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秦岭铁线莲根中齐墩果酸的含量测定



全 文 :和需要吸收的 O2总量为 092~2105mL。迅速生
长的管花肉苁蓉周围 O2的最低含量均在 19%以
上,随着 O2含量的降低,管花肉苁蓉生长缓慢甚至
出现腐烂。在一定类型土壤上,由于水分含量(液相
比)升高,造成气相比降低,土壤的气体交换能力随
之下降,管花肉苁蓉周围 O2不能得到及时补充,从
而影响管花肉苁蓉的生长。华北平原盐碱地区,降
水量显著高于新疆,且降水主要集中在夏季,如何采
取相应的栽培技术措施,控制土壤水分含量,创造管
花肉苁蓉生长的适宜土壤三相比和提高土壤 O2含
量,保证华北平原管花肉苁蓉正常生长,这一问题有
待进一步探讨。
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[责任编辑 张宁宁]
秦岭铁线莲根中齐墩果酸的含量测定
徐 涛1,万德光2
(1浙江理工大学,浙江 杭州 310018;2成都中医药大学,四川 成都 610075)
[收稿日期] 20050620
[通讯作者] 徐涛,Email:xutao1998cn@163com
秦岭铁线莲 ClematisobscuraMaxim为毛茛科铁
线莲属植物[1],据作者调查,在四川西北部、甘肃南
部等地民间一直在作为威灵仙使用,其地上茎在四
川当地名为“木通藤”,也可作为川木通用,但国内外
却没有关于秦岭铁线莲药用的记载及报道,有关它
的化学成分及药理作用的研究也未见报道。因此作
者对秦岭铁线莲根进行了化学成分分离提取、含量
测定等工作,由于秦岭铁线莲的主要有效成分为三
萜皂苷,其中三萜皂苷又以齐墩果皂苷为主,其结构
属于末端吸收,常规高效液相法测定紫外检测较为
困难,故此选择用双波长薄层扫描法测定秦岭铁线
莲根中齐墩果酸的含量,并与四川野生威灵仙作了
比较[2],为今后秦岭铁线莲的合理药用提供依据。
1 仪器与试剂
岛津 CS930薄层扫描仪,美国 Drummond微量
点样器。齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定
所提供。所用化学试剂均为分析纯。
秦岭铁线莲采自四川省茂县及汶川县,根阴干
备用。由万德光教授鉴定为秦岭铁线莲 Cobscu
ra,威灵仙采自四川峨眉山万山一带,由万德光教授
鉴定为毛茛科铁线莲属植物威灵仙 Cchinensis。
2 方法与结果
21 色谱及扫描条件 硅胶 G预制板,110℃活化
05h,展开剂环己烷醋酸乙酯(7∶3),上行展开,展
距10~12cm,显色剂10%硫酸乙醇,105℃烘8min
显色后,选择λS=530nm,λR=680nm进行测定。
22 样品溶液制备 取药材粉(过40目筛)4g,加
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第30卷第17期
2005年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 17
September,2005
40mL石油醚冷浸脱脂24h,过滤。加入1mol·L-1
HCl40mL,水浴加热回流水解 4h,放冷后加入 40
mL氯仿续继回流 1h,冷却后在分液漏斗中分离氯
仿层,残液用30mL氯仿萃取 2次,合并氯仿层,回
收氯仿至1~2mL,移入4mL量瓶中定容。
23 标准曲线制备 精密称取00345g干燥至恒
重的齐墩果酸对照品,置入 100mL量瓶中,加氯仿
稀释致刻度,摇匀即得 03450μg·μL
-1对照品液,
精密吸取齐墩果酸对照液 1,2,3,4,5,6μL点于同
一块硅胶 G板上,按条件展开,显色后扫描,测定斑
点的面积积分值。经回归分析,计算得回归方程
Y=240811X+442013,r=09990。
24 稳定性试验 精密吸取对照品溶液 1,3μL,
样品溶液2,4μL,交叉点于同一块硅胶 G板上,依
法展开显色,扫描测定,以外标两点法计算样品中齐
墩果酸含量,每隔30min测定1次,结果显示测定值
在2h内稳定,RSD31%。
25 重复性试验 取四川茂县产样品 5份,依法
扫描测定,平均含量为0043%,RSD41%,表明重
复性良好。
26 精密度试验 取对照品液,在同一块硅胶 G
板上依次点5点,各3μL,按上述条件层析,扫描测
定各斑点积分值。RSD25%,表明具有较好的精
密度。
27 加样回收率试验 精密吸取已知含量的样品
5份,分别精密加入对照品 138mg,按供试品溶液
制备和样品测定条件测定,测得加样回收率为
994%,RSD24%。
28 样品测定 精密吸取对照品溶液 1,3μL,供
试品溶液2,4μL,交叉点于同一硅胶 G板上,按上
述条件展开显色,扫描测定,以外标两点法测定样品
中齐墩果酸的含量,结果见表1。
表1 样品中齐墩果酸含量(n=3)
植物名 产地来源 含量/% RSD/%
秦岭铁线莲 四川茂县 0045 27
秦岭铁线莲 四川汶川县 0013 31
威灵仙 四川峨眉山 0145 22
3 讨论
31 秦岭铁线莲中所含皂苷由于成分复杂,结构属
于末端吸收,因此选择用薄层扫描法测定齐墩果酸
的含量,该方法灵敏度、重复性、稳定性均好,可作为
秦岭铁线莲药材质量控制及品质评价的参考依据。
32 水解酸度、水解时间选择试验结果显示,以 1
mol·L-1HCl40mL,加热回流4h为最佳水解条件。
33 秦岭铁线莲仅根据地上部分易被鉴定为黄花
铁线莲 Cintricata,所以在川、甘等地民间将其作为
威灵仙药用时易被误认为是黄花铁线莲,秦岭铁线
莲、威灵仙及黄花铁线莲地上部分较难区分,但植物
整体区别较大。黄花铁线莲据文献报道[3]可作为威
灵仙用,但据作者实地调查及查阅甘肃、四川等地标
本认为系标本鉴定有误,黄花铁线莲在甘肃南部尚
未发现被当作威灵仙使用的情况,而黄花铁线莲有
小毒,应加以注意。
34 本研究首次报道了秦岭铁线莲的药用状况,但
由实验结果可知秦岭铁线莲齐墩果酸含量要比野生
威灵仙低,能否作为威灵仙使用尚需进一步研究。
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[责任编辑 张宁宁]
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[责任编辑 古云侠]
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第30卷第17期
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ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 17
September,2005