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≈责任编辑 方文贤
雷公藤多甙片致小鼠急性肝损伤的初步探讨
彭 勃 o苗明三 o王宇亮
k河南中医学院 肝病研究所 o河南 郑州 wxsss{l
≈摘要 目的 }探讨雷公藤多甙片致急性肝损伤的作用及机理 ∀方法 }以雷公藤多甙片按成人 ts ous ovs倍剂
量给小鼠灌胃 o探讨不同剂量致急性肝损伤的影响 ~再以 us 倍剂量造成小鼠急性肝损伤 o分别在 | ot{ ouz ovy «测
小鼠血清丙氨酸基转移酶k×l o以探讨不同时间对急性肝损伤的影响 ~测定小鼠血清超氧化物歧化酶k≥⁄l !还
原型谷胱甘肽k≥2°¬l !肝匀浆 ° 值 o以探讨雷公藤多甙片致小鼠急性肝损伤的机理 ~并分别取肝组织作病理
观察 ∀结果 }在成人 us 倍剂量时急性肝损伤明显 o小鼠死亡少 o在急性肝损伤后 t{ «取材肝损伤明显 ∀结论 }雷公
藤多甙片可致小鼠急性肝损伤 o其机理和脂质过氧化反应有关 ∀
≈关键词 急性肝损伤小鼠 ~雷公藤多甙片
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltt2tsyz2sw
雷公藤多甙片作为临床常用药 o用于治疗风湿
性关节炎 !慢性肾炎 !系统性红斑狼疮等疾病 o肝损
伤是其常见的不良反应 ∀为确保临床用药安全 o我
们探讨了不同剂量 !不同时间对小鼠急性肝损伤的
影响 o并观察了给药后小鼠血清丙氨酸基转移酶
k×l o血清超氧化物歧化酶k≥⁄l o还原型谷胱甘
肽k≥2°¬l o肝匀浆 ° 值的变化 o以对雷公藤多
甙片致急性肝损伤机理及剂量进行初步探讨 o为预
≈收稿日期 ussu2sz2su
≈基金项目 河南省 usss 年重点科技攻关项目ksvuwwtssuyl
≈通讯作者 彭勃 ר¯ }ksvztlx|xxyxs ƒ¤¬}ksvztlx|yuy{s
∞2°¤¬¯}³¥¶¬µ ¶¬±¤q¦²°
防本药的不良反应及应用本品造肝损伤模型打下基
础 ∀
1 材料与方法
1 q1 药物 雷公藤多甙片 o湖南株洲市制药三厂生
产 o规格 ts °ªr片 o批号 usstswsu ∀
1 q2 动物 昆明种小鼠 o体重 us ∗ uu ªo雌雄各半 o
由河南省医学实验动物中心提供 ∀
1 q3 实验分组及给药 先以 ws只小鼠分为 x 组 o
每组 { 只 o每只以雷公藤多甙片 tx °ª#®ªp tk按正
常成人量换算l otxs °ª#®ªp tk成人用量 ts倍l ovss
°ª#®ªp tk成人用量 us 倍l owxs °ª#®ªp tk成人用量
vs 倍l按 s qu °#ts ªp t的灌胃量制成混悬液灌胃 o
#zyst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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²√¨°¥¨µoussv
另设 t 个空白对照组 o以探索致明显急性肝损伤用
量 ∀再以 xs 只小鼠分为 x组 o每组 ts 只 o待明显肝
损伤剂量找出后以该剂量灌胃 t 次 o分别于灌胃后
| ot{ ouz ovy «处死 o以确定致明显急性肝损伤的时
间 o另设一空白对照组 ∀
1 q4 取材及处理 小鼠处死后 o测血清 × o并取
同一部位肝组织作病理切片 ∀
1 q5 在 ° ·微机上应用 ≥°≥≥tt qs 软件进行统计分
析 ∀采用双侧检验 o统计学意义的显著性水平取Α
s qsx 水准 o数值变量统计描述采用 ξ ? σo数值变量
