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Effects of the volatile oil of Centipeda minima on acute pleural effusion in rats induced by an intrapleural injection of Car

鹅不食草挥发油对角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎的影响



全 文 :鹅不食草挥发油对角叉菜胶致大鼠
急性胸膜炎的影响
覃仁安t 3 o梅 璇t o宛 蕾u o师晶丽v o沈映君w
kt1 贵阳医学院 附属医院 o贵州 贵阳 xxsssw ~u1 贵阳医学院 o贵州 贵阳 xxsssw ~
v1 中山大学 第五附属医院 o广东 珠海 xt|sss ~w1 成都中医药大学 o四川 成都 ytsszxl
≈摘要  目的 }研究鹅不食草挥发油的抗炎作用及其可能的机制 ∀方法 }采用角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎模
型 o观察鹅不食草挥发油大剂量ks1sx °#®ªp tl !小剂量ks1t °#®ªp tl对急性炎症的影响 ∀结果 }鹅不食草挥发油
对大鼠胸膜炎模型白细胞数增高表现出明显的对抗作用 o能明显减少大鼠胸膜炎渗出液中一氧化氮k‘’l的产生和
前列腺素 ∞uk°Š∞ul的生成 o大剂量组能明显对抗胸膜炎大鼠血清中 ≤ 反应蛋白k≤• °l和肿瘤坏死因子kבƒΑl的升
高 ∀结论 }鹅不食草挥发油对角叉菜胶致大鼠急性胸膜炎有明显的保护作用 ∀
≈关键词  鹅不食草挥发油 ~抗炎 ~角叉菜胶 ~≤ 反应蛋白 ~细胞因子
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxltx2tt|u2sv
≈收稿日期  ussw2ts2ts
≈基金项目  贵州省科委科学基金项目kusss2ul
≈通讯作者  3 覃仁安 o ר¯ }ks{xtly{vtwxy2vvu| oƒ¤¬}ks{xtl
yzw|ssw o∞2°¤¬¯}ª½´ µ¤ƒ ·¨¤±ªq¦²°
鹅不食草是常用解表中药 o具有祛风 !散寒 !胜
湿 !通鼻窍之功 o已为5中国药典6所收载≈t  ∀本品在
贵州省各地区分布较广 o贵州苗族药中称为 / 窝更
比0 o贵阳地区习称/地胡椒0 o主要用于感冒鼻塞和
急慢性鼻炎等症 o其疗效肯定≈u ov  ∀笔者在前期工
作中对鹅不食草挥发油抗炎作用进行了初步研
究≈w  o实验进一步研究鹅不食草挥发油对急性炎症
的影响 o以期为临床用药提供科学依据 ∀
1 材料
111 动物
≥⁄大鼠 o雄性 o体重 txs ∗ t{s ªo购自成都中医药
大学实验动物中心 o动物合格证号为川实动管第 z号 ∀
112 药物
实验所用鹅不食草 Χεντιπεδα µινιµα k1l „1
…µ1 ·¨„¶¦«¨µ¶1为菊科植物石胡荽的干燥带花全草 ∀
购自成都市菏花池中药材批发市场 o为当年 | ∗ ts
月采制收购品 ∀经中药鉴定专业博士研究生徐涛鉴
定 o符合现行5中国药典6药用标准 ∀按 usss年版
5中国药典6k一部l附录 ÷ 挥发油测定法k甲法l o对
鹅不食草进行蒸馏提取 ∀得到淡黄色 !透明 !具有浓
郁芳香气味的油状液体 ∀用无水硫酸钠脱水后 o密
闭贮存于棕色玻璃瓶中 o置于 p us ε 冰箱保存备
用 ∀临用前用 s1x h山梨醇甲酯将挥发油配成所需
浓度的鹅不食草挥发油k√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ ²© Χεντιπεδα µινι2
µαo∂ ’≤l ∀角叉菜胶k¦¤µµ¤ª¨ ±¨¤±o ≤¤µl o≥¬ª°¤公
司 ²·tz‹ttw{ ∀地塞米松k⁄¨ ¬l o无锡市制药七厂 o
批号 sssvuv ∀总蛋白k×°l测定试剂盒k双缩脲法l o
成都迈克生物试剂公司 o批号 sss{t{ ∀一氧化氮试
剂盒 o南京建成生物工程研究所 ∀Œ2{ ~בƒΑ •Œ„
Ž¬·o解放军总医院科技开发中心放射免疫研究所 o
批号 sstsuy ∀其余试剂均为 „• ∀
113 仪器
ט p tsst型紫外分光光度计 oŠ∞‘∞• „产品 ~
…¤¦®°¤± ≤¯ ¬±¬¦¤¯ ≥¼¶·¨° zss型全自动生化分析仪 o美
国贝克曼仪器公司出品 ~ztzs„ 全自动生化仪 o
‹Œ×„≤‹Œ产品 ∀
2 方法
211 分组
