理
血药浓度测定结果用 ｄｒｕｇａｎｄｓｔａｔｉｓｔｉｃｓｏｆｗｉｎ
ｄｏｗｓ１０（ＤＡＳ１０）统计软件进行处理，计算药动学
参数，药动学参数用 ＳＰＳＳ１００统计软件进行统计
分析，Ｐ＜００５为有统计学意义。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件
ＶＰ－ＯＤＳＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ，
日本岛津），流动相乙腈２ｍｍｏｌ·Ｌ－１十二烷基硫酸
钠溶液（３５∶６５），流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２３５
ｎｍ，柱温４０℃，进样量２０μＬ；内标炔诺酮。
２．２ 对照品溶液的制备
精密称取炔诺酮对照品６６ｍｇ，置于１０ｍＬ量
瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得炔诺酮
对照品储备液。精密吸取炔诺酮对照品储备液２５
ｍＬ，置于 ２５０ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，配制成浓度为６６ｍｇ·Ｌ－１内标溶液待用。精
密称取盐酸二甲双胍对照品６ｍｇ于１０ｍＬ量瓶中，
用内标溶液（炔诺酮６６ｍｇ·Ｌ－１）溶解并稀释至刻
度，摇匀，即得盐酸二甲双胍对照品溶液，４℃储藏
备用。
２．３ 样品预处理
取血浆１００μＬ，加入４００μＬ的内标溶液，旋涡
振荡４０ｓ，混合液在１万 ｒ·ｍｉｎ－１下离心５ｍｉｎ除
去蛋白质，上清液过０４５μｍ微孔滤膜后，２０μＬ直
接进样分析。
２．４ 色谱行为
在上述色谱条件下，盐酸二甲双胍保留时间约
８７６ｍｉｎ，炔诺酮（内标）的保留时间为１４３８ｍｉｎ，
且血浆内源性物质对其无干扰。空白血浆、加样血
浆及大鼠灌胃给药后１ｈ的血浆样品色谱图见图１。
Ａ．空白血浆；Ｂ．空白血浆＋二甲双胍对照品＋内标；Ｃ．大鼠灌胃给药后１ｈ的血浆样品；１．盐酸二甲双胍，２．内标
图１ 血浆样品ＨＰＬＣ图
２．５ 标准曲线制备及最低检测浓度
精密吸取盐酸二甲双胍对照品溶液适量，用内
标溶液稀释成０７８～５００ｍｇ·Ｌ－１的系列对照品
溶液。取上述系列对照品溶液４００μＬ与１００μＬ空
白大鼠血浆混合，旋涡振荡４０ｓ，混合液在１万 ｒ·
ｍｉｎ－１下离心５ｍｉｎ除去蛋白质，得到０７１～４５４５
ｍｇ·Ｌ－１的标准加样血浆，上清液过０４５μｍ微孔
滤膜后，２０μＬ直接进样分析。记录盐酸二甲双胍
和内标的峰面积。以盐酸二甲双胍和内标的峰面积
比为纵坐标（Ｙ），盐酸二甲双胍的浓度为横坐标
（Ｘ）进行线性回归，得标准曲线方程 Ｙ＝０１６８Ｘ－
００００７，Ｒ２＝０９９９６，可见盐酸二甲双胍在０７１～
４５４５ｍｇ·Ｌ－１线性关系良好。按上述方法测得血
浆中盐酸二甲双胍最低检测限为０１７ｍｇ·Ｌ－１。
２．６ 精密度与回收率试验
配制０７１，２８４，４５４５ｍｇ·Ｌ－１的盐酸二甲双
胍标准血浆质控样品，按２．３项下操作，于日内不同
时间处理并测定５次，连续５ｄ进行测定，每日测定
１次，记录盐酸二甲双胍与内标峰面积，并计算盐酸
二甲双胍浓度。结果测得高、中、低浓度的日内、日
间精密度 ＲＳＤ分别为 ３５６％，４８７％，６３７％和
５１２％，６８１％，８５４％。将实测值与真实值相比得
相 对 回 收 率，分 别 为 （８６４２ ± ３０７）％，
（９３４７±４５５）％，（９６９８±６１７）％。
２．７ 药动学影响研究
２．７．１ 模型建立、分组及给药 雄性健康Ｗｉｓｔａｒ大
鼠１５只，（２１５±１５）ｇ，腹腔注射链脲佐菌素６０ｍｇ
