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Experimental study on the antiviral mechanism of Ceratostigma willmattianum against herpes simplex virus type 1 in vitro

藏药紫金标抗HSV-1的作用机理研究



全 文 :u . Ινστιτυτε οφ Βασιχ Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Αχαδεµψ οφ Μιλιταρψ Μεδιχαλ Σχιενχεσ, Βειϕινγ tss{xs , Χηινα ;
v . Ξιψυαν Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµψ οφ Χηινεσε Τραδιτιοναλ Μεδιχινε , Βειϕινγ tsss|t , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼ ·«¨ ¶¨µ∏° ³µ²·¨²°¨²©µ¤· ±¨§²·²¬¨ °¬¤·µ¨¤·¨§¥¼ ©¬ªº²µ·µ²²·kƒ• l q Μετηοδ : ׫¨ §¬©©¨µ¨±¦¨¶²©
¶¨µ∏° ³µ²·¨²°¨¤°²±ªµ¤·¶·µ¨¤·¨§º¬·« ¬¯³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ k°≥l o ƒ• o°≥ n ƒ• ¤±§¶¤¯¬±¨ µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §¥¼ ·º²2§¬° ±¨·¬²±¤¯
¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶ku⁄∞l ¤¶¶¤¼q Ρεσυλτ : ׫¨ √²¯∏° ¶¨²©¶¬¬·¨ ±¨ ¶¨µ∏° ³µ²·¨¬±¶k¬°µl ¬± °≥ ¬±§∏¦¨§2 ±¨§²·²¬¨ °¬¤ªµ²∏³ º µ¨¨ ªµ¨¤·¯¼ ¦«¤±ª¨§
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¦µ¨¤¶¨§q Χονχλυσιον : ׫¨ °²¯ ¦¨∏¯¤µ¥¤¶¬¶²©·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦ ©¨©¨¦·²©ƒ• ²± ±¨§²·²¬¨ °¬¤ °¬ª«·¥¨ ·«µ²∏ª«·«¨ µ¨ª∏¯¤·¬²± ²©¬°µt oy oz o{ o| o
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°≥ q
[ Κεψ ωορδσ] ©¬ªº²µ·µ²²·~ ±¨§²·²¬¨ °¬¤~¶¨µ∏° ~³µ²·¨²°¨ ≈责任编辑 方文贤 
藏药紫金标抗 ‹≥∂2t的作用机理研究
陈 恬t o贾文祥t 3 o杨发龙t o谢 轶t o杨维青t o曾 蔚t o张再容t o
李 晖u o蒋思萍u o央 珍u o陈金瑞u
kt q四川大学 华西基础医学与法医学院 微生物学教研室 o四川 成都 ytsswt ~
u q西藏高原生物研究所 o西藏 拉萨 {xsssul
≈摘要  目的 }探讨紫金标抗单纯疱疹 ´型病毒k‹≥∂2tl的作用及机理 o为进一步开发该药提供理论依据 ∀方
