全 文 :#技术交流#
一种快速制备永久中药材切片的方法
宗玉英t 3 o车镇涛
k香港中文大学 中医学院 o香港 新界 沙田l
≈收稿日期 ussw2sw2sx
≈通讯作者 3 宗玉英 o ר¯ }kss{xulvtyvwt|{ oƒ¤¬}kss{xul
uysvzusv o∞2°¤¬¯}½²±ª¼∏¼¬±ª tyv1¦²°
长期以来 o中药材永久切片多采用石蜡切片法制备 o该
方法具有试验周期较长 o接触二甲苯等有机溶剂次数较多等
缺点 o笔者对根 !根茎 !块茎 !茎 !叶类干燥药材进行适当处理
后 o用冷冻切片法切片 o然后采用直接对切片染色 o脱水 o封
存的方法制备药材永久切片 o取得良好的效果 ∀
1 材料和仪器
干燥药材牡丹皮 !黄柏k关黄柏及川黄柏l !黄芪k蒙古黄
芪及膜荚黄芪l !泽泻 !黄连k味连l !川升麻 !白芍 !赤芍 !防
风 !广金钱草 !牛膝 !木香k每个品种 y批2ts批 o均为5中国药
典6usss年版一部收载品种 o分别由中国药品生物制品检定
所鉴定l ∀ ≥∏³¨µƒµ²¶·ο °¯ ∏¶载玻片 ux °° ≅ zx °° ≅ t1s °°
k∞∞2≥∞ o ∞ ≠ l ~ 盖玻片 uu °° ≅ vu °°
k∞∞2≥∞ o∞ ≠l ~冷冻用包埋介质 ≤× ≤²°2
³²∏±§k׬¶¶∏¨2× ®¨ο o≥ o ≥l ∀冷冻切片机 k≥«¤±§²±
¦µ¼²·²°¨o≥¥us∞o׫¨µ°² ∞¯ ¦¨·µ²± ≤²µ³²µ¤·¬²±l
2 方法
211 药材处理 选择需切片药材 o湿润软化 o或浸入水中使
软化 o用利刀切成直径 s1x ∗ t1x ¦° o长 t ¦° 左右的小块 o备
用 ∀
212 冷冻切片 软化好的药材置铝纸做成的模子内 o加入
冷冻用包埋介质 o冷冻 o切片 o将切片贴于载玻片 o滴加少量
稀甘油ks1x ∗ t滴l ∀
213 永久片制备 用 xs h乙醇滴加在切片上约 x °¬±o移入
番红乙醇液中染色 o或直接滴加番红乙醇液于黏性差的样品
上染色 x °¬±至 vs °¬±o依次在载玻片上滴加 ys h o{s h o|x h
乙醇液中 o每级洗涤 w ∗ x次 o滴加固绿溶液进行二重染色
s1x ∗ u °¬±后 o分别依次滴加 |x h 乙醇洗涤 v ∗ x 次 o滴加
tss h乙醇洗涤 u次 o搽干 ~分别移入 tss h乙醇 !乙醇2二甲苯
kuΒtl !乙醇2二甲苯ktΒtl !乙醇2二甲苯ktΒul !二甲苯k两次l
进行脱水和透明k在染色缸内进行l o每级约 u °¬±∀取出染
色透明后的玻片 o按常规方法滴加树胶封藏 ∀
3 结果与讨论
311 结果 干燥药材经软化 o用冷冻切片后直接染色 !脱
水 !透明 o制备部分根 !根茎 !块茎 !茎 !叶 !皮类中药材永久切
片 o取得良好的效果 o制成的部分药材永久片见图 t ∀
图 t 中药材显微横切片图
1 广金钱草茎 ~
1 牛膝 ~≤1 川黄柏 ~⁄1 黄芪
312 讨论
31211 采用本试验方法 o简便 !快速 o效果良好 o可省去常规
石蜡切片法的脱水2透明2浸蜡2包埋2切片2黏片2脱蜡≈t ou 步
骤 o制作时间可从数日减少至几小时 o并且二甲苯等溶剂用
量及使用次数减少 ∀
31212 取材时注意避免用力挤压和撕扯所需切片的药材部
位 o以免破坏组织结构 ∀
31213 切片粘贴后 o为防止切片放置时间长产生裂片 o可在
载玻片上滴加少量的稀甘油 t ∗ u滴 o切片置冰箱数日仍然
保持湿润 ∀
31214 本试验对番红和固绿染色时间≈t ou 进行观察 o染色时
间根据染色液的性质和样品染色程度确定k本试验采用的方
法染色时间较短l ∀木化组织被染成红色即可 o固绿着色不
宜过深 o染色时间过长不易洗涤 ∀
31315 本方法也适用于一些含纤维较多的药材 o例如升麻 !
黄连 !黄柏 ∀
≈致谢 香港中文大学医学院生理系 !解剖系为本研究
提供冷冻切片及显微摄影设备 ∀
≈参考文献
≈t 张贵君 1 中药鉴定学实验 1 北京 }科学出版社 oussu1|v1
≈u 楼之岑 o李胜华 1 中草药性状和显微鉴定法 1 北京 }北京医科
大学 o中国协和医科大学联合出版社 ot||z1tw1
≈责任编辑 王康正
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第 u|卷第 tt期
ussw年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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