全 文 :青木香炮制前后的药效及毒理学比较研究
王金华,王智民,姜 旭,薛宝云,李春英
(中国中医科学院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 目的:研究青木香炮制前后水提物对大鼠的蓄积性毒性作用,及水提物、醇提物的药效学作用。方
法:采用小鼠急性毒性和大鼠蓄积性毒性方法观察青木香炮制前后对小鼠急性毒性LD50和对大鼠的慢性蓄积性毒
性作用;观察了青木香炮制前后的水煎剂和醇提物对正常和新斯的明诱导的胃肠运动机能亢进小鼠肠肌运动的影
响;并观察了对小鼠的镇痛和抗炎作用。结果:生品和炮制品水提物灌胃给药的LD50分别为生药14645,84606g
·kg-1;生品及其炮制品水提物高、中、低3个剂量组,连续给药1个月对大鼠的一般状况和外周血常规和血清生
化、脏器系数和病理组织学检查均未见明显改变。连续给药2个月,可见生品的高剂量组的血清生化指标的尿素
氮、总胆固醇和碱性磷酸酶明显升高,组织形态学检查部分动物的肝细胞、肾小管和胃黏膜均产生程度不同的损
伤。连续给药3个月,生品的中、高剂量组和炮制品的大剂量组均出现了上述脏器程度不同的损伤,可见血清生化
指标的肌酐、尿素氮明显升高,肝、肾、胃脏器系数明显增加。但等量的炮制品水提物的毒性明显低于生品;生品和
炮制品的水提物、醇提物对正常和新斯的明诱导的小鼠胃肠运动机能亢进均呈现出明显的抑制作用;在小鼠的扭
体和热刺激模型上显示出明显的镇痛作用;对二甲苯诱导的小鼠耳廓炎症有显著的抑制作用,在剂量相同的条件
下生品、炮制品的药效学作用无明显差异。结论:青木香炮制后急性毒性和慢性蓄积性毒性明显降低,炮制后药效
学作用强度不低于生品;水提物药效学作用不及相应剂量的醇提物。
[关键词] 青木香生品;青木香炮制品;抗炎;镇痛;急性毒性;蓄积性毒性
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05042805
[收稿日期] 20060401
[基金项目] 国家自然科学基金资助项目(30271612);国家中
医药管理局资助项目(30271612)
[通讯作者] 王智民,Tel:(010)84014128,Fax:(010)6401
3996,Email:zhmw123@263.net
青木香为马兜铃科植物马兜铃Aristolochiadebilis
Sieb.etZucc.的干燥根茎,具有平肝止痛,解毒消肿之
功效。用于眩晕头痛,胸腹涨满,痈肿疔疮等症,是中
医临床的常用中药。近年来由于马兜铃酸事件[15],致
使青木香等含微量马兜铃酸的中药材禁用,给该类中
药的临床应用带来了一定影响。青木香和关木通情况
不同,它具有悠久的应用历史,尽管含有少量的马兜铃
酸,能否应用炮制手段去除其毒性,炮制后是否会影响
饮片的药效也是值得关注的问题。本研究采用与青木
香临床功效、主治相吻合的主要药效学指标,对青木香
的生品和炮制品进行了药效学和毒理学比较,以阐明
青木香的炮制品是否达到了减毒存效的目的。
1 材料
1.1 药物 青木香购于河北安国,经本研究所生药
室谢宗万教授鉴定。
药物制备 生品和炮制品(采用盐制手段)浓
缩水提物:以8倍量水浸泡30min,煎煮至沸腾后再
加热30min,倾出水煎液继续以6倍量水煎煮,方法
同上。合并 2次提取液并浓缩至每毫升含生药
113g。生品、炮制品醇提液:生品及炮制品均以
95%乙醇回流提取2次,每次30min,合并2次提取
液浓缩至每毫升含生药208g(以下剂量均为生药
量),置4℃冰箱保存备用。
1.2 动物 ICR小鼠,雌雄兼用,体重(20±2)g;
Wistar大鼠,雌雄兼用,体重(100±5)g,均为 SPF
级,由北京维通利华医学试验动物有限公司提供,合
格证号 SCXK(京)20022003。上述动物均以标准
颗粒饲料饲养。
1.3 试剂 血清生化测定试剂为北京北化康泰临
床试剂有限公司提供。
1.4 仪器 全自动血球计数仪:MEK6813日本光
电株式会社生产。半自动生化分析仪:Humanlyser
2000德国产。自动脱水机:日本Sakura。
2 方法
2.1 毒理学研究
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2.1.1 小鼠急性毒性(LD50)的比较
[11]
小鼠实验前禁食(不禁水)14h,按体重随机分
为正常对照组,青木香生品水提物 8433,1127,
15023,2003,267g·kg-1·d-1(分别相当于临床
日用剂量的937,125,167,223,297倍)和炮制
品水提物 4746,63281,84375,1125,1500g·