假设检验采用正态性 ∆检验 !方差齐性检验和重复
测量的 Φ检验 o组间差异的显著性检验用 θ检验 ∀
2 结果
2 q1 不同剂量雷公藤多甙片与急性肝损伤的关系
正常用量k按成人剂量换算成小鼠用量l雷公藤多
甙片未见对肝脏造成损害 o随雷公藤多甙片用量的
加大 o血清 × o≥× 也相应增高 o当雷公藤多甙片
用到成人剂量 vs 倍时 o小鼠死亡将近 tru ~而在成
人 us 倍剂量时转氨酶升高明显 o小鼠仅死亡 t 只
k表 tl ∀从肝脏病理切片来看存在广泛肝细胞浊
肿 o中央静脉及周边部位成局灶性肝细胞气球样变 o
肝细胞中可见散在的嗜酸性变 ∀所以我们以成人
us 倍用量灌胃作为造成小鼠明显急性肝损伤的剂
量 ∀
表 t 同剂量雷公藤多甙片与急性肝损伤的关系
k ξ ? σ, ν tsl
分组 剂量r°ª#®ªp t ×r#p t ≥×r#p t
空白 uy qz ? u qt u| qw ? y qw
正常量 tx vs qy ? v qu u{ qu ? z qx
ts倍量txs wz qv ? v q|tl ws qv ? z qutl
us倍量vss z{ qw ? x qyul yx q| ? tt quul
vs倍量wxs {s qx ? y qyvl zu qw ? tu qtvl
注 }tl与空白组比较 Π s qsx ul动物死亡 t 只 与空白组比
较 Π s qsx vl动物死亡 v 只 与空白组比较 Π s qsx
2 q2 us倍剂量时不同时间小鼠 × 的变化 从
表 u 中我们可以看出 o| « × 即有升高 o并随时间
变化不断升高 o但以 t{ «肝损伤较为严重而小鼠死
亡较少 o在 uz ∗ vy « × 升高较多 o似不宜作为致
肝损伤观察的最佳时间 ∀从病理变化来看 o| «主要
的病理改变是广泛的肝细胞浊肿k图 tl ~t{ «主要
的病理改变是在广泛肝细胞浊肿的基础上出现片状
肝细胞溶解现象k个别 o图 ul ~uz «的病理改变是肝
细胞广泛肝细胞浊肿和疏松改变及中央静脉周边肝
细胞气球样变k图 vl ~vy «的病理改变是肝细胞广
泛肝细胞浊肿和严重的疏松改变及中央静脉周边肝
细胞气球样变 o同时出现脂肪变k图 wl ∀
表 u us 倍剂量kvss °ª#®ªp tl时不同时间小鼠 × 的变化
k ξ ? σ, ν tsl
时间k对照l ×r#p t
| « u| qx ? v qz
t{ « z{ qw ? x qy
uz « tsz qv ? x q|
vy « ty| qw ? ts qy
空白 uz qx ? w qy
图 t 雷公藤多甙片致急性肝损伤 | «k∞ ≅ wssl
图 u 雷公藤多甙片致急性肝损伤 t{ «k∞ ≅ wssl
图 v 雷公藤多甙致急性肝损伤 vy «k∞ ≅ wssl
2 q3 us 倍剂量 t{ «时小鼠血清 ≥⁄o ≥2°¬及
肝匀浆 ° 的变化 从表 v 可以看出急性肝损伤
组小鼠血清 ≥⁄o ≥2°¬与空白组比较明显降低
k Π s qsxl o而肝匀浆 °则明显升高k Π s qsxl ∀
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第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 v 雷公藤多甙片kvss °ª#®ªp tl致急性肝损伤小鼠血清
≥⁄o≥2°¬及肝匀浆 ° 的变化k ξ ? σ, ν tsl
分组 ≥⁄r# °¯ p t ≥2°¬r °r值
空白组 wzv qs ? t{ qv t|z q| ? us qu s qtux ? s qsvs