法 }采用不同剂量的紫金标作用于适量 ‹≥∂2t感染的 ∂ µ¨²细胞 o以 xs h组织细胞感染量k×≤Œ⁄xsl o细胞病变效应
k≤°∞l o ××法和核酸分子杂交作为评价指标 ∀结果 } ××法测得紫金标的 xs h抑制浓度kŒ≤xsl为 u| qwy °ª#pt o
xs h中毒浓度k×≤xsl 为 t szz °ª#pt o治疗指数k׌l为 vy qxy o结果表明紫金标有明显抑制 ‹≥∂2t的作用 o其作用强
度和有效时间与药物浓度成正比 ∀紫金标无直接灭活 ‹≥∂2t的作用 o也不能影响病毒的释放 ~但可干扰 ‹≥∂2t对
宿主细胞的吸附 ∀不同浓度的紫金标能明显抑制 ‹≥∂2tª⁄基因复制和 °• ‘„表达 ∀结论 }紫金标具有显著的抗
‹≥∂2t的作用 o能抑制 ‹≥∂2t对宿主细胞的吸附以及抑制 ‹≥∂2tª⁄基因复制与转录 ∀
≈关键词  紫金标 ~单纯疱疹病毒 Œ型 ~××法 ~斑点杂交 ~‘²µ·«¨µ±杂交
≈中图分类号  • u| ~• u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls|2s{{u2sx
紫金标是蓝雪科 °¯ ∏°¥¤ª¬±¤¦¨¤¨ 紫金标属 Χερ2
ατοστιγ µα小灌木≈t  o容易人工栽培 o含有多种有益成
分 o分布于我国西南地区 o其中西藏自治区资源最为
丰富 ∀西藏自治区高原生物研究所已从紫金标中分
≈收稿日期  ussv2sv2s|
≈基金项目  西藏自治区科委重点项目kussv2tu2wl
≈通讯作者  3贾文祥 oר¯ }ksu{l{xxstuyz oƒ¤¬}ksu{l{xxsvusw o
∞2°¤¬¯}­¬¤º ±¨¬¬¤±ªƒ ¶¬±¤q¦²°
离出 uv种化合物 o其中蓝雪醌k³¯∏°¥¤ª¬±l和蓝雪酸
k³¯∏°¥¤ª¬¦¤¦¬§l为主要成分 o在抗菌方面表现出了
较强的作用≈u  o但国内外均未见其抗病毒方面的研
究 ∀作者以 ∂ µ¨²细胞作为体外筛选细胞模型检测
不同剂量西藏紫金标对 ‹≥∂2t的抑制作用 o发现西
藏紫金标浓度达 yux °ª#pt时能完全抑制感染
‹≥∂2t的 ∂ µ¨²细胞产生病变 o而对 • ≥∂ 和 ≤∂…v无
明显抑制作用 ∀由此初步得到藏药紫金标具有抗
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第 u|卷第 |期
ussw年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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‹≥∂2t作用的结论 o并进行体外实验研究其作用机
理 o以期为紫金标作为药物开发开拓新的应用领域 ∀
1 材料与方法
1 q1 试剂和细胞株
紫金标流浸膏由西藏高原生物研究所提供 o每
毫升含生药 t ª∀以双蒸水配成 ts ª#pt母液 o过滤
除菌 o分装 ow ε 保存 o临用时以 • °Œtyws培养基稀
释至所需浓度 ∀ • °Œtyws干粉培养基 o美国 ŠŒ…≤’
公司 ~胰酶 o„∞• ≥≤’ 公司 ~新生牛血清 o‹¼¦¯²±¨ 公
司 ~四甲基偶氮唑盐k××l o≥¬ª°¤公司 ~×µ¬½²¯ 试剂 o
¬©¨ × ¦¨«±²¯²ª¬¨¶公司 ∀uw孔及 |y孔培养板为 …⁄公
司产品 ∀阿昔洛韦k¤¦¼¦¯²√¬µo„≤∂l为湖北潜江制药
厂产品 o批号 ussvsxs| o配成 t ª#pt溶液 ow ε 保存
备用 ∀小量组织r细胞基因组 ⁄‘„抽提试剂盒 !°≤•