取健康雄性 ≥⁄大鼠 v{只 o按体重随机分为 x
组 }正常对照组 o模型对照组 o ∂ ’≤ s1sx os1t °#
®ªpt o地塞米松对照组kx °ª#®ªpt o¬³共 u次l ∀每
组动物连续灌胃给药 z §o每日 t次 ∀正常对照组及
模型对照组给予等体积生理盐水 ∀
212 造模方法≈x 
于末次给药后 vs °¬±o模型对照组及各给药组
#u|tt#
第 vs卷第 tx期
ussx年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussx
动物分别用乙醚轻度麻醉后向右胸膜腔内注入 t h
角叉菜胶 s1u °#ktss ªlp t体重 ∀正常对照组注入
等体积生理盐水 o致炎后 w «各组动物灌胃给予相
应药物或生理盐水 ∀{ «后断头处死 ∀
213 指标与检测方法
21311 大鼠胸腔内渗出液白细胞计数及分类 用
玻璃吸管将大鼠胸膜腔内全部渗出液吸出计量 o再
以生理盐水 u °冲洗胸腔 o冲洗液与渗出液合并 o
做白细胞计数及分类 ∀
21312 大鼠胸腔渗出液中蛋白含量 !‘’及 °Š∞u含
量测定 将胸膜炎模型动物中所取得的胸腔渗出液
离心后 o取 s1x °上清液按总蛋白药盒说明书方法
对蛋白进行定量测定 ~取上清液 s1tx °o加 s1x °²¯
#ptŽ’‹2甲醇溶液 t °oxs ε 下异构化 us °¬±o用
甲醇稀释至 w °o于紫外分光光度计波长 uz{ ±°
处测定其吸光度kΑl值 o代表 °Š∞u的生成量 ~另取上
清液 uss ˏo按一氧化氮试剂盒方法k硝酸还原酶
法l测渗出液中 ‘’的含量 ∀
21313 胸膜炎大鼠血清中 ≤• °和炎症预激因子含
量测定 将胸膜炎模型动物中所取得的血清分离
后 o用放免法测 Œ2{和 בƒΑ含量 o免疫比浊法测 ≤
反应蛋白k≤• °l的含量 ∀
214 统计方法
实验数据均用 ≥°≥≥统计软件包处理 o用 cξ ? σ
表示 ∀两两比较采用 τ检验 o多组比较采用方差分
析 o方差齐性用 ≥⁄或 ×∏®¨ ¼等多重比较方法 o方差
不齐用 פ°«¤±¨ . ¶×u多重比较方法 ∀
3 结果
311 大鼠胸腔内渗出液白细胞计数及分类
模型对照组大鼠白细胞总数显著高于正常组 o
白细胞分类呈现淋巴细胞比率降低而中性粒细胞比
率增高的变化 o呈典型急性炎症表现 o说明大鼠胸膜
炎模型造模成功 ∀ ∂ ’≤ 小剂量组对大鼠胸膜炎模
型白细胞数增高表现出明显的对抗作用 o但对胸水
增多无明显对抗作用k表 tl ∀
312 大鼠胸腔渗出液中蛋白含量 !‘’及 °Š∞u含量
∂ ’≤ 大剂量组能明显减少大鼠胸膜炎渗出液
中 ‘’的产生和 °Š∞u的生成k表 ul ∀
313 胸膜炎大鼠血清中 ≤• °和炎症预激因子含量
∂ ’≤ 大剂量组能明显对抗胸膜炎大鼠血清中
≤• °和 בƒΑ的升高 o对 Œ2{的异常升高有一定的
对抗趋势 o但无显著性差异k表 vl ∀
表 t ∂ ’≤  对大鼠胸膜炎渗出液及白细胞分类计数的影响kcξ ? σl
组别
剂量
r°#®ªpt
ν 渗出量r°
• …≤
r ≅ ts|#pt
中性粒细胞
r h
淋巴细胞
r h
正常对照组 p y s qt ? s qtul w q{ ? v quul x| qx ? tt qsul ws qx ? tt qsul
模型组 p { u qt ? s qw vy q{ ? tt qz |w qx ? u qy x qw ? u qy
∂ ’≤  s qsx { u qs ? s qx ux qw ? x qytl |t q{ ? v qt { qu ? v qt
∂ ’≤  s qt { u qs ? s qy u| qu ? x qy |w qx ? u qs y qv ? t qw
地塞米松 xvl { s qt ? s qtul | qs ? y q{ul {x qy ? x qsul tw qw ? x qsul
注 }与模型组比较tl Π s1sx oul Π s1stk以下同l ~vl剂量单位为 °ª#®ªptk表 u ov同l
表 u ∂ ’≤  对胸膜炎大鼠胸膜炎渗出液中蛋白含量 !‘’及 °Š∞u的影响kcξ ? σl
组 别
剂量
r°#®ªpt
ν
蛋白质含量
rª#pt
‘’
rΛ°²¯#pt
°Š∞u
r Α
生理盐水组 p x w q{ ? u quul w qz ? t qwul s qvwz ? s qs{{ul
模型组 p y ut qy ? w qv ux qz ? ts q{ s q{wu ? s quzv
∂ ’≤  s qsx y t{ qs ? x qu t| qs ? { qz s qxuv ? s qtvsul