模型组 vtx qv ? vs qutl yt qu ? xw qttl s quux ? s qsvztl
注 }tl与空白组比较 Π s qsx
图 w 雷公藤多甙致急性肝损伤 vy «k∞ ≅ wl
3 讨论
3 q1 关于雷公藤多甙片致小鼠急性肝损伤的机理
近年研究表明 o药物对肝细胞的直接毒性作用主
要为药物在肝内经代谢转化为亲电子基 !自由基及
氧基 o与大分子物质共价结合或造成脂质过氧化而
导致肝细胞坏死≈t ∀ ≥⁄是体内自由基的重要清
除剂 o可防止生物膜过氧化引起的损伤作用 o≥⁄的
活性降低则自由基清除不足≈u ∀据报道≈v 各型肝病
患者 ≥⁄活性均明显下降 o且与肝脏病理损伤严重
程度呈正相关 ∀本实验提示肝损伤模型中 ≥⁄明
显降低k Π s qsxl ∀≥2°¬对肝细胞膜过氧化的
影响主要是防止过氧化物形成 o是重要的抗氧化和
解毒物质 o其含量下降所致的严重肝细胞损害与脂
质过氧化有关 ∀肝损伤越严重 o则 ≥2°¬含量越
下降≈w ∀本实验研究也表明 }雷公藤多甙片致急性
肝损伤小鼠血清 ≥2°¬明显下降 ∀一般而言 o
°是生物膜中的多价不饱和脂肪酸自由基作用
的产物 o可严重损伤肝细胞膜结构 o导致肝细胞的肿
胀坏死 o反映体内自由基水平 ∀肝损伤程度越重 o
°的含量则越高≈x ∀通过本实验也发现 o雷公藤
致急性肝损伤小鼠肝匀浆中 ° 含量与空白组比
较明显升高 ∀
关于雷公藤多甙片致急性肝损伤的机理 o从本
实验来看和脂质过氧化反应有关 ∀对于其他因素如
细胞凋亡 !细胞因子的改变等有待于进一步的研究 ∀
3 q2 关于急性肝损伤模型 急性肝损伤的模型报
道较多 o许多模型都比较成熟 o如四氯化碳 !硫代乙
酰胺 !扑热息痛等急性肝损伤模型 o但这些造模药临
床应用较少 o模型不能切合实际 o而运用中药作为造
模药物的还未见报道 ∀雷公藤多甙k苷l为卫矛科雷
公藤的提取成分 o为临床常用药 o用于治疗风湿性关
节炎 o慢性肾炎 o系统性红斑狼疮等疾病 o多有引起
肝损伤的报道 ∀在本实验中 o我们运用雷公藤多甙
片造成小鼠急性肝损伤 o从转氨酶和肝脏病理的变
化来看 o急性肝损伤是存在的 o在成人 us倍剂量时
t{ «肝损伤效果明显 o并且小鼠死亡较少 ∀运用保
肝解毒胶囊对抗这种肝损伤 o从实验结果来看是成
功的 o这对肝病的实验研究有一定意义 o并为雷公藤
多甙片的临床应用及进一步造模研究打下了基础 ∀
≈参考文献
≈t 刘玉凤 o邓惠英 q雷公藤多甙致肝损伤的临床报道 q中医药研
究 ot||z otvkxl }us q
≈u 唐望先 o虞涤霞 o但自力 o等 q肝炎平对急性肝损伤时脂质过氧
化作用的实验研究 q同济医科大学学报 ot||{ ouzktl }xy q
≈v 浦 林 o李 娟 q超氧化物歧化酶比活性在肝肾疾病中的应
用 q天津医药 ot||v outktsl }ytu q
≈w 彭汉光 o戴春林 o魏 屏 o等 q加味四逆散保护肝损伤的实验研
究 q中国中医药信息杂志 ousss ozkttl }ux q
≈x 吴东方 o周本宏 o罗顺德 o等 q银杏叶总黄酮对化学性肝损伤的
影响 q中草药 ot||z ou{kyl }vw{ q
Ινιτιαλ ∆ισχυσσιον οφ Μιχε Αχυτε Ηεπατιχ Ινϕυρψ Χαυσεδ
βψ Τριπτερψγιυµ Γλψχοσιδεσ
°∞
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第 u{卷第 tt期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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茶多酚抗大鼠肝纤维化及其机制研究