试剂盒和 °≤• 产物纯化试剂盒购自上海华舜公司 ∀
地高辛 ⁄‘„ 检测试剂盒为德国 • ’≤‹∞公司产品 ∀
非洲绿猴肾细胞 ∂ µ¨²细胞株由本室保存 ∀
1 q2 病毒
单纯疱疹病毒 t型k‹≥∂2tl≥ww株由中国药品
生物制品检定所提供 o使用前在 ∂ µ¨²细胞中连传 v
代 o激活病毒 ∀取上述制备好的毒株 o做 ts倍系列
稀释 otsp t ∗ tsp ts ∀将各稀释度的毒株接种于 ∂ µ¨²
细胞 o各 y个复孔 o同时设阴性对照 ∀以细胞病变法
检测病毒滴度 o细胞病变k≤°∞l程度可分为从 n ∗
8 o具体划分按文献≈v 方法进行 ∀
1 q3 药物的细胞毒性测定
参考 ²¶°¤±± ≈w  建立的 ××法 o将 ∂ µ¨²细胞经
胰酶消化后 o以含 ts h小牛血清的 • °Œ tyws培养
液制成 u ≅ tsx#°pt细胞悬液 o加入 |y孔培养板中 o
每孔 uss ˏouw ∗ w{ «后弃生长液 o每孔加入 txs ˏ
不同稀释度的紫金标kx ou qx ot qux ª#pt oyux ovtu o
txy oz{ ov| °ª#ptl o每个稀释度设 y个复孔 o置 x h
≤’u孵箱中 vz ε 培养 v §o每天观察细胞病变 ov §后
每孔加入 x ª#pt ×× us ˏo于 vz ε 培养箱中培养
w «o离心弃上清后每孔加二甲基亚砜 uss ˏo微量振
荡器振荡 x °¬±o酶标读数仪比色k波长 xzs ±°l o测
吸光度 Α值并计算药物对 ∂ µ¨²细胞的抑制率 ∀ ∂ µ¨²
细胞存活率k h l €药物组 Α值r细胞对照组 Α值 ≅
tss h o抑制率 k h l € tss h p 存活率 ∀按 • ¨¨§2
∏¨±¦«方法计算半数中毒浓度k×≤xsl ∀
1 q4 药物抗病毒的药效学试验k××法l
按文献≈x ××法分析药物的抗 ‹≥∂2t作用 o设
病毒对照 !细胞对照和 s qt h ⁄≥’阴性对照 ∀酶标
读数仪比色k波长 xzs ±°l o测吸光度 Α值后 o按
• ¨¨§2∏¨±¦«方法计算细胞存活率 !药物半数抑制病
毒浓度kŒ≤xsl o以治疗指数k׌l评价药物抗 ‹≥∂2t的
效果 o׌€ ×≤xsrŒ≤xs ∀
1 q5 核酸分子杂交
1 q5 q1 核酸探针的设计与制备 根据 Š¨ ±¥¤±®中
‹≥∂2t全基因序列 o以编码 ‹≥∂2t成熟 ª⁄蛋白胞外
区的 ª⁄基因 zy ∗ |sy位为目的片段 o用 ³µ¬°¨ µv软件
设计 相 应 的 °≤• 引 物 o °t } x . ª¦ªª¤·¦¦¤·ª·¦·2
ª·¦ª·¦ªª¦¤¦¦¦v. ~°u }x. ª¦¤¤ª¦·¦·¤ª·ªª¤¤¦·ªª¦¦¦·¦v. o引
物由上海申能博采公司合成 ∀用小量组织r细胞基
因组 ⁄‘„抽提试剂盒从感染细胞中提取病毒基因
组 ⁄‘„为模板在 tss ˏ反应体系中进行 °≤• 反应 o
反应条件为热启动后 |w ε 变性 ys ¶oyu ε 复性 ys
¶ozu ε 延伸 ys ¶o循环 vs次 o最后 zu ε 延伸 z °¬±∀
°≤• 产物经 °≤• 产物纯化试剂盒纯化后用地高辛
⁄‘„标记与检测试剂盒进行探针标记与检测 ∀
1 q5 q2 ⁄‘„提取与斑点杂交 长成单层的 ∂ µ¨²细
胞ktss °小方瓶l按 t ∗ u ³©∏r细胞接种 ‹≥∂2t o于
vz ε x h ≤’u 吸附 u «o弃病毒液 o加含有 yux °ª#
pt紫金标的维持液 o当病毒对照组的细胞病变达
zx h以上时收获细胞 o用小量组织r细胞基因组 ⁄‘„
抽提试剂盒从各瓶细胞中抽提 ⁄‘„ o设细胞对照 !