kg-1·d(分别相当于临床日用剂量的5273,703,
938,125,1667倍)5个不同剂量组,共11组,每组
10只,雌雄各半。受试药物分上、下午(一日内给药
2次,间隔6h)灌胃给药,给药时间1d,每次给药体
积40mL·kg-1。观察药后小鼠7d内的一般状态
和死亡情况以及死亡分布时间。死亡动物立即尸
解,肉眼观察各主要脏器的外观变化。
2.1.2 对大鼠慢性蓄积性毒性的比较
将大鼠按体重随机分为正常对照组,生品和炮制
品水提物均分别设162,81,081g·kg-13个剂量
组(分别相当于临床日用剂量的1,10,20倍),共7
组,每组50只,雌雄各半。各组动物连续给药,正常
对照组给予等体积的饮用水。每周观察记录大鼠的
体重增长(根据体重变化适时调整给药量)、进食量和
一般状况。各组动物分别于药后1,2,3个月和停药1
个月后,每组分批抽取10只动物(雌雄各半),自眼眶
后静脉丛取血,用全自动血球计数仪测定外周血白细
胞(WBC)计数和分类、红细胞计数(RBC)、血红蛋白
浓度(HGB)、红细胞比容(HCT)。同时检测血液生
化学指标:包括尿素氮(BUN),肌酐(Cr),总胆红素
(TBIL),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),血糖(GLU),丙
氨酸氨基转移酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP),天门冬
氨酸氨基转移酶(AST),总胆固醇(CHOL)。然后处
死动物进行系统解剖,肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑、
肾上腺、胸腺、胰腺、肠系膜淋巴结、胃、十二指肠、子
宫,卵巢、睾丸、附睾、前列腺各脏器及组织有无病理
改变,胸、腹腔各体腔有无异常积液等。主要脏器称
湿重,计算脏器系数(g脏器重/100g体重),观察青
木香炮制前后对大鼠的慢性蓄积性毒性作用。
2.2 药效学研究
2.2.1 对小鼠肠肌运动功能的影响[6]
2.2.1.1 对正常小鼠肠肌运动功能的影响 将小鼠
按体重均匀分为10组:正常对照组,阳性药阿托品
组,青木香生品、炮制品的水提物和醇提物高、低剂量
组,每组10只,雌雄各半。试验前小鼠禁食(不禁水)
12h,各给药组分别一次性灌胃给予青木香生品、炮
制品的水提物和醇提物15,30g·kg-1(按动物体
表面积折算,分别相当于临床用量的1,2倍),给药体
积为20mL·kg-1,正常对照组给予同体积的蒸馏水。
药后45min,每鼠灌胃8%的炭末混悬液10mL·
kg-1,15min后,脱颈椎处死小鼠,立即剖腹取出小肠
全长(幽门至回盲部),测量幽门至炭末前沿的距离,
按下述公式计算各组动物的炭末推进百分率。
炭末推进率(%)=炭末在肠内推进距离(cm)/小肠全
长(cm)×100%
2.2.1.2 对新斯的明负荷小鼠肠肌运动功能的影
响[7] 将小鼠按体重均匀分为11组,除增加新斯的
明组外,其余动物的分组情况、给药剂量、试验方法
均同2.2.1.1。小鼠在一次性给药后30min,除正
常对照组,其余各组小鼠均皮下注射新斯的明 10
μg·kg-1,10min后每鼠灌胃8%的炭末混悬液10
mL·kg-1,15min脱颈椎处死小鼠,立即剖腹取出
小肠全长,测量炭末前沿至幽门的推进距离,计算炭
末运动百分率(计算方法同2.2.1.1)。
2.2.2 青木香炮制前后的镇痛作用比较
2.2.2.1 对小鼠温热刺激性疼痛的影响[8] 给药
前先进行痛阈值筛选,将热板仪温度调至55℃,将
小鼠放入热板仪中,记录小鼠自放入热板仪至小鼠
出现舔后足的时间为痛阈值,痛阈值低于6s或高
于60s者予淘汰。将小鼠按痛阈值分入各组,分组
情况、给药方法和剂量均同2.2.1.1,各组开始给
药,于药后1,2h测定小鼠痛阈值。
2.2.2.2 对冰醋酸诱导的小鼠扭体反应的影响[9]
雌性小鼠,按体重均匀分组,分组情况、给药方法
和剂量均同2.2.1.1,各组动物于给药后60min,每
只小鼠腹腔注射06%的冰醋酸溶液02mL,随后
立即观察每只小鼠最初出现扭体的时间(潜伏期)
和15min内小鼠的扭体次数。
2.2.3 青木香炮制前后对 二甲苯诱导的小鼠耳廓
炎症的抗炎作用比较[10]
将雄性小鼠按体重均匀分为11组,每组10只,
分组情况、给药方法和剂量同试验2.2.1.1。各组
动物于给药后45min,在小鼠右耳廓内外各涂二甲
苯25μL致炎,15min后将小鼠脱颈椎处死,剪下双
耳,用直径 8mm的角膜环钻打下左右耳片称重。
以左耳作自身对照,以致炎侧耳廓与对照耳廓重量
之差作为炎症的肿胀度。
2.3 统计学处理
