全 文 ：[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²© Λιγυστιχυ µ χηυανξιονγ q Μετηοδ : × «¨ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·2
§¨¤±§³∏µ¬©¬¨§¥¼ ¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ º¬·«¶¬¯¬¦¤ ª¨¯ ¤±§ ⁄≥ o¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§¥¼ o ≥ ¶³¨ ¦·µ¤¯ §¤·¤q Ρεσυλτ : ∞¬ª«·¦²°2
³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§¤¶¬ª∏¶·¬¯¬§¨ k ´l ow ox2§¬«¼§µ²2v2¥∏·¼¯ ³«·«¤¯¬§¨ k µl oΖ , Ζj2y oyjoz ovΑ2§¬¯¬ª∏¶·¬¯¬2§¨ k ¶l o2y o{jo
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³¨ ±¨ k ¬l qΧονχλυσιον :≤²°³²∏±§ ¬ ¬¶¤ ±¨ º ¦²°³²∏±§q
[ Κεψ ωορδσ] Λιγυστιχυ µ χηυανξιονγ ~¯¬ª∏¶·¬¯¬§¨ ~¬¬²±ª·¨µ³¨ ±¨ ≈责任编辑 王康正
沙姜中抗促癌有效成分的分离鉴定
薛 颖t o村上明u o小清水弘一u o陈 杭v
kt q北京市疾病预防控制中心 o北京 tssstv ~u q日本近畿大学生物理工学部 o日本和歌山县 ~
v q北京市蔬菜研究中心 o北京 tsss{|l
≈摘要 目的 }研究沙姜中的抗促癌有效成分 o并对其进行分离和结构鉴定 ~方法 }采用柱层析及薄层层析
k×≤l分离纯化 o现代波谱法k ∂ o o o ≥l鉴定其结构 ~结果与结论 }对甲氧基肉桂酸乙酯是沙姜中的抗促
癌有效成分之一 o其顺式和反式化合物的 ≤xs分别为 x qx Λ°²¯#p t和 | qx Λ°²¯#p t ∀
≈关键词 沙姜 ~抗促癌活性 ~对甲氧基肉桂酸乙酯
≈中图分类号 u{w qt ~ u{x qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsz2sxuu2sv
沙姜 Καε µ πφερια γαλανγα qo又名山柰 !三柰 !
三柰子 !三赖 !山辣等 o为姜科多年生宿根草本植物 o
原产于热带地区 o以根茎供药用 o是著名的中药 o又
为常用副食佐料 ∀据5中国药典6记载有行气 !温中
和止痛作用 o常用于胸脘涨满 !心腹冷痛 !寒湿吐泻 !
牙痛等症 ∀在印度 !马来西亚等国 o沙姜常用于治疗
咳嗽和肺病 !也常作为健胃剂 !利尿剂 !排除肠胃胀
气药 !促进伤口愈合药及杀虫剂使用 o同时也被用作
香料和食物调味料≈t ou ∀沙姜水煎剂对许兰氏毛癣
菌及其蒙古变种 !共心性毛癣菌 !堇色毛癣菌等 ts
种常见致病真菌均有不同程度的抑制作用≈t ∀
沙姜在东南亚一带广为栽培 o在我国主产于广
东 !广西 !海南 !云南 !四川 !台湾 !福建等地 o是一种
收入5中国传统蔬菜图谱6的传统蔬菜 o但目前的栽
培量及使用量均很有限 o用于食用的量则更少 ∀
在对我国蔬菜的抗促癌活性进行筛选的过程
中≈v o沙姜显示出一定的抗促癌活性 o因此为了了解
沙姜中的抗促癌活性成分 o本文对沙姜的成分进行
了分离 !鉴定 ∀
≈收稿日期 usst2s{2ts
≈通讯作者 电话 }kstslywutuwyu2xsu 传真 }kstslywutwwsx