·ｋｇ－１建立糖尿病模型。７２ｈ后，取空腹静脉血，用
葡萄糖氧化酶法测定血糖。选择空腹血糖值高于
１６７ｍｍｏｌ·Ｌ－１者视为造模成功［１２］。选取造模成
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
功的大鼠１０只，随机分为二甲双胍组，联合用药组。
二甲双胍组单次给予盐酸二甲双胍３５０ｍｇ·ｋｇ－１，
联合用药组每天按６０ｇ·ｋｇ－１灌胃给予玉泉丸混
悬液，分２次给药，连续给药７天，第７天晚禁食，于
第８天早晨灌胃给予盐酸二甲双胍３５０ｍｇ·ｋｇ－１。
２．７．２ 药时曲线及药动学参数 以上２组大鼠于
给药前及给药后 １５，３０，６０，９０，１２０，１５０，１８０，２４０，
３６０，４８０，６００，７２０ｍｉｎ，经股动脉插管采血０２５ｍＬ，
同时补充等量含肝素钠４０Ｕ·ｍＬ－１的生理盐水，血
样立刻转入涂过肝素钠的１５ｍＬ微型离心试管中，
在１万 ｒ·ｍｉｎ－１下离心５ｍｉｎ得血浆，取上层血浆
１００μＬ，按２．３项操作，记录峰面积，计算血药浓度，
并绘制平均血药浓度时间曲线图。盐酸二甲双胍
的平均药时曲线图见图２。
二甲双胍组（◆）；联合用药组（■）
图２ 盐酸二甲双胍给药后的平均药时间曲线
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝５）
由药时曲线可知，联合用药组大鼠盐酸二甲双
胍的血药浓度高于同时间二甲双胍组大鼠的血药浓
度，且联合用药组大鼠盐酸二甲双胍的药时曲线出
现双峰现象。
对药时曲线中的数据用 ＤＡＳ１０统计软件进
行处理，经自动拟合，符合权重因子为１／ＣＣ的一室
模型，主要的药动学参数见表１。
表１ 盐酸二甲双胍的药动学参数（珋ｘ±ｓ，ｎ＝５）
参数 二甲双胍组 联合用药组
Ｔｍａｘ（ｍｉｎ） ９０ ９０
Ｃｍａｘ（ｍｇ·Ｌ－１） １８９５±４０４ ２１７６±６３１
ｔ１／２（ｍｉｎ） １０６９８±２９６３ １７６７４±４１２４１）
ＣＬ／Ｆ（Ｌ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１） ００１３±０００７ ０００８±０００１１）
ＡＵＣ（ｍｇ·Ｌ－１·ｍｉｎ－１）１００４２１±２１２４４ １０７１２２±２６４３２１）
注：与二甲双胍组比较１）Ｐ＜００５
３ 讨论
在优化色谱条件时，本实验也对文献报道的方
法做了试验，但是都不能得到满意的色谱行为，有的
甚至出现拖尾与展宽现象。因此，本实验直接采用
十二烷基硫酸钠作为离子对试剂来延长盐酸二甲双
胍的保留时间，并得了满意的色谱行为。在血浆样
品处理过程中，由于盐酸二甲双胍极性较大，难于从
血浆中萃取出来，所以作者采取了甲醇直接沉淀蛋
白的方法处理血浆，该操作方法简单、易行，且血浆
中内源性物质无干扰。
联合用药后，玉泉丸中的某些成分可能竞争性
抑制了盐酸二甲双胍从肾小球的滤过，使得其排泄
减慢，因而联合用药组大鼠盐酸二甲双胍的血药浓
度高于同时间单给盐酸二甲双胍组大鼠的血药浓
度。对于联合用药，其药时曲线出现了双峰现象，
可能是由于联合用药后，玉泉丸抑制了盐酸二甲双
胍的排泄，盐酸二甲双胍出现蓄积现象；另一方面，
盐酸二甲双胍主要分布在胃肠道，也可能出现了胃
肠循环，或者肠肠循环。其详细机制还有待于进一
步研究。
［参考文献］
［１］ 李 端．药理学［Ｍ］．５版．北京：人民卫生出版社，２００３：３２０．
［２］ ＣａｙｌｅｙＪｒＷ Ｅ．Ｎａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆｏｒｍｅｔｆｏｒｍｉｎ［Ｊ］．Ｊ
ＡｍＭｅｄＡｓｓｏｃ，２００２，２８７：２５０４．