∂ ’≤  s qt y t| qs ? v q| tv qs ? z q|tl s qtys ? s qttvul
地塞米松 xvl y y q| ? y qyul w qs ? s q|ul s qu|u ? s qtvvul
表 v ∂ ’≤  对胸膜炎大鼠血清中 ≤• ° oבƒΑ及 Œ2{的影响kcξ ? σl
组 别
剂量
r°#®ªpt
ν
≤• °
rΛª#pt
בƒΑ
rΛª#pt
Œ2{
rΛª#pt
生理盐水组 p x t w{u qw ? wsz qytl t qtx| ? s qs{{ul s qvxu ? s qt|ytl
模型组 p y u w|{ qy ? {sx q{ t qv|s ? s qttv s qxy{ ? s qsy{
∂ ’≤  s qsx y t |s{ qv ? vzt qy t qtsu ? s qwvt s qxt{ ? s qtxt
∂ ’≤  s qt y t yuy qz ? uws q{tl t qtzx ? s qtzytl s qxwv ? s qswu
地塞米松 xvl y u vzw q| ? zyv qv t qtx{ ? s qt{wtl s qu{v ? s qtw|tl
#v|tt#
第 vs卷第 tx期
ussx年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussx
4 讨论
‘’在炎症反应的许多环节中发挥复杂的调节
作用 ∀炎症反应时 o致炎物或炎症介质可诱导或增
加局部 ‘’的合成和释放 o一般地说 o组织中诱导型
‘’合酶k¬‘’≥l在炎症反应中被诱导产生 o生成大量
‘’ o促进炎症反应 o诸如血管扩张充血 !水肿 !细胞
毒性以及细胞因子依赖过程的间接作用等 ∀
≤反应蛋白k≤• °l与血清淀汾样蛋白 °k≥„°l是
u个重要的炎症急性期反应物 ∀当机体遭受各种损
伤时 o≤• °可以数百倍以至数千倍地增加 o一旦病
愈 o其浓度立即下降 o此即 ≤• °的急性期特性 ∀凡
有活动性炎症及组织损伤的人血中 ≤• °均会增加 o
特别是感染过程 !创伤 !手术 !风湿热 !类风湿性关节
炎 !心肌梗死 !扩散的恶性肿瘤 o自身变态反应等疾
病时为著 ∀因此多将 ≤• °作为炎症与组织损伤的
/非特异性指示剂0≈y oz  ∀
בƒΑ是重要的致炎因子 o可诱导血管内皮细胞
表达细胞间黏附分子kŒ≤„2t o即 ≤⁄xwl和分泌 Œ2t o
Œ2{等具有增强炎症反应和趋化作用的细胞因子 o
从而促使中性粒细胞和单核细胞与血管内皮细胞黏
附 o进而穿过血管 o到达感染发生的部位 ∀ בƒΑ对
中性粒细胞和单核吞噬细胞具有刺激作用 o可增强
其吞噬功能 o并使之脱颗粒 o释放多种胞外酶和前列
腺素 !Œ2t等致炎因子 o促进局部炎症反应发生 ∀
Œ2{主要由单核细胞 !血管内皮细胞和成纤维
细胞产生 o其主要的生物学活性是 }吸引中性粒细
胞 !嗜碱性粒细胞和 × 细胞作定向趋化运动 o因此 o
又称其为趋化因子k¦«¨ °²®¬±¨ l ~激活中性粒细胞和
嗜碱性粒细胞 o使之脱颗粒 o释放生物活性介质 o参
与炎症反应和速发型超敏反应≈{  ∀
本研究表明 o∂ ’≤ 大剂量组对角叉菜胶致大
鼠胸膜炎渗出液中 ‘’ 的产生有明显的对抗作用 o
并能明显对抗胸膜炎大鼠血清中 ≤• °的升高 o降低
胸膜炎大鼠体内 בƒΑ合成与分泌 o这些可能是其
抗炎的有效机制 o为临床用于治疗感冒 o急 !慢性炎
症如鼻炎等提供了依据 ∀本研究同时还发现 o地塞
米松对造模后 ≤• °的升高无对抗作用 o其机理有待
进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss qu{x q
≈u  贵州省中医研究所 q贵州草药 q第二集 q贵阳 }贵州人民出版
社 ot|zs quzx q
≈v  包 骏 o冉懋雄 q贵州苗族医药研究与开发 q贵阳 }贵州科技
出版社 ot||| quws q
≈w  覃仁安 o陈 敏 o师晶丽 o等 q鹅不食草挥发油抗炎作用的初
步实验报告 q贵州医药 ousst ouxktsl }|s| q
≈x  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 q药理实验方法学 q第二版 q北京 }
人民卫生出版社 ot||w qztw q
≈y  ¤±¶¶¨± ˜ o…¤«¯°¤±± ƒ oŽ²«¯ o ετ αλ. „¦·¬√¤·¬²± ²©·«¨ ¤¦∏·¨ ³«¤¶¨
