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Effect of genistein on human leiomyoma cell in vitro

金雀黄素对离体人子宫肌瘤细胞增殖的影响



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³¤·«º¤¼1 Χονχλυσιον : ¬·²¦«²±§µ¬¤2§¨ ³¨ ±§¨ ±·³¤·«º¤¼¶¤µ¨ ¬±√²¯√ §¨¬± ¶«¬®²±¬±2¬±§∏¦¨§ „vzx2≥u ¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶1
[ Κεψ ωορδσ] ¶«¬®²±¬±~„vzx2≥u ¦¨¯¯¶~¤³²³·²¶¬¶~¦¤¶³¤¶¨ ≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussw2sw2s{
≈通讯作者  3 薛晓鸥 oר¯ }kstsly{z|wwuu2vvts o∞2°¤¬¯}¬¬²tuv
ƒ ¶¬±¤1¦²°
金雀黄素对离体人子宫肌瘤细胞增殖的影响
薛晓鸥t 3 o曹 爽u o魏丽惠t
kt1 北京大学 人民医院 妇科 o北京 tsssww ~
u1 锦州医学院 o辽宁 锦州 tutsstl
≈摘要  目的 }观察不同浓度金雀黄素对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖的影响 ∀方法 }应用 ××比色法研究
金雀黄素对体外培养人子宫肌瘤细胞影响的量效关系和时效关系 ∀结果 }低浓度的金雀黄素对子宫肌瘤细胞无抑
制作用 o达到一定浓度后才表现出抑制作用 o并且呈浓度依赖性和时间依赖性 ∀结论 }金雀黄素对体外培养的子宫
肌瘤细胞具有抑制作用 o可为临床应用金雀黄素提供参考依据 ∀
≈关键词  金雀黄素 ~人子宫肌瘤 ~细胞培养
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltu2ttzz2sv
子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的良性肿
瘤 o生育期妇女发病率高达 ux h ∗ vs h o而且部分
患者伴有贫血 o甚至是重度贫血 ∀传统治疗子宫肌
瘤多主张手术切除子宫或行肌瘤剥出术 o但影响其
身心健康 ∀子宫肌瘤是激素依赖性肿瘤 o尤其与雌 !
孕激素密切相关 ∀金雀黄素是一类植物雌激素 o其
可来源于葛根 !大豆等植物中 o它发挥雌激素和抗雌
激素双相调节作用取决于其剂量和受试对象本身的
激素代谢状态≈t ou  ∀本研究旨在观察金雀黄素对体
外培养的子宫肌瘤细胞的作用 o为临床治疗子宫肌
瘤提供理论依据 ∀
1 材料和方法
111 主要试剂和仪器设备
金雀黄素k≥¬ª°¤公司产l o⁄∞ 培养基kŠ¬¥¦²
公司产l o胎牛血清k‹¼¦¯²±¨ 公司产l o胶原酶 Œ„ 型
k≥¬ª°¤公司l o胰蛋白酶k购自华美生物公司l o噻唑
蓝k购自华美生物公司l ~鼠抗人 Α2¤¦·¬±抗体k购自
北京中山生物公司l ~Œ÷xs倒置显微镜k日本 ’¯ ¼°2
³∏¶公司产l o≤’u培养箱k德国产l o„× p {x{型自动
酶标分析仪k上海安泰公司产l ∀
112 方法
11211 标本采集 子宫肌瘤来源于锦州医学院附
属第一医院妇科及北京大学人民医院妇科行子宫肌
瘤切除的患者 o年龄 vs ∗ w{岁k平均 ws岁l o术前至
少 v个月未接受激素治疗 o病理学诊断为子宫肌瘤 ∀
无菌操作取子宫肌瘤组织 o冰浴送实验室 ∀
11212 子宫肌瘤细胞的分离培养 将子宫肌瘤组
织置于 ⁄∞ 培养基中清洗 u遍 o剪成细小碎块 o加
入 s1tux h的 Œ„型胶原酶于 vz ε 空气浴中搅拌振
荡消化 vs °¬± ∗ u «≈v  o消化结束后过滤 o离心收集
细胞 o用 s1w h台盼蓝计数 o以 x ≅ tsx#°pt的密度
接种于培养瓶内 ∀待细胞长满瓶底 o用 s1ux h胰蛋
白酶消化 o以同样密度接种进行传代培养 ∀
11213 ××实验 取 v ∗ w代子宫肌瘤细胞 o以 x ≅
tsw# °pt的密度接种于 |y 孔培养板内 o每孔 tss
ˏo每组设 x个平行孔 ouw «后将 ⁄∞ 培养基更换
为含金雀黄素的培养基 os1sss x os1ssx os1sx os1x o
x ots ous oxs oxss °ª#pt o对照组不加药 ∀继续培养
uw ow{ ozu o|y «o于培养终止前 w «o向每孔加入 ××
溶液kx °ª#°ptlts ˏo培养终止后吸去孔内上清
液 o每孔加入 txs ˏ的 ⁄≥’ o振荡 ts °¬±o使结晶
物充分溶解 o用酶标仪于 w|s ±°波长处测定吸光度
kΑl值 ∀分别记录金雀黄素作用于子宫肌瘤细胞的
量效数据和时效数据 ∀用下列公式计算金雀黄素对
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第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