张幸国 o虞朝辉 o秦玉娥 o张 宇 o陈韶华 o厉有名
k浙江大学 医学院 附属第一医院 o浙江 杭州 vtsssvl
≈摘要 目的 }观察茶多酚抗大鼠肝纤维化作用并探讨其作用机制 ∀方法 }大鼠随机分成 x 组 o对其中 w 组的
每只大鼠酒精灌胃形成酒精性肝纤维化 o其中 v 组大鼠每天同时分别以不用剂量茶多酚灌胃 ~另设对照组 ∀在 uw
周时观察分析各组大鼠的肝脏组织病理情况并进行定量分析 o同时测定大鼠的血清抗脂质过氧化指标及血清内毒
素水平 ∀结果 }经茶多酚干预的各组酒精灌胃大鼠的肝纤维化程度较单纯酒精组轻 ~抗脂质过氧化 !血清内毒素指
标较单纯酒精灌胃组大鼠也均有不同程度改善 ∀结论 }茶多酚有抗大鼠肝纤维化的作用 ∀其作用机制可能与清除
过多的过氧化脂质及降低内毒素水平有关 ∀
≈关键词 肝纤维化 ~茶多酚 ~大鼠
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltt2tszs2sv
肝纤维化是形成肝硬化的必经途径 ∀对肝纤维
化的治疗至今尚无特效方法 ∀茶多酚是从茶叶中提
取的有效成分 o它是含有多酚类化合物的混合物 o包
含有儿茶素类 !黄酮及黄酮醇类 !花色素类和缩酚醛
类等主要几种物质≈t ∀已有研究发现茶多酚具有抗
菌 !防癌抗癌 !降血脂 !保护心脑血管 !护肝和抗氧化
等作用≈u ∀本研究根据茶多酚的药理作用特性 o观
察其对酒精性肝纤维化动物模型的保护作用 o以探
讨茶多酚抗肝纤维化的作用及其机制 ∀
1 材料与方法
1 q1 试验动物及饲养
体重 t{s ∗ uts ª的清洁级 ≥⁄大鼠 ys 只 ∀浙
江大学医学院动物中心以清洁级标准饲养 ∀
1 q2 试验材料及试剂
灌胃用酒为红星牌 xy度二锅头白酒 o北京酿酒
总厂生产 ∀苏木素染料 !伊红染料 !丽春红染料 !亮
绿染料由上海试剂三厂生产 ~测定超氧化物歧化酶
k≥⁄l o丙二醛 k ⁄l o谷胱甘肽 k ≥l试剂盒
≈收稿日期 ussv2sv2tw
≈通讯作者 张幸国 ר¯ }ksxztl{zuvyxvt ƒ¤¬}ksxztl
{zuvyyzx ∞2°¤¬¯}÷ zzz ¶²«∏q¦²°
由南京建成生物工程研究所生产 ∀
1 q3 试验方法
清洁级喂养 ≥⁄大鼠 tus只随机分成 x组 o每组
大鼠雌雄各半 ∀w 组每只大鼠分别按 z ª#®ªp t剂
量 !以 xy 度红星二锅头白酒每日清晨 t 次灌胃 ~除
模型对照组单纯酒灌胃外 o另 v组酒精灌胃同时 o每
天分别以 s qsx os qtux os qux ª#®ªp t剂量的茶多酚灌
胃 ~∞组为单纯对照组 o每天仅以同样剂量饮用水灌
胃 t 次 ∀
1 q4 试验标本及取材
在试验 uw 周末采取大鼠股静脉血并处死 ∀血
液离心提取血清 ~处死的大鼠留取肝脏标本并以
ts h 福尔马林液固定 ∀
1 q5 试验指标测定
1 q5 q1 肝脏组织病理学变化 ¤¶¶²±三色染色观
察大鼠肝脏胶原组织沉积等变化 ∀对胶原染色的酒
精性肝纤维化程度按 ≤«¨ √¤¯ ¬¯¨µ提出的 ≥≥≥ 计分来
判定并计算 °≥tsss 面积 ∀
1 q5 q2 抗氧化物及内毒素测定 分别测定血液标
本的 ≥⁄o ⁄ o≥ ~以鲎试验法测定血清标本内
毒素水平 ∀
#szst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tt
²√¨°¥¨µoussv