病毒对照和 „≤∂ 对照 ∀取相同含量的 ⁄‘„kx Λªl进
行倍比稀释后用多孔加样器点于尼龙膜k±¬¤ª¨±l上 o
然后按地高辛 ⁄‘„ 标记与检测试剂盒进行斑点杂
交及显色反应 ∀
1 q5 q3 • ‘„ 提取与 ‘²µ·«¨µ± 杂交 长成单层的
∂ µ¨²细胞ktss °小方瓶l按 t ∗ u ³©∏r细胞接种
‹≥∂2t o于 vz ε x h ≤’u吸附 u «o弃病毒液 o加含有
yux otxy oz{ ows °ª#pt紫金标的维持液 o当病毒对
照组的细胞病变达 zx h以上时收获细胞 o用小量组
织r细胞基因组 ⁄‘„抽提试剂盒从各瓶细胞中抽提
⁄‘„ o设细胞对照 !病毒对照 ∀用 ×µ¬½²¯ 试剂按说明
书提取总 • ‘„ ∀将 us Λª总 • ‘„在甲醛变性胶中电
泳后转移到尼龙膜上 o按文献≈y 操作 o杂交及显色
反应按地高辛 ⁄‘„标记与检测试剂盒进行 ∀
2 结果
2 q1 病毒毒力 病毒的 ×≤Œ⁄xs为 tsp | qvt ∀即接种
滴度为 tsp | qvt的病毒 s qt °r孔 o可使 xs h细胞发
生明显病变 ∀
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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2 q2 紫金标对 ∂ µ¨²细胞的毒性作用 以不引起细
胞病变的药物稀释度作为对 ∂ µ¨²细胞的最大无毒
浓度 ×≤s ∀紫金标的 ×≤s为 yux °ª#pt o„≤∂ 的 ×≤s
为 xs °ª#pt ∀ ×× 法算出紫金标的 ×≤xs为 t szz
°ª#pt o„≤∂ 的 ×≤xs为 vvs °ª#pt ∀
2 q3 紫金标抗 ‹≥∂2t药效的实验结果
2 q3 q1 ××法 结果见表 t ∀表 t中所设正常细胞
对照 Α值为s qyxvt ? s qsu{ o病毒对照 Α值为
s qsv{ ? s qsuv o ‹≥∂2t抑制率 € k药物 Α值 p ‹≥∂2t
对照 Α值lrk 细胞对照 Α值 p ‹≥∂2t对照 Α值l ≅
tss h ∀由实验数据计算得紫金标 Œ≤xs为 u| qwy °ª#
pt o即用 u| qwy °ª#pt的紫金标作用于 ‹≥∂2t攻击
的 ∂ µ¨²细胞 o可保护 xs h不发生明显病变 ~„≤∂ 的
Œ≤xs为 | qtu °ª#pt ∀算得紫金标的治疗指数k׌l为
vy qxy o„≤∂ 的 ׌为 vy qt{ ∀
2 q3 q2 不同时间和不同给药浓度对病毒抑制的影
响 用 |y孔培养板及 ××法 o‹≥∂2t感染率为 t ∗ u
³©∏r细胞 ∀于感染前 t «及感染后 s ot ou ow o{ otu ouw
«分别加不同浓度紫金标 o实验重复 v次 o结果见图
t o显示各浓度药物于感染前 t «及感染后 uw «加药
均无抑制病毒活性 o而ws°ª#pt的药物于感染后
s ∗ u «加药有抑制活性k Π s qsxl o其中 txy ∗ yux
°ª#pt的药物于感染后s ∗ tu«均有抑制效应k Π
s qsxl ∀
表 t 紫金标抑制 ‹≥∂2t致细胞病变作用k××法l k ξ ? σl
紫金标
药物浓度r°ª#pt Α 病毒抑制率r h
„≤∂
药物浓度r°ª#pt Α 病毒抑制率r h
yux s qyw{ v ? s qsvy || quu wss s qyw| { ? s qsx| || qwy
vtu s qyvz t ? s qswx |z qws uss s qyuu x ? s qst{ |x qsu
txy s qwz{ { ? s qsvt zt qyy tss s qyss v ? s qsvz |t qwu