细胞的生长抑制率 ∀
抑制率 h € k对照组平均 Α值 p 金雀黄素组平均 Α
值lr对照组平均 Α值 ≅ tss
2 结果
211 金雀黄素对体外培养子宫肌瘤细胞作用的量
效关系
较低浓度的金雀黄素ks1sss x ∗ x °ª#ptl对子
宫肌瘤细胞无抑制作用 o反而有部分促增殖作用 o
和对照组相比无显著性差异 ∀较高浓度的金雀黄素
kx ∗ xss °ª#ptl能够抑制子宫肌瘤细胞的生长 o并
且随着浓度的增加 o其抑制增殖作用逐渐增强 o和对
照组相比具有显著性差异k表 tl ∀
表 t 金雀黄素对子宫肌瘤细胞的作用kcξ ? σ, ν € xl
分组 Χr°ª#pt 吸光度值
对照组 s s1t|{ w ? s1stv |
金雀黄素 s1sss x s1ust w ? s1su{ v
s1ssx s1ut| u ? s1sxx u
s1sx s1tz| s ? s1suz s
s1x s1t{{ w ? s1suw w
x s1t|u y ? s1svs x
ts s1tzx y ? s1ss| y
us s1tyv u ? s1ssy vtl
xs s1tw{ w ? s1st{ {ul
xss s1tw| s ? s1stu tul
注 }与对照组相比tl Π s1sx oul Π s1stk表 u同l
212 金雀黄素对体外培养子宫肌瘤细胞作用的时
效关系
分别选取 us °ª#pt和 xs °ª#pt的金雀黄素
作为药物的有效浓度 o对子宫肌瘤细胞的体外生长
做连续的时效观察k表 ul ∀金雀黄素对子宫肌瘤细
胞具有抑制作用 o随着时间的延长 o其抑制作用逐渐
增强 ∀最显著的抑制时间是加药后的 zu «o虽然加
药后的 |y «仍然有抑制作用 o但不甚明显 o其抑制
率趋于平稳或降低 o说明药效趋于饱和 ∀
3 讨论
已有研究表明 }金雀黄素能使幼小鼠子宫重量
增加≈w  o但与雌激素合用子宫重量会减轻 o其代谢产
物肠内酯也可与雌激素受体k∞• l结合 o抑制大鼠子
宫 • ‘„合成≈x  ∀本研究结果发现 }金雀黄素对体外
培养的子宫肌瘤细胞具有明显的抑制作用 o并且随
浓度的增加和时间的延长 o其抑制作用逐渐增强 ~当
浓度和时间达到一定数值时 o其抑制增殖作用便不
再增强 o而且浓度较低时亦无抑制作用 o这说明金雀
黄素仅在一定浓度范围内能够抑制子宫肌瘤细胞的
增殖 ∀金雀黄素是一种植物雌激素 o近年来研究发
现金雀黄素具有抗癌作用 o由于金雀黄素有与雌二
醇相似的结构 o当与雌激素同时作用于靶器官时 o两
者竟争结合 ∞• o从而可减轻雌激素促细胞增殖的作
用 o降低与雌激素相关的肿瘤发病的危险性 ∀子宫
肌瘤是雌激素相关肿瘤 o因此 o金雀黄素可抑制子宫
肌瘤细胞的增殖 ∀当金雀黄素浓度较低时 o不足以
竞争 ∞• o因此无从发挥抑制增殖作用 o有可能补充
体内的雌激素 o进而促进子宫肌瘤细胞的增殖 ~当金
雀黄素浓度较高时 o与肌瘤细胞上 ∞• 结合已达到
饱和 o由此可推测其抑制作用不再增强 ∀
表 u 金雀黄素作用于子宫肌瘤细胞的时效数据kcξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
uw «
Α 抑制率r h
w{ «
Α 抑制率r h
zu «
Α 抑制率r h
|y «
Α 抑制率r h
对照组 不加药物 s1t|z s ? s1stw z s1sss s s1t|| u ? s1ssv y s1sss s s1t|| { ? s1ss{ | s1sss s s1t|t s ? s1ssw y s1sss s
金雀黄素 us s1t|x u ? s1ssv y s1|tv z s1t|v s ? s1ssw t v1ttu w s1tzy s ? s1suz vtl tt1|tt | s1t{v w ? s1ss| w v1|z| t
xs s1t|y w ? s1ssx | s1vsw y s1t{x w ? s1ss{ wtl y1|uz z s1txs w ? s1ssy zul uw1zuw z s1tzv s ? s1ssy vtl |1wuw t
另外 o金雀黄素还有抗氧化作用≈y  !抑制拓扑异
构酶 µ≈z  !抑制酪氨酸蛋白激酶活性≈{ 等作用 o其抑
制子宫肌瘤细胞的增殖作用还可能与这些途径有
关 ∀
目前关于金雀黄素抗乳腺癌 !白血病的体外实
验报道较多 o作者研究的结果表明 o金雀黄素对体外
培养的子宫肌瘤细胞具有抑制作用 o但金雀黄素在
临床上的应用剂量及疗效 o尚待进一步研究 ∀
≈参考文献 
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·¨¬± ²± ¶¨·µ²ª¨ ± µ¨¦¨³·²µ°¨ §¬¤·¨§³¤·«º¤¼¶1 Χαρχινογενεσισot||y otz
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第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Εφφεχτ οφ γενιστειν ον ηυµαν λειοµψοµα χελλ ιν ϖιτρο
