全 文 ：凉膈散对内毒素血症小鼠的肝脏库普弗细胞 ＣＤ１４
和清道夫受体表达的影响
余林中，江爱达，陈育尧，林 慧，秦清和，马晓冬
（南方医科大学，广东 广州 ５１０５１５）
［摘要］ 目的：探讨凉膈散对内毒素血症小鼠的肝脏库普弗细胞 ＣＤ１４和清道夫受体（ＳＲ）的表达的影响以及
肝脏（ＬＰＳ）引起损伤的影响，从细胞信号转导途径阐明中药解毒机制。方法：建立内毒素血症小鼠动物模型，同时
灌服凉膈散，在内毒素给药后不同时间点（２，４，８ｈ）杀动物取肝组织，免疫组化法观察肝脏库普弗细胞 ＣＤ１４及 ＳＲ
表达的变化，并进行图像分析和肝组织的病理检测。结果：注射 ＬＰＳ２，４，８ｈ后，与正常对照组相比，ＬＰＳ损伤组肝
脏库普弗细胞ＣＤ１４的表达均呈显著升高，ＳＲ表达均呈显著降低（Ｐ＜００１）。不同剂量凉膈散组及地塞米松组均
介于正常对照组与ＬＰＳ损伤组之间。与ＬＰＳ损伤组比较，不同剂量凉膈散组及地塞米松组在两者的表达上均有显
著性差异（Ｐ＜００１），以高剂量凉膈散最为明显，呈剂量相关性。肝脏损伤主要表现为空泡变性，肝脏库普弗细胞
ＳＲ，ＣＤ１４的表达变化与小鼠肝损伤程度呈平行关系。结论：凉膈散对内毒素血症小鼠的肝脏库普弗细胞表面 ＣＤ１４
表达上调以及ＳＲ表达下调有明显的抑制作用，并能减轻内毒素所致的肝损伤。
［关键词］ 凉膈散；库普弗细胞；内毒素；肝损伤；ＣＤ１４；清道夫受体
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０３０２２００４
［收稿日期］ ２００５０３２８
［基金项目］ 国家自然科学基金资助课题（３０１７１１５５）
［通讯作者］ 余林中，Ｔｅｌ：（０２０）６１６４８２６２，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｌｚｈ＠ｆｉｍ
ｍｕ．ｃｏｍ
ＣＤ１４是内毒素激活巨噬细胞的主要受体，与细
胞释放炎症介质有关；巨噬细胞清道夫受体（ｓｃａｖ
ｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＳＲ）是重要的防御性受体，参与内毒素
的清除和灭活作用。文献资料表明，内毒素血症动
物模型巨噬细胞表面 ＣＤ１４表达明显增高，而 ＳＲ表
达却明显降低［１３］，因而这二者的变化可以看作是内
毒素引起瀑布式炎症反应和组织器官严重损害的主
要中间环节。作者先前的研究表明凉膈散具有减轻
内毒素引起炎症反应和组织器官损害的作用［４，５］，
本研究通过探讨凉膈散对小鼠内毒素血症引起的肝
脏库普弗细胞表面ＣＤ１４、清道夫受体表达变化的影
响，从细胞信号转导途径探讨凉膈散的解毒机制，同
时也为中医中药治疗内毒素损伤提供理论依据。
１ 材料与方法
１１ 动物和试剂、仪器 ＳＰＦ级昆明小鼠，体重
２０～２２ｇ，雄性，共１０８只，购于第一军医大学实验动
物中心；ＣＤ１４抗体，武汉博士德公司；ＳＲ抗体，英国
Ｓｅｒｏｔｅｃ公司；ＳＡＢＣ试剂盒（抗兔及抗大鼠）、免疫组
化用载玻片，武汉博士德公司；ＬＰＳ（Ｅｃｏｌｉ０１１１：
Ｂ４），Ｓｉｇｍａ公司；地塞米松片，广州邦民制药有限公
司，批号２００３１１０７。
１２ 药物的制备 凉膈散处方：大黄１２ｇ，青海产
蓼科植物大黄 ＲｈｅｕｍｔａｎｇｔｉｃｕｍＭａｘｉｍｅｘＢａｌｆ的干
燥根；芒硝 １２ｇ，广西产硫酸盐类矿物芒硝族芒硝
Ｎａｔｒｉｓｕｌｆａｓ经加工精制而成的结晶体；连翘２４ｇ，安
徽产木犀科植物连翘 ＦｏｒｓｙｔｈｉａｓｕｓｐｅｎｓｅＶａｈｌ的干燥
成熟果实；栀子６ｇ，湖南产茜草科植物栀子 Ｇａｒｄｅ
ｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌｉｓ的干燥成熟果实；黄芩 ６ｇ，安徽
产唇型科植物黄芩 ＳｃｕｔｅｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓＧｅｏｒｇｉ的干
燥根；薄荷６ｇ，广西产唇型科植物薄荷 Ｍｅｎｔｈａｈａｐ
ｌｏｃａｌｙｘＢｒｉｑ的干燥茎叶；生甘草１２ｇ，内蒙古产豆科
植物甘草 ＧｌｙｃｙｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ的干燥根茎。以