z{ s qwvv u ? s qsxt yw qux xs s qxyz t ? s qswu {y qsu
ws s qv{u w ? s qss| xx q|| ux s qwxy v ? s qsvv y{ qst
us s qu|{ { ? s qswt wu qws tu qx s qvzz { ? s qsxy xx quw
ts s quxw w ? s qsx| vx qt{ y qux s qvsy { ? s qsxt wv qzs
图 t 紫金标对 ‹≥∂2t的抑制曲线
与 ⁄≥’阴性对照组有显著性差异 o3 Π s qsx
2 q4 紫金标抗 ‹≥∂2t作用机理
2 q4 q1 紫金标对病毒的直接作用 取不同稀释度
的紫金标各 tss ˏ分别与 ‹≥∂2t病毒原液 tss ˏ
混合 ovz ε 吸附 u «o同时设阴性对照和阳性对照 ∀
各管病毒依次 ts倍稀释 o用 |y孔单层 ∂ µ¨²细胞板
滴定各管病毒 ×≤Œ⁄xs ∀结果各管 ×≤Œ⁄xs相同 o说明紫
金标对 ‹≥∂2t无直接作用 ∀
2 q4 q2 紫金标抑制 ‹≥∂2t对 ∂ µ¨²细胞的吸附 不
同浓度紫金标加入已长成单层的 uw孔 ∂ µ¨²细胞板 o
每孔加入 uss ˏo于 x h ≤’u孵箱中 vz ε 作用 v «o弃
药液 o用 ⁄2‹¤±®¶液洗 u遍 o加入 tss ˏ适当稀释病
毒液 ovz ε 吸附 u «o吸出各孔病毒液 o以 °ƒ˜法滴定
病毒 o结果如图 u所示 ∀yux °ª#pt紫金标加药组培
养液平均病毒残留量为kwzss qss ? tss qssl ³©∏#
°pt o明显高于未加药组 kwtvv qvv ? xz qzw ³©∏#
°ptl o Π s qsx o可见 o用 yux °ª#pt紫金标预处理
细胞 o可使吸附接毒后培养液病毒残留量明显增加 o
显著抑制 ‹≥∂2t对 ∂ µ¨²细胞吸附 o而 z{ °ª#pt紫金
标加药组培养液平均病毒残留量虽高于未加药组却
无统计学差异 ∀
图 u 紫金标处理对培养液病毒残留量的影响
k ξ ? σ, ν € wl
2 q4 q3 紫金标对病毒释放的影响 不同稀释度的
紫金标加入已感染病毒的 uw孔细胞板 o每一浓度 w
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孔 o置 x h ≤’u孵箱中 vz ε 培养 ∀待病毒对照病变
达 7 时 o终止培养 o吸出每孔培养液 op zs ε 冻存备
滴定培养液内病毒 o细胞亦冻存 ∀用 ≤°∞法滴定病
毒 o细胞内病毒滴定前进行 v次冻融 o在所用浓度范
围内 o紫金标对病毒释放未见明显影响 o用药组细
胞内的病毒与细胞内外全部病毒 ×≤Œ⁄xs的比率与对
照组无明显差异k见表 ul ∀
表 u 紫金标对病毒释放的影响
分组
浓度
r°ª#pt
培养液病毒
滴度 ×≤Œ⁄xs
细胞内病素
滴度 ×≤Œ⁄xs
胞内与全部病毒
×≤Œ⁄xs比率r h
紫金标 s w qx ≅ tsz z q{ ≅ ts{ |y q{|
z q{ w qv ≅ tsz y q{ ≅ tsz |w qsx
txy w qs ≅ tsz z q{ ≅ ts{ |x qtu
vtu v qv ≅ tsz x qv ≅ ts{ |w qtw
yux v q{ ≅ tsz y qs ≅ ts{ |w qsw
2 q4 q4 紫金标抑制 ‹≥∂2t ª⁄基因复制 制备的
‹≥∂2t ª⁄ ⁄‘„探针浓度达 x qs ≅ tsp x ª#pt ∀斑点
杂交结果如图 v o用 Š∞2°• ’ „±¤¯¼½¨ µ图像分析软件
算出每一组斑点的平均吸光度值 o由此可得出紫金
标对 ‹≥∂2t ª⁄基因复制的抑制率 o如表 v所示 ∀