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青木香炮制前后水提、醇提物对小鼠的 LD50试
验结果用机率单位法(Bilss)计算。药效学和蓄积
性毒性试验各项参数均以 珋x±s表示,数据采用
Student'st检验进行统计分析。
3 结果
3.1 对毒理学的影响
3.1.1 小鼠LD50
青木香生品水提物的 LD50为14645g·kg
-1,
其95%可信限为12855~16685g·kg-1;炮制品
水提物 LD50为 84606g·kg
-1,95%可信限为
70709~101234g·kg-1,生品水提物的毒性明显
高于炮制品58倍,说明青木香生品炮制后毒性明
显降低。小鼠药后的死亡时间主要集中在药后第4
天。肉眼观察可见死亡小鼠的肾脏体积较对照组明
显增大,由于积水而呈现出白色。但其他脏器肉眼
观察未见异常性改变。
3.1.2 对大鼠慢性蓄积性毒性的影响
3.1.2.1 一般状况观察 大鼠连续灌胃给予青木
香生品以及炮制品水提物1,2,3个月和给药2个月
停药1个月,给药3个月停药1个月后,对大鼠的一
般状况、体重增长、进食量均无明显的影响,对大鼠
均无致死性毒性作用。
3.1.2.2 对外周血液、血清生化指标的影响 大鼠
连续灌胃给予青木香生品以及炮制品水提物1,2,3
个月以及给药2个月停药1个月和给药3个月停药
1个月后检测结果表明,青木香生品以及炮制品水
提物的各剂量组对大鼠的外周血液(红细胞、白细
胞总数及其分类、血小板、和血红蛋白、红细胞压积
等)与正常组比无明显影响。药后1,2个月的血液
生化指标(GLU,TP,ALB,BUN,Cr,TBIL,CHOL,
ALP,GOT,GPT)的各项检测值均在正常范围内,与
正常对照组比较均无明显差异。但连续给药3个月
后生品的中、高剂量组和炮制品的高剂量组可见谷
丙转氨酶、肌酐、尿素氮明显高于对照组。但停药1
个月后基本恢复正常,结果见表1。
3.1.2.3 对脏器系数和组织形态学的观察 连续
表1 青木香炮制前后对大鼠血清生化指标的影响(珋x±s,n=10)
组别 时间 剂量/g·kg-1 ALT/U·L-1 Cr/mmol·L-1 BUN/mmol·L-1
对照 药后2个月 - 4855±1066 15558±2652 735±337
生品 081 4541±329 15382±2033 742±207
81 5014±396 16884±2475 816±1821)
162 6883±6872) 18122±4332 884±0772)
炮制品 081 4442±606 14940±3448 773±109
81 5383±312 16266±972 776±144
162 6578±6122) 17238±5481 881±122
对照 药后3个月 - 5313±751 11669±3182 427±153
生品 081 5527±928 14056±2033 660±207
81 6599±16921) 15116±3006 600±1321)
162 7656±11162) 16089±44201) 685±1122)
炮制品 081 5939±1445 12995±2652 452±074
81 5930±937 12995±3624 485±999
162 6223±10401) 14321±49501) 570±218
注:与对照组比较1)P<005,2)P<001
给药1个月后,肉眼观察动物的各主要脏器外观未
见任何异常改变,各主要脏器系数无明显增加,镜下
组织形态学观察均未见异常性改变;连续给药2个
月后,生品的高剂量组可见胃黏膜表面粗糙、增厚、
颜色发黄,镜下检查可见胃黏膜上端出现角化现象,
肝脏、胃系数明显增加(与对照组比较,P<001),
其他未见明显异常。停药恢复1个月后,上述症状
虽有一定减轻,仍可见生品的高剂量组肝脏系数较
对照组明显增高(与对照组比较,P<005),但相同
剂量的炮制品则未见上述异常现象;连续给药3个
月后,生品的中、高剂量组的肝、肾、胃脏器系数均明
显增大(与对照组比较,P<001)。高剂量组胃黏
膜表面粗糙、增厚和颜色发黄的现象重于药后2个
月,镜下检查可见生品高剂量组的少数动物的肾脏
中肾曲管上皮肿胀,间质出现炎症反应,肾集合管蛋
白变形,炎性增生。肝细胞部分核浓染,炮制品中剂
量组的肾集合管少量渗血,肾曲管上皮肿胀,但病变
不明显。停药恢复1个月后,生品中剂量组的肝、
肾、胃系数以及炮制品中、高剂量组的胃系数基本恢
复(与对照组比较无显著性差异),但生品和炮制品
高剂量组的肝、肾脏器重量仍较对照组明显增高
(与对照组比较,P<005)。