上处方剂量为成人（７０ｋｇ）１ｄ用量。以上均为符合
２０００年版《中国药典》规定并加工炮制合格的饮片，
由第一军医大学南方医院中药房提供，并由第一军
医大学中医系中药鉴定室鉴定。具体煎煮方法：加
１０倍体积的蒸馏水将饮片浸泡３０ｍｉｎ，先煮连翘、黄
芩、栀子、甘草，沸腾后继续煎煮 ２０ｍｉｎ，起锅前 １０
ｍｉｎ加入大黄及薄荷，第２煎加６倍体积的蒸馏水煎
·０２２·
第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
煮，沸腾后继续煎煮２０ｍｉｎ。２次煎液混合，用４层
无菌纱布过滤，芒硝最后纳入药液中充分溶解，药液
最后浓缩成含生药 ３ｇ·ｍＬ－１，置 ４℃ 冰箱保存备
用，于动物给药前以蒸馏水倍比稀释成 １∶０５∶０２５
３个不同剂量，即分别含生药 ３，１５，０７５ｇ·ｍＬ－１。
ＬＰＳ用生理盐水稀释成０５ｍｇ·ｍＬ－１。地塞米松片
用蒸馏水稀释成０２５ｍｇ·ｍＬ－１。
１３ 动物分组及模型制作 将１０８只实验动物随
机分成１８个组，ＬＰＳ给药后２，４，８ｈ３个时间点各有
６组，６组分别为正常对照组，ＬＰＳ损伤组，地塞米松
组，凉膈散高、中、低剂量组。造模前先连续灌胃给
药３ｄ，按每次 ０２ｍＬ·１０ｇ－１的量给药，每天 １次
（凉膈散高、中、低剂量组分别给凉膈散，ＬＰＳ损伤组
及正常对照组给蒸馏水，地塞米松组给地塞米松溶
液），最后１次灌药后，各组动物（正常对照组注射等
量生理盐水），均按５ｍｇ·ｋｇ－１剂量尾静脉注射 ＬＰＳ，
复制内毒素血症动物模型，在注射 ＬＰＳ后 ２，４，８ｈ
分别颈椎脱臼处死动物，取出肝脏固定。
１４ 免疫组化标本的准备 肝脏以１０％甲醛固定
２４ｈ后，常规石蜡包埋切片，切片厚５μｍ，行免疫组
化显色和ＨＥ染色。
１５ ＣＤ１４，ＳＲ检测 采用 ＳＡＢＣ免疫组化法。石
蜡切片，常规脱蜡，经０３％Ｈ２Ｏ２灭活内源性过氧化
物酶，经微波抗原修复，并以５％牛血清白蛋白封闭
后，加１∶２００ＳＲ和１∶１５０ＣＤ１４抗体，４℃冰箱过夜，
１∶２００生物素化二抗和 ＳＡＢＣ分别与切片在 ３７℃孵
育３０ｍｉｎ，ＤＡＢ显色。ＰＢＳ代替一抗作为阴性对照。
切片在光镜下（２０×１０倍）每组采集１００个库普弗细
胞，在计算机图像分析系统以 ＬＥＩＣＡＱＮ软件计算
每个细胞的平均灰度值，以此表示 ＣＤ１４及 ＳＲ表达
的相对强度。
１６ 肝组织病理学观察 石蜡切片常规 ＨＥ染色，
观察光镜下肝组织损伤的情况。
１７ 统计学处理 各组计量数据用 ＳＰＳＳ１００软件
处理，采用单因素方差分析（ｏｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ）检验。
２ 结果
２１ ＣＤ１４表达变化 光镜下可见在肝脏中 ＣＤ１４
只在库普弗细胞上表达，在 ３个时间点都可见到正
常对照组肝脏库普弗细胞表面 ＣＤ１４表达相对较
低，ＬＰＳ损伤组 ＣＤ１４表达明显增强，凉膈散不同剂
量组及地塞米松组的 ＣＤ１４表达也增强，但比 ＬＰＳ
损伤组弱。图像分析显示：注射 ＬＰＳ后２，４，８ｈ，肝
脏库普弗细胞平均灰度值都是以正常对照组最低，
ＬＰＳ损伤组最高，凉膈散高、低、中剂量组及地塞米
松组介于正常对照组与ＬＰＳ损伤组之间。在不同时
间点，均为凉膈散高剂量组＜凉膈散中剂量组＜凉
膈散低剂量组，呈剂量相关性。不同时间点，各组平
均灰度值差别均有统计学意义（Ｐ＜００１）。与 ＬＰＳ
损伤组比较：不同剂量凉膈散组及地塞米松组均有
显著性差异（Ｐ＜００１，如表１）。显示凉膈散对 ＬＰＳ
诱导的 ＣＤ１４表达增强有抑制作用，并呈剂量相关
性。
表１ 凉膈散对内毒素血症时小鼠的库普弗细胞ＣＤ１４和清道夫受体表达的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
ＣＤ１４ ＳＲ
２ｈ ４ｈ ８ｈ ２ｈ ４ｈ ８ｈ
正常对照组 ９１．９２±７．４１１） ９２．２７±６．６０１） ９２．８３±６．０８１） １５０．０６±７．７１１） １４８．７６±６．９８１） １５０．２４±６．２０１）
ＬＰＳ损伤组 １１４．２０±７．８６ １３７．５５±８．５２ １４７．５５±７．０３ １２１．０１±７．３９ １０９．８８±７．３１ ８９．８３±５．５３
