全 文 ：Τηε εξπεριµενταλστυδψ οφ τηε εφφεχτ οφ τανσηινονε ον αρτερψ ρεστενοσισιν µ ουσε
÷¬±t o⁄ ∏±2µ²±ªt o ²±ªt o ¬2©¤±ªt o ±«²±ª2°¬±ªu
(t . ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχολογψ, Σχηοολ οφ Ηυαξι Πηαρµαχψ, Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytsswt , Χηινα ;
u . Τηε Ηονγ Κονγ Πολψτεχκνιχ Υνιϖερσιτψ, Ηονγ Κονγ)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ³µ¨√ ±¨·¬√¨¤±§·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦ ©¨©¨¦·²©·¤±¶«¬±²±¨ k×l ²± ¤µ·¨µ¼ µ¨¶·¨±²¶¬¶¬± °¬¦¨ ¤±§³µ¬°¤µ¬¯¼
¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° q Μετηοδ : ƒ °¨¤¯¨ °¬¦¨ º µ¨¨ µ¤±§²°¯ ¼ §¬√¬§¨§¬±·² °²§¨¯¦²±·µ²¯ o ²¯º §²¶¨ ¤±§«¬ª«§²¶¨ × ªµ²∏³¶q∞¤¦«ªµ²∏³
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³¯¤¶¬¤oº«¬¦«¬¶°¤¬±¯¼ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬½¨ §º¬·«·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§ °¬ªµ¤·¬²± ²©¶°²²·« °∏¶¦¯¨¦¨¯¯ ¬±§∏¦¨§¥¼ ¤¥±²µ°¤¯ «¨ °²§¼±¤°¬¦¦«¤±ª¨¶q
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[ Κεψ ωορδσ] ·¤±¶«¬±²±¨ ~µ¨¶·¨±²¶¬¶~°¬¦¨ ~·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ²©¶°²²·« °∏¶¦¯¨¦¨¯¯ ~¬±·¬°¤¯ «¼³¨µ³¯¤¶¬¤
≈责任编辑 方文贤
李氏 x号方对人神经母细胞瘤株 ≥≠x≠ 生长的影响
张景艳t o王 蓉t o李子中u o程浩然u o李生海u o刘梦霞t o盛树力t 3
kt q首都医科大学 宣武医院 北京脑老化重点实验室 o北京 tsssxv ~
u q广东高明脑病医疗研究院 o广东 高明 xu{xssl
≈摘要 目的 }观察李氏 x号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响 o寻找最佳药物浓度 ∀方法 }不同浓度的
李氏 x号方作用于人神经母细胞瘤株 ≥≠x≠ o利用 ××测定细胞的存活率 o制定浓度2药效曲线得出最佳药物浓度 ∀
以 ××代谢率 !⁄漏出率 !细胞轴突长度 !胞体面积为观察指标 ∀结果 }李氏 x号方在 s qtux ∗ s qzx ª#pt浓度范
围内均可增加 ≥≠x≠ 细胞的存活率 ∀与正常对照组相比 o加药组 ≥≠x≠ 细胞轴突长度和胞体面积均增加 o××代谢
率升高 !⁄漏出率降低 ∀结论 }李氏 x号方具有营养神经细胞 !促进神经细胞存活的作用 ∀
≈关键词 李氏 x号方 ~神经营养作用 ~人神经母细胞瘤株 ≥≠x≠
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlsv2sux{2sv
李氏 x号方对 °≤tu细胞缺血性损伤有保护作
用≈t o并能改善半乳糖老化小鼠的学习 !记忆功
能≈u o本研究目的在于观察李氏 x号方对人神经母
细胞瘤株 ≥≠x≠ 生长的影响 o在体外寻找具有神经
≈收稿日期 ussv2s|2sx
≈通讯作者 3盛树力 oר¯ }kstslyvstvvxx2u{xw o∞2°¤¬¯}¬º±µ¬¬²
³∏¥¯¬¦q¥·¤q±¨ ·q¦±
营养作用 !促进神经细胞生长的最适浓度≈v ∀
1 材料和方法
1 q1 材料
1 q1 q1 细胞模型 ≥≠x≠ 细胞株由瑞典卡罗玉林斯
卡研究所
¨ ±ª·•¬±¥¯¤§教授和裴进京博士赠送 ∀细
胞培养条件为 ∞ k¬¥¦²
owtxss2syzl培养基
中加入体积分数为 ts h 的灭活胎牛血清k¼¦¯²±¨ o
#{xu#
第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≥vsszt qsvl !tx °°²¯#pt∞°∞≥k⁄≤²°³¤±¼l !青