∞2°¤¬¯} ÷∏¨p¼¬±ª ¥·¤°¤¬¯q±¨ ·q¦±
1 材料与方法
1 q1 化合物 佛拜酯k·¨·µ¤§¨¦¤±²¼¯ ³«²µ¥²¯ tv2¤¦2
·¨¤·¨ o×°l }用作 ∞
病毒早期抗原的诱导剂 o购自
≥¬ª°¤公司 ∀正丁酸钠 }用作增效剂 o购自日本京都
±¤¦¤¯¤¬·¨¶´ ∏¨ 公司 ∀ ∞
病毒早期抗原k∞
∂2∞l阳
性抗血清 }来自鼻咽癌病人 o由日本北海道大学医学
部提供 ∀ ° tyws及小牛血清为培养基 o¬¥¦²公
司产品 ∀二甲基亚砜k⁄ ≥l }用作溶剂 o为 ≥¬ª°¤
公司产品 ∀ • ¤®² ≤2uss 硅胶 }购于日本 ±¤¦¤¯¤¬
·¨¶´ ∏¨ 公司 o用于柱层析 ~≥¬¯¬¦¤ ƒuxw硅胶板 }为德国
µ¨¦®公司产品 o用于样品分析时的薄层层析 ~硅
胶 ƒuxw }青岛化工厂出品 o用于样品制备时的薄层
层析 ~溶剂 }甲醇 !乙酸乙酯 !正己烷 !氯仿 !石油醚
等 o为北京化工厂产品 ∀
1 q2 样品制备 沙姜产自广东省茂名 o由茂名市农
业局提供 ∀沙姜新鲜根茎 u wss ªo用清水洗净 o控
去水分 o切片 o冷冻干燥 ∀所得的干姜片用甲醇浸
泡 o室温下提取 ts §左右 o用旋转蒸发仪 wx ε 左右
除去溶剂 o对所得的甲醇提取物在乙酸乙酯和水间
进行分配 o乙酸乙酯相样品浓缩后置冰箱中保存 o
供实验所用 ∀取部分样品溶于 ⁄ ≥中供 ∞
∂2∞
实验所用 ∀
#uux#
第 uz卷第 z期
ussu年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qz
∏¯¼ oussu
1 q3 ∞
∂2∞实验 采用经 ∞
病毒转化的人的
淋巴细胞k ¤¬lk由中国预防医学科学院病毒研究所
提供l o方法同文献≈x ∀x ≅ tsx 个细胞接种于 t °
含正丁酸钠 vvs Λªo×° us ±ª及被测物 tss Λª的
° tywsk内含 ts h小牛血清l的培养基中 o于二
氧化碳孵箱中 vz ε 培养 w{ «∀然后收集细胞按文
献方法制成涂片 o在荧光显微镜下观察至少 xss个
细胞 o分别计数阳性细胞和细胞总数 o按下列公式计
算诱导抑制率 ∀
诱导抑制率k h l 对照组诱导率 p实验组诱导率对照组诱导率 ≅ tss h
1 q4 主要仪器 核磁共振仪k l
µ∏®¨ µ√¤±¦¨
vss ~质谱仪k ≥l¬·¤¦«¬2tuss ~红外光谱仪k l
≥«¬°¤§½∏ƒ×2{uss ~紫外可见分光光度计k ∂ l
≥«¬°¤§½∏ ∂2uuss ~高效液相色谱 k °≤l ≥«¬2
°¤§½∏≤2ts ∀
2 结果与分析
2 q1 筛选实验结果 对沙姜提取物进行 ∞
∂ 活性
检测时发现 o其甲醇提取物在浓度为 tss Λª# °p t
时的抗促活性只达到中等水平kx| qu h l o而在进行
了乙酸乙酯和水分配后 o乙酸乙酯相在 us Λª#°p t
的浓度下 o其抑制活性即达到了 zv q| h o是同浓度
分配前样品的近 v倍 o提示其活性成分是脂溶性的 o
进而对其有效成分进行了分离鉴定 ∀
2 q2 有效成分的分离鉴定
2 q2 q1 柱层析 以 • ¤®² ≤2uss硅胶装柱 o对沙姜
的乙酸乙酯部分进行柱层析 ∀首先以氯仿2甲醇体
系进行洗脱 o以 ∞
∂ 活性实验实时监测 o效果显著
的样品进一步分离 o以正己烷2氯仿体系洗脱 o对得
到的有效组分进一步用 ×≤k薄层层析l法进行精
制 o分离出了 v个成分 t ou ov ∀
2 q2 q2 化学结构的鉴定所得的化合物经 ×≤k≥¬2
ª¨¯和 ⁄≥l检查确为单一成分 o并经 °≤ 检查达
到一定纯度后 o进行核磁共振k l !质谱k ≥l !