µ¨¶³²±¶¨ ¤±§¦²°³¯ °¨ ±¨·≤v ¬± ³¤·¬¨±·¶º¬·«Œª„ ±¨ ³«µ²³¤·«¼q Αµ ϑ
Κιδνεψ ∆ισousss ovxktl }ut q
≈z  ‹ ±¨§µ¼ o‘¬¬²± o⁄²§§  o ετ αλ. °∏¯°²±¤µ¼©∏±¦·¬²±o¶¨µ∏° °¤µ®2
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º¬·«…∏µ®«²¯§¨µ¬¤¦¨³¤¦¬¤q Πεδιατρ Πυλµονολ, usss ou|ktl }{ q
≈{  孙卫民 q细胞因子研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||| q
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Εφφεχτσ οφ τηε ϖολατιλε οιλ οφ Χεντιπεδα µινιµα ον αχυτε πλευραλ
εφφυσιον ιν ρατσινδυχεδ βψ αν ιντραπλευραλινϕεχτιον οφ Χαρ
±Œ‘• ±¨2¤±t o ∞Œ ÷∏¤±t o • „‘¨¬u o≥‹Œ¬±ª2¯¬v o≥‹∞‘≠¬±ª2­∏±w
(t . Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ οφ Γυιψανγ Μεδιχαλ Χολλεγε , Γυιψανγ xxsssw , Χηινα ;
u . Γυιψανγ Μεδιχαλ Χολλεγε , Γυιψανγ xxsssw , Χηινα ;
v . Τηε φιφτη Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ οφ Ζηονγσηαν Υνιϖερσιτψ, Ζηυηαι xt|sss , Χηινα ;
w . Χηενγδυ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηενγδυ ytsszx , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·¬²± ©¨©¨¦·²© √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ ²© Χεντιπεδα µινιµα ¤±§·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²© ¤¦·¬²±q
Μετηοδ : ׫¨ ¤±¬°¤¯ °²§¨¯ º¤¶¬±§∏¦¨§¥¼·«¨ ≤¤µ¬±­¨¦·¬²±¬±·²¬±·µ¤³¯ ∏¨µ¤¯ ²©µ¤·¶o·²²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²© ∂ ’≤  ²± ¤¦∏·¨¬±©¯¤°°¤·¬²±q
Ρεσυλτ : ∂ ’≤  º¤¶¤¥¯¨·²¬±«¬¥¬··«¨ ¬±¦µ¨¤¶¨ ²©‘’ o≤• ° ¤±§³µ²¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¦¼·²®¬±¨ ¶¶∏¦«¤¶×‘ƒΑ¬±·«¨ ¤¦∏·¨¬±©¯¤°°¤·¬²± ²©·«¨ µ¤·
¥²§¼q Χονχλυσιον : ∂ ’≤  «¤¶¤³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²± ¤¦∏·¨ ³¯ ∏¨µ¤¯ ©¨©∏¶¬²±¬±µ¤·¶¬±§∏¦¨§¥¼ ¤±¬±·µ¤³¯ ∏¨µ¤¯ ¬±­¨¦·¬²± ²© ≤¤µq
[ Κεψ ωορδσ] √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ ²© Χεντιπεδα µινιµα ; ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·¬²±~¦¤µµ¤ª¨ ±¨¤±~¦2µ¨¤¦·¬√¨ ³µ²·¨¬± k≤• °l ~¦¼·²®¬±¨
≈责任编辑 古云侠 
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第 vs卷第 tx期
ussx年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·oussx