地塞米松组 １０２．０７±６．４２１） １０６．５８±５．５０１） １０８．７５±６．７７１） １３９．９０±６．７６１） １３０．５７±６．０２１） １２９．４８±６．７０１）
凉膈散高剂量组 ９９．１８±７．０８１） １０９．２９±６．６７１） １０３．０６±５．７８１） １３６．６６±６．３３１） １３１．０８±６．７４１） １３４．７２±５．６３１）
中剂量组 １０６．０６±６．９４１） １２０．１０±８．１５１） １２３．４８±７．７７１） １３１．５１±６．０４１） １２４．３７±５．８２１） １１９．９５±６．０６１）
低剂量组 １１０．１３±５．６５１） １２９．３８±６．６５１） １３３．５０±６．５８１） １２７．３５±５．３０１） １１８．６５±５．８４１） １０６．７０±７．７０１）
注：与ＬＰＳ损伤组比较１）Ｐ＜００１
２２ ＳＲ表达变化 光镜下可见 ＳＲ在肝脏库普弗
细胞及肝脏内皮细胞上表达，在不同时间点均可见
正常对照组库普弗细胞表达相对较强，ＬＰＳ损伤组
表达明显减弱，凉膈散不同剂量组及地塞米松组的
ＣＤ１４表达也减弱，但比ＬＰＳ损伤组强。图像分析显
示：注射 ＬＰＳ后２，４，８ｈ，肝脏库普弗细胞平均灰度
值都是以正常对照组最高，ＬＰＳ损伤组最低，凉膈散
高、低、中剂量组及地塞米松组介于正常对照组与
ＬＰＳ损伤组之间。在不同时间点，均为凉膈散低剂
量组＜凉膈散中剂量组＜凉膈散高剂量组，呈剂量
相关性。不同时间点，各组平均灰度值差别均有统
计学意义（Ｐ＜００１）。与 ＬＰＳ损伤组比较：不同剂
量凉膈散组及地塞米松组均有显著性差异（Ｐ＜
００１，表 １）。显示凉膈散对 ＬＰＳ诱导的 ＳＲ表达减
·１２２·
第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
弱有抑制作用，并呈剂量相关性。
２３ 肝组织病理学改变 光镜观察：ＬＰＳ损伤组肝
窦内库普弗细胞数量增多，体积增大，伴有轻度肝血
窦扩张，肝细胞空泡变性。以肝细胞空泡变性最为
明显。上述病变以ＬＰＳ注射后８ｈ最重。凉膈散不
同剂量组肝损害均较 ＬＰＳ组为轻，以高剂量组最为
明显，呈剂量相关性。地塞米松对减轻肝损害不太
明显。
３ 讨论
ＣＤ１４为糖基磷酯酰肌醇锚定糖蛋白，在肝脏表
达于库普弗细胞表面。ＳＲ是一种跨膜糖蛋白，在肝
脏表达于库普弗细胞及肝窦内皮细胞等表面，可与
多种带有负电荷的大分子（包括脂多糖）结合，并将
之转移到细胞内降解，是近年发现的介导巨噬细胞
吞噬降解细菌脂多糖的受体。内毒素与 ＣＤ１４结合
后，通过一系列的细胞信号转导过程，促使单核巨噬
系统细胞释放炎性介质，其中某些介质（ＴＮＦα，ＩＬ
６）又对ＣＤ１４自身表达起正调控作用，而对 ＳＲ的表
达起负调控作用，再加上这些介质还存在其他的正
反馈机制，上述这些因素叠加，引起炎症的瀑布反
应，导致机体严重损害，甚至引起续惯性的多脏器功
能衰竭［６８］。先前邓文龙与作者提出中药解毒作用
可能与其调节炎症因子的表达有关［９，１０］，之后作者
研究发现清热解毒名方凉膈散对炎症因子的表达有
调节作用［４，５］，验证了先前的推测。近年研究发现
内毒素引起ＣＤ１４上调、ＳＲ下调，进而调节炎症因子
的表达［１３］。
本研究发现凉膈散能明显抑制 ＬＰＳ诱导的
ＣＤ１４表达上调及ＳＲ表达下调，呈剂量相关性；同时
也能明显减轻肝损害，也呈剂量相关性，其减轻肝损
害与调节 ＣＤ１４及 ＳＲ表达呈平行关系。从而说明
调节ＣＤ１４及ＳＲ表达是凉膈散发挥解毒作用、调节
炎症因子表达、减轻内毒素损伤的细胞信号转导机
制之一。为阐明中药解毒机制提供了依据。
文献报道地塞米松有抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞
ＣＤ１４表达上调及 ＳＲ表达下调作用［１１，１２］，临床上也
经常将其作为治疗内毒素血症的常用药物，但临床
上其治疗内毒素引起组织器官损害效果并不明显。
作者研究也发现其对 ＣＤ１４表达及 ＳＲ表达有调节
作用，但对ＬＰＳ引起的肝损害减轻作用不明显，与临
床实践结果相一致。在目前西医对内毒素血症无特
效药的情况下，以清热解毒方剂为代表的中药无疑
有举足轻重的作用。
［参考文献］
［１］ 蒋建新，谢国旗，陈永华，等．库普弗细胞清道夫受体、ＣＤ１４