图 v 斑点杂交结果
t q„≤∂ 对照组 ~u q紫金标组 ~
v q细胞对照组 ~w q‹≥∂2t对照组
表 v 紫金标对 ‹≥∂2t ª⁄基因复制的抑制效果
组别 Α 抑制率r h
紫金标组 uv qx {| qty
„≤∂ 对照组 tx qz |{ qux
细胞对照组 tw qu
‹≥∂2t对照组 tss
注 }抑制率 € t p k实验组 Αp细胞对照组 Αlrk‹≥∂2t对照组 p
细胞对照组 Αl
2 q4 q5 紫金标抑制细胞核糖体转录 ‹≥∂2t ª⁄基因
°• ‘„ ‘²µ·«¨µ±杂交结果如图 w o用 Š∞2°• ’ „±¤2
¼¯½¨ µ图像分析软件算出除去背景后每一组杂交条带
的平均吸光度值 o由此可得出紫金标对细胞核糖体
转录 ‹≥∂2t ª⁄基因 °• ‘„的抑制率 o如表 w所示 ∀
表 w 紫金标对 ‹≥∂2t ª⁄基因 °• ‘„表达的抑制效果
组别 剂量r°ª#pt Α 抑制率r h
紫金标 ws txz q{wt xy qt|
txy tut quxu yy qvx
vtu z| qzyy t zz q{y
yux y q{tv s{ |{ qtt
细胞对照组 s
‹≥∂2t对照组 vys qu{z
图 w ‘²µ·«¨µ±杂交结果
¤q细胞对照组 ~¥q‹≥∂ p t对照组 ~¦q紫金标 ws °ª#pt ~
§q紫金标 txy °ª#pt ~¨ q紫金标 vtu °ª#pt ~©q紫金标 yux °ª#pt
3 讨论
单纯疱疹病毒 Œ型k‹≥∂2tl 是一种在人群中引
起广泛感染的 ⁄‘„病毒 o健康成人中约有 |s h感染
‹≥∂2t≈z  o血清 ‹≥∂ 抗体阳性者约占全世界人口总
数的 zs h o超过 trv的人有复发性 ‹≥∂ 感染≈{  ∀本
实验以 ‹≥∂2t攻击 ∂ µ¨²细胞为细胞模型 o采用 ××
法研究了紫金标流浸膏体外抗 ‹≥∂2t的药物效应 o
测得紫金标的Œ≤xs为 u| qwy °ª#pt o×≤xs为 t szz °ª#
pt o׌为 vy qxy ~„≤∂ 的 Œ≤xs为 | qtu °ª#pt o×≤xs为
vvs °ª#pt o׌为 vy qt{ ∀由实验结果看 o紫金标对
∂ µ¨²细胞的毒性比国际公认的抗 ‹≥∂2t 药物 „≤∂
小得多 o而抑制 ‹≥∂2t的治疗指数与 „≤∂ 无显著性
差异 ~其最大无毒浓度 yux °ª#pt对 ‹≥∂2t的抑制
率达到 || quu h ~紫金标半数中毒剂量 ×≤xs为 tszz
°ª#pt比 „≤∂ 的 ×≤xs高出 v倍多 o可见紫金标具有
高效低毒的特点 ∀
以不同剂量的紫金标作用于病毒复制周期的吸
附和释放阶段 o结果显示 }紫金标无直接灭活 ‹≥∂2t
作用 ~紫金标可干扰 ‹≥∂2t向宿主细胞吸附 o但不影
响病毒的释放 ∀紫金标对 ∂ µ¨²细胞的无毒浓度范围
内 o浓度越高 o抗病毒作用越强 otxy ∗ yux °ª#pt的
药物于感染后 s ∗ tu «加药均有抑制效应 ows °ª#
pt的药物仅于感染后 s ∗ u «加药有效 ∀
已知 ‹≥∂2t糖蛋白 ª⁄与病毒吸附有关 ∀t||y
年 ²±·ª²°¨ µ¼等≈| 证实了易感细胞表面特异性受体
‹∂∞k«¨µ³¨¶√¬µ∏¶ ±¨·µ¼ °¨ §¬¤·²µl直接与 ª⁄特异结合
介导 ‹≥∂ 进入宿主细胞 ∀本研究设计并制备了对应
于 ‹≥∂2t糖蛋白 ª⁄基因序列的 ⁄‘„ 探针 o进行斑
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点杂交和 ‘²µ·«¨µ±杂交 o结果表明不同浓度的紫金标
均可明显抑制 ‹≥∂2t 糖蛋白 ª⁄基因复制 o影响
‹≥∂2t糖蛋白 ª⁄基因的转录 o进一步从分子水平直