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3.2 对药效学的影响
3.2.1 对正常小鼠肠肌运动功能的影响
青木香生品和炮制品的水提和醇提物对正常小
鼠的肠肌运动均具有明显的抑制作用;且炮制前后
在剂量相等的条件下比较作用强度基本相同。但可
以看出醇提物对小鼠肠肌运动的抑制作用强度有优
于水提物的作用趋势。结果见表2。
表2 青木香炮制前后水提物、醇提物对
正常小鼠肠肌运动的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
炭末推进率
/%
抑制率
/%
对照 - 430±97
阿托品 025 207±702) 519
生品水提物 15 343±861) 202
3 318±642) 144
炮制品水提物 15 368±79 260
3 309±821) 281
生品醇提物 15 278±462) 353
3 243±322) 312
炮制品醇提物 15 296±692) 435
3 258±912) 400
注:与正常对照组比较1)P<005,2)P<001
3.2.2 对新斯的明负荷小鼠肠肌运动功能的影
响[7]
与正常对照组比较,可见新斯的明可使正常小
鼠的胃肠运动明显加快。炮制前后的水提物和醇提
物15,3g·kg-1一次性灌胃给药后,均可明显拮抗
新斯的明所致的小鼠胃肠运动加快;炮制品对肠肌
运动的抑制作用无明显的下降;醇提物有优于水提
物的作用趋势;阳性对照药阿托品也可明显拮抗新
斯的明所致的小鼠胃肠运动加快。结果见表3。
表3 青木香炮制前后水提物、醇提物对新斯的明
负荷小鼠胃肠运动机能的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
炭末推进率
/%
抑制率
/%
对照 - 538±1132)
新斯的明 1×10-5 773±71
阿托品 025 558±1062) 278
生品水提物 15 652±1151) 157
3 622±1611) 188
炮制品水提物 15 678±1071) 195
3 641±1691) 171
生品醇提物 15 596±1492) 229
3 586±1552) 221
炮制品醇提物 15 602±1012) 242
3 560±1282) 276
注:与新斯的明组比较1)P<005,2)P<001
3.3 对镇痛作用的影响
3.3.1 对小鼠热板刺激性疼痛的影响[8]
炮制前后的醇提物15,3g·kg-1在药后 1h
对热刺激性疼痛均具有明显的镇痛作用,但生品和
炮制品在剂量相同的条件下比较,二者并未见统计
学差异;炮制前后的水提物镇痛作用则均不明显。
但阳性对照药强痛定则使小鼠药后1h的热痛阈值
明显提高,镇痛作用可持续至药后2h(与对照组比
较P<001)。结果见表4。
表4 青木香炮制前后水、醇提物对小鼠热刺
激痛阈值的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
药后1h
/s
药后2h
/s
对照 - 25±822 28±585
强痛定 5×10-5 53±12142) 49±13762)
生品水提物 15 24±758 34±897
3 26±604 39±1215
炮制品水提物 15 26±670 26±528
3 33±1298 24±1229
生品醇提物 15 34±8971) 27±719
3 40±16661) 37±727
炮制品醇提物 15 36±14951) 31±1731
3 49±12152) 36±1375
注:与模型对照组比较1)P<005,2)P<001
3.3.2 对冰醋酸诱导的小鼠扭体反应的影响
炮制品的醇提物3g·kg-1,可明显延长小鼠出
现扭体的潜伏期,其他各组对潜伏期均未见明显的
延长作用;但炮制前后的水提物和醇提物(除生品
水提物15g·kg-1组外)均可明显抑制小鼠的扭体
次数。且炮制前后的镇痛作用强度基本相似。表明
青木香炮制后对镇痛作用无明显的影响。见表5。
表5 青木香炮制前后水、醇提物对冰醋酸诱导的
小鼠扭体反应的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
潜伏期
/s
扭体次数
/次
对照 - 2861±1146 1950±1131
索米痛 010 8101±21032) 030±0671)
生品水提物 15 2477±1165 1190±502
3 3564±1016 900±9821)
炮制品水提物 15 3080±1504 910±9531)
3 3946±1725 670±8032)
生品醇提物 15 3470±1628 920±7871)