红外光谱k l !紫外光谱k ∂ l的检测 o鉴定结果如
下 ∀
成分t } ∂Κ«¨ ¬¤±¨°¤¬ ±°k ²¯ªΕl }usvkw qstzl ous|
kv q|zvl outykw qsywl ouuukv q|ywl ouzskw quvyl ou|{
kv qyuvl ∀ }Μ©¬¯°°¤¬ ¦°p t }tzus o tyws otwzx otwys o
tvts otuss ottzx oktsvsl ∀t p kvss ½o≤⁄2
≤ v¯l∆}t qvwkv o·o z qt½l ow quzku o´ o z qt
½l oy qwvk o§o ty qs ½l oz qv{kv o°l oz qxu
ku o°l oz qy|k o§o ty qs ½l ∀ ≥k°2≤l °r½
kµ¨¯q¬±·h l }tzzk≈ n n otssl otw|kttzl otvy
kytl ottvkw|l ozzkvxl oyxkttsl ∀
成分 u } ∂Κ«¨ ¬¤±¨°¤¬ ±°k¯ ²ªΕl }utv ¶«kv q{|ul ouuz
kv q{vul ouvv¶«kv qyxvl ou|z¶«kw qtwyl ovsv
kw qtzyl ∀ }Μ©¬¯°°¤¬ ¦°p t }tzus otyvs otyss otxus o
twzs otwys otwws otvys ott|s ottys otsvs ∀t p
kvss ½o ≤⁄≤ v¯l∆}t qu{kv o·o z qt ½l ov qu{
kv o¶l ow qt|ku o´ o z qt ½l ox q{uk o§o
tu qy ½l oy q{vk o§o tu qy ½l oy q{{ku o§o
{ q{ ½l oz qy{ku o§o { q{ ½l ∀ ≥k°2≤l °r½
kµ¨¯q¬±·h l }uszk≈ n n otssl oyxkxxl ∀
成分 v } ∂Κ«¨ ¬¤±¨°¤¬ ±°k¯ ²ªΕl }utskv q|wwl out{ ¶«
kv q|y{l ouuvkw qswxl ouvs ¶«kv q|u|l ou|skw qvywl o
vsvkw qvvwl ∀ }Μ©¬¯°°¤¬¦°p t }tzts otyws otyss otx{s o
txts otwzs otwys otwws otwus otvzs otvus otvss o
tu|s otuxs otuss ottzs oktsvsl ∀t 2 kvss
½o≤⁄≤ v¯l∆}t qvvkv o·o z qt ½l ov q{vkv o
¶l ow quxku o´ o z qt ½l oy qvsk o§o tx q|
½l oy q{|ku o§o | qz ½l oz qwyku o§o | qz
½l oz qywk o§o tx q| ½l ∀ ≥k°2≤l °r½
kµ¨¯q¬±·h l }usz k≈ n n otssl otvz kvvl o||
kvul ∀
鉴定结果表明成分 t ou ov分别为反式肉桂酸乙
酯k ·¨«¼¯2τρανσ2¦¬±±¤°¤·¨l !顺式2对甲氧基肉桂酸乙
酯k ·¨«¼¯ π2° ·¨«²¬¼2χισ2¦¬±±¤°¤·¨l !反式2对甲氧基
肉桂酸乙酯k ·¨«¼¯ π2° ·¨«²¬¼2τρανσ2¦¬±±¤°¤·¨l ∀
2 q3 抗促癌活性的验证 采用筛选实验所用的
∞
∂2∞实验的方法 o对从沙姜中分离出来的 v种
肉桂酸酯类化合物的抗促癌活性进行验证 o结果如
表 t所示 ∀
实验结果表明 }从沙姜中分离出来的对甲氧基
肉桂酸乙酯具有较强的抑制 ∞
∂2∞ 诱导的作用 o
其中顺式2对甲氧基肉桂酸乙酯的 ≤xsk半数抑制浓
度l为 x qx Λ°²¯#pt o反式2对甲氧基肉桂酸乙酯的
≤xs为 | qx Λ°²¯#pt o顺式的作用效果比反式的好 ∀
从与其他已知抗促癌剂 ≤xs比较的结果可见 o顺式2
对甲氧基肉桂酸乙酯的抗促癌活性与姜黄素k¦∏µ2
¦∏°¬±o≤xs x qw Λ°²¯ #p tl相当 o反式2对甲氧基肉
桂酸乙酯的抗促癌活性也比已经报道过的熊果酸
k∏µ¶²¯¬¤¤¦¬§ous Λ°²¯ #p tl !蟒牛儿醇kª¨µ¤±¬¤¯ oty
Λ°²¯#ptl等作用略强≈y oz ∀而肉桂酸乙酯则几乎
#vux#
第 uz卷第 z期
ussu年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qz
∏¯¼ oussu
无抑制作用 ∀以上结果显示沙姜中的抗促癌有效成 分为对甲氧基肉桂酸乙酯 ∀
表 t 沙姜中的 v种肉桂酸酯类化合物对 ∞
∂ 活化的抑制作用
化合物
xss
rΛ°²¯#p t
tss
rΛ°²¯#p t
xs
rΛ°²¯#p t
ts
rΛ°²¯#p t
t
rΛ°²¯#p t
s qt
rΛ°²¯#p t
s qst