接证明紫金标可抑制 ‹≥∂2t病毒的生物合成从而抑
制病毒合成 ∀
总之 o紫金标抗 ‹≥∂2t作用的机制包括 }抑制
病毒向细胞吸附 ~抑制感染细胞中 ‹≥∂2t糖蛋白 ª⁄
基因的复制和转录 ∀目前正进一步深入研究和探讨
紫金标抑制 ‹≥∂2t的作用机理 ∀
目前临床应用的抗病毒药物中大多为核苷类衍
生物 o如 „≤∂ 等 o其作用靶点为病毒 ⁄‘„ 聚合酶 ∀
它们以酶反应底物类似物的形式与正常底物竞争 o
直接降低或阻断病毒 ⁄‘„聚合酶活性≈ts  o其共同缺
点是易产生耐药毒株 o抗病毒谱窄 o毒副作用大 o价
格高昂或药理特性不理想 ∀因此研究抑制病毒基因
复制 !转录及转译等多环节的药物和制剂是当今国
内外开发抗病毒药物的热点 ∀由于紫金标为纯天然
中药k藏药l制剂 o较合成药具有低毒高效的优点 o又
兼有抗病毒和抗菌双重作用 o在发展新型抗病毒药
物中具有重要意义 ∀因此紫金标可能作为一种高效
低毒的抗病毒药物 o值得进一步研究和开发 o将具有
广阔的应用前景 ∀
≈参考文献 
≈t  李 恒 o郭辉军 o刀志灵 q高黎贡山植物 q北京 }科学出版社 o
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≈u  贾文祥 o莫正纪 o李 晖 o等 q西藏紫金标药物的资源生态及其
药效的初步研究 qussu年中医药现代化国际科技大会论文摘
要集 ok中华人民共和国科技部 o卫生部 o药品监督管理局主办 o
成都 oussu qt|s q
≈v  傅传华 q病毒学实用实验方法 q济南 }山东科学技术出版社 o
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≈y  q萨姆布鲁克 o ⁄ • 拉塞尔 q分子克隆实验指南 q上册 q第三
版 q北京 }科学出版社 oussu qxws q
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Εξπεριµενταλστυδψ ον τηε αντιϖιραλ µεχηανισµ
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(t . ∆επαρτµεντ οφ Μιχροβιολογψ, Ωεστ Χηινα Σχηοολ οφ Πρεχλινιχαλ ανδ Φορενσιχ Μεδιχινε , Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα ;
u . Τιβετ Πλατεαυ Ινστιτυτε οφ Βιολογψ, Ληασα {xssst , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ¤±·¬√¬µ¤¯ ©¨©¨¦·¤±§° ¦¨«¤±¬¶°¶²©·«¨ ¬¯´∏¬§ ¬¨·µ¤¦·©µ²° Χερατοστιγ µα ωιλλµαττιανυµ ¤ª¤¬±¶·«¨µ2
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[ Κεψ ωορδσ] Χερατοστιγ µα ωιλλµαττιανυµ ; ‹≥∂2t ~ ×× ~§²·¥¯²·~‘²µ·«¨µ± ¥¯²·
≈责任编辑 方文贤 
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第 u|卷第 |期
ussw年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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