霉素 t ≅ tsx #pt !链霉素 t ≅ tsx #pt ox h ≤u o
vz ε o每周换液 u次 o传代 t代 ∀
1 q1 q2 药物 李氏 x号方由龟甲 !枸杞子 !黄精 !石
菖蒲 !核桃仁 !当归 !远志 !红花等组成 o该粉剂用蒸
馏水煮沸 vs °¬±o共煎 u次 o将上清液合并调整为每
t°含生药 s qx ª∀
1 q1 q3 主要试剂 ×× ≈噻唑蓝 ov2kw ox2
§¬°¨ ·«¼¯·«¼¯·«¬¤½²¯2u2¼¯ l2u ox §¬³«¨ ±¼¯·¨·µ¤½²¯¬∏° ¥µ²¬2
§¨ }≥¬ª°¤产品 ∀二甲基亚砜k⁄≥l }北京化工厂
产品 ∀乳酸脱氢酶k⁄l测定试剂盒 }北京化工厂
产品 o批号 ||tssx ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 ×× 代谢率测定 将 ≥≠x≠ 细胞以每毫升
u qx ≅ tsv的密度接种于 |y孔板k∏±¦产品l o每孔体
积 uss Λozu «后分为对照组与加药组 o每组 { ∗ tu
孔 ∀于接种后第 w天 o每孔加 ××kx ª#ptlus Λo
v z ε 孵育 w « o吸出培养液 o每孔加入 ⁄≥
uss Λo振摇 ts °¬±o用酶标仪 k⁄¬¤ª±²¶·¬¦ °¤¶·¨∏µ
°wssl测定 xxs ±°处吸光度值 ∀
1 q2 q2 ⁄漏出率测定 将≥≠x≠细胞以每毫升
t ≅ tsw 的密度接种于 uw孔板 o每孔体积 t °ozu «
后分为对照组与加药组ks qx ª#ptl o每组 {孔 ∀于
接种后第 w天留取各组细胞培养液 o按照 ⁄ 测定
试剂盒所示方法k比色法l o测定 xxs ±°处吸光度
值 o同时做 ⁄标准曲线 ∀
1 q2 q3 形态学观察 将 ≥≠x≠ 细胞接种于 vx °°小
皿 ozu «后分为对照组与加药组ks qx ª#ptl ∀加药
后 uw «o瑞氏染色 o每组随机取 yx个细胞 o用 °≥2
tsss高清晰度彩色图文报告管理系统及医学影像计
算机处理系统测量细胞轴突长度和胞体面积 ∀
1 q2 q4 统计学处理 应用 ≥°≥≥ 软件做 τ检验统
计 ∀
2 结果
2 q1 李氏 x号方水提取液对 ≥≠x≠ 细胞 ×× 代谢
率的剂量反应曲线影响 分别用终浓度kª#ptl为
s qsyux os qtux os qux os qx os qzx ot qx ow qx的李氏 x
号方水提取液处理细胞 o所得 ××剂量反应曲线见
图 t ∀可见在水提取液终浓度为 s qzx ª#pt时 o细胞
××代谢率最高 o而增加或降低药物浓度 o其 ××
代谢率均低于终浓度为 s qzx ª#pt时 o但仍比对照
组的 ××代谢率高 o但当浓度增加至 t qx ª#pt时 o
甚至出现了细胞毒性 o××代谢率低于对照组 o由此
可见 o选用终浓度 s qx ª#pt是增加细胞活性的最适
浓度 ∀
图 t 李氏 x号方水提液对 ≥≠x≠
细胞 ××代谢率的剂量反应曲线影响
2 q2 李氏 x号方水提取液最适浓度对 ≥≠x≠ 细胞
××代谢率的影响 s qxª# pt加药组值 Α为
ks qzys x ? s qss{ xl o对照组为ks qy{s | ? s qss tl o两
组比较差异有显著性 Π s qsstk图 ul ∀
图 u 李氏 x号方对 ≥≠x≠ 细胞 ××代谢率的影响
与对照组比较 3 3 Π s qsst
2 q3 李氏 x号方水提取液最适浓度对 ≥≠x≠ 细胞
⁄漏出率的影响 s qx ª#pt加药组 ⁄ 漏出率
明显低于对照组 o两组比较差异有显著性 Π s qsx
k图 vl ∀
图 v 李氏 x号方对 ≥≠x≠ 细胞 ⁄漏出率的影响
与对照组比较 3 3 Π s qsx
2 q4 形态学观察 加药组轴突长度和胞体面积明
显高于对照组 o两组比较差异有显著性 Π s qsst
k表 tl ∀
表 t 李氏 x号方对 ≥≠x≠ 细胞轴突长度和胞体面积的影响
k ξ ? σ, ν yxl
组别 剂量rª#pt 轴突长度 胞体面积
对照组 vy qxs ? tx qx{ x|| q{t ? twt qux
加药组 s qx tsu q|{ ? zx q|utl {ut qy{ ? tzt qsvtl
注 }计量单位以像素总点数表示 ~与对照组比tl Π s qsst
3 讨论
李氏 x号方临床上主要用于治疗精神发育迟
#|xu#
第 u|卷第 v期
ussw年 v月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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滞 o脑血管病后遗症 o老年性痴呆以及先天后天引起
的各种脑病而伴发各种智力低下者 ∀中医认为智力
低下者 o其病位在脑 o与心肝脾肾相关 ∀而脑为/髓
海0 !/元神之府0 o神机之源 ∀肾主骨生髓 ∀若先天
不足或者年迈体衰或久病多病 o心脾不足 o肝肾受
损 o致气虚血少 o肾精亏耗 o髓海失养 o髓减脑消 o神
志失养 o渐见记忆减退 o认知受损等 ~久病伤肾 o或者