3 4166±3087 1380±1002
炮制品醇提物 15 3863±1375 740±4742)
3 5458±29061) 760±10151)
3.3.3 对二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀的抗炎作用
青木香生品及炮制品的水提物30g·kg-1以
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及醇提物15,3g·kg-1组,对二甲苯诱导的小鼠耳
廓肿胀均具有明显的抑制作用。结果见表6。
表6 青木香炮制前后水、醇提物对二甲苯诱导的
小鼠耳廓肿胀的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
肿胀度
/mg
抑制率
/%
正常 - 03±067-2)
模型 - 163±452
泼尼松 001 33±095-2) 798
生品水提物 15 135±534 172
30 121±2881) 258
炮制品水提物 15 1260±64 227
30 120±4451) 264
生品醇提物 15 110±5211) 325
30 116±4591) 288
炮制品醇提物 15 126±4051) 227
30 121±5021) 258
注:与模型对照组比较1)P<005,2)P<001
4 小结和讨论
通过对小鼠急性毒性和对大鼠蓄积性毒性的研
究结果表明,青木香生品的急性毒性明显高于炮制
品,证明青木香炮制后毒性明显降低,青木香急性毒
性的主要靶器官是肾脏,小鼠死亡的主要原因是肾
衰竭所致。
大鼠的长期蓄积性毒性表明,青木香生品中、高
剂量(相当于临床用药10,20倍量)连续长期用药
后,随给药时间的延长,逐渐显示出对肾脏、肝脏细
胞的毒性,并使胃黏膜表面出现病理性改变。证明
青木香生品连续长期大剂量用药主要的毒性靶器官
为肝、肾、胃。青木香经本法炮制后可使毒性明显降
低。停止用药后对动物脏器的损伤程度能够逐渐减
轻。
青木香炮制前后的药效学研究证明,生品经本
法炮制处理后,虽然毒性明显降低(降至生品的
1/5),但对药效学作用无明显的影响。本研究为含
马兜铃酸类中药利用炮制手段达到减毒存效目的提
供了一种示范性研究。
[参考文献]
[1] 鲍志东,叶 晨,黄 新,等.马兜铃属植物的肾毒性(综述)
[J].国外医学·中医中药分册,2001,23(5):252.
[2] 吴春兰,袁 莉,陈永华,等.马兜铃酸肾病研究概况[J].中
国中医药信息杂志,2000,9(2):60.
[3] 王智民.含有马兜铃酸的中成药情况分析[J].中国中药杂
志,2002,27(10):800.
[4] 高 天,王文莉.含马兜铃酸药品不良反应3例[J].时珍国
医国药,2002,13(10):636.
[5] 黄枝优,何秀田.马兜铃酸肾病的临床研究概况[J].时珍国
医国药,2002,13(8):494.
[6] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,
1993:332.
[7] 中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南[S].
1994:138.
[8] H沃格尔杜冠华,李学军,张永祥,等译.药理学试验指南
[M].北京:科学出版社,2001:492.
[9] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,
1993:378.
[10] 徐叔云.药理学试验方法[M].北京:人民卫生出版社,1982:
492.
[11] 王北璎.中药新药研制开发技术与方法[M].上海:上海科学
技术出版社,2001:795.
Pharmacodynamicandtoxicologiccomparativestudyofcrude
andprocessedRadixAristolochice
WANGJinhua,WANGZhimin,JIANGXu,XUEBaoyun,LIChunying
(InstituteofMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700China)
[Abstract] Objective:TostudytheaccumulatedtoxicactiontobandicootofaqueousextractofcrudeandprocessedRadix
AristolochiceandthepharmacodynamicactionofaqueousandalcoholicextractofcrudeandprocessedRadixAristolochice.Method:
TheLD50ofacutetoxicitytomiceandchronicaccumulatedtoxicitytobandicootsofcrudeandprocessedRadixAristolochicewereob
servatedIntestinalandmyokineticinfluenceofnormalandrevulsivehyperactivegastrointestinalmotilityofmiceinducedbyneostigmine
wereobservatedbygivingaqueousextractandalcoholicextractofcrudeandprocessedRadixAristolochiceRelievingpainandelimina
tinginflammationtomicealsowereobservated.Result:TheLD50ofaqueousextractofcrudeandprocessedRadixAristolochicewere
146.45,846.06g·kg-1(equivalentlytocrudedrug)respectivelybyintragastricadministrationBandicoot′generalcondition,periph
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第32卷第5期
2007年3月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.32,Issue 5
March,2007
eralblood,serum,organiccoeficient,histopathologicexaminationweren'tobviouschangesafter1monthadministratingaqueousextract
ofcrudeandprocesseddruginthreedoseSerumindicatorsureanitrogen,cholesteroltotal,alkalinephosphatasemanifestlywere
heightenedandsomeanimals'hepaticcels,nephrictubulesandmucosaemergeddiferentlydamageathistomorphologybygivingcrude
highdoseafter2monthsAboveorgansemergeddiferentdamageincrudemiddleandhighdoseandprocessedhighdoseafter3months
andserumindicatorscreatinine,ureanitrogenmanifestlywereincreased,thecoeficientsofliver,kidneyandgastermanifestlywere
heightened.However,thetoxicityofidenticaldoseprocessedproductwaslowerthanthatofcrudeoneAqueousextractandalcoholic
extractofcrudeandprocessedRadixAristolochicecouldobviouslyinhibitenormalandrevulsivehyperactivegastrointestinalmotilityby
neostigmineofmice,relievepaininmouse,stretchingandheatstimulationmodelsandinhibitedimethylbenzeneinducmouse,auricle
inflammation.Pharmacodynamicactionwasn'tobviousdiferenceinsamedoseofcrudeproductandprocessedone.Conclusion:Acute
toxicityandchronicaccumulatedtoxicityaresteppeddownaftergivingprocessedRadixAristolochice,butpharmacodynamicefectwasn
'tlowerInpharmacodynamicefect,aqueousextractcan′tcomparewithalcoholicextractinsamedose.