［３］ ＡＮｏｕｒｐａｒｖａｒ，ＡＢｕｌｏｔａ，ＵＤｉＭａｒｉｏ，ｅｔａｌ．Ｎｏｖｅｌｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｆｏｒ
ｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ
ＰｈａｒｍａｃｏｌＳｃｉ，２００４，２５：８６．
［４］ ＰａｒｈｏｆｅｒＫＧ，ＬａｕｂａｃｈＥ，ＧｅｉｓｓＨＣ，ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆｇｌｕｃｏｓｅ
ｃｏｎｔｒｏｌｏｎｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓ［Ｊ］．Ｄｔｓｃｈ
ＭｅｄＷｏｃｈｅｎｓｃｈｒ，２００２，１２７：９５８．
［５］ 邓银泉，范小芬，吴国琳，等．玉泉丸对２型糖尿病促炎细胞因
子干预的影响［Ｊ］．中国中西医结合杂志，２００６，２６（８）：７０６．
［６］ 熊 璞，唐炜立，李华珠．格列美脲、格列吡嗪合用二甲双胍
对Ⅱ型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响［Ｊ］．海南医学，２００６，
１７（３）：３８．
［７］ 方穗雄．舒宁茶与二甲双胍合用治疗Ⅱ型糖尿病临床疗效分
析［Ｊ］．中药材，２００１，４（７）：４３．
［８］ 马翠荣，马丽华，马伯华．六味地黄丸与二甲双胍合用治疗２
型糖尿病６０例疗效观察［Ｊ］．邯郸医学高等专科学校学报，
２００２，１５（６）：６０７．
［９］ ＳＡｂｕＲｕｚ，ＪＭｉｌｅｒｓｈｉｐ，ＪＭｃＥｌｎａｙ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｅｔｆｏｒｍｉｎｉｎ
ｐｌａｓｍａｕｓｉｎｇａｎｅｗｉｏｎｐａｉｒｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅａｎｄｉｏｎ
ｐａｉｒｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢ，２００３，７９８：２０３．
［１０］ ＮｏｚｏｍｕＫｏｓｅｋｉ，ＨｉｒｏｔｏＫａｗａｓｈｉｔａ，ＭｉｙｕｋｉＮｉｎａ，ｅｔａｌ．Ｄｅｖｅｌ
ｏｐｍｅｎｔａｎｄｖａｌｉｄａｔｉｏｎｆｏｒｈｉｇｈｓｅｌｅｃｔｉｖｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆｍｅｔｆｏｒｍｉｎｉｎｈｕｍａｎｐｌａｓｍａｂｙｃａｔｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｉｎｇｗｉｔｈｎｏｒｍａｌ
ｐｈａｓｅＬＣ／ＭＳ／ＭＳ［Ｊ］．ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌ，２００５，３６：１０６３．
［１１］ ＣｅｒｅｎＹａｒｄｉｍｃｉ，ＮｕｒａｎＯｚａｌｔｉｎ，ＡｌｐｅｒＧｕｒｌｅｋ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅａｎｄｍｅｔｆｏｒｍｉｎｉｎｐｌａｓｍａｂｙｇｒａｄｉｅｎｔｌｉｑ
ｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈＵＶｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２００７，７２：１４１６．
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