÷˜∞ ÷¬¤²2²∏t o≤„’ ≥«∏¤±ªu o • ∞Œ¬2«∏¬t
(t1 ∆επαρτµεντ οφ Οβστετριχσ ανδ Γψνεχολογψ, Πεκινγ Υνιϖερσιτψ Πεοπλεχσ Ηοσπιταλ, Βειϕινγ tsssww , Χηινα ;
u1 ϑινζηου Μεδιχαλ Χολλεγε , ϑινζηου tutsst , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²©§¬©©¨µ¨±·¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©ª¨ ±¬¶·¨¬± ²± «∏°¤± ∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤¦¨¯¯ ιν ϖιτρο1 Μετηοδ :
ײ §¨·¨¦··«¨ µ¨ ¤¯·¬²± ²©¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2 ©¨©¨ ¦·¤±§·¬° 2¨ ©¨©¨ ¦·²©ª¨ ±¬¶·¨¬±©²µ«∏°¤± ∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤¦¨¯¯¶¥¼ ×× ¤¶¶¤¼1 Ρεσυλτ : ²º ¦²±2
¦¨±·µ¤·¬²± ²©ª¨ ±¬¶·¨¬± «¤¶±²¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·²±·«¨ «∏°¤± ∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤¦¨¯¯¶1 ׫¨ ©¨©¨¦·º¤¶²±¯¼ ¬¨³µ¨¶¶¨§ º«¨ ±·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬¶
µ¨ ¤¯·¬√¨¯¼ «¬ª«o¤±§¬·¬¶¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¤±§·¬° 2¨§¨ ³¨ ±§¨ ±·1 Χονχλυσιον : Š¨ ±¬¶·¨¬±¦¤±¬±«¬¥¬··«¨ ªµ²º·«²©«∏°¤± ∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼2
²°¤¦¨¯¯¶ιν ϖιτρο o·«∏¶¬·°¤¼ ¶∏³³¯¼ ¶²°¨¶∏ªª¨¶·¬²±¶º¬·«¦¯¬±¬¦¤¯ ·«¨µ¤³¼ ²©∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤1
[ Κεψ ωορδσ] ª¨ ±¶¬·¨¬±~«∏°¤± ∏·¨µ¬±¨ ¯¨¬²°¼²°¤~¦¨¯¯ ¦∏¯·∏µ¨
≈责任编辑 方文贤 
舒安冲剂对动物多尿模型的作用
黄崇刚 o刘剑毅 o宋国红 o罗先钦 o徐嘉红 3
k重庆市中药研究院 o重庆 wsssyxl
≈摘要  目的 }研究舒安冲剂对动物多尿模型的影响 ∀方法 }通过大鼠 !猫的纯水多尿模型 o安体舒通多尿模
型 !大鼠肾阳虚多尿模型等试验对舒安冲剂临床治疗多尿的药理作用进行了观察 ∀结果 }舒安冲剂 ts ª#®ªp t能明
显减少纯水所致大鼠 !猫的尿量增多 o减少安体舒通 !肾阳虚所致大鼠的尿量增多 o抑制尿中钠离子的排出 !促进尿
钾离子的排出 ~能增加肾阳虚大鼠肾上腺的重量 ∀结论 }该药对动物的多种多尿模型有明显的疗效 ∀
≈关键词  舒安冲剂 ~多尿 ~肾阳虚
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltu2ttz|2sw
≈收稿日期  ussw2sv2u|
≈通讯作者  3徐嘉红 oר¯ }ksuvlyuwyutw|
舒安冲剂是临床用于治疗多尿有效的验方 o具
有化气行水 o补肾益气 o固摄小便等功能 ∀为使其能
进一步服务于临床 o作者对其药理作用及作用机理
进行了初步的研究 ∀
1 材料与方法
111 试验药物与试剂
舒安冲剂 }重庆市中药研究院中药化学室提供 o
批号 stsztu o用前配为 w ª#°pt ∀戊巴比妥钠 }上
海行知化工厂 o批号 |utst| ∀垂体后叶素 }南京新天
生物化学制药有限公司提供 o批号 stssxsu ∀安体舒
通 }江苏盐城制药有限公司提供 o批号 usstttu{ ∀硫
酸阿托品 }西南药业股份有限公司提供 o批号
||sxty ∀乌拉坦 }上海曹杨第二中学化工厂提供 o批
号 |tttsz ∀肾气丸 }河南宛西制药股份有限公司提
供 o批号 ussususv ∀氢化可的松 }西南药业股份有限
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第 u|卷第 tu期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
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