rΛ°²¯#p t
≤xs
rΛ°²¯#p t
∞·«¼¯2 π2° ·¨«²¬¼2
τρανσ2¦¬±±¤°¤·¨
|z qw ? s q|
k {wl
ys q{ ? z qv
k |ul
w| qy ? u qz
k |ul
wy qs ? y qy
k |ul
vv qu ? ts qw
k |ul
ty q|
k |ul
w qy | qx
k |ul
∞·«¼¯2 π2° ·¨«²¬¼
2χισ2¦¬±±¤°¤·¨
|y qz ? t qz
k {|l
y| qx ? v qs
k |ul
y{ q{ ? v q|
k |ul
w| q{ ? ts q|
k |ul
vu q{ ? tu qv
k |ul
tv qu
k |ul
v qu
k |ul
x qx
∞·«¼¯2τρανσ2
¦¬±±¤°¤·¨
ww qy ? z qt
k |xl
t| qy ? x qt
k |xl
tu qu ? w qs
k |xl
s
k |xl
s
k |xl
xss
注 }括号中的数字表现细胞活力k h l
此外 o从表 t的结果还可看出 o这 v种成分对细
胞活力的影响不明显 o基本无细胞毒性 ∀
对甲氧基肉桂酸乙酯和肉桂酸乙酯是沙姜油中
的主要成分 ∀据报道 }除在沙姜油中之外 o南姜
Αλπινια γαλανγα • ¬¯§q!罗勒 Οχι µ υ µ βασιλιχυ µ
q!蛇苔 Χονοχεπηαλυ µ χονιχυ µ kql ⁄∏° 及蓬莪
术 Χυρχυ µ α ζεδοαρια k
¨ µªql ²¶¨ 的根中也有存
在≈w ∀
从实验结果可以看出 o对甲氧基肉桂酸乙酯是
一种有应用可能性的抗促癌有效物质 o虽然顺式 p
对甲氧基肉桂酸乙酯的 ≤xs仅为反式的 s qx{ o但反
式2对甲氧基肉桂酸乙酯在沙姜中的含量却是顺式
的近 vs倍 o所以认为反式2对甲氧基肉桂酸乙酯在
实际应用中会更有意义 ∀
≈参考文献
≈t 钱信忠 q山柰 q中国本草彩色图谱 ) ) ) 常用中药篇k上卷l q北
京 }人民卫生出版社 ot||y qux q
≈u • ²±ª ≤ q ±ª ≥ q¬° ≤ q≤²°³²¶¬·¬²± ²©·«¨ ∞¶¶¨±·¬¤¯ ¬¯
²© «¬½²° ¶¨²© Καε µ πφερια γαλανγα q ƒ¯ ¤√²∏µ¤±§ ƒµ¤ªµ¤±¶¨
²∏µ±¤¯ ot||u oz }uyv q
≈v 薛 颖 o宋曙辉 o陈 杭 q|t种蔬菜抗促癌活性的研究 q营养学
报 ot||{ ouskul }ut| q
≈w 江纪武 o肖庆祥 q植物药有效成分手册 q北京 }人民卫生出版社 o
t|{y qwuz oz{y q
≈x ·² ≠ o ≠¤±¤¶¨ ≥ q ¶«²µ·2·¨µ° ιν ϖιτρο ¶¶¤¼ ©²µ°µ²°²·¨µ≥∏¥2
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≈y ∏µ¤®¤°¬ q ±·¬·∏°²µ°µ²°²·¬²± º¬·« ƒ²²§°«¼·²¦«¨ °¬¦¤¯¶}
≥·µ¤·¨ª¼ ©²µ ≤¤±¦¨µ ≤«¨ °²³µ¨√ ±¨·¬²±q
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≤¤±¦¨µ °µ¨√ ±¨·¬²± µ q × ¤¨¶o ≥³¬¦¨¶ ¤±§ µ¨¥¶q • ¤¶«¬±ª§²±o
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≈责任编辑 王康正
÷ 射线衍射法测定药用滑石粉中石棉的研究
农以宁t o曾令民u
kt q桂林市药品检验所 o广西 桂林 xwtssu ~u q广西大学 材料科学研究所 o广西 南宁 xvssswl
≈摘要 目的 }建立适当的检测方法 o严格控制药用滑石粉中石棉的存在 ∀方法 }考察药用滑石粉以及其中可
能存在的透闪石石棉 !蛇纹石石棉 !绿泥石的 ÷ 射线衍射行为 ∀结果 }药用滑石粉中透闪石石棉 !蛇纹石石棉含量
在 t h ∗ us h呈线性关系 ~绿泥石含量在 u h ∗ ys h呈线性关系 ∀结论 }建立的药用滑石粉中石棉测定方法准确 !
可靠 o重现性良好 o可用于药用滑石粉的质量控制 ∀
≈关键词 药用滑石粉 ~石棉 ~透闪石石棉 ~蛇纹石石棉 ~绿泥石 ~÷2射线粉末衍射
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsz2sxuw2sw
≈收稿日期 usst2s|2ts
≈通讯作者 电话 }kszzvlu{xuywv 传真 }kszzvlu{tswux ∞2°¤¬¯}±¼±§¼¬ tyv q±¨ ·
#wux#
第 uz卷第 z期
ussu年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qz
∏¯¼ oussu