表达变化及其与内毒素肝损伤关系．中华创伤杂志，２０００，１６
（４）：４７８．
［２］ 杨 策，蒋建新，刘大维，等．严重创伤及合并内毒素攻击后
小鼠肝、肺组织巨噬细胞 ＣＤ１４和清道夫受体的表达及其意
义．中华创伤杂志，２００２，１８（４）：２００．
［３］ ＪｉａｎｇＪＸ，ＣｈｅｎＹＨ，ＸｉｅＧＱ，ｅｔａｌ．Ｉｎｔｒａｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ
ｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｄＣＤ１４ａｎｄｔｈｅｉｒｒｅｌａｔｉｏｎｔｏｌｏｃａｌｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ
ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａｉｎｍｉｃｅ．ＷｏｒｌｄＪＳｕｒｇ，２００３，２７（１）：１．
［４］ 余林中，吴 锐，黄 泳．凉膈散对家兔内毒素温病模型解毒
作用研究．中药药理与临床，１９９６，１２（５）：４．
［５］ 余林中，吴 锐，沈映君，等．凉膈散对家兔内毒素温病模型
体温、血浆ＴＮＦα及脑脊液 ＰＧＥ２，ｃＡＭＰ含量的影响．中国中
医药科技，１９９６，（４）：２６．
［６］ 姜 勇，金丽娟．休克的细胞和分子基础．北京：科学出版社，
２００２．１４３．
［７］ 张 猛，秦文利，蒋建新，等．白细胞介素６对小鼠肺泡巨噬
细胞ＣＤ１４、清道夫受体表达的调节功能．中国临床康复，
２００４，８（２７）５８６３．
［８］ 周 健，单佑安，秦文利，等．ＴＮＦα对小鼠肺泡巨噬细胞
ＣＤ１４、清道夫受体表达的影响．基础医学与临床，２００４，２４（３）：
２６９．
［９］ 邓文龙．中医解毒法实质研究及内毒素性疾病的中医药防
治．中药药理与临床，１９９３，８（４）：４０．
［１０］ 余林中．中药解“内毒”研究刍议．中药药理与临床，１９９８，１４
（增刊）：１１６．
［１１］ ＢｕｅｃｈｌｅｒＣ，ＲｉｔｅｒＭ，ＯｒｓｏＥ，ｅｔａｌ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｃａｖｅｎｇｅｒｒｅｃｅｐ
ｔｏｒＣＤ１６３ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｍｏｎｏｃｙｔｅｓａｎｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｂｙｐｒｏ
ａｎｄａｎｔｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｓｔｉｍｕｌｉ．ＪＬｅｕｋｏｃＢｉｏｌ，２０００，６７（１）：９７．
［１２］ ＣｈａｂｙＲ，ＰｅｄｒｏｎＴ，ＳｔｕｔｚＰＬ，ｅｔａｌ．Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅａｎｄｔｕｍｏｒ
ｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒａｌｐｈａｉｎｄｕｃｅｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｎ
ｂｏｎｅｍａｒｏｗｃｅｌｓｂｙｄｉｆｅｒｅｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，１９９３，１５１
（９）：４４７６．
ＬｉａｎｇｇｅＳａｎｅｆｅｃｔｓｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ１４ａｎｄｓｃａｖｅｒｇｅｒ
ｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｔｈｅｋｕｐｆｅｒｃｅｌｓｏｆｌｉｖｅｒｏｆｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａｍｉｃｅ
·２２２·
第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６
ＹＵＬｉｎｚｈｏｎｇ，ＪＩＡＮＧＡｉｄａ，ＣＨＥＮＧＹｕｙａｏ，ＬＩＮＨｕｉ，ＱＩＮＱｉｎｇｈｅ，ＭＡＸｉａｏｄｏｎｇ
（ＮａｎｆａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＬｉａｎｇｇｅＳａｎｔｏｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ１４ａｎｄｓｃａｖｅｒｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＳＲ）ｉｎｔｈｅｋｕｐｆｅｒｃｅｌｓｏｆ
ｌｉｖｅｒａｎｄｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅｏｆｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｉｔｈｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆ
ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＬＰＳ）ａｎｄａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅＬｉａｎｇｇｅＳａｎｗｅｒｅｇｉｖｅｎ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ１４ａｎｄｓｃａｖｅｒｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｗｅｒｅｄｅ
ｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｈｉｇｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｔｔｈｅ２ｎｄ，４ｔｈ，８ｔｈｈｏｕｒｏｆｔｅｒｉｎｊｕｒｙａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｗｉｔｈｃｏｍｐｕｔｅｒｉｍａｇｅｓｙｓｔｅｍ，ａｎｄｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ
ｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅａｌｓｏｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ａｔｔｈｅｔｈｒｅｅｄｉｆｅｒｅｎｔｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ１４ａｎｄｓｃａｖｅｒｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｏｆｌｉｖｅｒ
ｏｆＬＰＳｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｃｒｅａｓｅａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｔｈｅｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜
００１）．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅｇｒｏｕｐａｎｄＬｉａｎｇｇｅＳａｎｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｏｓｅｉｎｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐａｎｄ
ｔｈｏｓｅｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＬＰＳｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐ，ｔｈｏｓｅｏｆｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅｇｒｏｕｐａｎｄＬｉａｎｇｇｅＳａｎｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｇｒｏｕｐｓ
ｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＜００１），ｅｓｐｅｃｉａｌｙｔｈａｔｏｆＬｉａｎｇｇｅＳａｎｈｉｇｈｄｏｓｅｇｒｏｕｐ．Ｌｉｖｅｒｃｅｌｓｓｈｏｗｅｄｖａｃｕｏｌｅｃｈａｎｇｅ．Ｃｈａｎｇｅｓｏｆ
ＣＤ１４ａｎｄＳＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗｅｒｅｐａｒａｌｅｌｅｄｗｉｔｈｔｈｅｓｅｖｅｒｉｔｙｏｆｌｉｖｅｒｄａｍａｇｅｓｏｆｔｈｅｍｉｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＬｉａｎｇｇｅＳａｎｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｅｔｈｅｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ
ｏｆＣＤ１４ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｃａｖｅｒｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎａｄｏｓａｇｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒａｎｄａｌｓｏａｌｅｖｉａｔｅｔｈｅｄａｍａｇｅｓｏｆｌｉｖｅｒ
ｉｎｄｕｃｅｄｂｙＬＰＳ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＬｉａｎｇｇｅＳａｎ；ｋｕｐｆｅｒｃｅｌｓ；ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙ；ＣＤ１４；ｓｃａｖｅｒｇｅｒｒｅｃｅｐｔｏｒ
［责任编辑 方文贤］
［收稿日期］ ２００４０４１２
［基金项目］ 上海市卫生局中医药科研基金项目（２００２Ｑ００３）
［通讯作者］ 原爱红，Ｔｅｌ：（０２１）５６０５１０８０，Ｆａｘ：（０２１）５６０５０５０２，
Ｅｍａｉｌ：ａｉｈｏｎｇｙｕａｎｘｎ００＠ｙａｈｏｏｃｏｍｃｎ
桑叶中糖苷酶抑制活性组分的筛选
原爱红，马 骏，蒋晓峰，李 素
（同济大学 附属同济医院，上海 ２０００６５）
［摘要］ 目的：筛选桑叶中具有糖苷酶抑制活性的组分。方法：采用柱色谱法将桑叶水提物进行分离，并利用
体外糖苷酶抑制模型对活性部位进行跟踪研究，进一步通过小鼠体内糖耐量实验验证其效果。结果：体外和体内
实验结果表明桑叶提取物中生物碱、黄酮、多糖等部位均有糖苷酶抑制活性，其中生物碱组分活性最强。结论：桑
叶的降糖作用与各组分的糖苷酶抑制活性有关。
［关键词］ 桑叶；生物碱；糖尿病；糖苷酶
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０３０２２３０５
桑叶是常用的中药，味苦、甘，性寒，归肺、肝经；
功能祛风清热，凉血明目。治风温发热，头痛，目赤，
口渴，肺热咳嗽等［１］。近年来国内外很多研究结果
表明桑叶具有很好的降血糖功能，在临床常用桑叶
或桑叶为主的处方治疗糖尿病，并取得满意效
果［２］，现代药理研究证明桑叶具有抑制血糖上升，
可防治和治疗糖尿病［３６］，有关桑叶降糖活性的机理
研究认为与桑叶中的多羟基生物碱的α糖苷酶抑制
作用有密切关系［７］，而桑叶其他成分的降糖机理研
究较少。为了进一步明确桑叶降糖活性的有效部位
和作用机理，本研究用柱色谱分离法从桑叶水提物
中分离出不同有效组分，利用体外糖苷酶抑制剂微
量模型筛选具有α糖苷酶抑制活性的有效组分，并
探讨了有效组分对小鼠糖耐量的影响。
１ 材料与方法
１１ 材料
桑叶购自上海潼涵春药店，由第二军医大学药
学院生药教研室鉴定 ＭｏｒｕｓａｌｂａＬ。ＡＢ８大孔树
脂，天津南开大学化工厂；７３２强酸性离子交换树
·３２２·
第３１卷第３期
２００６年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３１，Ｉｓｓｕｅ ３
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００６