劳作伤肾 o肾气亏虚 o不能气化升清 o致脑气虚弱 o元
神失用而反应迟钝 !记忆减退 !表情呆滞 !动作笨拙 ∀
若七情内伤 o或久病留邪 o致气滞血瘀 !痰浊内生 !痰
瘀闭阻 o或影响脑脉运行 o或蒙蔽清窍 o神机失用 o引
发上述各种疾病 ∀基本病机为髓减脑消 o神志失养 o
或痰瘀阻窍 o神机失用 ∀故而李氏 x号方以益肾活
血立法 ∀方中龟甲 !枸杞子 !黄精益肾 ~石菖蒲辛开
苦燥 o以开心窍 !去痰浊 !醒神志为长 ~核桃仁暖肾固
精 ~当归 !红花活血化瘀 ~远志宁心安神 o去痰开窍 ∀
全方共奏补肾益髓 !行气活络 !生血壮骨 !活血化瘀
之功效 ∀
将李氏 x号方应用于实验 o其结果表明该方水
提液确能增加线粒体活性 !并能促进神经细胞的生
长 o表现在可以增加 ××代谢率 !降低 ⁄漏出率 o
并使轴突长度和胞体面积均增加 ∀用不同浓度的李
氏 x号方作用于人神经母细胞瘤株 o得知s qtux ∗
s qzx ª#pt浓度范围内作用最明显 ∀提示李氏 x号
方提取液中可能含有某些营养和保护神经细胞的成
分 o可促进神经细胞存活 ∀本研究在细胞水平上进
行 o初步结果已在本课题组所完成的整体实验中得
到进一步证实 o目前正在进行其作用机制方面的研
究 ∀
≈参考文献
≈t 包金风 o刘国卿 o李子中 o等 q李氏 x号方对 °≤tu细胞缺血性
损伤的保护作用 q中国药科大学学报 ousss out }tuy q
≈u 江雪华 o李 锐 o周莉玲 o等 q李氏 x号方对拟衰老模型小鼠的
益智作用 q中国实验方剂学杂志 ousss oy }xv q
≈v 张景艳 o孟 艳 o赵志炜 o等 q救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤
株 ≥≠x≠ 细胞生长的影响 q中国中西医结合杂志 oussu ouu }{w q
Τηε εφφεχτ οφ Λισηι Νο .x φορµ υλα ον τηε γροωτη οφ
ηυµαν νευροβλαστοµα χελλλινε ΣΨxΨ
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(t . Βειϕινγ Ρεσεαρχη Λαβορατορψφορ Βραιν Αγινγ , Βειϕινγ Ξυανωυ Ηοσπιταλ,
Χαπιταλ Υνιϖερσιτψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ tsssxv , Χηινα ;
u . Γυανγ ∆ονγ Γαο Μινγ Ενχεπηαλοπατηψ Μεδιχαλ ανδ Πηαρµαχολογιχαλ Αχαδεµψ, Γαοµινγ xu{xss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²©¬¶«¬²qx ©²µ°∏¯¤²±·«¨ ªµ²º·«²©«∏°¤± ±¨ ∏µ²¥¯¤¶·²°¤¦¨¯¯ ¬¯±¨ ≥≠x≠ ¤±§©¬±§
²∏··«¨ °²¶·¨©©¨¦·¬√¨§µ∏ª§²¶¨ q Μετηοδ : ≥≠x≠ ¦¨¯¯¶º µ¨¨ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¨§¥¼ ¬¶«¬²qx ©²µ°∏¯¤¬± §¬©©¨µ¨±·¦²±¦¨±·µ¤·¬²±q ×× ° ·¨¤¥²¯¬¦
µ¤·¨ º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¤¶·«¨ ¦¨¯¯ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨ o·«¨ ±·«¨ §²¶¨2 ©¨©¨ ¦·¦∏µ√¨º¤¶°¤§¨ q⁄ ¯¨ ¤®¤ª¨ µ¤·¨o¤¬²±¤¯ ¯¨ ±ª·«¤±§¤µ¨¤²©¦¨¯¯ ¥²§¼ º µ¨¨
∏¶¨§¤¶·«¨ ¬±§¬¦¤·²µ¶qΡεασυλτ : ± s qtux ∗ s qzx ª#pt ¬¶«¬²qx©²µ°∏¯¤¦²∏¯§¬±¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¦¨¯¯ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨ ¤±§ ×× ° ·¨¤¥²¯¬¦µ¤·¨o§¨2
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≈责任编辑 方文贤
本刊启事
本刊自 t||x年 t月 t日开始对来稿收取处理费k每篇 xs元l o请作者在寄发稿件的同时将处理费通过邮
局寄汇本刊k请勿在稿件中夹带现金l ∀汇单上请注明论文题目及第一作者姓名 ∀收款地址 }北京市东直门
内南小街 ty号5中国中药杂志6社 o邮编 tsszss ∀
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