[Keywords] crudeRadixAristolochice;processedRadixAristolochice;eliminateinflammation;relievepain;acutetoxicity;
accumulatedtoxicity
[责任编辑 古云侠]
漏芦多糖对小鼠激发态免疫功能的影响及其可能机制
李发胜1,杨 光1,咸 丰2,刘 辉1
(1.大连医科大学 检验医学院,辽宁 大连116027;
2.大连市沈阳军区第一疗养院,辽宁 大连 116013)
[摘要] 目的:探讨漏芦多糖对小鼠免疫反应的影响及作用机制。方法:分别用绵羊红细胞(SRBC)和卵清蛋
白为抗原给小鼠注射后,将漏芦多糖分为3个剂量(50,100,200mg·kg-1·d-1)灌服小鼠7d,加强免疫后,检测相
应抗体生成水平和血清中白细胞介素2(IL2),γ干扰素(IFNγ)生成水平。结果:中剂量给药组 SRBC抗体生成
水平和卵清抗体生成水平,IL2,IFNγ激发水平均显著高于对照组(P<005)。结论:漏芦多糖对正常小鼠机体免
疫有增强作用。
[关键词] 漏芦多糖;免疫;IL2;IFNγ
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)05043303
[收稿日期] 20050710
[基金项目] 辽宁省教育厅项目(202200953)
[通讯作者] 刘辉,Tel:(0411)84720030,Email:liuhui60@
sina.com
漏芦为菊科植物 Rhaponticumuniforum(L.)DC
漏芦的干燥根,始载于《神农本草经》,列为上品。
味苦、咸,性寒,入胃,大肠经,具有清热解毒、消痈排
脓、通乳的功效。药理研究表明,漏芦提取液具有较
好的抗动脉粥样硬化[1]、抗缺氧和益智作用[2,3]。
为深入探讨漏芦提取液中活性成分的作用,作者从
漏芦中提取出漏芦多糖,并对灌服漏芦多糖的小鼠
免疫应答水平进行了检测,得到了较为理想的结果。
1 材料
1.1 药材
漏芦购于大连国药大药房,经大连药品检验所
郭月秋主任药师鉴定为正品。漏芦多糖提取参照文
献[4]进行,主要过程如下:称取已干燥的漏芦250
g,加入适量80%乙醇过夜,回流提取3h脱脂,药渣
挥尽乙醇后,沸水提取2次,每次2h,合并提取液,
浓缩至 200mL,加 95%乙醇使醇体积分数达到
80%,于4℃冰箱中醇沉过夜,抽滤,滤渣依次用无
水乙醇、丙酮洗涤,得到多糖。将多糖溶于水,用三
氯醋酸除蛋白,反复进行 3次至无蛋白,流水透析
后,蒸发浓缩至200mL,加95%乙醇使醇体积分数
达到80%,于4℃冰箱中醇沉过夜,抽滤,滤渣依次
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2007年3月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.32,Issue 5
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